Tiomáineann Cailliúint JAK1 Easnamh imdhíonachta dúchasach

Tá cosán comharthaíochta Janus kinase-trasduchtóirí comharthaí agus gníomhaithe trascríobh (JAK-STAT) ríthábhachtach chun freagairtí imdhíonachta a choigeartú agus tá dlúthbhaint ag a dírialú le hailse agus neamhoird imdhíonachta. Cruthaíonn cur isteach ar chonair chomharthaíochta interleukin (IL)-15/STAT5 mar gheall ar chailliúint slabhraí gabhdóirí IL-15, JAK3 nó STAT5 easnaimh imdhíonachta le mínormáltachtaí cille marfach nádúrtha (NK). Tarchuireann JAK1, in éineacht le JAK3 comharthaí le sruth ó IL-15, ach tá an méid a chuireann JAK1 le bitheolaíocht ceall NK fós le soiléiriú. Chun staidéar a dhéanamh ar iarmhairtí easnamh JAK1 i gcealla NK, ghineamar lucha le scriosadh coinníollach JAK1 i gcealla NKp46+ (Jak1fl/flNcr1Cre). Léirímid anseo gur laghdaigh scriosadh cille intreach NK JAK1 go suntasach líon na gcealla NK sa smior agus gur lagaíodh a bhforbairt. Ar aon dul, thugamar faoi deara caillteanas beagnach iomlán de chealla NK sa spleen, san fhuil, agus san ae, rud a chruthaíonn ról ríthábhachtach JAK1 i gcealla NK imeallacha. Ar aon dul leis, léirigh lucha Jak1fl/+Ncr1Cre lagú suntasach ar fhaireachas tumaí NK trí mheán na cille. Tugann ár sonraí le fios nach bhfuil JAK2 in ann cúiteamh a dhéanamh as caillteanas JAK1 i gcealla NK. Rud atá tábhachtach, ní raibh aon éifeacht ag scriosadh coinníollach JAK2 i gcealla NKp46+ ar chealla NK forimeallacha, rud a léirigh go bhfuil NK cill-intreach JAK2 indiúscartha do mharthanas cille NK. Go hachomair, d'aithníomar go spreagann caillteanas JAK1 i gcealla NK easnamh imdhíonachta dúchasach, ach fágann easnamh JAK2 líon na gceall NK agus aibiú gan athrú. Molaimid mar sin, i gcodarsnacht le coscairí JAK1/JAK2 a úsáidtear faoi láthair, go mbeadh sé ina bhuntáiste d’othair coscairí sonracha JAK trí chealla NK a fhágáil slán.

Eochairfhocail: JAK-STAT, cealla killer nádúrtha, JAK1, JAK2, faireachas siadaí

Buntáistí cistanche tubulosa-Antitumor

RÉAMHRÁ

Is limficítí dúchasacha iad cealla killer nádúrtha (NK) a aithníonn agus a mharaíonn cealla ionfhabhtaithe nó claochlaithe go víreasach (1). Fochineál neamhchoitianta d’easnamh imdhíonachta (PID) is ea easnamh cealla NK ach a bhfuil meas ag méadú air. Tá easnamh cille NK Clasaiceach tréithrithe ag easpa cealla NK san fhuil imeallach agus mar thoradh air sin tá claonadh feabhsaithe i leith ionfhabhtuithe víreasacha (2). Gníomhaíonn an Janus kinase (JAK)-transducer comhartha agus activator trascríobh (STAT) cosán comharthaíochta sruth de cytokines iolrach, fachtóirí fáis, agus hormóin rud a rialaíonn go criticiúil freagraí imdhíonachta (3, 4). Nuair a cheanglaítear ligand ar leith lena ghabhdóir gaolmhar, eascraíonn oligomerization an ghabhdóra agus gníomhachtú JAKanna a bhaineann le gabhdóirí as athruithe comhfhoirmithe. Déanann JAKs uath- agus tras-fosfaraláit a chéile agus slabhraí gabhdóirí fosfaraláit a sholáthar, ag soláthar na suíomhanna dugála do mhóilíní STAT. Ansin téann STAT faoi fhosfarylation JAK-idirghabhála, maolú, agus traslonnú go dtí an núicléas, áit a rialaíonn siad trascríobh spriocghéin (5). Tá JAK3 agus STAT5 ina n-imreoirí ríthábhachtacha chun an comhartha a aistriú le sruth de cytokines a úsáideann an receptor c (6). Cruthaíonn sócháin "caillteanas feidhme" (LOF) i ngéinte a ionchódaíonn JAK3 (7) nó STAT5B (8) PIDanna le mínormáltacht cille NK, rud a leagann béim ar thábhacht an chosáin le haghaidh limficítí dúchasacha. Míníodh easpa imdhíonachta na n-othar seo ag freagraí lagaithe IL-7 agus IL{-15 (6). Rud atá tábhachtach, tá ról ceannasach ag JAK1 thar JAK3 maidir le STAT5 a ghníomhachtú le sruth de ghabhdóirí cítocine c-ina bhfuil (9). Tá sé tarraingteach tuairimíocht a dhéanamh go bhféadfadh PID a bheith mar thoradh ar shócháin LOF JAK1 freisin. Go dtí seo, níor aithníodh ach othar amháin a chothaíonn sócháin ghaiméite JAK1, áit ar laghdaíodh JAK1 ach nach raibh sé as láthair, agus go deimhin cuireadh cosc ​​imdhíonachta air (10). I lucha, mar thoradh ar chailliúint iomlán JAK1 tá marfacht imbhreithe agus léiríonn lucha nuabheirthe laghdú láidir ar thymocytes agus cealla B (11). Deimhníodh na breathnuithe seo i lucha aosach: má scriostar JAK1 go do-indéanta, déantar lagú ar homeostasis gas hematopoietic (HSCanna) agus laghdaítear go suntasach minicíochtaí cealla B agus fo-thacar B220+CD11c+NK1.1+ de Cealla NK (12). Mar sin féin, go dtí seo, ní dhearna aon staidéar anailís dhíreach ar éifeacht caillteanas JAK1 ar chealla NK traidisiúnta.

Cistanche deserticola ma-An t-ae a chothabháil

Eascraíonn na chéad léargais ar an méid a chuir JAK1 le bitheolaíocht cille NK ó staidéir a úsáideann coscairí JAK - drugaí ceadaithe chun ailse agus galair uath-imdhíonachta a chóireáil (13). Léirigh an dá, lucha agus othair cóireáilte leis an JAK1/JAK2 inhibitor Ruxolitinib líon cille NK laghdaithe, aibithe lagaithe, agus feidhm (14, 15). Ós rud é go bhfuil baint ag JAK2 freisin le difreáil cille NK a thiomáint (14, 16), tá sé fós le soiléiriú cé acu den dá kinases atá freagrach as éifeachtaí breathnaithe cóireála Ruxolitinib. Ag baint úsáide as lucha a bhfuil Jak1 nó Jak2 bainte amach acu i gcealla NKp46+, léirímid anseo go bhfuil JAK2 inchurtha le maireachtáil cille NK. I gcodarsnacht leis sin, tá easnamh cille NK mar thoradh ar scriosadh JAK1 i gcealla NK aibí, agus is leor ailléil amháin de Jak1 a chailleadh chun rialú fáis siadaí a dhochrú. Mar sin, d'aithin muid JAK1 mar phríomhfhachtóir do chealla NK aibí agus ghin muid samhail luiche d'easnamh cille NK clasaiceach.

ABHAIR AGUS MODHANNA

Línte Muice agus Cill

Jak1fl/fl (C57BL/6N-Jak1tm1c(EUCOMM)Hmgu/H; ar fáil go cineálta ag an Dr. Alexander Dohnal (CCRI, Vín, An Ostair). le Cuibhreannas Idirnáisiúnta um Fhéinitíopáil Luiche https://www.mousephenotype.org) tríd an gcaiséad lacZ-neo a dhíbirt trí Flp-recombination.

Cuireadh poitéinseal coinníollach lucha Jak1fl/fl i ngníomh trí Cre-recombination and excision of loxP-flanked exon 3 of Jak1. Spreagadh athmheascadh a bhaineann go sonrach le fíocháin trí thrasphórú Jak1fl/fl nó Jak2fl/fl [Jak2tm1Kuw; (17)] le B6NTg(Ncr1Cre); (18) lucha. Rinneadh cur síos ar lucha Stat5fl/fl (19) agus Stat5fl/flNcr1Cre (18) roimhe seo. Jak1fl/fl , Ncr1Cre, Stat5fl/fl , Stat5fl/flNcr1Cre bhí lucha ar chúlra C57B6/N agus Jak2fl/fl ar chúlra measctha. Rinneadh na hainmhithe turgnamhacha a mheaitseáil le haois (8-12 seachtaine) agus coinníodh iad faoi shainchoinníollacha saor ó phataigin ag Ollscoil an Leighis Tréidliachta, Vín de réir threoirlínte na Cónaidhm um Chomhlachais um Eolaíocht Ainmhithe Saotharlainne (FELASA) (2014). D'fhormheas Coiste Eitice agus Leasa Ainmhithe Ollscoil Tréidliachta Vín agus an t-údarás náisiúnta (Aireacht Eolaíochta agus Taighde Chónaidhme na hOstaire) na turgnaimh ainmhithe de réir §§ 26ff. den Acht um Thurgnaimh Ainmhithe, Tierversuchsgesetz 2012—TVG 2012, faoi cheadúnais BMWF-68.205/0218-II/3b/2012 agus BMBWF-68.205/{{{{{{{{0)}V/3b) /2018 agus rinneadh iad de réir threoirlínte FELASA agus ARRIVE. Ar fud an pháipéir, tagraíonn Jak1WT do shonraí comhthiomsaithe ó lucha Jak1fl/+ agus Jak1fl/fl. Línte cille liomfóma na luchóige RMA-Rae1 [ar fáil go cineálta ag an Ollamh A. Cerwenka; (20)] agus YAC-1 i meán iomlán RPMI1640 (Sigma) ina raibh 10% FCS (Bith & Díol), 100 U/mL peinicillin, 100 mg/mL streiptimícin (Sigma), agus 50µM {{58 }}mercaptoethanol (Sigma).

cistanche tubulosa-feabhas a chur ar chóras imdhíonachta

Múnla Meall In vivo

Instealladh scc do lucha Jak1fl/+ agus Jak1fl/+ Ncr1Cre le 106 cealla RMA-Rae1 isteach sa dá thaobh agus rinneadh monatóireacht ar fhás siadaí gach lá eile. Deich lá tar éis an insteallta rinneadh na lucha a íobairt agus socraíodh meáchan an siadaí. Le haghaidh anailís cítiméadrach sreafa ar chealla NK a bhí insíothlú siadaí, gearradh siadaí i bpíosaí ∼5 mm2, agus fuarthas an fionraí cille aonair ag baint úsáide as gentleMACSTM Octo Dissociator (Miltenyi Biotec) le maolán díleá ina raibh Collagenase D (1 mg / ml; Sigma Aldrich). agus DNAse I (20 mg/mL; Roche).

NK-Cill Aonrú, Leathnú, agus Spreagadh

Rinneadh cealla NK a leithlisiú ó fhionraí aoncheallacha spleen ag baint úsáide as coirníní MACS lipéadaithe DX de réir threoracha an déantóra (Miltenyi Biotec). Méadaíodh cealla NK i RPMI1640 meán iomlán arna fhorlíonadh le 5,000 U/mL rhIL-2 (Proleukin, Novartis) ar feadh 7 lá. Rinneadh measúnú ar líon na gcealla CD3-NK1.1+ ag cíteiméadracht sreafa ar laethanta 0, 3, 5, agus 7. Ar lá 7 rinneadh cealla a liostáil le haghaidh anailíse blotála an Iarthair. Le haghaidh anailíse pSTAT5, spreagadh 106 splenocytes le 50 ng/ml rmIL-15 (PeproTech) ar feadh 15 nóiméad agus socraíodh na cealla i 2% PFA agus ina dhiaidh sin tréscaoileadh meatánóil agus athhiodráitiú.

Measúnacht Cíteatocsaineachta NK-Cill

Maidir le measúnachtaí cíteatocsaineachta in vitro, leathnaíodh cealla NK DX5-MACS-sórtáilte ar feadh 7 lá in IL-2 mar a thuairiscítear thuas agus meascadh iad ag éifeachtóir sonraithe: cóimheasa sprice le eistear carboxyfluorescein dé-aicéatáit succinimidyl (CFSE, Probes Móilíneach , CellTrace CFSE Cell Proliferation Kit) spriocchealla lipéadaithe. Tar éis 4 h de gor ag 37◦C, bhí na cealla dhaite le Sytox Blue Blue Cell stain (Thermo Fischer), agus rinneadh measúnú ar an lysis sain-sprioccheall ag cíteiméadracht sreafa.

Cíteiméadracht Sreabhadh

Ullmhaíodh fionraí aonchealla ón spleen, smior, nó ae. Bhí an t-ae perfused tríd an vein thairseach le 5-10 ml PBS steiriúla. Rinneadh scaradh na limficítí ag baint úsáide as 37.5% de phearsanta (GE Healthcare). Le haghaidh anailíse fola, rinneadh na erythrocytes a líseáil ag baint úsáide as Réiteach Lysing BD FACS de réir phrótacal an déantóra (BD Bioscience). Ceannaíodh na hantasubstaintí (clóin) a dhírigh ar phróitéiní seo a leanas ó eBitheolaíocht: CD3 (17A2), CD3e (145-2C11), CD11b (M1/70), CD16/CD32 (93), CD19 (eBio1D3) CD27 (LG. 7F9), CD49b (DX5), CD122 (5H4), CD226 (10E5), Gr-1 (RB6-8C5), KLRG1 (2F1), Ly49A (A1), Ly49G2 (eBio4D11), NKG2A /C/E (20d5), NKG2D (CX5), NKp46 (29A1.4), NK1.1 (PK136), agus Ter119 (TER-119). Ceannaíodh antasubstaintí CD49a (Ha31/8) agus pSTAT5 [47/Stat5(pY694)] ó BD Pharminogen agus ceannaíodh pan-Rae1 (186107) ó R&D Systems. Rinneadh measúnú ar líon iomlán na gceall trí chitoiméadracht sreafa agus úsáid á baint as coirníní comhairimh Count Bright Beads (Invitrogen). Rinneadh turgnaimh cíteaiméadrachta sreafa ar BD FACSCanto II (BD Bioscience) nó Cytoflex (Beckman Coulter) agus rinneadh anailís orthu ag baint úsáide as bogearraí BD FACSDiva V8.0 (BD Bioscience), CytExpert (Beckman Coulter) nó FlowJo V10 (FlowJo, LLC).

FIGIÚR 1|Mar thoradh ar chailliúint JAK1 i gcealla NKp46+ tá easpa beagnach iomlán de chealla NK forimeallacha. (A) Minicíocht (painéal ar chlé) agus uimhreacha iomlána (painéal ar dheis) Lin−(CD3−CD19−Ly-6G−Ter119−) CD{7}} Rinneadh measúnú ar chealla NK sa smeara de réir sreafa citeiméadracht. (B) Rinneadh cealla smeara Lín-CD122+ a roinnt tuilleadh ina réamhtheachtaithe NK (NKPanna: NKp46-NK1.1−), cealla NK neamhaibí (iNKs: NKp46−NK1.1+), agus aibí Cealla NK (mNKs: NKp46+NK1.1+). (C) Rinneadh measúnú ar mhinicíocht cealla NK CD3 - NKp 46+ sa spleen ag cíteiméadracht sreafa agus taispeántar ceapacha ionadaíocha. (D, E) Rinneadh measúnú ar mhinicíocht (painéal ar chlé) agus ar líon iomlán (painéal ar dheis) de chealla NK CD3-NKp sa spleen (D) agus (E) de réir cíteiméadracht sreafa. (F) Minicíocht cealla NK traidisiúnta (CD3−NK1.1+NKp46+CD49b+, painéal ar chlé) agus cealla ILC1 (CD3−NK1.1+NKp46+CD49a+ , painéal ar dheis) in ae Jak1WT, Jak1fl/+ Ncr1Cre, agus lucha Jak1fl/flNcr1Cre de réir cíteiméadracht sreafa. (A, B, D–F) Léiríonn barraghraif meán ± SEM de thurgnaimh neamhspleácha 1–2; n=3–11. *p < 0.05, **p < 0.01, ***p < 0.001.

FIGIÚR 2|Léiríonn na cealla Jak1fl/flNcr1Cre NK atá fágtha feinitíopa neamhaibí. (A, B) Splenic CD3 - NKp 46+ Rinneadh anailís ar chealla NK le haghaidh léiriú CD27 agus CD11b ag cíteiméadracht sreafa. (A) Taispeántar minicíocht na gceall i ngach céim aibithe: DN (CD27 −CD11b−), CD27 (CD{{10}}CD11b−), DP (CD27+CD11b+), CD11b (CD27 -CD11b+). Léirítear líon iomlán na gceall i ngach céim aibithe i bhFíor S1C. (B) Taispeántar ceapacha ionadaíocha. (C) pSTAT5(Y694)+ rinneadh anailís ar chealla laistigh den daonra CD3 -NKp46+NK1.{1+ ex vivo tar éis spreagadh 15 nóiméad le IL-15 trí chitoiméadracht sreafa. (D) Splenic CD3 - NKp{{30}} Rinneadh anailís ar chealla NK chun na gabhdóirí gníomhacha agus coisctheacha léirithe a léiriú trí chiteiméadracht sreafa. Taispeántar an céatadán de chealla NK dearfach do gach gabhdóir. Cuirtear na sonraí déine fluaraiseachta airmheánacha i láthair i bhFíor S1D. (A–D) Léiríonn barraghraif agus uimhreacha ar na ceapacha meán ± SEM de 2 thurgnamh neamhspleách; n=5–8. **p < 0.01, ***p < 0.001.

Blot an Iarthair

Rinneadh lysis cille, SDS-PAGE, agus blotaí an Iarthair mar a thuairiscítear roimhe seo (21). Baineadh úsáid as substráit Soiléire an Iarthair ECL (BioRad) agus an ChemiDocT XRS+ Molecular Imager (BioRad) chun ceimiluminescence a bhrath agus rinne bogearraí Image Lab (BioRad) anailís air. Úsáideadh na hantasubstaintí seo a leanas: frith– -actin (C4, sc-47778) ó Santa Cruz mar rialú luchtaithe, frith-JAK2 (D2E12; #3230), frithPerforin (#3693), agus frith-JAK1 (#3332 ) ó Theicneolaíocht Chomharthaíochta Cille.

cistanche tubulosa-feabhas a chur ar chóras imdhíonachta

Cliceáil anseo chun táirgí Cistanche Feabhsú Díolúine a fheiceáil

【Iarr tuilleadh】 Ríomhphost:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

Anailís staitistiúil

Rinneadh t-tástálacha neamhphéireáilte nó ANOVA aontreo le hiar-thástálacha Tukey agus úsáid á baint as leagan 5 de GraphPad Prism.00 (Bogearraí GraphPad). Léirítear an leibhéal suntasachta do gach turgnamh (∗p < 0.05; ∗∗p < 0.01; ∗∗∗p < 0.001).

TORTHAÍ

Laghdaíonn Scriosadh JAK1 Uimhreacha NK Cell agus ILC1 ar Bhealach a Chleithiúnaigh ar Dháileog

Tá sé léirithe go laghdaítear líon na gcealla NK, aibiú agus feidhm an choscóra JAK1/JAK2 Ruxolitinib (14, 15). Chun comparáid a dhéanamh agus dul i ngleic leis an méid a chuireann JAK1 agus JAK2 le haghaidh bhitheolaíocht ceall NK, ghineamar lucha agus scriosadh coinníollach ceachtar JAK1 nó JAK2 i gcealla NKp46+. Dá bhrí sin thrasnaigh muid Ncr1Cre (18) lucha le Jak1fl/fl nó Jak2fl/fl [féach Ábhair agus Modhanna alt agus (17)] lucha, faoi seach. Forbraíonn cealla NK sa smior ó réamhtheachtaithe cille NK (NKPanna), a shainmhínítear mar Lín-CD122+NK1.1-NKp46−. Forbraíonn siad ina gcealla NK neamhaibí (iNKanna) a ndéantar NK1 orthu.1+ cé nach bhfuil iontu ach cealla NK aibí (mNKanna) ná NK1.1+NKp46+ (22). Toisc go bhfuil an abairt Cre-recombinase i lucha Ncr1Cre á thiomáint ag an tionscnóir NKp46, tá scriosadh Cre-mediated teoranta do chealla NK. Thugamar faoi deara laghdú suntasach ar chéatadán agus ar líon iomlán na gcealla NK smeara i lucha Jak1fl/flNcr1Cre (Fíor 1A). Léirigh cealla NK Lin−CD122+ i lucha Jak1fl/flNcr1Cre céatadáin saibhrithe de réamhtheachtaithe cille NK (NKPanna) agus cealla NK neamhaibí, agus laghdaíodh mNKanna go suntasach sa smeara ag teacht le bloc forbartha ag an gcill iNK céim a chuireann cosc ​​ar dhul ar aghaidh chuig céim cille mNK (Fíor 1B). Mar thoradh ar scriosadh ailléil amháin de Jak1 tháinig líon idirmheánach de chealla NK smeara (Fíor 1A). Go comhsheasmhach, léirigh forbairt cille NK feinitíopa idirmheánach a mhol éifeacht géine-dáileog Jak1 ar fhorbairt cealla NK (Fíor 1B). An bloc i bhforbairt smeara cealla NK aistrithe go líon laghdaithe go suntasach de chealla NK ar an imeall. Mar thoradh ar chailliúint JAK1 bhí easnamh beagnach iomlán de chealla splenic agus fola NK (Fíoracha 1C–E). Ag teacht le héifeacht dáileog géine Jak1, léirigh lucha Jak1fl/+ Ncr1Cre céatadáin cille NK laghdaithe agus líon iomlán go 50% i gcomparáid le bruscar den chineál fiáin sa spleen agus san fhuil (Figiúirí 1C–E). Tá laghdú ar chealla NK aibí (18) mar thoradh ar scriosadh éifeachtóra iarmhartach JAK1 agus fachtóir trascríobh STAT5 i gcealla NKp46+ freisin. Léirigh comparáid dhíreach idir lucha Jak1fl/flNcr1Cre agus Stat5fl/flNcr1Cre gur spreag scriosadh JAK1 easnamh cille NK níos suntasaí sa spleen agus san fhuil ná mar a scriosadh STAT5 (Figiúirí S1A, B). Cuimsíonn limficítí dúchasacha an ae NKp dhá ghrúpa de línte ar leith (23). Tá cealla NK traidisiúnta (cNK) tréithrithe ag léiriú CD49b agus a scaiptear go saor, ach tá limficítí dúchasacha cineál 1 (ILC1) tréithrithe ag léiriú CD49a agus tá siad teoranta don ae (24). Mar an gcéanna le spleen agus fola, bhí cNKs ae agus ILC1s fíochán-chónaitheach ablasted beagnach go hiomlán nuair a cailleadh JAK1 (Fíor 1F). Arís, mar thoradh ar scriosadh ailléil amháin de Jak1 bhí flúirse idirmheánach de limficítí dúchasacha ae (Fíor 1F). Go hachomair, thug na torthaí seo dúinn an tátal go bhfuil slonn JAK1 i gcealla NKp fíor-riachtanach chun ceall NK a fhorbairt agus a chothabháil in orgáin fhorimeallacha ar bhealach dáileog-spleách.

Tá JAK1 ríthábhachtach maidir le hAibiú cealla NK

Ar an imeall, téann cealla NK faoi chéimeanna aibithe arb iad is sainairíonna iad léiriú seicheamhach marcóirí dromchla CD27 agus CD11b (22). Ba leor ailléil amháin de Jak1 chun aibiú cille NK a thiomáint mar níor bhraitheamar aon difríochtaí i gcéatadán na gceall i ngach céim aibithe idir cealla Jak1WT agus Jak1fl/+ Ncr1Cre (Figiúirí 2A, B). Léirigh na cealla Jak1fl/flNcr1Cre NK atá fágtha méadú ar an daonra neamhaibí (CD27+CD11b−) agus laghdú ar dhaonra aibí CD27-CD11b+ (Figiúirí 2A, B, agus Fíor S1C). Tugann an toradh seo le fios go bhféadfadh go mbeadh na cealla atá fágtha díreach tar éis JAK1 a chailleadh agus nach bhfuil go leor comharthaíochta IL-15 faighte acu chun aibíocht iomlán a dhéanamh. Go deimhin, léirigh na cealla Jak1fl/flNcr1Cre NK atá fágtha fosfarylation laghdaithe de STAT5 ex vivo ar spreagadh gearrthéarmach le IL-15 (Fíor 2C). Tá gníomhaíocht cille NK á rialú ag cothromaíocht idir gníomhachtú agus gabhdóirí coisctheacha. Ní raibh éifeacht ag scriosadh ailléil amháin nó an dá ailléil de Jak1 ar chéatadán na gcealla NK a léirigh na gabhdóirí gníomhachtaithe agus coisctheacha seo a leanas: KLRG1, NKG2D, NKG2A/C/E, agus Ly49A (Fíor 2D). Ba é an difríocht is suntasaí ná laghdú beag i gcealla NK Ly49G2+ agus méadú ar chealla NK DNAM-1+ i lucha Jak1fl/flNcr1Cre (Fíor 2D). Mar an gcéanna, níor aimsíodh aon difríochtaí comhlána i leibhéal slonn (MFI) gach gabhdóra, seachas méadú ar an MFI de DNAM1 agus Ly49G2 (Fíor S1D). Seachas a ról mar ghabhdóir gníomhachtúcháin, is céim fhorbartha é slonn DNAM- 1; Cruthaíonn cealla DNAM-1+ cealla DNAM-1− (25). Rinneamar réasúnú go léiríonn na hathruithe ar DNAM-1+ an bloc aibithe de chealla Jak1fl/flNcr1Cre NK.

FIGIÚR 3|Tá JAK2 inchurtha le maireachtáil agus aibiú cealla NK. (A) Minicíocht (painéal ar chlé) agus líon iomlán (painéal ar dheis) de CD3 −NKp{3}} cealla NK i spleens na lucha Jak2WT agus Jak2fl/flNcr1Cre Rinneadh measúnú ag cíteiméadracht sreafa. (B) Splenic CD3 - NKp 46+ Rinneadh anailís ar chealla NK le haghaidh léiriú CD27 agus CD11b ag cíteiméadracht sreafa. Taispeántar minicíocht na gceall i ngach céim aibithe: DN (CD27 -CD11b -), CD27 (CD27+CD11b−), DP (CD27+CD11b+), CD11b (CD27−CD11b+). (C) Rinneadh anailís ar shloinneadh JAK2 agus -actin ag blot an Iarthair i gcealla NK tar éis 6 lá leathnaithe in IL-2. Tá scananna iomlána ar fáil in Ábhar Breise. (A,B) Léiríonn barragraif meán ± SEM de 2–3 turgnaimh neamhspleácha; n=5–12.

FIGIÚR 4|Cuireann cailliúint ailléil amháin de Jak1 isteach ar ghníomhaíocht cille NK. (A) Rinneadh cealla NK a íonú ó MACS ó spleens agus saothraíodh iad in IL-2 ar feadh 7 lá. Rinneadh measúnú ar líon na gceall beo CD3-NK1.1+NKp46+ gach 2-3 lá. Ciallaíonn na siombailí agus na barraí earráide atá i láthair ± SEM de 2–4 mhacasamhlú bitheolaíoch. (B) Rinneadh anailís ar an slonn JAK1, Perforin, agus -actin i gcealla NK leathnaithe ó dhá thurgnamh neamhspleách ag blot an Iarthair. Tá scananna iomlána ar fáil in Ábhar Breise. (C) Meascadh cealla NK méadaithe ó lucha Jak1WT agus Jak1fl/+ Ncr1Cr le cealla sprice YAC {{2{0}} le dath CFSE (painéal ar chlé) nó RMA-Rae1 (painéal ar dheis) ag cóimheas sprice an éifeachtóra léirithe . Rinneadh measúnú ar an lysis sonrach ag cíteiméadracht sreafa. I gcás YAC-1 taispeántar graf ionadaíoch de cheann amháin de dhá thurgnamh neamhspleácha. Cuireann na siombailí agus na barraí earráide an meán ± SEM de 2 mhacasamhlú theicniúla i láthair. I gcás RMA-Rae1 taispeántar meán as dhá thurgnamh neamhspleácha. Ciallaíonn na siombailí agus na barraí earráide atá i láthair ± SEM de 2–3 macasamhla bitheolaíocha. *p < 0.05, **p < 0.01, ***p < 0.001.

Tá JAK2 Indíolta le haghaidh Marthanais agus Aibithe Cille NK

Go dtí seo tá sé léirithe againn go bhfuil easnamh cille NK mar thoradh ar scriosadh cille intreach JAK1 NK. Chun a shoiléiriú an bhfuil tionchar ag JAK2 ar mharthanas agus ar aibiú cille NK, rinneamar anailís ar chealla splenic NK i lucha Jak2fl/flNcr1Cre agus a gcuid bruscair den chineál fiáin. Theip orainn aon tionchar a bhí ag scriosadh JAK2 a bhrath ar mhinicíocht nó ar líon iomlán na gcealla CD3−NKp46+ sa spleen (Fíor 3A). Ina theannta sin, léirigh lucha Jak2fl/flNcr1Cre gnáthaibíocht cille NK, mar a aimsíodh céatadáin chosúla de chealla CD27 - CD11b + sa dá ghéinitíopa (Fíor 3B). Toisc go raibh scriosadh an phróitéin JAK2 i gcealla NK an-éifeachtach (Fíor 3C), sainmhíníonn na sonraí seo go soiléir, murab ionann agus JAK1, go bhfuil NK cill-intreach JAK2 indiúscartha chun maireachtáil agus aibiú cille NK.

sochair cistanche do na fir-neartú chóras imdhíonachta

Laghdaítear ailléil amháin de Jak1 ar Fheidhmiúlacht NK Cell

Chun tuilleadh léargais a fháil ar an gcaoi a rialaíonn JAK1 feidhmiúlacht cealla NK, rinneamar anailís ar fhás cealla NK spleniceacha íonaithe MACS ó Jak1WT, Jak1fl/+ Ncr1Cre, agus Jak1fl/flNcr1Cre. Níor mhéadaigh cealla NK easnamhacha JAK, rud a thaispeánann nach féidir le JAKanna eile fiú faoi dháileog an-ard IL-2 eile cúiteamh a dhéanamh as caillteanas JAK1 (Fíor 4A). Mar thoradh ar chailliúint ailléil amháin de Jak1 tháinig mioneasnamh fáis (Fíor 4A). Dhearbhaigh anailís blot an Iarthair an slonn laghdaithe próitéin JAK1 i gcealla méadaithe Jak1fl/+ Ncr1Cre NK a bhí comhthreomhar le leibhéil laghdaithe perforin (Fíor 4B). Ar aon dul, léirigh cealla Jak1fl/+Ncr1Cre NK gníomhaíocht chitotocsaineach lagaithe i gcoinne na sprioclínte cille YAC-1 agus RMA-Rae1 (Fíor 4C). Cruthaíonn na torthaí seo go bhfuil JAK1 fíor-riachtanach ní hamháin chun cealla NK a chothabháil ar an imeall ach go gcuireann sé lena ngníomhaíocht citotocsaineach freisin.

Laghdaíonn ídiú cealla NK de bharr Caillteanais ailléil amháin de Jak1 Lagaíonn Faireachas Tumor

Tá cealla NK ríthábhachtach chun cealla claochlaithe a aithint agus a dhíchur go luath. Chun imscrúdú a dhéanamh an bhfuil claonadh méadaithe i leith fás siadaí mar thoradh ar laghdú cille NK agus a bhfeidhmiúlacht lagaithe i lucha Jak1fl/+ Ncr1Cre agus nach ndéantar é a chúiteamh ar bhealaí eile, bhaineamar úsáid as cealla linfóma RMA-Rae1. Is uirlis é an líne cille seo chun staidéar a dhéanamh ar fhaireachas meall atá ag brath ar chealla NK ar bhealach láidir agus éifeachtach (20). Rinneamar cealla liomfóma RMA-Rae1 a thrasphlandú go subcutaneously isteach sa dá thaobh de lucha Jak1fl/+ agus Jak1fl/+ Ncr1Cre. Toisc nach raibh ailléil amháin de Jak1 ann, chuir sé sin lagú ar chumas na gcealla NK fás siadaí a rialú mar atá léirithe ag méadú ar mhéid siadaí (Fíor 5A) agus meáchan siadaí i Jak1fl/+Ncr1Cre (Fíor 5B). Ag teacht, léirigh na siadaí seo insíothlú cille NK laghdaithe go suntasach (Fíoracha 5C, D). Theip orainn aon difríocht a bhrath i minicíocht cealla NK NKG2D+ insíothlaithe siadaí (Fíor 5E), atá ríthábhachtach chun siadaí RMA-Rae1 a aithint. Go hachomair, léiríonn ár dtorthaí gur leor an líon laghdaithe cille NK mar aon le feidhmiúlacht cille NK lag i lucha Jak1fl/+ Ncr1Cre chun rialú fáis siadaí in vivo a lagú go suntasach.

FIGIÚR 5|Cuireann cailliúint ailléil amháin de Jak1 isteach ar fhaireachas siadaí. (A, B) Jak1fl/+ agus Jak1fl/+ Ncr1Cre Rinneadh instealladh sc le 106 chealla RMA-Rae1 agus tar éis 10 lá rinneadh measúnú ar mheáchan an siadaí. Taispeántar (A) pictiúir ionadaíocha siadaí agus (B) ceapacha ponc le línte cothrománacha a léiríonn meánmheáchan meall ± SEM ó 2 thurgnamh neamhspleách; n=6–8 (C, D) Rinneadh anailís ar chealla NK insíothlaithe meall de réir cíteiméadracht sreafa. (C) Taispeántar ceapacha ionadaíocha de chealla CD3−NKp46+ siadaí-insíothlaithe agus a gcéatadán i measc cealla Rae1−. (D) Cuirtear líon iomlán na gceall CD3−NKp46+ siadaí-insíothlaithe in aghaidh gach graim den siad agus (E) céatadáin de chealla NKG2D+ NK i láthair mar bharraghraif a thaispeánann meán ± SEM ó thurgnamh amháin n=4– 5. ***p < 0.001.

PLÉ

Tá baint dlúth ag dírialú cosán comharthaíochta JAK-STAT le forbairt ailse chomh maith le neamhoird imdhíonachta (7). Ba é an chéad ghalar JAK-nasctha a thángthas air ná an dianeasnamh imdhíonachta comhcheangailte (SCID) arb iad is sainairíonna é neamhghnáchaíochtaí cille NK de bharr sócháin LOF JAK3 (26, 27). Léirímid anseo go bhfuil easnamh imdhíonachta dúchasach mar thoradh ar scriosadh JAK1 i gcealla NKp46+ le cailliúint cealla NK agus ILC1 in orgáin fhorimeallacha, ach tá JAK2 iomarcach do mharthanas agus aibiú cille NK. Nocht ár gcuid oibre roimhe seo go bhfuil laghdú mór ar líon na gcealla NK in orgáin fhorimeallacha mar thoradh ar chailliúint STAT5 i gcealla NK (18). Tarrtháil caillteanas cealla NK i lucha Stat5fl/flNcr1Cre trí léiriú forfheidhmithe ar an móilín pro-marthanais BCL2 (28). Sainmhínigh an staidéar seo STAT5 mar fhachtóir ríthábhachtach marthanais do chealla NK. Tá easpa cealla NK (29) den chuid is mó ag lucha STAT5B-easnamhach, i gcomhréir leis an bhfíric go comharthaí STAT5 le sruth de cytokines atá ríthábhachtach do bhitheolaíocht ceall NK, mar shampla IL-2 nó IL-15 (30). Tá IL-15 ríthábhachtach d'fhorbairt agus do mharthanas cille NK mar go bhfuil Il15 - / - lucha den chuid is mó gan cealla NK forimeallacha (31). Comharthaíonn IL-15 trí choimpléasc gabhdóra de shlabhra gabhdóra c, IL-2R , agus IL-15r (32). Cruthaíonn lucha knockout gach slabhra gabhdóirí ról fíorthábhachtach do chomharthaí a seoladh le sruth ó IL-15 le haghaidh forbairt cille NK (33, 34). Go dtí seo, tá an méid a chuireann JAK3 c-ghaolmhar le forbairt cealla NK bunaithe go maith. Léiríonn lucha a bhfuil easnamh JAK3 acu feinitíopa SCID den chineál céanna mar a breathnaíodh in othair dhaonna agus cuirtear bac ar fhorbairt cille NK ag an gcéim progenitor réamh-NK (35, 36). Anois cuirimid JAK1 ar bheagán meas mar chuid ríthábhachtach den ais IL-15/STAT5 i gcealla NK. Jak1fl/flNcr1Cre Léiríonn cealla NK bloc forbartha ag céim na gceall iNK agus caillteanas beagnach iomlán de chealla NK sna horgáin fhorimeallacha.

Is díol spéise é go sáraíonn iarmhairtí scriosadh JAK1 do chealla NK éifeachtaí easnamh STAT5-. D’fhéadfadh lagú ar ghníomhachtú comhcheangailte STAT3 agus STAT5 a bheith mar bhunús leis an gcaillteanas níos suntasaí de chealla NK, mar go bhfuil sé léirithe go gcothaíonn STAT3 léiriú ar ghéin ríthábhachtach marthanais cille NK Mcl1 (37, 38). Mar mhalairt air sin, d'fhéadfadh leathréanna difriúla a bheith ag JAK1 agus STAT5 a chuireann san áireamh minicíochtaí difriúla "scriostóirí díreach" - cealla NK nach bhfuil ach an ghéin caillte acu ach a iompraíonn an próitéin go fóill, rud a d'fhéadfadh difríochtaí a mhíniú. Léirítear éifeacht géine-dáileog easnamh JAK i líon na gceall NK, agus tá cailliúint ailléil amháin de JAK1 indiúscartha le haghaidh aibithe cille NK. Tugann sé seo le tuiscint go bhfuil STAT5 gníomhachtaithe ag teorainn an ráta do mharthanas cille NK ach nach bhfuil sé ag aibiú. Is leor freisin ailléil amháin de Jak1 a scriosadh chun lagú suntasach a dhéanamh ar fhaireachas siadaí bunaithe ar líon laghdaithe cealla NK mar aon le feidhmiúlacht laghdaithe na gcealla NK atá fágtha. De réir ár gcuid sonraí, tá easnamh cille NK tromchúiseach mar thoradh ar scriosadh cille-shonrach NK de ghéine sprice STAT5 Mcl1, rud a fhágann go bhfuil méadú suntasach ar ualach méadastatach (38).

cistanche tubulosa-feabhas a chur ar chóras imdhíonachta

Féadfaidh JAKanna feidhmeanna iomarcacha a thaispeáint agus cúiteamh a dhéanamh dá chéile. Le sruth ón receptor interferon Is féidir le JAK1 cúiteamh a dhéanamh go páirteach as caillteanas gníomhaíochta kinase JAK2 (39). Tá sé léirithe freisin go ndéanann JAK2 fosfarylate STAT5 le sruth ó IL-15 le linn difreáil in vitro ar chealla NK (16). Ar an láimh eile, ní féidir le JAK2 atá gníomhach go bunreachtúil ach go measartha cúiteamh a dhéanamh as caillteanas JAK1 i ngaschealla, rud a thugann le tuiscint go bhfuil ról neamhiomarcúil JAK1 agus 2 i HSCanna. Ar aon dul leis, tugaimid faoi deara, in éagmais JAK1, go mainneoidh JAK2 cúiteamh a dhéanamh maidir le STAT5 a ghníomhachtú, fiú faoi dáileog ard IL-2 in vitro, chun maireachtáil cille NK a cheadú. Tá sé fós le soiléiriú an féidir éifeachtaí cúitimh a bhaint amach trí fhoirm de JAK2 atá gníomhach go bunreachtúil a chur in iúl. Níos tábhachtaí fós, léirímid go bhfuil caillteanas JAK2 i gcealla NKp46+ thar a bheith dodhéanta do mharthanas cille NK. JAK2-tá cealla NK easnamhacha go hiomlán aibí, rud a chruthaíonn nach bhfuil aibiú ceall NK á thiomáint ag JAK2, atá intreach cille NK. Tugann sé seo le fios freisin gur dóichí go bhfuil an aibiú cille NK lag i lucha Jak2fl/flMx1Cre (14) mar thoradh ar fheidhmeanna cille-eistreach NK de JAK2. D’fhéadfaí tuairimíocht a dhéanamh go n-athraíonn scriosadh bunreachtúil JAK2 an milieu cítocine.

TAGAIRTÍ

1. Abel AM, Yang C, Thakar MS, Malarkannan S. Cealla marfach nádúrtha: forbairt, aibiú, agus úsáid chliniciúil. Imdhíonacht Tosaigh. (2018) 9:1869. doi: 10.3389/Fimmu.2018.01869

2. Oráiste JS. Easnamh cille killer nádúrtha. J Ailléirge Clin Immunol. (2013) 132:515–25. doi: 10.1016/J.jaci.2013.07.020

3. O'Shea JJ, Plenge R. JAK agus móilíní comharthaíochta STAT i ngalar imdhíonrialaithe agus imdhíonachta-idirghabhála. Díolúine (2012) 36:542–50. doi: 10.1016/j.immuni.2012.03.014

4. Stark GR, Darnell JE. An cosán JAK-STAT ag fiche. Díolúine (2012) 36:503–14. doi: 10.1016/j.immuni.2012.03.013

5. Shuai K, Liu B. Comharthaíocht JAK-STAT sa chóras imdhíonachta a rialáil. Nat Rev Immunol. (2003) 3:900–11. doi: 10.1038/1226

6. O'Shea JJ, Holland SM, Staudt LM. JAKanna agus STATanna in imdhíonacht, easpa imdhíonachta, agus ailse. N Béarla J Med. (2013) 368:161–70. doi: 10.1056/NEJMra1202117

7. Hammarén HM, Virtanen AT, Raivola J, Silvennoinen O. Rialú JAKanna i gcomharthaíocht cytokine agus a bhriseadh i ngalar. Cíticín (2018). doi 10.1016/j.cyto.2018.03.041. [Epub roimh phriontáil].

8. Sócháin Lorenzini T, Dotta L, Giacomelli M, Vairo D, Badolato R. STAT mar lascairí cláir: ag iompú easpa imdhíonachta príomhúil i ngalar uath-imdhíonachta. J Leukoc Biol. (2017) 101:29–38. doi: 10.1189/jlb.5RI0516-237RR

9. Haan C, Rolvering C, Raulf F, Kapp M, Drückes P, Thoma G, et al. Tá ról ceannasach ag Jak1 thar Jak3 maidir le haistriú comhartha trí ghabhdóirí cítocine ina bhfuil c. Ceimic Biol. (2011) 18:314–23. doi: 10.1016/j.chembiol.2011

10. Eletto D, Burns SO, Angulo I, Plagnol V, Gilmour KC, Henriquez F, et al. Sócháin Bialelic JAK1 in othar imdhíon-easpa le hionfhabhtú mióbaictéarach. Cumann Nat. (2016) 7:13992. doi: 10.1038/ncomms13992

11. Rodig SJ, Meraz MA, White JM, Lampe PA, Riley JK, Arthur CD, et al. Léiríonn cur isteach ar an géine Jak1 róil éigeantacha agus neamhiomarcaíochta na Jaks i bhfreagairtí bitheolaíocha cítocine-spreagtha. Cill (1998) 93:373–83.

12. Kleppe M, Spitzer MH, Li S, Hill CE, Dong L, Papalexi E, et al. Jak1 Comhtháthaíonn braite citocín chun feidhm gascheall hematopoietic agus hematopoiesis struis a rialáil. Gascheall Cille (2018) 22:277. doi: 10.1016/j.stem.2017 13. Schwartz DM, Kanno Y, Villarino A, Ward M, Gadina M, O'Shea JJ. Cosc JAK mar straitéis theiripeach do ghalair imdhíonachta agus athlastacha. Diosca Drugaí Nat Rev. (2017) 16:843–62. doi: 10.1038/10.2017.201

14. Bottos A, Gotthardt D, Gill JW, Gattleli A, Frei A, Tzankov A, et al. Cuireann laghdú ar fhaireachas imdhíonachta siadaí NK-chealla mar thoradh ar chosc JAK le metastasis i múnlaí ailse chíche. Cumann Nat. (2016) 7:12258. doi: 10.1038/ncomms12258

15. Schönberg K, Rudolph J, Vonnahme M, Parampalli Yajnanarayana S, Cornez I, Hejazi M, et al. Cuireann cosc ​​JAK isteach ar fheidhm na gceall NK i neoplasmaí myeloproliferative. Ailse Res. (2015) 75:2187–99. doi: 10.1158/0008-5472.CAN-14-3198

16. Kim WS, Kim MJ, Kim DO, Byun JE, Huy H, Song HY, et al. Rialaíonn suppressor comharthaíochta cítocine 2 go diúltach idirdhealú cille NK trí ghníomhaíocht JAK2 a chosc. Ionadaí Sci (2017) 7:46153. doi: 10.1038/srep46153

17. Krempler A, Qi Y, Triplett AA, Zhu J, Rui H, Wagner KU. Gin ailléil choinníollach um chnagadh don ghéin Janus kinase 2 (Jak2) i lucha. Geineasas (2004) 40:52–7. doi: 10.1002/gine.20063

18. Eckelhart E, Warsch W, Zebedin E, Simma O, Stoiber D, Kolbe T, et al. Nochtann luch nua Ncr Cre ​​an ról riachtanach atá ag STAT5 maidir le maireachtáil agus forbairt cealla NK. Fuil (2011) 117:1565–74. doi: 10.1182/fola-2010-06-291633

19. Cui Y, Riedlinger G, Miyoshi K, Tang W, Li C, Deng C, et al. Léiríonn díghníomhú Stat5 in epithelium mammary luiche le linn toirchis feidhmeanna ar leith maidir le iomadú cille, maireachtáil agus difreáil. Mol Cell Biol. (2004) 18:8037–47. doi: 10.1128/MCB.24.18.8037-8047.2004

20. Cerwenka A, Baron JL, Lanier LL. Ligeann léiriú ectópach ar ghéine luath-induchtaithe(RAE-1) aigéid retinoic (RAE-1) marfóir nádúrtha siadaí in vivo a iompraíonn I-aicme MHC. Proc Natl Acad Sci USA. (2001) 98:11521–6. doi: 10.1073/pnas.201238598

21. Putz E, Gotthardt D, Hoermann G, Csiszar A, Wirth S, Berger A, et al. Cuireann CDK8-STAT Idirghabhála1-S727 fosfarylation srian ar chiteatocsaineacht cille NK agus faireachas siadaí. Ionadaí Cille (2013) 4:437–44. doi: 10.1016/j.celrep.2013.07.012

22. Geiger TL, Sun JC. Forbairt agus aibiú cealla marfacha nádúrtha. Curr Opin Immunol. (2016) 39:82-9. doi: 10.1016/j.coi.2016.01.007

23. Sojka DK, Plougastel-Douglas B, Yang L, Pak-Wittel M, Artyomov MN, Ivanova Y, et al. Is línte cille iad cealla marfacha nádúrtha fíocháin-chónaitheacha (NK) atá éagsúil ó chealla thymic agus traidisiúnta splenic NK. Elife (2014) 3:e01659. doi: 10.7554/eLife.01659

24. Peng H, Jiang X, Chen Y, Sojka DK, Wei H, Gao X, et al. Tugann cealla NK a chónaíonn ae díolúine oiriúnaitheach in athlasadh teagmhála craiceann. J Clin Infheistiú. (2013) 123:1444–56. do: 10.1172/JCI66381

25. Martinet L, Ferrari De Andrade L, Guillerey C, Lee JS, Liu J, Souza-Fonseca Guimaraes F, et al. Léiríonn slonn DNAM-1 clár eile d’aibiú cealla NK. Ionadaí Cille (2015) 11:85–97. doi: 10.1016/j.celrep.2015. 03. 006

26. Macchi P, Villa A, Giliani S, Sacco MG, Frattini A, Porta F, et al. Sócháin géine Jak-3 in othair a bhfuil comh-easnamh imdhíonachta uathsomach orthu (SCID). Dúlra (1995) 377(6544):65–8.

27. Russell SM, Tayebi N, Nakajima H, Riedy MC, Roberts JL, Aman MJ, et al. Sóchán Jak3 in othar le SCID: ról riachtanach Jak3 i bhforbairt lymphoid. Eolaíocht (1995) 270:797–800.

28. Gotthardt D, Putz EM, Grundschober E, Prchal-Murphy M, Straka E, Kudweis P, et al. Is príomh-rialtóir é STAT5 i gcealla NK agus feidhmíonn sé mar an t-athrú móilíneach ó fhaireachas meall go cur chun cinn meall. Ailse Diosca. (2016) 4:414–29. doi: 10.1158/2159-8290.CD-15-0732

29. Villarino A V., Sciumè G, Davis FP, Iwata S, Zitti B, Robinson GW, et al. Rialaíonn tairseacha STAT5 sainithe ag fo-thacar agus fíocháin hoiméastáis agus feidhm na gcealla dúchasacha limfeach. J Cait Med. (2017) 214:2999–3014. do: 10.1084/nm.20150907

30. Marçais A, Viel S, Grau M, Henry T, Marvel J, Walzer T. Forbairt cille NK luchóg agus feidhm ag cytokines a rialáil. Imdhíonacht Tosaigh. (2013) 4:450. doi: 10.3389/Fimmu.2013.00450

31. Kennedy MK, Glaccum M, Brown SN, Butz EA, Viney JL, Embers M, et al. Lochtanna inchúlaithe i marfóirí nádúrtha agus i línte cuimhne cille CD8 T i lucha easnamhacha idirleukin 15-. J Cait Med. (2000) 191:771–80. do: 10.1084/jem.191.5.771

32. Ikemizu S, Chirifu M, Davis SJ. Coimpléisc chomharthaíochta IL-2 agus IL-15: difriúil ach mar a chéile. Nat Immunol. (2012) 13:1141–2. doi: 10.1038/n.2472

33. Williams NS, Klem J, Puzanov IJ, Sivakumar PV, Schatzle JD, Bennett M, et al. Difreáil cille marfach nádúrtha: léargais ó mhúnlaí knockout agus luch trasgenic agus córais in vitro. Immunol Ath. (1998) 165:47-61.

34. Lodolce JP, Boone DL, Chai S, Swain RE, Dassopoulos T, Trettin S, et al. Coinníonn gabhdóir IL-15 hoiméastáis limfóideach trí thacú le húrú agus leathadh limficítí. Díolúine (1998) 9:669–76.

35. Páirc SY, Saijo K, Takahashi T, Osawa M, Arase H, Hirayama N, et al. Lochtanna forbartha cealla lymphoid i lucha Jak3 kinase-easnamhach. Díolúine (1995) 3:771–82.

36. Robinette ML, Cella M, Telliez JB, Ulland TK, Bearú AD, Capuder K, et al. Cuireann easnamh Jak3 bac ar fhorbairt cille lymóideach dúchasach. Imdhíonól Mucosal. (2017) 1:50–60. doi: 10.1038/mi.2017.38 37. Abdulghani J, Allen JE, Dicker DT, Liu YY, Goldenberg D, Smith CD, et al. Déanann Sorafenib siadaí soladacha a íogrú chuig antasubstaintí agónaithe gabhdóra Apo2L/TRAIL agus Apo2L/TRAIL ag an ais Jak2-Stat3-Mcl1. PLoS ONE (2013) 8:e75414. doi: 10.1371/journal.pone.0075414

38. Sathe P, Delconte RB, Souza-Fonseca-Guimaraes F, Seillet C, Chopin M, Vandenberg CJ, et al. Easnamh imdhíonachta dúchasach tar éis ablation géiniteach Mcl1 i gcealla marfacha nádúrtha. Cumann Nat. (2014) 5:4539. doi: 10.1038/ncomms5539

39. Keil E, Finkenstädt D, Wufka C, Trilling M, Liebfried P, Strobl B, et al. Feidhm scafall tábhachtach an Janus kinase 2 nochta ag samhail luiche úrscéal a chothaíonn sóchán lúb gníomhachtaithe Jak2. Fola (2014) 123:520–9. doi: 10.1182/fola-2013-03-492157