Tionchar an Fhorlíonadh Algaí Ar Thiúchan Glutathione Agus Gníomhaíocht Einsímí Glutathione in ae na lucha agus na nduán
Mar 17, 2022
Coimriú: Is foinse fhéideartha agus nádúrtha é algaí d’aigéid shailleacha il-neamhsháithithe slabhra fada amhail aigéad eicosapentaenoic (EPA) agus aigéad docosahexaenoic (DHA). Carnann an diatom Pinnularia Borealis leibhéil arda EPA agus féadfar é a mheas mar fhoinse le haghaidh táirgeadh tráchtála forlíontaí aiste bia. Sa staidéar seo, chuireamar an cheist an bhféadfadh forlíonadh aiste bia le P. Borealis cur le cosaint frithocsaídeach agus fachtóirí riosca do ghalair cardashoithíoch a fheabhsú. Chothaithe muid lucha ( Mus musculus ) le tuaslagáin diatom lyophilized de thiúchan éagsúla ( 1 faoin gcéad , 3 faoin gcéad , agus 5 faoin gcéad ) ar feadh 7 lá . Ansin thomhaiseamar ábhar glutathione agus gníomhaíocht einsímí córais redox glutathione, tiúchan iomlán colaistéaról agus triacylglycerol, agus tiúchan malondialdehyde saaeagusduán. Fuaireamar amach go bhfuil tiúchan colaistéaról agus triacylglycerol saaeagus duáin Ba iad na lucha ab ísle a chothaíodh leis an tiúchan is airde de Pinnularia Borealis, rud a thugann le tuiscint go bhfuil airíonna cosanta ag algaí. Ina theannta sin, ba leor an tiúchan is ísle de Pinnularia Borealis chun cumas frithocsaídeach a fheabhsú. Tugann ár dtorthaí le fios go bhféadfaí P. Borealis a úsáid mar fhoinse d'fhorlíonta aiste bia atá saibhir i EPA, ach ba cheart go mbeadh teorainn leis an méid a sholáthraítear don orgánach.
Eochairfhocail:algaí; EPA; forlíonadh ; glutathione; einsímí glutathione; strus ocsaídiúcháin; duán ; ae
Feabhsaíonn CISTANCHE FEIDHM Duán/Duánach
Réamhrá
Cruthaíonn fréamhacha saor in aisce agus ROS dúshláin shuntasacha d'orgánaigh mar go bhféadfadh siad damáiste a dhéanamh d'aigéid núicléacha, próitéiní agus lipidí. Mar sin, tá córas cosanta frithocsaídeach éifeachtach forbartha ag orgánaigh lena n-áirítear frithocsaídeoirí einsímeacha agus nonenzymatic ingenous. Mar sin féin, is féidir frithocsaídeoirí cosúil le vitimín C, vitimín E, carotenoidí, agus feanóil a fháil ón aiste bia freisin. Ina theannta sin, féadfaidh aigéid shailleacha il-neamhsháithithe (PUFAanna), a ocsaídíonn go tapa in vitro, damáiste ocsaídiúcháin in vivo a laghdú [1]. Laghdaíonn aiste bia saibhir i PUFA an baol galar cardashoithíoch agus roinnt cineálacha ailse. Féadfaidh sé tiúchan colaistéaról plasma a laghdú freisin agus dá bhrí sin maolaíonn sé an baol galar cardashoithíoch agus Alzheimer [1,2], agus tá ról tairbheach aige i neamhoird shíciatracha, fís, asma, agus airtríteas réamatóideach [3]. Is féidir leis an gcorp an duine go leor cineálacha aigéid shailleacha a shintéisiú, ach ní mór aigéid sailleacha riachtanacha, mar aigéad -linolenic (omega-3, ω-3) agus aigéad linóleic (ω-6) a bheith ann. a fhaightear ón aiste bia. Tá dhá dhíorthach d'aigéad -linolenic, an aigéad eicosapentaenoic (ω-3, EPA) agus aigéad docosahexaenoic (ω{{10}}, DHA), ina gcomhpháirteanna struchtúracha tábhachtacha den chillscannán [4] . Maolaíonn EPA agus DHA fachtóirí riosca do ghalair cairdiacha, mar shampla stróc, arrhythmia, agus brú fola ard [3], agus tá ról tairbheach acu i neamhoird síciatracha, fís, asma, agus airtríteas réamatóideach [4]. Is minic a fhaightear EPA agus DHA ón aiste bia laethúil, go príomha ó ola éisc. Mar sin féin, tarlaíonn fadhbanna amhail boladh agus éagobhsaíocht táirgí eastósctha le linn eastóscadh éisc [4]. Mar sin, éilítear foinsí eile. Is ionann diatóim agus grúpa mór amháin de algaí fótaisintéiseach [5-11] agus is eol dóibh leibhéil arda de aigéid shailleacha riachtanacha ω-3, EPA, DHA, agus carotenoidí [12,13]. In 2011, Lang et al. próifílí aigéad sailleacha foilsithe de níos mó ná 2000 microalgae, rud a cheadaíonn staidéar mionsonraithe ar phróifílí VLC-PUFA i diatoms [14]. Tá siad saibhir i aigéid shailleacha il-neamhsháithithe mheánslabhra agus slabhra an-fhada (VLC-PUFAanna). Is iad na aigéid shailleacha is mó ná aigéad miristic (14:0), aigéad palmitic (16:0), aigéad palmitoleic (16:1), agus aigéad eicosapentaenoic (20:5), agus is gnách go mbíonn aigéid shailleacha C18 i rianmhéideanna [ 15]. Tá diatóim forleathan go héiceolaíoch, tarlaíonn siad i ngnáthóga muirí, fionnuisce agus talún ar fud an domhain, agus cuireann siad go mór le táirgeadh príomhúil agus le timthriall domhanda carbóin agus cothaithigh [16]. Is speiceas cosmopolitan talún coitianta é Pinnularia Borealis a fhaightear i ngnáthóga aerga (carraigeacha, ballaí, ithir, caonach) agus na huiscí seo a leanas agus uiscí seasta [17]. Le blianta beaga anuas, tá diatóim á n-aithint níos mó as a n-acmhainneacht mhór in iarratais biteicneolaíochta, de réir mar a tháirgeann siad comhdhúile ardluacha is féidir a úsáid i míochaine agus mar fhorlíonta bia [18].
Sa staidéar seo, chuireamar an cheist an bhféadfadh forlíonadh aiste bia le diatom Pinnularia Borealis cur le cosaint frithocsaídeach i Musculus luch. Rinneamar anailís ar an gcóras frithocsaídeach glutathione, a bhfuil ról ríthábhachtach aige maidir le homeostasis ocsaídiúcháin a chothabháil, chomh maith le tiúchan malondialdehyde, táirge sárocsaídiúcháin lipid, mar mharcóir ar strus ocsaídiúcháin. Is éard atá sa chóras frithocsaídeach glutathione foirmeacha laghdaithe agus ocsaídithe de glutathione (GSH agus GSSH, faoi seach), glutathione peroxidases, agus glutathione reductase. Tá cóimheas méadaithe GSSG (glutathione disulfide)-go-GSH ina tháscaire ar strus ocsaídiúcháin níos mó [1]. Déantar Glutathione a shintéisiú i gcíteaplasma na gcealla agus anaeIs é an t-orgán is gníomhaí [1]. Is é glutathione laghdaithe (L-gáma-glutamyl-L-cysteinyl glicín, GSH) an thiol íseal-mheáchan móilíneach is flúirseach i gcealla mamaigh a bhfuil airíonna frithocsaídeacha cumhachtacha [19-21]. Athghiníonn GSH frithocsaídeoirí ocsaídithe eile freisin, mar shampla vitimín C agus vitimín E. Glacann sé páirt freisin i ndeisiú struchtúr na móilíní próitéine, lipid, agus aigéad núicléasach a ndearnadh damáiste dóibh de bharr ocsaídiúcháin [22]. Úsáideann glutathione peroxidases (GPx), lena n-ard-chleamhnas le haghaidh sárocsaíd hidrigine, an fhoirm laghdaithe glutathione chun sárocsaíd hidrigine a laghdú go huisce agus é a dhíchur ón gcorp [1]. Tá timthriall redox GSH dúnta ag glutathione reductase, rud a chatalaíonn laghdú an fhoirm ocsaídithe de glutathione go dtí a fhoirm laghdaithe [1]. Tá an próiseas seo tábhachtach chun an cóimheas ceallach cuí de glutathione a chothabháil ina fhoirmeacha laghdaithe agus ocsaíde [23].
Feabhsaíonn CISTANCHE TEIP Duán/Duánach
Ar deireadh, déanann an glutathione S-transferase (GST) catalú ar chomhchuingeach GSH chuig raon leathan de chomhdhúile leictreafaileacha ingenous agus exogenous [24-26]. Is é an comhchuinge GST an chéad chéim sa chonair aigéid mercapturic as a dtagann deireadh a chur le comhdhúile tocsaineacha. Tá ról suntasach ag GST i ndíthocsainiú xenóbiotics díobhálacha éagsúla, idir exogenous agus endogenous, agus i bpróisis bith-chlaochlaithe carcanaigineach freisin [27]. I mamaigh, tá GST i láthair i ngach orgán agus fíocháin, ach tá an t-ábhar is airde den einsím le fáil saae[21]. Sprioc eile dár staidéar ná an tuar a thástáil go bhféadfadh forlíonadh aiste bia gearrthéarmach le Pinnularia Borealis fachtóirí riosca do ghalair cardashoithíoch a fheabhsú. Chun seo a dhéanamh, thomhaiseamar triacylglycerols agus comhchruinnithe colaistéaróil iomlána saaeagusduáinde lucha saotharlainne.
Abhair agus modhanna
Rinneadh an staidéar seo ag Ollscoil Jan Kochanowski i Kielce, an Pholainn. D’fhormheas an Coiste Áitiúil um Eitic i dTaighde Ainmhithe i Vársá na Polainne na nósanna imeachta turgnamhacha go léir (cinneadh uimhir 37/2019). Áiríodh leis an turgnamh dhá chéim staidéir: (1) ullmhú Pinnularia Borealis le húsáid mar fhorlíonadh bia agus (2) taighde in vivo ar 6-lucha Eilvéiseacha seachtaine d’aois.
2.1. Ullmhú Pinnularia Borealis Scríobadh paistí algach ó craobhóga péine a bailíodh ó uaimh Głowoniowa Nyza˙ (Sléibhte Tatra, an Pholainn), agus cuireadh iad isteach i málaí plaisteacha steiriúla agus a iompar chuig an saotharlann, áit a saothraíodh na algaí ar phlátaí Petri gloine ina raibh agar úr comhdhéanta de 1. faoin gcéad Bold's Basal Medium [28]. Coinníodh na cultúir ag teocht 228 ◦C i 12-h solas/12-h timthriall dorcha ag 300{{5{ {60}}}} µEmm2 s悆1 l× (40 W feadáin fluaraiseacha FL fionnuar). Tar éis thart ar dhá nó trí mhí ón gcéad chuma ar algaí, rinneadh staidéar micreascópach. Breathnaíodh an t-ábhar i riocht beo agus aithníodh é ag baint úsáide as micreascóp solais Nikon Eclipse E 600 (Nikon, Tóiceo, an tSeapáin), agus tógadh grianghraif le ceamara digiteach Coolpix 4500 (Nikon, Tóiceo, an tSeapáin). Socraíodh na cealla i glutaraldehyde 3 faoin gcéad i maolán fosfáit 0.1 M ag pH 7.1, iar-osmicated i 1 faoin gcéad osmium tetroxide, agus bhí siad infiltrated ansin i meán Spurr [29]; tógadh micreaghrianghraif le micreascóp tarchurtha leictreoin TESLA BS 500 (TEM). Aithníodh Pinnularia Borealis de réir [30] agus le micreascóp inverted Nikon Eclipse Ti agus grianghraf le trealamh confocal Nikon A1 (Nikon, Tóiceo, an tSeapáin). Ba iad na cinn léasair 405.488.561 nm agus an córas braite ná brathadóir PMT-DU4 sa raon 400-820 nm, lionsa inbhéartach Plan Apo VC 100XOil, soilsiú mearcair Nikon C-HgFiE, agus ceamara digiteach DS0Fi1C-U3. Fuarthas sonraí i Nikon NIS-Elements íomhánna digiteacha, a próiseáladh le Adobe Photoshop CS5 (Adobe, San Jose, CA, SAM). Rinneadh anailís ar phróifíl eistir meitile aigéid shailligh (FAME) i Pinnularia Borealis triomaithe ag crómatagrafaíocht gháis- mais-speictriméadracht (GC-MS) ag baint úsáide as ionstraim Clarus 600T ó PerkinElmer (Waltham, MA, SAM) bunaithe ar an modh ag Guzman et al. [31]. Seo a leanas an t-ábhar P. Borealis reoite-triomaithe sa ωn-3 PUFA: ωn-3 PUFA (i gcéatadán d’aigéid shailleacha iomlána), iomlán=28 faoin gcéad, agus EPA {{45 }} faoin gcéad . Aithníodh agus tomhaiseadh 14 aigéid shailleacha san iomlán: aigéad miriste (C14:0), aigéad pailmíteach (C16:0), aigéad pailmeitile (C16:1 n-7), aigéad heicseádadéanóch (C16:2 n{{). 56}}), aigéad heicsidheachtraiéineach (C16:3), aigéad stéarach (C18:0), aigéad oiléach (C18:1 n-9), aigéad linóleic (C18:2 n{{{2), - aigéad linóileach (C18:3 n-3), arachidónach (C20:4 n-6), aigéad eicosapentaenoic (C20:5 n-3), aigéad erúcach (C22:1 n{{ 79}}), agus aigéad docosahexaenoic (C22:6 n-3).
2.2. Ábhair Tástála Ainmhithe agus Próiseáil Fíocháin
2.2.1. Grúpaí agus Cóireálacha Ainmhithe
Ceannaíodh 40 lucha Eilvéiseacha fireanna 6 seachtaine d’aois le meáchan coirp tosaigh 20.5 g ± 0.5 g ó Institiúid Géineolaíochta agus Biteicneolaíochta Ainmhithe Acadamh Eolaíochtaí na Polainne (Jastrz ˛ebiec, an Pholainn). Coinníodh na hainmhithe faoi ghnáthchoinníollacha saotharlainne ag teocht tairiseach 20–22 ◦C agus bogthaise choibhneasta 55 faoin gcéad ± 10 faoin gcéad i dtimthriall solais 12-h (12L-12D ). Cuireadh na daoine aonair go léir i gcliabháin pholacarbónáite caighdeánach (252 × 167 × 140 mm) clúdaithe le cláir dhosmálta le fonsa beathaithe ionsuite. Bhí bia (stáisiún páirce Łomna-Las, an Pholainn) agus uisce ar fáil delirium. Cuireadh cúigear in aon chliabhán amháin. Tugadh bia caighdeánach do gach lucha ina raibh (ar bhonn meáchain) próitéiní 20.5 faoin gcéad, saillte 10 faoin gcéad (0.28 g de PUFA), carbaihiodráití 62 faoin gcéad, mianraí 6.5 faoin gcéad (cailciam 1.9 faoin gcéad, fosfar 1.6 faoin gcéad, maignéisiam 1.2 faoin gcéad, sóidiam). 0.9 faoin gcéad, agus potaisiam 0.9 faoin gcéad ), agus vitimíní 1 faoin gcéad (retinol 25.000 IU, cholecalciferol 1.000 IU, thiamin 300 mg, ribeaflaivin 20 mg, pyridoxine 15 mg, cobalamin 40 mg, aigéad ascorbic 58 mg, quinones 5 mg, tócaifearóil 125 mg, aigéad fólach 3 mg, biotin 100 µg, aigéad nicotinic 60 mg, aigéad pantothenic 35 mg, agus clóiríd choilín 1000 mg). Bhí rochtain saor in aisce ag na lucha ar bhia agus ar uisce le linn an staidéir. Tar éis seachtain amháin de chlaonadh le coinníollacha saotharlainne, roinneadh lucha go randamach i 4 ghrúpa (10 lucha in aghaidh an ghrúpa). Ar feadh na 7 lá atá romhainn, chothaíodh na lucha le aistí bia éagsúla:
(1) fuair an grúpa rialaithe aiste bia caighdeánach; (2) chothaigh an dara grúpa an aiste bia caighdeánach arna fhorlíonadh le réiteach 1 faoin gcéad de P. Borealis lyophilized (0.16 mg de EPA); (3) chothaigh an tríú grúpa an aiste bia caighdeánach arna fhorlíonadh le réiteach 3 faoin gcéad de P. Borealis lyophilized (0.48 mg de EPA); agus (4) tugadh an aiste bia caighdeánach don cheathrú grúpa arna fhorlíonadh le réiteach 5 faoin gcéad de P. borealis lyophilized (0.8 mg de EPA). Tugadh tuaslagáin uisce lyophilized P. borealis ó bhéal uair amháin sa lá i dtoirt 50 µL. Bhí rochtain saor in aisce ag na lucha ar bhia agus ar uisce le linn an staidéir. Rinneadh monatóireacht ar ardú meáchain na n-ainmhithe faoi dhó (le linn an turgnaimh), agus rinneadh a n-iontógáil bia a thomhas faoi dhó freisin. Soláthraíodh réitigh diatóim lyophilized le gnáthmhicripéad p200 aon chainéil (Gilson Pipetteman, Thermo Fischer Scientific, Reinach, an Eilvéis) agus tairgeadh barr an phípéad don bhéal go dtí gur thosaigh an luch ag ól.
Feabhsaíonn CISTANCHE Péine Duán/Duánach
2.2.2. Bailiúchán Samplaí Fíocháin
Tar éis seachtain amháin de fhorlíonadh bia, bhí decapitated na lucha agus anaeagus rinneadh na duáin a scaradh. Tá anaeperfused le tuaslagán salanda fuaraithe (4 ◦C) a bhaint as aon fola atá fágtha. Rinneadh blúirí fíocháin (maolán 100 mg/1 mL) a aonchineálú le homaiginitheoir TH 220-PCRH-Omni TH i maolán fosfáite 0.1 M le pH 7.4 ina raibh EDTA 10 mM. Rinneadh aonchineálacha a lártheifneoiriú ar feadh 15 nóiméad ag 12.000 rpm i lártheifneoir saotharlainne le MPW fuaraithe-351 R. Tar éis lártheifneoraithe, reoitear na sútháin láithreach i leacht nítrigine agus stóráiltear iad ag t 40 ◦C le haghaidh tuilleadh anailíse. .
2.2.3. Modhanna Anailíse,I supernatants fíocháin, rinneadh tiúchan glutathione laghdaithe, gníomhaíocht glutathione peroxidase, glutathione reductase, glutathione transferase, colaistéaról, triacylglycerols, próitéin agus tiúchan malondialdehyde [32] a thomhas go spectrophotometrically
2.3. Glutathione laghdaithe (GSH)Cinneadh an tiúchan GSH ag baint úsáide as Glutathione Assist Kit (Sigma-Aldrich, Darmstadt, an Ghearmáin, Cat. Uimh. CS0260), de réir nós imeachta an mhonaróra. Díphróitéiníodh samplaí ar dtús leis an tuaslagán d'aigéad sulfosalicileach 5 faoin gcéad 5- agus lártheifneoiríodh iad chun an phróitéin deasctha a bhaint. Úsáideann tomhas GSH measúnú cinéiteach ina n-eascraíonn méideanna catalaíoch GSH laghdú leanúnach de 5.5 dithiobis (2-aigéad nítribenzoic) (DTNB) go dtí 5-thio-2aigéad nítreabéinseach (TNB)). , a bhfuil dath buí air. Rinneadh déine an dath a thomhas go speictrophotometric ag 412 nm.
2.4. Glutathione peroxidase (GPx)Rinneadh gníomhaíocht glutathione peroxidase a thomhas le Kit Measúnaithe Gníomhaíochta Ceallach Glutathione Peroxidase (Sigma-Aldrich, Darmstadt, an Ghearmáin, Cat. Uimh. CPG1). Tá an modh bunaithe ar ocsaídiú glutathione (ó fhoirm GSH go GSSG) arna chatalú ag GPx, atá in éineacht le hathchúrsáil GSSG ar ais go GSH ag baint úsáide as an glutathione reductase agus NADPH. Tá an laghdú ar ionsúchán NADPH arna thomhas ag 340 nm le linn ocsaídiúcháin NADPH go NADP móide ina tháscaire ar ghníomhaíocht GPx.
2.5. Glutathione Transferase (GST)Tomhaiseadh Glutathione transferase le Pacáiste Measúnachta Glutathione S-Transferase (GST) (Sigma-Aldrich, Darmstadt, an Ghearmáin, Cat. Uimh. CS0410). Tá prionsabal an mheasúnaithe bunaithe ar an bhfíric go gcatalaíonn GST comhchuingeach L-glutathione go dtí an 1-clóra-2,{5}} dinitrobenséin (CDNB) tríd an ngrúpa thiol den glutathione. Ionsúnn an comhchuingeach GS-DNB ag 340 nm. Tá an ráta méadaithe ar an ionsú comhréireach go díreach le gníomhaíocht GST sa sampla.
2.6. Glutathione Reductase (GR)Tomhaiseadh gníomhaíocht Glutathione reductase le Kit Measúnachta Glutathione Reductase (Sigma-Aldrich, Darmstadt, an Ghearmáin, Cat. Uimh. GRSA). Rinneadh an ghníomhaíocht a thomhas leis an méadú ar ionsúchán de bharr laghdú DTNB [5,5" dithiobis(2-aigéad nítri-beansóch)] ag 412 nm.
2.7. Ábhar CholesterolCinneadh ábhar colaistéaról ag baint úsáide as an tástáil Biochemtest ag an modh [33]. Rinneadh eistir colaistéaról a hidrealú le colaistéaról esterase (CE) chun colaistéaról agus aigéid sailleacha a shaoradh. Tomhaiseadh ionsú an tsampla tástála ag 505 nm.
2.8. Ábhar TriacylglycerolsCinneadh ábhar Triacylglycerols ag baint úsáide as an tástáil Alfa Diagnóiseacha [34]. Tá prionsabal an mheasúnaithe bunaithe ar an bhfíric go ndéantar triacylglycerols a hidrolyzed ag lipáis chun aigéid sailleacha saor in aisce agus gliocról, ansin fosfarilated ag ATP. Tomhaiseadh an déine dath ag 520 nm.
Feabhsaíonn an CISTANCHE scagdhealaithe duán/duáin
2.9. Tiúchan Malondialdehyde (MDA).Rinneadh an tiúchan MDA a thomhas go speictrophotometric ag baint úsáide as an measúnú aigéid thiobarbituric (TBA). Chun an mheasúnacht a chur i gcrích, cuireadh {{0}}.5 mL den sampla le meascán imoibriúcháin (1.0 mL) déanta ag codanna cothroma d'aigéad tris chloroaicéiteach (TCA), i 0.25 N HCL, agus 0.375 faoin gcéad aigéad thiobarbituric (TBA), i 0.25 N HCL, agus téite ag 95 ◦C ar feadh 30 min. Tar éis an fhuaraithe agus an lártheifneoraithe, tomhaiseadh déine dath bándearg an t-adduct TBA-malondialdehyde go speictrophotiméadrach ag 532 nm [35].
2. 10. Ábhar PróitéinCinneadh ábhar próitéine ag baint úsáide as an modh faoi [36]. Tá measúnacht próitéin Lowry bunaithe ar imoibrithe na n-ian copair leis na naisc pheptíde (le himoibrí Folin-Ciocalteu, .i. meascán d'aigéad fosfatungstach agus d'aigéad fosfamoluibdeach) faoi choinníollacha alcaileach (an tástáil Biuret) le hocsaídiú iarmhair próitéine aramatacha ( go príomha tryptophan agus tyrosine). Tá cistéin imoibríoch freisin don imoibrí. Rinneadh tiúchan an choimpléasc daite a thomhas go speictrophotiméadrach ag tonnfhad λ=750 nm.
2. 11. Anailís staitistiúilCuirtear na torthaí ar fad i láthair mar mhodhanna le diallais chaighdeánacha (SD). Cuireadh paraiméadair bithcheimiceacha i gcomparáid le hanailís ar athraithis ANOVA agus tástáil post hoc Tukey ina dhiaidh sin. Rinneadh comparáid idir athruithe ar mhais an choirp agus ar thomhaltas bia trí úsáid a bhaint as t-tástáil dhá shampla. Rinneadh na hanailísí seo trí úsáid a bhaint as na bogearraí Statistica 9.0 [37]. Cuirtear na sonraí i láthair mar chéatadán freisin, ag glacadh leis gurb ionann luachanna rialaithe agus 100 faoin gcéad . Socraíodh tábhacht staitistiúil ag p < -.05="" agus="" p="">< 0.01.="" ina="" theannta="" sin,="" rinneadh="" anailísí="" ar="" chomhordú="" díreach="" cca="" le="" tástálacha="" iomalartaithe="" monte="" carlo="" chun="" a="" chinneadh="" cé="" acu="" de="" na="" paraiméadair="" bithcheimiceacha="" tomhaiste="" a="" dhéanann="" idirdhealú="" suntasach="" idir="" na="" tacair="" staidéir.="" rinneadh="" na="" hanailísí="" seo="" ag="" baint="" úsáide="" as="" bogearraí="" canoco="" 5.0="" [38],="" ar="" leithligh="" le="" haghaidh="">ae agus na duáin.
3. Torthaí
Bhí tiúchan nó gníomhaíocht gach cuid den chóras frithocsaídeach glutathione ag brath ar fhorlíonadh aiste bia, araon saae agus na duáin. Roimh an turgnamh, mheáigh na lucha 20.5 g ± 0.5 g. Tar éis seachtain amháin de fhorlíonadh le réitigh diatom éagsúla, ní raibh difríocht idir na lucha i mais comhlacht [t== 1.75, p=0.088]. Ní raibh difríocht idir tomhaltas bia freisin idir grúpaí agus d'ith na lucha 2.5 ± 0.4 g de bhia ar an meán in aghaidh an lae. Mar sin féin, tar éis seachtain amháin de fhorlíonadh, an t-ábhar colaistéaról agus triacylglycerol saaeagus laghdaigh na duáin i gcomparáid leis an aiste bia rialaithe, agus tháinig méadú suntasach ar ghníomhaíocht glutathione reductase agus tiúchan malondialdehyde, neamhspleách ar an tiúchan de thuaslagán diatom, sa dáaeagus na duáin.
San ae, tháinig laghdú leanúnach ar ghníomhaíocht GPx le méadú ar ábhar Pinnularia Borealis (F (3, 36)=3.80, p=0.018) (Fíor 1A). Fuarthas an laghdú is mó (78.18 faoin gcéad) saaede lucha a chothaítear le réiteach 5 faoin gcéad (Fíor 1A, Tábla 1). Sa duáin, bhí an patrún beagnach os coinne (F (3, 36)=13.08, p=6.2 × 10 6 ) (Fíor 1A) agus an ghníomhaíocht is airde de GPx Taifeadadh in ainmhithe a fhaigheann réiteach 3 faoin gcéad de diatóim (Fíor 1A, Tábla 1). Níor léirigh athruithe i dtiúchan glutathione tar éis forlíonadh aiste bia patrún aonfhoirmeach, ach an oiread saae(F (3, 36)=5.44, p=0.003) (Fíor 1B) nó sna duáin (F (3, 36)=23.12, p {{ 11}}.6 × 10悆 8 ) (Fíor 1B). Tar éis 7 lá de fhorlíonadh bia leis an réiteach 5 faoin gcéad, an tiúchan GSH saaelaghdú go ~82 faoin gcéad de na luachanna rialaithe ach ní raibh an difríocht seo suntasach (Fíor 1B, Tábla 1). Níor taifeadadh difríocht shuntasach in ábhar GSH ach idir lucha a chothaítear leis an 3 faoin gcéad agus 5 faoin gcéad de réitigh diatom. Sna duáin, taifeadadh an t-ábhar is airde de GSH in ainmhithe a chothaítear leis an réiteach 3 faoin gcéad de diatóim (Fíor 1B, Tábla 1).
Tháinig méadú suntasach ar ghníomhaíocht glutathione reductase, neamhspleách ar an tiúchan de thuaslagán diatom, araon saae(F (3, 36)=29.34, p=8.9 × 10 10) (Fíor 1C) agus anduán(F (3, 36)=9.85, p=7.0 × 10 5 ) (Fíor 1C), agus go ginearálta, bhí sé i bhfad níos airde saaená saduán(p < 0.05).="" tháinig="" gníomhaíocht="" gr="" tar="" éis="" fhorlíonadh="" leis="" an="" réiteach="" 5="" faoin="" gcéad="" suas="" le="" 290="" faoin="" gcéad="" den="" luach="" rialaithe="">ae(Fíor 1C) agus suas le 180 faoin gcéad den luach rialaithe saduán(Fíor 2, Tábla 1).
Gníomhaíocht GST saduánméadaithe go leanúnach le méadú ar ábhar Pinnularia Borealis sa bhia (F (3, 36)=15.59, p=1.2 × 10 6 ) (Fíor 1D). Taifeadadh an ghníomhaíocht is airde tar éis forlíonta leis an réiteach 5 faoin gcéad nuair a shroich sé 158 faoin gcéad den luach rialaithe (Fíor 1D). Gníomhaíocht GST saaebhí sé suntasach níos airde ná saduán(p < 0.05).="" cé="" go="" bhfuil="" gníomhaíocht="" gst="">aeag brath ar an aiste bia (F (3, 36)=11.62, p=1.8 × 10 5) (Fíor 1D), níor léirigh sé patrún rialta den sórt sin mar atá i anduán(Fíor 1D). Mhéadaigh an tiúchan malondialdehyde go leanúnach freisin le méadú ar an ábhar Pinnularia Borealis sa bhia, sa bhia.ae(F (3, 36)=4.26, p=0.011) (Fíor 1E) agus saduán(F (3, 36)=6.74, p=0.001) (Fíor 1E). Sa dá chás, taifeadadh an tiúchan is airde de MDA tar éis beathú leis an réiteach 5 faoin gcéad de diatoms (Fíor 1E). B’ionann athróga suntasacha d’éagsúlacht an tacair sonraí le chéile agus 55.9 faoin gcéad den éagsúlacht iomlán saaeagus 53.9 faoin gcéad snaduán(Figiúirí 2 agus 3). Sa duán, fuarthas gaol suntasach go staitistiúil idir colaistéaról ard agus tríghlicrídí sna samplaí rialaithe. Bhí an méadú ar leibhéal GSH leis an bhforlíonadh 3 faoin gcéad de diatoms suntasach freisin. Ar an gcaoi chéanna, bhí baint shuntasach ag an méadú ar GR le diatoms 5 faoin gcéad a chur leis (Fíor 3). San ae, bhí an méadú ar thiúchan MDA comhghaolmhar leis an admixture 5 faoin gcéad de diatoms. Bhí an gaol suntasach go staitistiúil. Bhí an méadú ar leibhéil GSH agus GR ag tiúchan íseal diatóim sa bheatha suntasach freisin (Fíor 2).
Triacylglycerols agus ábhar colaistéaról saaeagusduánbhí cosúlachtaí (Fíor 1F,G). Forlíonta aiste bia le diatoms tionchar suntasach ar an tiúchan de triacylglycerols, araon saae(F (3, 36)=16.22, p=7.8 × 10 7 ) agus saduán(F (3, 36)=7.89, p=0.0004). I gcomparáid le grúpaí rialaithe, tar éis an réitigh diatom 3 faoin gcéad agus 5 faoin gcéad, anaelaghdaigh triacylglycerols go 75.25 faoin gcéad agus 65.84 faoin gcéad , faoi seach , agus saduángo 92 ( sn ) agus 73.16 faoin gcéad , faoi seach. Ar an gcaoi chéanna, laghdaigh saibhriú aiste bia le diatoms ábhar colaistéaróil, araon saae(F (3, 36)=2.57, p=0.07) agus saduán (F (3, 36)=14.90, p =1.8 × 106 ). Taifeadadh an laghdú is mó ar ábhar colaistéaróil in orgáin na lucha a chothaítear leis an réiteach 5 faoin gcéad de diatóim.
4. Plé
Sa staidéar seo, chuireamar an cheist an bhféadfadh forlíonadh aiste bia le Pinnularia Borealis cosaint frithocsaídeach a mhéadú agus fachtóirí riosca do ghalair cardashoithíoch a fheabhsú. Fuaireamar amach go bhfuil tiúchan colaistéaról agus triacylglycerol saaeagusduáinBa iad na lucha is ísle a chothaíodh leis an tiúchan is airde de P. Borealis, rud a thugann le tuiscint go bhfuil airíonna cosanta ag algaí. Ina theannta sin, bhí an tiúchan is ísle de P. Borealis leordhóthanach chun cumas frithocsaídeach na lucha a fheabhsú. Is foinse nádúrtha agus féideartha d’aigéid shailleacha il-neamhsháithithe slabhra fada (PUFAanna) iad algaí amhail aigéad eicosapentaenoic (EPA) agus aigéad docosahexaenoic (DHA). Go ginearálta, sa raon ábhar lipid in algaí fótatrófach ó 10 faoin gcéad go 60 faoin gcéad den mheáchan tirim, agus tá 10 faoin gcéad -20 faoin gcéad ω-3 PUFAs iontu [4]. Déantar próifílí aigéad sailleacha in algaí a chinneadh go géiniteach, ach braitheann ábhar aigéid shailleacha freisin ar dhéine an tsolais agus ar shalandacht an uisce [39]. Tá Ryckebosch et al. [40] tuairiscíodh go carnann méideanna móra EPA nó DHA sna algaí muirí: Bacillariophyceae, Chlorophyceae, Chrysophyceae, Cryptophyceae, agus Florideophyceae. Tá Peltomaa et al. [39] mhol sé go bhféadfadh algaí fionnuisce a bheith níos saibhre i ω-3 PUFAanna ná in algaí muirí agus goirt, agus dhírigh diatom fionnuisce Nitzschia sp. mar an brú diatom is bisiúla do tháirgeadh tráchtála an EPA. Tá 75.9 faoin gcéad den EPA san iomlán ag Nitzschia laevis, agus tá 37.4 faoin gcéad den EPA carntha i bhfoirm triacylglycerol, 22.6 faoin gcéad i bhfoirm monoacylglycerides, agus 15.9 faoin gcéad i bhfoirm phosphatidylcholine [41]. Sa P. Borealis a úsáideadh sa staidéar seo, b'ionann na ω-3 PUFAanna agus 28 faoin gcéad de na haigéid shailleacha iomlána agus b'ionann an EPA agus 32 faoin gcéad de na ω-3 PUFAanna ar fad. Faightear EPA daonna ón aiste bia, go príomha ó ola éisc. Is aigéad sailleach riachtanach é de luach cothaitheach tábhachtach agus tá an cumas aige an baol a bhaineann le go leor galair a mhaolú. Dá bhrí sin, tá gá le foinsí eile seachas ola éisc chun an gá atá le PUFA atá ag méadú i gcónaí a chlúdach. Bailíonn an diatom P. Borealis leibhéil arda (32 faoin gcéad) den EPA agus mar sin féadfar é a mheas mar fhorlíonadh chothaithe.
Fuaireamar amach gur spreag forlíonadh aiste bia le tuaslagáin diatom lyophilized P. Borealis de thiúchan éagsúla laghdú dáileog-spleách i dtiúchan colaistéaról agus triacylglycerol. Mar gheall ar an éagsúlacht mhór san ábhar colaistéaróil sa ghrúpa rialaithe, níor shroich an éifeacht seo an leibhéal suntasachta sabeor (p=0.07), ach ba léir treocht chomhsheasmhach. Saduán,tháinig laghdú ~30 faoin gcéad ar an tiúchan colaistéaróil i lucha arna bhforlíonadh leis an tuaslagán diatom 5 faoin gcéad ab airde . Go comhsheasmhach, laghdaíodh ábhar triacylglycerol go suntasach, araon saaeagusduán. Molaimid go raibh an laghdú ar ábhar colaistéaról agus triacylglycerol mar thoradh ar fhorlíonadh aiste bia le PUFAanna, a bhfuil aithne orthu as a n-éifeacht chosanta [1]. Is diatom xerophytic é P. Borealis, ina bhfuil ní hamháin tiúchan ard EPA, ach freisin roinnt comhdhúile bithghníomhacha, cosúil le líocha, snáithíní, agus fíteastaróil, atá tairbheach don tsláinte [5,8]. Fuarthas torthaí cosúla ag Sano et al. [42], a thug faoi deara éifeachtaí suntasacha antilipidemic agus antiatherosclerotic de fhorlíonadh aiste bia le algaí Chlorella Vulgaris i coiníní chothaithe aiste bia ard-cholesterol ar feadh 10 seachtaine. Fallah et al. [43] léirigh gur féidir le iontógáil Chlorella leibhéil colaistéaról a ísliú freisin in othair le hypercholesterolemia. Tá na tairbhí sláinte féideartha seo curtha i leith na gcomhpháirteanna sonracha de Chlorella, amhail mianraí, snáithín cothaithe, próitéiní, agus ω-3 PUFA. Cherng et al. Léirigh [44] freisin go bhfuil an cumas ag Chlorella pyrenoidosa cosc a chur ar dyslipidemia i múnlaí francach agus hamster a chothaítear ar aiste bia ard-saill ina bhfuil ola cnó cócó hidriginithe 20 faoin gcéad (saibhir i aigéid sailleacha sáithithe). Léirigh roinnt staidéir go bhfuil níos mó seans ann go bhforbróidh ainmhithe a chothaítear aistí bia ard-saill dyslipidemia agus hyperglycemia [45], friotaíocht inslin [46], steatosis hepatic [47], comhiomlánú pláitíní [48], agus strus ocsaídiúcháin [49]. Dá bhrí sin, d'fhéadfadh aiste bia ceart saibhir i PUFAnna fachtóirí riosca do na galair seo a fheabhsú.
Feabhsaíonn an CISTANCHE Ionfhabhtú Duán/Duánach
Lee et al. [50] léirigh go ndearna forlíonadh Chlorella Vulgaris, i gcaiteoirí fireann na Cóiré, stádas cothaitheach frithocsaídeach plasma a chaomhnú agus gníomhaíochtaí feabhsaithe einsímí frithocsaídeacha erythrocyte. D’fhéadfadh speicis ocsaigin imoibríocha agus fréamhacha saor in aisce a bheith díobhálach do lipidí, próitéiní, agus DNA agus d’fhéadfadh siad roinnt galair daonna a spreagadh, amhail galair néar-mheathlúcháin agus cardashoithíoch [51]. Sa staidéar seo, thuaramar go maolódh forlíonadh aiste bia le P. Borealis strus ocsaídiúcháin toisc gur féidir le PUFAanna damáiste ocsaídiúcháin in vivo a laghdú [1]. Mar sin féin, bhí an tiúchan malondialdehyde (MDA), marcóir ar strus ocsaídiúcháin, an ceann is airde, sa dáaeagusduán, i lucha arna fhorlíonadh leis an réiteach diatom 5 faoin gcéad (Figiúirí 2 agus 3). Tá malondialdehyde mar thoradh go príomha ar shárocsaídiú PUFAanna, agus cé go bhfuil sé níos lú contúirteacha ná mar a measadh roimhe seo, tá sé fós tocsaineach, imdhíon-ghineach agus só-ghineach [1]. Mar sin féin, féadfaidh MDA teacht ní hamháin ó shárocsaídiú lipid ach freisin ó bhia. Mar sin, tá sé sochreidte nach bhfuil baint ag ard-ábhar MDA le strus ocsaídiúcháin, ach leis an ard-ábhar EPA san fhorlíonadh chothaithe. Go deimhin, níor tháinig athrú nó fiú laghdú ar ghníomhaíocht glutathione peroxidase (GPx) tar éis fhorlíonadh aiste bia (Fíor 2). Déanann einsímí GPx catalú ar laghdú sárocsaíd hidrigine a chosnaíonn an t-orgánach ó dhamáiste ocsaídiúcháin. Dá bhrí sin, dá gcuirfí leis an strus ocsaídiúcháin, mhéadódh gníomhaíocht GPx. Dothuigthe, tháinig méadú ar ghníomhaíocht GPx saduánde lucha a chothaítear leis an réiteach diatom 3 faoin gcéad agus bhí sé comhthreomhar le méadú ar ábhar GSH (Fíor 3). Is dócha, is é seo an fáth a mhínigh an tiúchan GSH 23.7 faoin gcéad den athraitheas saduán(Fíor 3). D'fhéadfadh na torthaí seo méadú ar strus ocsaídiúcháin sa ghrúpa seo a mholadh. Mar sin féin, tá gníomhaíocht glutathione reductase (GR) saaeagusduáin méadaithetar éis forlíonadh aiste bia, neamhspleách ar an réiteach diatom (Fíor 2). San ae, mhínigh gníomhaíocht GR 39.7 faoin gcéad den éagsúlacht (Fíor 2). D'ath-thiontaigh an einsím seo glutathione ocsaídithe go dtí a fhoirm laghdaithe chun an cumas laghdaithe ocsaídiúcháin chuí a choinneáil, agus chosain sé na grúpaí próitéiní -SH i gcoinne ocsaídiúcháin [22]. Léiríonn an méadú faoi dhó ar ghníomhaíocht GR i ngach grúpa ~2–2.5-go bhfuil feabhas curtha ar mheicníochtaí frithocsaídeacha fiú leis an tuaslagán is ísle de Pinnularia Borealis. Laghdaíodh an tiúchan glutathione laghdaithe (GSH) ach amháin i lucha a forlíontar leis an réiteach diatom 5 faoin gcéad. D'fhéadfadh sé a mholadh go bhfuil tiúchan níos ísle níos tairbhí. Is frithocsaídeach potent é GSH, atá ina chomhfhachtóir freisin do glutathione peroxidases agus glutathione transferases [1]. Is grúpa einsímí iad Glutathione transferases a chuireann tús le díthocsainiú comhdhúile díobhálach cille ingenous agus exogenous lena n-áirítear speicis ocsaigin imoibríoch. Féadfaidh an ghníomhaíocht is airde de glutathione transferase (GST) i lucha arna fhorlíonadh leis an réiteach diatom 5 faoin gcéad an t-ábhar GSH is ísle sna hainmhithe seo a mhíniú freisin. Dá bhrí sin , tugaimid i gcrích go bhfuil forlíonadh aiste bia le P. Borealis tairbheach don chóras redox de GSH nuair a chuirtear i bhfeidhm é sa réiteach suas le 3 faoin gcéad . D’fhéadfadh éifeachtaí díobhálacha a bheith ag na tiúchain níos airde nach féidir a chúiteamh trí laghdú ar an ábhar colaistéaról nó triacylglycerol. Mar sin féin, is féidir PUFAanna aiste bia a ionchorprú i lipidí cille go méideanna éagsúla, agus mar sin féadfaidh siad éifeachtaí éagsúla a bheith acu ag brath ar na struchtúir cille nó fíocháin [52]. D'fhéadfadh sé seo a mhíniú go páirteach na difríochtaí i paraiméadair an chórais frithocsaídeach idir anduánagus ae. Ina theannta sin, féadfaidh aigéid sailleacha a fhaightear ón aiste bia a bheith dísháithithe nó fadaithe, go príomha sa reticulum endoplasmic [53]. Ní dhearnamar ábhar an EPA a thomhas saaeagusduán,mar sin ní féidir linn a rá go beacht cad é an t-ábhar EPA fíocháin, ach táimid cinnte nach raibh na torthaí de thaisme toisc go raibh an tiúchan is ísle de P. Borealis leordhóthanach chun cumas frithocsaídeach a fheabhsú
Ina theannta sin, tá fianaise ag méadú nach bhfuil PUFAanna éagsúla a úsáidtear mar fhorlíonta aiste bia comhionann, toisc go bhfuil ní hamháin airíonna pro-, ach freisin frithocsaídeacha ag PUFAanna agus, dá bhrí sin, féadfaidh siad cosaint frithocsaídeach ingenous a mhodhnú [52]. Ní bhaineann éifeachtaí PUFAanna go simplí le fad an tslabhra carbóin, ná le líon agus suíomh na mbannaí dúbailte. I measc na gcúig PUFA éagsúla a ndearnadh staidéar orthu (arachidonic (20:4 ω-6), linóleic (18:2 ω-6), -linolenic (18:3 ω52), eicosapentaenoic (20: 5 ω-3), agus docosahexaenoic (22:6 ω-3)) ach mhéadaigh DHA cosaint frithocsaídeach i gcultúr líne cille hepatoma daonna, agus damáiste ocsaídiúcháin de bharr aigéad arachidónach [51,54]. I staidéir in vitro eile, léirigh údair [55] go bhfuil na hairíonna frithocsaídeacha is cumhachtaí ag EPA agus DHA exogenous agus go bhfuil siad i bhfad níos éifeachtaí i scavenging ROS ná ω-6 PUFAs.
Chomh fada agus is eol dúinn, is é seo an chéad staidéar ar P. Borealis mar fhorlíonadh bia. Is féidir le algaí go leor comhdhúile a shintéisiú le sochair sláinte potent [56]. Tá Koyande et al. [45] léirigh go bhfuil airíonna anticarcinogenic, antioxidative, agus antihypertensive ag comhdhúile gníomhacha in algaí. D’fhéadfadh go mbeadh aiste bia saibhir i ω-3 PUFAanna ar cheann de na bealaí nádúrtha chun na rioscaí do ghalair néar-mheathlúcháin agus cardashoithíoch a dhíchur [38]. Aicmítear roinnt algaí mar fhoinse bia sa chatagóir GRAS [57], agus tá an diatom P. Borealis aitheanta mar fhoinse saibhir aigéid sailleacha il-neamhsháithithe, mar shampla EPA [58]. Sa lá atá inniu ann, faightear EPA daonna ón aiste bia, go príomha ó ola éisc. Is aigéad sailleach riachtanach é de luach cothaitheach tábhachtach agus an cumas chun an baol a bhaineann le go leor galair a mhaolú. Dá bhrí sin, tá gá le foinsí eile seachas ola éisc chun an gá atá le PUFAanna, atá ag dul i méid, a chlúdach. Bailíonn an diatom P. Borealis leibhéil arda (32 faoin gcéad) den EPA agus mar sin féadfar é a mheas mar fhorlíonadh chothaithe.
5. Conclúidí
Léiríonn torthaí ár staidéir gur féidir Pinnularia Borealis a úsáid mar fhorlíonadh bia a sholáthraíonn sochair sláinte. Nuair a chuirtear ar fáil an méid cuí é is féidir leis an gcosaint frithocsaídeach a mhéadú agus fachtóirí riosca do ghalair cardashoithíoch a fheabhsú. Is rogha maith eile iad algaí d'ola éisc, rud a chuireann deireadh le fadhbanna boladh agus éagobhsaíocht táirgí eastósctha.
