Ionduchtú Díolúine Mucosal Trí Riar Scamhógach ar Nanacháithníní a dhíríonn ar chealla

Teibí

Fuaireamar amach roimhe seo gur léirigh nanacháithnín a tógadh le hantaigin, clóiríd benzalkonium (BK) agus aigéad c-polaglutamach (c-PGA) ionduchtú imdhíonachta de chineál ard Th1 agus Th2- tar éis riarachán subcutaneous. I gcás próifiolacsas ionfhabhtuithe riospráide, áfach, ba cheart imdhíonacht mhúcóis a tharlú. Sa staidéar seo, rinneamar imscrúdú ar éifeacht riarachán scamhógach ar nanacháithnín a chuimsíonn ubhchruthach (OVA) mar antigen múnla, BK, agus c-PGA ar ionduchtú díolúine mucosal sna scamhóga agus sa serum.

Ghlac cealla RAW264.7 agus DC2.4 go láidir leis an gcoimpléasc. Tar éis riarachán scamhógach, bhí coinneáil na scamhóg níos faide don choimpléasc OVA/BK/c-PGA ná mar a bhí i gcás OVA amháin. Bhí glóbailin imdhíonta serum OVA-shonrach (Ig)G ionduchtaithe go mór ag an gcoimpléasc. Cothaíodh leibhéil arda IgG agus IgA freisin sa leacht níocháin bronchoalveolar, agus in vivo, níor tugadh faoi deara tocsaineachtaí. Mar fhocal scoir, rinneamar imdhíonacht mhúcóis a tharlú go héifeachtach agus go sábháilte trí choimpléasc OVA/BK/c-PGA a thabhairt don scamhóg.

Le blianta beaga anuas, léirigh staidéir níos mó agus níos mó go bhfuil ról tábhachtach ag díolúine mucosal i gcóras imdhíonachta an chomhlachta. Tagraíonn díolúine mucosal don chóras imdhíonachta membrane múcasach sa chorp daonna, agus tá a chumais chosanta dírithe go príomha ar ionradh pataiginí i seicní múcasacha daonna mar an chonair riospráide, an chonair díleá, agus an chonair atáirgthe.

Ní dhéanann díolúine mucosal féin an comhlacht níos imdhíonachta, ach is féidir leis cabhrú lenár gcomhlacht déileáil níos éifeachtaí le hionradh pataiginí eachtracha. Trí dhíolúine mucosal a spreagadh go leanúnach, táirgeann ár gcorp níos mó antasubstaintí, rud a chothaíonn ár n-imdhíonacht.

Mar sin, conas is féidir díolúine mucosal a spreagadh? Seo cúpla moladh:

1. Faigh go leor vitimín C. Is frithocsaídeoir nádúrtha é Vitimín C a chothaíonn feidhm chealla imdhíonachta, rud a chabhraíonn le hionfhabhtuithe a chomhrac. Tá torthaí agus glasraí glasa duilleacha cosúil le liomóidí, oráistí agus sútha talún saibhir i vitimín C.

2. Méadú ar iontógáil na baictéir aigéid lachtaigh. Is féidir le baictéir aigéid lachtaigh cothromaíocht an fhlóra intestinal a chur chun cinn agus bac a chur ar fhás baictéir dhochracha. I measc na mbianna coitianta baictéir aigéid lachtaigh tá iógart, sauerkraut, kimchi, etc.

3. Cleachtaigh análaithe Anáil dhomhain. Méadaíonn análaithe domhain soláthar ocsaigine agus aeráil do na scamhóga, rud a d'fhéadfadh cabhrú le pataiginí carntha a bhaint as na scamhóga.

I mbeagán focal, is bealach tábhachtach é díolúine mucosal a spreagadh chun díolúine a fheabhsú. Ba cheart dúinn ár ndícheall a dhéanamh ár n-imdhíonacht mucosal a fheabhsú trí aiste bia agus nósanna maireachtála, chun ár sláinte a chosaint. Ón taobh sin de, ní mór dúinn díolúine a fheabhsú. Is féidir le Cistanche díolúine a fheabhsú go suntasach toisc go bhfuil éagsúlacht de chomhpháirteanna bitheolaíocha gníomhacha ag fuinseog feola, mar shampla polaisiúicrídí, dhá bheacán, agus Huang Li, ar féidir leo an córas imdhíonachta a spreagadh. Cineálacha éagsúla cealla, méadú ar a ngníomhaíocht imdhíonachta.

Cliceáil forlíonadh cistanche deserticola

1. Réamhrá

Is cinnte gurb iad ionfhabhtuithe géara riospráide an phríomhchúis le bás i measc leanaí < 5 bliana d'aois i dtíortha i mbéal forbartha (Williams et al., 2002). Forbraíodh roinnt vacsaíní, mar iad siúd don fhliú, pertussis, agus niúmacocas, le haghaidh ionfhabhtuithe riospráide (White, 1988; Pittman, 1991; Chen et al., 2020). Is trí na bealaí ionmhatánach agus fochraicneach a riartar an chuid is mó de na vacsaíní sin, rud a d’fhéadfadh glóbailin imdhíon serum (Ig)G a chothú go héifeachtach. Mar sin féin, tá bealaí eile níos úsáidí chun díolúine mucosal a spreagadh chun ionfhabhtuithe géara riospráide a chosc. Tuairiscíodh go gcothaíonn riaracháin mhúcóis, ar nós intranasal agus scamhógach, IgA mucosal go héifeachtach agus go gcuireann siad cosc ​​​​ar ionfhabhtuithe riospráide (Giri et al., 2005; Ainai et al., 2017).

Ar an láimh eile, níor cheart go mbeadh aidiúvaigh i vacsaíní le haghaidh riarachán infhéitheach agus scamhógach a tuairiscíodh a bheith ina gcúis le frithghníomhartha athlastacha agus ulceration ag an láithreán riaracháin (Tamura et al., 1988; McKee et al., 2007). Cur chuige eile chun éifeachtúlacht vacsaíní gan aidiúvach a fheabhsú is ea córas a fhorbairt a fhéadfaidh vacsaíní a sheachadadh go héifeachtach i gcealla mucosal-láithreoireachta antaiginí (APCanna).

I staidéar a rinneadh roimhe seo, d’fhorbraíomar veicteoir nua seachadta vacsaíne a tógadh le hantaigin, clóiríd benzalkonium (BK), agus aigéad c-polaglutamach (c-PGA). Rinne coimpléasc comhdhéanta ubhchruthach (OVA) mar mhúnla antaigin, BK agus c-PGA (coimpléasc OVA/BK/c-PGA) OVA a sheachadadh go héifeachtach isteach i gcealla dendritic agus ionduchtú serum IgG serum OVA-shonrach feabhsaithe tar éis riarachán subcutaneous i lucha (Kurosaki et al ., 2012). Bhí sé mar aidhm ag an staidéar seo imscrúdú a dhéanamh ar an éifeacht a bhíonn ag riarachán scamhógach ar choimpléasc OVA/BK/c-PGA ar ionduchtú díolúine mucosal sna scamhóga agus sa serum.

2. Ábhair agus modhanna

2.1. Ceimiceáin

Ceannaíodh OVA ó Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, SAM). Fuarthas BK ó Nacalai Tesque, Inc. (Kyoto, an tSeapáin). Chuir Yakult Pharmaceutical Industry Co., Ltd (Tóiceo, an tSeapáin) an c-PGA ar fáil. Fuarthas OVA (FITC-OVA) lipéadaithe isothiocyanate-lipéadaithe fluorescein agus Alexa Fluor 647-lipéadaithe OVA (Alexa647- OVA) ó Invitrogen (Carls, CA, USA). Ceannaíodh séiream bó féatais (FBS) ó Biological Industries Ltd. (Kibbutz Beit Haemek, Iosrael). Fuarthas OPTI-MEM I ó GIBCO BRL (Grand Island, NY, SAM), agus fuarthas tuaslagán antaibheathaigh premix ina raibh peinicillin, streptomycin, agus L-glutamine ó Wako Pure Chemical Industries, Ltd (Osaka, an tSeapáin). Fuarthas Meán Iolair Athraithe Dulbecco (DMEM) agus meán RPMI1640 ó Nissui Pharmaceutical Co., Ltd. (Tóiceo, an tSeapáin).

2.2. Ullmhú casta

Roimhe seo, rinneamar coimpléasc OVA/BK/c-PGA ag cóimheas meáchain 1:0.2:0.2 (Kurosaki et al., 2012). Chun an coimpléasc OVA/BK a ullmhú, rinneadh méid iomchuí de thuaslagán BK (pH 5.0) tuaslagtha i 5 faoin gcéad glúcóis a mheascadh le tuaslagán OVA (pH 7.0) tuaslagtha i glúcóis 5 faoin gcéad agus fágtha ar feadh 15 nóiméad ag 4 C. Chun an coimpléasc OVA/BK a chóta le c-PGA, cuireadh tuaslagán c-PGA (pH 7.0) tuaslagtha i glúcóis 5 faoin gcéad leis an gcoimpléasc OVA/BK agus fágadh é ar feadh 15 nóiméad eile ag 4 C. Rinneadh méid na gcáithníní agus f-acmhainneacht gach coimpléasc a thomhas trí úsáid a bhaint as Zetasiser Nano ZS (Malvern Instruments, Ltd., Malvern, RA).

2.3. Cealla

Baineadh úsáid as líne chill macrophage luch RAW264.7 agus líne cille dendritic DC2.4. Fásadh cealla RAW264.7 i DMEM arna fhorlíonadh le 10 faoin gcéad FBS agus antaibheathaigh. Fásadh cealla DC2.4 i meán RPMI1640 arna fhorlíonadh le 10 faoin gcéad FBS, antaibheathaigh, 1 mM aimínaigéid neamhriachtanacha, agus 1 nM 2-mercaptoethanol. Rinneadh measúnú ar na cealla seo faoi atmaisféar tais de 5 faoin gcéad CO2 san aer ag 37C.

2.4. Turgnamh ar ghlacadh ceallach in vitro

Plátáladh cealla RAW264.7 agus cealla DC2.4 ar 24-phlátaí tobair (Corning, NY, USA) ag dlús 2.0 104 cill/tobar agus saothraíodh iad i 50{ {21}} ml de mheán cultúir. Tar éis 24-h réamhghortaithe, cuireadh meán OPTI-MEM I in ionad an mheán, agus goradh na cealla le 5 mg FITC-OVA agus an coimpléasc ina bhfuil 5 mg FITC-OVA ar feadh 2 h. Tar éis goir, nitear na cealla sin le PBS agus breathnaíodh iad faoi mhicreascóp fluaraiseachta (BIOREVO BZ-9000; Keyence Co., Osaka, an tSeapáin). Tar éis breathnóireachta, cuireadh na cealla sin i 300 lL de mhaolán lysis (pH 7.8 agus maolán 0.1 M Tris/HCl ina raibh 0.05 faoin gcéad Triton X-100 agus 2 mM EDTA). Cuireadh na lysates i 96-plátaí toibreacha, agus tomhaiseadh fluaraiseacht FITC-OVA ag tonnfhad astaithe 530 nm le tonnfhad excitation de 480 nm, ag baint úsáide as léitheoir micreaphláta fluairiméadrach (Infinite{{29}Pro) M-Plex, Tecan Japan Co., Ltd., Kanagawa, an tSeapáin). Cinneadh cion próitéine an lysate le measúnacht Bradford ag baint úsáide as BSA mar chaighdeán. Tomhaiseadh ionsú ag baint úsáide as an léitheoir microplate ag 570 nm. Léiríodh glacadh FITC-OVA mar mg in aghaidh an mg de phróitéin.

2.5. Ainmhithe

Rinne na Treoirlínte um Turgnamh Ainmhithe de chuid Ollscoil Nagasaki le faomhadh ón gCoiste Institiúideach um Chúram agus Úsáid Ainmhithe. Ceannaíodh lucha fireann C57BL/6N (5 seachtaine d’aois) ón tSeapáin SLC (Shizuoka, an tSeapáin). Tar éis iad a iompar, bhí cead ag na lucha dul i dtaithí ar a dtimpeallacht nua ar feadh 1 lá roimh na turgnaimh. Rinneadh riarachán scamhógach (40 mL) trí úsáid a bhaint as depressor teanga le solas trí riospráid spontáineach i lucha ainéistéiseach trí ionanálú isoflurane (Horiguchi et al., 2015).

2.6. Coimpléasc carnadh na scamhóg

Chun carnadh OVA a scrúdú, rinneadh an 40 mg Alexa647-OVA agus an coimpléasc ina bhfuil 40 mg Alexa647- OVA ag toirt 40 ml in aghaidh na lucha a riaradh i lucha trí bhealach scamhógach. Sé lá tar éis an riaracháin, íobairt lucha agus díroinneadh na scamhóga. Breathnaíodh déine fluaraiseacha Alexa647-OVA i scamhóg na luiche le Córas Lumina Xenogen IVIS in éineacht le bogearraí Íomhá Beo chun sonraí a fháil (Xenogen, Co, Almeda, CA, USA). Tar éis an bhreathnaithe, rinneadh na scamhóga sin a aonchineálú le maolán lysis agus lártheifníodh aonchineálacha ag 15,000 rpm (Kubota-3500, Kubota Corporation, Tóiceo, an tSeapáin) ar feadh 5 nóiméad agus fluaraiseacht Alexa647 sna fornádaithe sin. a chinneadh le ceannaire microplate ag excitation agus tonnfhad astaithe de 640 agus 670 nm, faoi seach.

2.7. Imdhíonadh

Rinneadh imdhíonadh ar lucha le tuaslagán glúcóis 5 faoin gcéad, 40 mg OVA, coimpléasc folamh de 8 mg BK agus 8 mg c-PGA (feithicil), agus coimpléasc OVA / BK / c-PGA ina raibh 40 mg OVA ag riarachán scamhógach, 4 huaire seachtainiúil. Dhá sheachtain tar éis an imdhíonta deiridh, fuarthas sreabhach lavage bronchoalveolar (BALF) agus serum. Baineadh úsáid as an BALF agus an séiream le haghaidh measúnachtaí imdhíon-ionsorbent einsím-nasctha (ELISA).

2.8. Ionduchtú antasubstaintí a bhaineann go sonrach le OVA a chinneadh

Le haghaidh sciath OVA, cuireadh 100 ml de thuaslagán OVA (10 mg/mL, i gcarbónáit hidrigine sóidiam 1 M) le gach tobar de na plátaí ELISA (Thermo Fisher Scientific Inc., Waltham, MA, SAM) agus gortha thar oíche ag 4 C. Níodh na plátaí trí huaire le saline maolánach fosfáit ina raibh 0.05 faoin gcéad Tween-20 (PBST), 200 ml d'imoibrí blocála N 102 (Nichiyu, Co., Ltd., Tóiceo, an tSeapáin ) a chuirtear leis an gceangal nonspecific bloc agus ansin gor ar feadh 6 h ag 4 C. Nite na plátaí dhá uair le PBST. Ansin, cuireadh slánchodanna 100 ml de 1000-shéiream caolaithe huaire agus samplaí BALF neamhchaolaithe le gach tobar agus goraíodh iad thar oíche ag 4 C. Tar éis níocháin le PBST cúig huaire, 100 ml an ceann de horseradish peroxidase (HRP) - frith-gabhar comhchuingeach. -luch IgG, IgA, IgM, IgE, IgG1, IgG2a, IgG2b agus IgG3 (1:10,000) (Abcam, Cambridge, RA) – curtha le gach tobar agus gor ag teocht an tseomra ar feadh 1 h agus ansin nite cúig huaire le PBST. TMB Baineadh úsáid as réiteach amháin (Promega, WI, USA) agus ullmhaíodh é de réir threoracha an mhonaróra. Stopadh an t-imoibriú ansin ag 15 nóiméad trí aigéad hidreaclórach 1 N a chur leis. Léadh ionsú ag 450 nm trí úsáid a bhaint as léitheoir microplate.

2.9. Tocsaineacht in vivo coimpléasc OVA/BK/c-PGA

Tugadh coimpléasc OVA agus OVA/BK/c-PGA do lucha tríd an mbealach scamhógach. Fuarthas BALF 3 agus 24 h tar éis riarachán ó lucha. Fiche ceithre huaire an chloig tar éis an riaracháin, rinneadh an scamhóg a scaradh freisin. Rinneadh gníomhaíocht Lactate dehydrogenase (LDH) sa BALF a thomhas ag baint úsáide as QuantiChromTM Lactate Dehydrogenase Kit (BioAssay Systems, CA, USA) de réir threoir an mhonarcha. Socraíodh na samplaí scamhóg i dtuaslagán maolánach fosfáite paraformaildéad 4 faoin gcéad. Cuireadh an t-alting agus an staining hematoxylin-eosin (HE) ar iontaoibh GenoStaff (Tóiceo, an tSeapáin). Breathnaíodh ranna HE-dhaite den scamhóg trí mhicreascópacht ag 20 formhéadú.

2. 10. Anailís staitistiúil

Rinneadh measúnú ar thábhacht staitistiúil na ndifríochtaí idir an dá ghrúpa trí thástáil t an Mhic Léinn a dhéanamh. Rinneadh comparáidí iolracha i measc na ngrúpaí trí thástáil Tukey a dhéanamh. Measadh go raibh tábhacht staitistiúil ag baint le p-Luachanna < .05.

3. Torthaí

3.1. Airíonna fisiciceimiceacha an choimpléasc

Thógamar coimpléasc anionic OVA/BK/c-PGA ag cóimheas meáchain 1:0.2:0.2. Bhí méid na gcáithníní thart ar 105.4 nm ag an gcoimpléasc c-PGA-brataithe agus poitéinseal f de thart ar 35.5 mV.

3.2. Glacadh ceallach an choimpléasc

Cóireáladh cealla RAW264.7 agus cealla DC2.4 le coimpléasc FITC-OVA agus FITC-OVA/BK/c-PGA, agus rinneadh amharc ar iontógáil cheallacha FITC-OVA, mar a léirítear i bhFíor 1. FITC-OVA/BK/ Ghlac na cealla RAW264.7 agus cealla DC2.4 go mór le coimpléasc c-PGA, agus breathnaíodh fluaraiseacht láidir glas FITC-OVA (Fíor 1(A, B), faoi seach). Ag an am céanna, breathnaíodh méideanna beaga FITC-OVA sa dá chealla a ndearnadh cóireáil orthu le FITC-OVA.

Rinneadh iontógálacha ceallacha FITC-OVA a chainníochtú i gcealla RAW264.7 agus i gcealla DC2.4 (Fíor 1(C)). Léirigh coimpléasc FITC-OVA/BK/ c-PGA iontógáil i bhfad níos airde ná an FITC-OVA sa dá chill (p < .01).

3.3. Carnadh scamhóg ar Alexa647-OVA tar éis riarachán scamhógach

Tugadh Alexa647-OVA agus Alexa647-OVA/BK/c-PGA complex do lucha tríd an mbealach scamhógach chun carnadh scamhóg Alexa647-OVA mar antaigin a aimsiú. Ag 6 lá tar éis an riaracháin, rinneadh na scamhóga a scaradh, agus léiríodh a ndéine fluaraiseachta trí úsáid a bhaint as Córas Lumina Xenogen IVIS. Taispeántar íomhá fluaraiseacha ex-vivo i bhFíor 2(A). Breathnaíodh déine fluaraiseachta ard ar fud na scamhóg ar fad 6 lá tar éis riarachán scamhógach, cé nach raibh aon déine fluaraiseachta sa spleen, croí, duáin agus ae (sonraí nach bhfuil léirithe). Bhí carnadh scamhóg níos airde do choimpléasc Alexa647-OVA/BK/c-PGA ná do Alexa647-OVA ar lá 6. Mar a léirítear i bhFíor 2(B), bhí carnadh scamhóg i bhfad níos airde don Alexa 647-Coimpléasc OVA/BK/c-PGA ná do Alexa647- OVA (p < .05).

3.4. Antashubstaint OVA-shonrach i serum tar éis riarachán scamhógach den choimpléasc

Rinneadh réiteach glúcóis 5 faoin gcéad, coimpléasc BK/c-PGA (feithicil), OVA, agus coimpléasc OVA/BK/c-PGA a riaradh tríd an mbealach scamhógach i lucha ceithre huaire, agus ansin serum OVA-shonrach IgG, IgA, IgM, agus chinn ELISA IgE mar a léirítear i bhFíor 3. Mhéadaigh riarachán scamhógach OVA agus an coimpléasc OVA/BK/c-PGA na leibhéil IgG i lucha, cé nár braitheadh ​​IgG OVA-shonrach i lucha a riaradh 5 faoin gcéad glúcóis agus feithicle. Ina theannta sin, bhí táirgeadh IgG agus IgA i bhfad níos airde tar éis an choimpléasc OVA/BK/c-PGA a riaradh ná tar éis riaradh OVA (p < .05 nó .01). Ar an taobh eile de, níor spreag OVA nó an coimpléasc OVA/BK/c-PGA IgM agus IgE a bhaineann go sonrach le OVA.

3.5. Antashubstaint OVA-shonrach i BALF tar éis riarachán scamhógach den choimpléasc

Socraíodh freisin IgG, IgA, IgM, agus IgE a bhaineann go sonrach le OVA sa BALF, mar a thaispeántar i bhFíor 4. Tháinig méadú suntasach ar leibhéal IgG OVA i gcoibhneas leis na leibhéil tar éis an rialaithe agus an fheithicil a riaradh (p < .05 nó .01). Mar sin féin, mhéadaigh an coimpléasc OVA/BK/c-PGA go suntasach ní hamháin IgG ach freisin IgA sa BALF (p < .01). Mar sin féin, níor spreag OVA nó an coimpléasc OVA/BK/c-PGA IgM agus IgE a bhaineann go sonrach le OVA.

3.6. Fochineálacha IgG i serum tar éis riarachán scamhógach an choimpléasc

Socraíodh éifeachtaí ionduchtaithe na bhfochineálacha IgG OVA-shonracha, mar shampla IgG1, IgG2a, IgG2b, agus IgG3 sa serum mar a thaispeántar i bhFíor 5. I gcomparáid leis an rialú agus an fheithicil, tháinig méadú suntasach ar OVA ach IgG1 (p <.01). Bhí leibhéil antashubstainte na bhfochineálacha go léir a tharlódh ón gcoimpléasc OVA/BK/c-PGA i bhfad níos airde ná na leibhéil a tharlódh ón rialú agus ón bhfeithicil (p < .05 nó .01).

3.7. Fochineálacha IgG i BALF tar éis riarachán scamhógach an choimpléasc

Cinneadh freisin ar fhochineálacha IgG OVA-shonracha, mar shampla IgG1, IgG2a, IgG2b, agus IgG3 sa BALF, mar a thaispeántar i bhFíor 6. Níor tháinig méadú suntasach ar OVA ach leibhéil IgG1 i gcomparáid leo siúd a tharlódh ag an rialú agus an fheithicil (p < .01). . I gcomparáid leis an rialú, an fheithicil, agus OVA, chothaigh an coimpléasc OVA/BK/ c-PGA leibhéil antashubstainte i bhfad níos airde de gach fochineál (p < .05 nó .01).

3.8. Tocsaineacht in vivo coimpléasc OVA/BK/c-PGA

Tugadh tuaslagán glúcóis 5 faoin gcéad, OVA, agus an coimpléasc OVA/BK/c-PGA do lucha. Socraíodh gníomhaíocht LDH sa BALF 3 nó 24 h tar éis riarachán (Fíor 7). Is beag tionchar a bhí ag riarachán coimpléasc OVA agus OVA/BK/c-PGA ar na leibhéil LDH sa BALF.

Fiche ceithre huaire an chloig tar éis an riaracháin, rinneadh na scamhóga a scaradh ó na lucha sin le haghaidh anailíse histeolaíochta. Taispeántar rannóga scamhóg daite HE i bhFíor 8. Níor tugadh faoi deara aon neamhghnáchaíochtaí histeolaíocha sna lucha a ndearnadh cóireáil orthu le OVA agus sa choimpléasc OVA/BK/c-PGA.

4. Plé

Rialaíonn an scamhóg análaithe agus tá sé nochta do go leor pataiginí, mar víris agus baictéir is cúis le hionfhabhtuithe riospráide. Ionfhabhtaíonn na pataiginí sin tríd an membrane múcasach scamhógach, agus mar sin ní mór imdhíonacht mhúcóis a spreagadh chun cosaint a dhéanamh ar ionfhabhtuithe riospráide. Cosc a chur ar ionfhabhtuithe riospráide, tá ról tábhachtach ag díolúine mucosal; áfach, ní féidir le riaradh intradeirmeach agus ionmhatánach na vacsaíne díolúine mucosal a spreagadh go láidir (Ito et al., 2003; Amorij et al., 2007). Forbraítear an córas imdhíonachta mucosal a chothaíonn IgA secretory ar an dromchla mucosal. Tuairiscíodh go bhfuil roinnt APCanna, mar chealla dendritic agus macrophages, suite sa dromchla mucosal (Kopf et al., 2015). Ina theannta sin, tá fíochán lymphoid a bhaineann le bronchus (BALT) le fáil sa mhúcóis bronchiolar agus is follicle lymphoid é a bhfuil ról lárnach aige i díolúine mucosal na conaire riospráide (Bienenstock, 1980). Táthar ag súil go spreagfaidh riarachán scamhógach na vacsaíne an córas imdhíonachta mucosal go héifeachtach. Mar sin, rinneamar an coimpléasc OVA/BK/c-PGA chun a úsáidí a mheas mar vacsaín a riartar tríd an mbealach scamhógach.

Léiríonn Fíor 4 an tiúchan BALF d’antasubstaintí OVA-shonracha tar éis riarachán scamhógach OVA agus an choimpléasc OVA/BK/c-PGA. Mhéadaigh riarachán scamhógach OVA IgG ach ní raibh mórán éifeacht aige ar IgA i BALF. Ar an láimh eile, chothaigh an coimpléasc OVA/BK/c-PGA go mór an rún IgA sa BALF. Ina theannta sin, bhí ionduchtú serum IgG i bhfad níos airde tar éis an choimpléasc OVA/BK/ c-PGA a riar ná tar éis OVA a thabhairt (Fíor 3). Tá Serum IgG tábhachtach chun géarú aon ionfhabhtuithe a tharlaíonn a chosc (Huber et al., 2006; Schroeder & Cavacini, 2010). Léiríonn na torthaí go bhféadfadh an coimpléasc OVA/BK/c-PGA cosc ​​a chur ar ionfhabhtuithe riospráide trí ionduchtúchán ard-mhúcóis IgA agus géarú ar ionfhabhtú riospráide trí ionduchtú ard-séiream IgG. Ina theannta sin, níor breathnaíodh ionduchtú IgE ag an gcoimpléasc OVA/BK/c-PGA, agus léirigh an toradh seo gur beag an baol go mbeadh frithghníomhú ailléirgeach ag an gcoimpléasc OVA/BK/c-PGA.

D’fhéadfadh an coimpléasc OVA/BK/c-PGA ní hamháin IgG1 agus IgG2b a aslú ach freisin IgG2a agus IgG3 (Fíor 5). Tugtar glóbailin imdhíon-chineáil Th{2-ar IgG1 agus IgG2b a dhéanann idirghabháil ar an bhfreagairt imdhíonachta humoral, agus tugtar Glóbailiní Glóbailin Chineáil Th1-déanta ar IgG2a agus IgG3 a dhéanann idirghabháil ar an bhfreagra imdhíonachta ceallacha (Firacative et al., 2018). . Mar sin, d'fhéadfadh an coimpléasc OVA/BK/c-PGA freagairtí imdhíonachta greannacha agus ceallacha araon a chothú. Tugann na torthaí seo le tuiscint go bhféadfadh an córas seo a bheith úsáideach le haghaidh vacsaíní in aghaidh ionfhabhtuithe chomh maith le hailse. Ba cheart an éifeacht choisctheach, freagairtí cineáil Th1- agus Th{2-chineál-spreagtha antaigineach in ionduchtú ionduchtaithe BALT, Treg, agus IL-10 ag baint úsáide as fíor-antaiginí ó ionfhabhtuithe nó ó ailsí sa todhchaí. staidéir.

Caithfidh an ionduchtú láidir ó choimpléasc OVA/BK/c-PGA an fhreagairt imdhíonachta a bheith mar gheall ar choinneáil ard an choimpléasc sa scamhóg agus seachadadh éifeachtach OVA isteach sna APCanna sa mhúcóis scamhógach. Dhearbhaigh ár dtorthaí é seo trí léiriú gur fhan an coimpléasc Alexa{{2}OVA/BK/c-PGA sa scamhóg 6 lá tar éis an riaracháin agus gur léirigh sé fluaraiseacht i bhfad níos airde ná Alexa647- OVA (Fíor 2). D'fhéadfadh an foirmiú casta idirleathadh OVA a chosc agus OVA a chosaint ó dhíghrádú ag próitéasanna sa mhúcóis scamhógach. Ina theannta sin, bhí an coimpléasc OVA/BK/c-PGA in ann OVA a sheachadadh go héifeachtach i gcealla macrophage RAW264.7 agus i gcealla dendritic DC2.4 (Fíor 1). Thug na torthaí sin le fios go nglacfadh APCanna alveolacha an coimpléasc OVA/BK/c-PGA agus go n-eascródh sé freagairt imdhíonachta ard tar éis riarachán scamhógach. Tuairiscíodh gur tógadh nanacháithníní c-PGA-brataithe ag an gcosán endocytotic trí mheán gáma-glutamyl traspeptidase (Du et al., 2015). Dhearbhaíomar freisin gur ghlac an chonair endocytotic a bhaineann go sonrach le c-PGA leis na nanacháithníní atá brataithe le c-PGA (Kurosaki et al., 2009). D'fhéadfadh APCanna sa scamhóg an coimpléasc OVA/BK/c-PGA a thógáil trí na meicníochtaí céanna. Mar sin féin, níl sé soiléir fós cé na cealla atá freagrach as glacadh OVA agus cur i láthair antaiginí ina dhiaidh sin in ionduchtú díolúine sonrach. Ba cheart tuilleadh staidéir ar mheicníochtaí ionduchtaithe imdhíonachta mionsonraithe a dhéanamh sa todhchaí.

Forbraíodh go leor aidiúvach chun éifeachtacht na vacsaíní a fheabhsú; áfach, tuairiscíodh go n-eascraíonn aidiúvaigh imoibrithe athlastacha ag láthair an insteallta (Tamura et al., 1988; McKee et al., 2007). Mar sin, d’fhéadfadh fo-iarmhairtí tromchúiseacha a bheith mar thoradh ar riaradh aidiúvach ar an scamhóg, amhail niúmóine. Tar éis riarachán scamhógach den choimpléasc OVA/BK/c-PGA, níor mhéadaíodh leibhéil LDH sa BALF (Fíor 7) agus níor breathnaíodh neamhghnáchaíochtaí histeolaíocha sa chuid daite HE (Fíor 8). Tuairiscíodh, is polaiméir bith-chomhoiriúnach agus in-bhithmhillte é c-PGA nach léiríonn imoibrithe imdhíon-athlastacha (Prodhomme et al., 2003; Ye et al., 2006). Is cumaisc amóiniam ceathartha sábháilte é BK a úsáideadh go forleathan go cliniciúil mar bhreiseán frithmhiocróbach (Marple et al., 2004). Tacaíonn na tuarascálacha seo freisin le sábháilteacht an choimpléasc OVA/BK/c-PGA. Ar an láimh eile, breathnaíodh leibhéil LDH níos airde ag 3 h tar éis an riaracháin scamhógach ná ag 24 h, fiú sa ghrúpa rialaithe. Tugann na torthaí sin le fios gur tharla greannú beag de bharr riarachán scamhógach. Tá gá le tuilleadh staidéir sábháilteachta sula gcuirtear an coimpléasc OVA/BK/c-PGA i bhfeidhm go cliniciúil.

Sa staidéar seo, léirigh muid ionduchtú córas imdhíonachta ard mucosal ag veicteoir nua seachadta vacsaín a tógadh le próitéin antigen, BK, agus c-PGA tar éis riarachán scamhógach. Is féidir an córas a úsáid le haghaidh vacsaíní i gcoinne ionfhabhtuithe riospráide éagsúla.

Ráiteas nochta

Níor thuairiscigh an t-údar/na húdair aon choinbhleacht leasa féideartha.

Maoiniú

Thacaigh Cumann na Seapáine um Chur Chun Cinn na hEolaíochta (JSPS) KAKENHHI leis an obair seo faoi dheontais [JP20K12649 agus JP20K07156].

Tagairtí

1.Ainai A, Suzuki T, Tamura SI, et al. (2017). Riar laistigh den bhroinn den vacsaín víreas neamhghníomhaithe iomlán mar iarrthóir tuar dóchais inti don vacsaín fliú. Imdhíonacht Víreasach 30:451–62.

2.Amorij JP, Saluja V, Petersen AH, et al. (2007). Spreagann seachadadh scamhógach ar vacsaín fo-aonaid chobhsaithe inulin don fhliú a ullmhaítear trí thriomú le sprae-reo freagairtí imdhíonachta córasacha, múcasacha greannta agus ceall-idirghabhála i lucha BALB/c. Vacsaín 25:8707–17.

3.Bienenstock J. (1980). Fíochán lymphoid a bhaineann le bronchus agus foinse na gcealla ina bhfuil imdhíonglobulin sa mhúcóis. Dearcadh Sláinte Timpeallachta 35:39–42.

4.Chen JR, Liu YM, Tseng YC, et al. (2020). Vacsaíní fliú níos fearr: dearcadh tionscail. J Biomed Sci 27:11.

5. Du X, Xiong L, Dai S, et al. (2015). nanacháithníní shilice mesoporous c-PGA-brataithe le táirgí atá ceangailte go comhfhiúsach le haghaidh glacadh cille feabhsaithe agus scaoileadh infhéitheach freagrúil GSH. Adv Sláintec Ábhar 4: 771–81.

6. Firacative C, Gressler AE, Schubert K, et al. (2018). Sainaithint cúntóirí T (Th)1- agus Th2-antaiginí gaolmhara cripteacocais neoformáin i múnla murine d’ionfhabhtú scamhógach. Sci Rep 8:14.

7. Giri PK, Sable SB, Verma I, et al. (2005). Meastóireacht chomparáideach ar bhealaí imdhíonta intranasal agus subcutaneous chun vacsaín mucosal a fhorbairt i gcoinne eitinn thurgnamhach. FEMS Immunol Med Microbiol 45:87-93.

8. Horiguchi M, Oiso Y, Sakai H, et al. (2015). Is cóireáil leigheasach é riaradh scamhógach d’inhibitor fosphoinositide 3-kinase do ghalar ainsealach bacúil scamhógach trí athghiniúint alveolach. J Rialú Eisiúint 213:112-9.

9. Huber VC, McKeon RM, Brackin MN, et al. (2006). Rannchuidiú ar leith ag glóbailin imdhíonachta G1 (IgG1) agus IgG2a de bharr vacsaíne le himdhíonacht chosanta in aghaidh an fhliú. Imdhíonól Clin 13: 981–90.

10. Ito R, Ozaki YA, Yoshikawa T, et al. (2003). Róil antasubstaintí frith-hemagglutinin IgA agus IgG i suíomhanna éagsúla den chonair riospráide de lucha vacsaínithe chun niúmóine marfach fliú a chosc. Vacsaín 21:2362–71.

11.Kopf M, Schneider C, Nobs SP. (2015). Forbairt agus feidhm macrophages agus cealla dendritic a chónaíonn sa scamhóg. Nat Imdhíon 16:36–44.

12.Kurosaki T, Kitahara T, Fumoto S, et al. (2009). Coimpléisc ternary de pDNA, poileitiléinimine, agus gáma-polaglutamic aigéad do chórais seachadta géine.... Bithábhair 30:2846–53.

13.Kurosaki T, Kitahara T, Nakamura T, et al. (2012). Forbairt vacsaín ailse éifeachtach ag baint úsáide as córas spriocdhírithe próitéine antaiginí chuig APCanna. Pharm Res 29:483-9.

14. Marple B, Roland P, Benninger M. (2004). Athbhreithniú sábháilteachta ar chlóiríd benzalkonium a úsáidtear mar leasaitheach i réitigh intranasal: forbhreathnú ar shonraí agus tuairimí contrártha. Máirseáil Muineál Ceann Otolaryngol 130: 131-41.

15.McKee AS, Munks MW, Marrack P. (2007). Conas a oibríonn aidiúvaigh? Breithnithe tábhachtacha maidir le aidiúvaigh ghlúin nua. Díolúine 27: 687–90.

For more information:1950477648nn@gmail.com