HS-GC-IMS a Bhrath Comhdhúile Orgánacha So-ghalaithe i bPúdair Cistéise faoi Mhodhanna Cóireála Éagsúla
Jul 13, 2022
Teibí
Cistancheis luachmharSínis leighisábhar a bhfuil luach íocshláinte agus inite aige. D’fhonn staidéar a dhéanamh ar éifeachtaí modhanna cóireála éagsúla ar na comhpháirteanna so-ghalaithe icistéir. Gcéad dul síos, rinne an staidéar reatha an púdarú sineirgisteacha, ultra-fíneáil, eastóscadh alcóil agus cóireáil eastóscadh uisce cistanche, agus ansin d'úsáid an modh HS-GC-IMS chun na comhpháirteanna so-ghalaithe a bhrath, agus bhunaigh sé méarloirg tréithiúla an phúdar cistanche feabhsaithe. (a), púdar cistánach úr (b), púdar cistéise feola ultra-mhiocróbach (c), eastóscán uiscepúdar cisteanche(d) agus ansliocht eatánóil an chistáin(e). Braitheadh 48 buaic san iomlán, agus aithníodh 32 comhdhúil so-ghalaithe, lena n-áirítear 17 aildéid, 5 cetóin, 1 furan, 5 alcól, feanóil, 1 lactone, 3 chomhdhúile eistir. Ina theannta sin, léirigh anailís chosúlachta PCA agus méarloirg go bhféadfaí idirdhealú suntasach a dhéanamh ar chomhpháirteanna so-ghalaithe na cúig mhodh cóireála. Léirigh na torthaí go raibh cineálacha agus ábhar na gcomhpháirteanna so-ghalaithe i gcistanche sineirgisteacha sách íseal, bhí na comhpháirteanna agus na cineálacha so-ghalaithe i cistanche úr sách ard, agus bhí a saintréithe féin ag na cúig mhodhanna cóireála.comhpháirteanna so-ghalaithe de Cistanche.
Faigh tuilleadh eolais faoi Cistanche Benefits
Eochairfhocail
1. Réamhrá
Is planda seadánacha luibheach ilbhliantúil den teaghlach Ledangaceae é Cistanche (Cistanche deserticola YC Ma) ar a dtugtar orlach yun, cistanche, a dháiltear go príomha i Lár Mhongóil, Gansu agus Xinjiang sa tSín, agus is ábhar míochaine coitianta Síneach é sa tSín. Chomh luath le "Shennong Materia Medica" an Ríshliocht Han an Oirthir, tá sé taifeadta go "cistanche ... Raw Valley." (Peng et al., 2017) Toisc go bhfuil an éifeacht aige tonifying duáin yang, feabhas a chur ar fhuil sperm, intestines moisturizing, etc., is féidir é a úsáid chun easnamh yang duáin a chóireáil, impotence de bharr neamhleor sperm agus fola, pian ar ais lag agus cosa lag, tinnitus agus triomacht intestinal. agus constipation, etc., ar a dtugtar "desert ginseng" (Zhu, Liu, Gao, Wu, & Shi, 2016).
Léiríonn taighde gurb iad gliocóisídí feanileatánóideach, iridoids, lignans, olagaishiúicrídí, agus polaisiúicrídí príomh-chomhábhair cheimiceacha na gCistánach(Fu, Fan, Wang, & Gao, 2018), ina bhfuil comhpháirt so-ghalaithe saibhir. Déanann eagrán 2020 de Pharmacopoeia Daon-Phoblacht na Síne cur síos ar an cistanche mar "beagán airy, milis agus beagán searbh", is é sin, tá boladh speisialta ag cistanche (Wang et al., 2015). I gCóras Idirdhealaithe Cáilíochta traidisiúnta Leigheasra Luibhe na Síne, tá boladh ar cheann de na boinn thábhachtacha chun cáilíocht luibheanna leighis a mheas, agus mar sin tá staidéar ar chomhpháirteanna so-ghalaithe Cistanche an-tábhachtach.
Go dtí seo, tá dhá phríomh-theicníc chun anailís a dhéanamh ar chomhdhúile orgánacha so-ghalaithe i mbia, is é ceann amháin gur féidir leis an srón leictreonach anailís a dhéanamh ar chomhdhéanamh cumhra bia i bhfíor-am, agus is é an ceann eile gur féidir leis an teicneolaíocht crómatagrafaíochta an comhdhéanamh ceimiceach a aithint go cruinn.Rusinek et al., 2021). Ina measc, tá feistí leictreonacha srón (r-srón), comhdhéanta de ghnáth de shraith feistí braite leictriceimiceach, teicneolaíochtaí braite aroma leictreonacha (EAD) i bhfeidhm ar chruinneas braite na srón leictreonach, agus is gá an bhrath cuí a roghnú. srón leictreonach le haghaidh samplaí braite éagsúla. Tá tréithe braite tapa, íogaireacht ard agus raon braite leathan ag feistí leictreonacha srón (r-srón), ach mar gheall ar in-atáirgtheacht torthaí beagán níos ísle, tá feidhm phraiticiúil teoranta (Rasekh, Karami, Wilson, & Gancarz, 2021; Slimani et al., 2020). Áirítear leis an teicneolaíocht crómatagrafaíocht den chuid is mó HPLC-MS agus GC-MS, etc., le córas crómatagrafaíocht leachta nó gáis mar an córas deighilte, mais-speictriméadracht mar an córas braite, trí speictream an mhais mhóilíneach choibhneasta agus faisnéis struchtúr an cheimiceáin le chéile chun sonraí ceimiceacha a fháil, tá an t-am réamhchóireála samplach fada ach tá scaradh ard ann, déanann roghnaíocht ard na torthaí cruinneas ard agus in-atáirgtheacht ard. Faoi láthair, tá cistanche aitheanta den chuid is mó ag anailís HPLC-MS ar chomhdhéanamh ceimiceach, níl mórán staidéir ar bhlas na gCistanches Herba. Mar shampla, asbhaintear substaintí so-ghalaithe an chististe trí mhodh eastósctha driogtha, agus leithlisíodh 24 comhpháirt cheimiceach trí mhodh GC/MS(Hui, Hou, Li, & Guang, 2003), agus ar deireadh anailís agus deimhnithe ag IR agus EI-MS. Baineadh úsáid as GC-MS chun anailís a dhéanamh ar sho-ghalaithe inflorescence Cistanche agus ar deireadh aithníodh 40 comhdhúil so-ghalaithe(Qiao et al., 2012). Tá réamhchóireáil samplaí de na modhanna seo níos casta, a bhfuil tionchar níos mó aige ar thorthaí an turgnaimh, agus tógann sé níos mó ama chun na coinníollacha braite a dhífhabhtú go luath, a bhfuil ceanglais theicniúla níos airde acu.
Le blianta beaga anuas, tá speictreascópacht imirce ian crómatagrafaíochta gáis (GC-IMC) mar theicneolaíocht braite ag teacht chun cinn, mar gheall ar a íogaireacht ultra-ard, luas anailíse ultra-ard, simplíocht saintréithe oibríochta éasca, tá sé curtha i bhfeidhm go forleathan sna réimsí lena n-áirítear anailís blas bia, braite ceimiceach tocsaineach. Tá na buntáistí a bhaineann le héifeachtacht ard anailíseach agus ardleibhéal léirshamhlaithe ag HS-GC-IMS, agus tá sé go maith ag anailísiú substaintí so-ghalaithe agus leath-so-ghalaithe.Zhou, Dai, Guo, Wang, & Shi, 2020). Den sórt sin linne, Wenjiang Dong et al. anailís ar chomhdhúile so-ghalaithe i pónairí caife glasa ag teicneolaíocht HS-SPME/GC-MS chun cáilíocht na pónairí caife a chinneadh (Dong, Tan, Zhao, Hu, & Lu, 2015). Mar sin, rinne an páipéar seo iarracht teicneolaíocht HS-GC-IMC a chur i bhfeidhm chun anailís a dhéanamh ar chomhdhéanamh cumaisc orgánach so-ghalaithe agus méarloirg cistanche cóireáilte trí mhodhanna éagsúla, agus d'úsáid sé anailís phríomh-chomhpháirt agus meastóireacht cosúlachta chun anailís a dhéanamh ar an difríocht in ábhar cumaisc orgánach so-ghalaithe cistanche próiseáilte i bealaí éagsúla, chun smaointe nua a sholáthar maidir le sainaithint agus braite blas táirgí cistéise a chóireáiltear le modhanna cóireála éagsúla.
2. Ábhair agus modhanna
2.1. Sampla Cistanche
Púdar cistanche sineirgisteacha: Déantar cistanche úr a ghlanadh agus a bhaint, agus déantar an chóireáil éifeachtúlachta, agus cuirtear an leacht bailithe leis an buailteoir le haghaidh brúite fliuch, a thriomú go dtí go bhfuil an t-ábhar uisce níos lú ná 5 faoin gcéad, agus ar deireadh déantar an bhrú tánaisteach a iompar amach.
Púdar cistanche úr: Déantar cistanche úr a ghlanadh agus a bhaint, cuirtear buailteoir le haghaidh brúite fliuch, a thriomú go dtí go bhfuil an cion taise níos lú ná 5 faoin gcéad, agus ar deireadh déantar an dara crushing.
Púdar ultra-fíneáil Cistanche: déantar an cistanche úr a ghlanadh agus a bhaint, a chur i buailteoir le haghaidh brúite fliuch, a thriomú go dtí go bhfuil an t-ábhar uisce níos lú ná 5 faoin gcéad, agus ar deireadh an dara crushing, cuirtear an sampla mar thoradh air sin sa ultra-micrea pulverizer le haghaidh brúite ultra-fíneáil, agus ansin déantar an púdar cistanche a chriathar (líon na mogaill níos mó ná nó cothrom le 300 mogalra), agus bailítear an púdar tar éis an criathar.
Sliocht uisce púdar Cistanches Herba: Ar dtús, déantar an cistanche iomlán úr a nite agus a bhaint, a steamed i galtán ar feadh 25 nóiméad, agus ansin bailítear an cistanche chun an leacht a deascadh. Ina dhiaidh sin, cuir an cistéir steamed isteach sa bhosca soinneáin a thriomú ag 70 céim chun é a thriomú ar feadh 7-8 h, bain amach an cistanche triomaithe agus gearr é (thart ar 5mm ar tiús), triomaigh arís é ar feadh 1{{19} } h, ionas go mbeidh an cion taise níos lú ná 10 faoin gcéad . Ansin meáigh na slisní cistanche triomaithe agus cuir uisce driogtha leis, is é an cóimheas beatha-go-leachtach 1:10 (g/ml), soak ar feadh 30 nóiméad, friochadh ar feadh 1h, níos mó ná 200 strainer mogalra. Cuir an t-uisce driogtha thuas leis an iarmhar cistánach atá fágtha agus déan na céimeanna thuas arís. Déan faoi dhó arís, agus ar deireadh bailigh na sleachta go léir le haghaidh tiúchan dí-chomhbhrú (folús −0.08Mp, teocht 65 céim ) chun sliocht a fháil le dlús coibhneasta de thart ar 1.30. Ar deireadh, cuirtear an sliocht i mbosca triomú i bhfolús (tá céim folúis níos mó. ná −0.08Mp, teocht 70 céim ), triomaithe go dtí go bhfuil cion taise an tsampla níos lú ná 5 faoin gcéad, agus brúitear an sampla i púdar níos mó ná 80 mogalra.
Sliocht eatánól púdar Cistanches Herba: cistanche úr a ní agus a bhaint, gearrtha i slices tiubh 5mm, cuir eatánól 70 faoin gcéad, is é an cóimheas leacht 1:10, soak ar feadh 30min (ní gá ach soak uair amháin). Ag baint úsáide as an extractor Soxell, is é an eastóscadh aife 1.5h. Cuir eatánól 70 faoin gcéad eile leis agus déan na céimeanna thuas arís 2 uair. Comhcheangail na trí réitigh eastósctha, déan tiúchan dí-chomhbhrúite, agus tá na céimeanna seo a leanas mar an gcéanna leis an uisce chun an púdar cistanche a ardú.
Ceannaítear an cistanche úr a úsáidtear sa turgnamh ó Inner Mongolia Sankou Biotechnology Co., Ltd., is gá gach púdar cistanche a phacáistiú, a steiriliú agus a stóráil i dtimpeallacht thirim le húsáid níos déanaí.
2.2. Córas HS-GC-IMS
Críochnaíodh anailísí ar shamplaí Cistanches Herba ar fheiste de speictream soghluaisteachta ian gáis-chéim FlavourSpec® (Roinn GASD Shandong Hai Neng Science Instrument Co., Ltd., Shan-dong, an tSín))
Ar an gcéad dul síos, cuireadh 0.5g sampla i vial sampla headspace 20 ml, ina dhiaidh sin, goradh an sampla ag 70 céim ar feadh 20 nóiméad. Ansin, ba é an luas lártheifneoir ná 500 rpm, agus bhí teocht an tsnáthaid insteallta 85 céim. Ar deireadh thiar, instealladh sampla 200μL.
Úsáideadh an GC atá feistithe le colún crómatagrafaíochta MXT{{{0}} (15 m × 0.53 mm) le haghaidh scaradh ag 60 céim , bhí N2 (íonacht Níos mó ná nó cothrom le 99.999 faoin gcéad) a úsáidtear mar ghás iompróra, agus ba é an ráta sreafa ná: 0–2 nóim - 2 mL/nóim; 2–10 nóim - 2–10 mL/nóiméad; 10–20 nóim - 10–100 mL/nóiméad, tar éis 20 nóiméad, cuireadh stop leis an anailís. Coinníodh an sruthfheadán ag 45 céim faoi N2 mar ghás srutha ag 150 ml/nóiméad.
Socraíodh teocht an IMS mar 45 céim.
2.3. Anailís staitistiúil
Áirítear leis na bogearraí anailíse sonraí Amharcóir Anailíseach Saotharlainne (LAV) agus bogearraí Cuardaigh leabharlainne GC-IMS, ar féidir iad a dhéanamh ó uillinneacha éagsúla. Áiríodh le LAV VOcal agus trí breiseán, VOCal a úsáideadh chun an speictream anailíse a fheiceáil agus anailís cháilíochtúil agus chainníochtúil ar shonraí. Seasann gach pointe sa léaráid do chomhdhúil orgánach so-ghalaithe. Is féidir anailís cháilíochtúil ar shubstaintí a dhéanamh i gcomhcheangal leis an mbunachar sonraí ionsuite de na bogearraí. Úsáidtear breiseán an tuairisceora chun comparáid dhíreach a dhéanamh idir na difríochtaí speictreach idir táirgí éagsúla, mar shampla speictrim difríochta samplach agus speictrim radhairc barr déthoiseach. Baineadh úsáid as an breiseán plota gailearaí chun na méarloirg idir samplaí a chur i gcomparáid agus chun na difríochtaí VOCanna idir samplaí éagsúla a chur i gcomparáid go radhairc; Baineadh úsáid as breiseán dinimiciúil PCA le haghaidh anailíse braisle ar shamplaí, rud a bhí áisiúil chun cineál na samplaí anaithnid a chinneadh go tapa.
Baineadh úsáid as an anailís phríomh-chomhpháirte chun na gaolmhaireachtaí idir na samplaí cistéise a chóireáiltear go héagsúil agus na comhdhúile so-ghalaithe orgánacha inbhraite a aimsiú. Bhí 38 colún (ainmneacha comhdhúile so-ghalaithe) agus 15 sraith (samplaí a ndearnadh cóireáil orthu ar bhealaí éagsúla) sa mhaitrís sonraí PCA le haghaidh anailíse staitistiúla ar thorthaí na dtástálacha crómatagrafaíochta. Rinneadh an maitrís ionchuir a scála go huathoibríoch.
3. Torthaí agus plé
3.1. Ceapacha topagrafacha HS-GC-IMS de mhodhanna cóireála éagsúla ar an gcistanche
Sa staidéar seo, baineadh úsáid as HS-GC-IMS chun anailís a dhéanamh ar dhifríochtaí comhdhúile so-ghalaithe i modhanna cóireála éagsúla ar cistanche. Bhí na sonraí léirithe ag HS-GC-IMS 3D-speictream iFíor 1, cuimsíonn sé am coinneála, am imirce, agus buaic-déine. ÓFíor 1, tá na comhdhúile so-ghalaithe i gcóireáil dhifriúil cistíní an-chosúil, ach tá difríochtaí laistigh de na ciorcail dearga agus tá an déine comhartha beagán difriúil.
Fíor 1. Líníochtaí topagrafacha 3D.
Chun breathnóireacht níos fearr a bheith ann, baineadh úsáid as an radharc barr chun na samplaí seo a chur i gcomparáid go mion. Tá cúlra iomlán an radhairc bharr gorm, agus tá an líne ingearach dearg ag abscissa 1.0 sracadh buaic (buaic ian imoibríoch, normalaithe). Seasann gach pointe ar dheis RIP Peak do chomhdhúil orgánach so-ghalaithe. Léiríonn an comhordanáid an t-am(í) coinneála de chrómatagrafaíocht gháis, agus seasann an abscissa don am imirce ian (próiseas normalaithe). Mar atá le feiceáil óFíor 2a, tarlaíonn formhór na gcomharthaí ag am coinneála 100–800 s agus am sreafa 1.0–1.7 ms. Léiríonn an dath neart comhartha na substainte, léiríonn bán déine níos ísle, agus léiríonn dearg déine níos airde. Dá dorcha an dath, is mó an déine.
Chun comparáid níos soiléire a dhéanamh idir na héifeachtaí atá ag modhanna cóireála éagsúla ar shubstaintí so-ghalaithe cistanche,Fíor 2b roghnaíonn sé speictream shampla (a) mar thagairt, agus asbhaineann sé an láimhseáil thagartha ar speictream na 4 shampla eile chun plota comparáide difríochta samplach a fháil. Má tá an sampla comhdhúile so-ghalaithe orgánacha comhsheasmhach, tá an cúlra tar éis asbhainte bán, má tá difríocht idir an dá, ciallaíonn dearg go bhfuil tiúchan na substainte níos airde ná an tagairt, ciallaíonn gorm go bhfuil tiúchan na substainte níos ísle ná an tagairt, agus an níos dorcha an dath, is mó an tiúchan. Ag comparáid idir samplaí a agus b, is féidir a fháil amach go bhfuil tiúchan na gcomhdhúile so-ghalaithe orgánacha atá i b i bhfad níos airde ná an tiúchan de a le linn an tsrutha de 1.2–1.6 ms. Ba é an anailís a d'fhéadfadh cistanche comhpháirteanna so-ghalaithe áirithe a scaoileadh le linn an phróisis sineirgisteacha, ag laghdú tiúchan na gcomhpháirteanna so-ghalaithe a choinnítear i bpúdar cistanche agus a dhéanann difear do bhlas cistanche.Yang et al., 2021). Ag comparáid idir samplaí a agus c, is féidir a fháil amach go bhfuil an t-am srutha sa raon 1.4–1.6 ms, agus tá difríocht tiúchana idir na samplaí difriúil. Tharla an anailís mar gur athraíodh airíonna ceimiceacha nó fisiceacha roinnt substaintí so-ghalaithe nuair a brúitear an criathar le grinder ultra-mhín (Zhao et al., 2009), rud a fhágann go bhfuil sé éagobhsaí agus seans maith go luaineacht agus go gcaillfear é le linn stórála nó oibríochta (YBLi, Li, Liu, & Lu, 2020), rud a fhágann go laghdaítear tiúchan na substaintí so-ghalaithe atá fágtha. Ón chairt comparáide difríochta de shamplaí d agus e, is féidir a fháil amach go bhfuil an difríocht idir púdar cistanche agus púdar cistanche feola mellow agus púdar cistanche steamed mar an gcéanna i gcoitinne, ach sa raon ama coinneála 10{{ 7}}–200í agus am srutha 1.0–1.3ms, bhí difríochtaí suntasacha i dtiúchan substaintí so-ghalaithe eastóscán uisce cistanche agus sliocht alcóil cistanche, agus bhí na substaintí so-ghalaithe de eastóscadh uisce cistanche comhchruinnithe den chuid is mó in aice leis an am coinneála de 1.0ms agus bhí an tiúchan ard, cé go raibh na substaintí so-ghalaithe de eastóscadh alcóil cistanche scaipthe agus beagán níos airde. Is féidir a anailísiú, le linn eastóscadh cistanche ó eatánól, mar gheall ar "intuaslagthacht chéim den chineál céanna", d'fhéadfadh go mbeadh substaintí so-ghalaithe dothuaslagtha in eatánól a cailleadh le linn an phróisis eastósctha, rud a fhágann go mbeidh tiúchan níos ísle de roinnt substaintí so-ghalaithe (Xu et al., 2014). D'fhéadfadh sé freisin, toisc go bhfuil eatánól féin so-ghalaithe, go bhfuil substaintí so-ghalaithe ann a luainíonn le eatánól le linn an phróisis tiúchana, rud a fhágann go mbíonn tiúchan níos ísle ann. D'fhéadfadh sé go gcaillfí sleachta uisce Cistanche, ar an láimh eile, sa scagachán mar gheall ar an bhfíric go bhfuil roinnt substaintí so-ghalaithe dothuaslagtha in uisce nó dothuaslagtha in uisce, rud a fhágann go bhfuil tiúchan braite deiridh íseal.
3.2. Comhpháirteanna so-ghalaithe a shainaithint ón gcistanche arna bpróiseáil trí mhodhanna cóireála éagsúla
Fuarthas amach go bhfuil 49 comhdhúil so-ghalaithe ag Cistanche, lena n-áirítear go príomha blátholaí, 17 gliocóisídí feinileatánóideach (PhG), agus aithníodh 10 n-iridoids (Xu et al., 2014). Hui et al. úsáid as modh GC/MS chun a dhearbhú go bhfuil 24 ceimiceán san ola so-ghalaithe cistanche, mar shampla 3 aildéid, 2 feanól, 3 alcól agus 3 céatón, agus gurb é eugenol an phríomh-chomhpháirt d'ola so-ghalaithe cistanche(Hui et al., 2003).
Sa taighde seo, an anailís ar chomhdhúile so-ghalaithe cistanche cóireáilte le cóireálacha éagsúla ag úsáid HS-GC-IMS chun faisnéis cháilíochtúil thréithrithe a thabhairt. Mar a léirítear iFíor 3, seasann an abscissa don am difreálach, seasann an t-ordanáid don am(í) réitigh, agus comhfhreagraíonn na huimhreacha dearga do na comhdhúile iTábla 1. Braitheadh iomlán na cinn 48 buaic ón sampla agus aithníodh 32 comhdhúil so-ghalaithe, lena n-áirítear 5 cetóin, 5 alcól, 17 aildéid, 1 furans, 1 lachtóin, 3 eistear. Ina measc, tá na comhdhúile meataprópánal, 3-meitilbútánal, 2-meitilbútán, heiptinal, (E)-2-heiptinal, 2-heipteanóin, (E)-2-heicseánach Bhí na foirmeacha ag , (E)-2-octenal, n-nónal, ochtánal, aicéatáit eitile, 2-meitilprópánól, (E)-2-pentenal, furfural, gáma-Butyrolactone agus heacsánáit meitile de chistanche monaiméirí agus dimers.
Fíor 3. Spectra HS-GC-IMS de cistanche tar éis modhanna cóireála a phróiseáil. Aithnítear na huimhreacha comhpháirteanna so-ghalaithe. a: púdar cistanche sineirgisteacha, b: púdar cistanche úr, c: púdar cistanche feola Super micrea, d: sliocht uisce púdar Cistanches Herba, e: sliocht eatánól púdar Cistanches Herba.
