Sintéis Glas Agus Tréithriú Nanacháithníní Iarainn Sintéisithe Ó Sliocht Duilleog Uisciúil As Vitex Leucoxylon Agus A Feidhmeanna Bithleighis

Coimriú:Baineadh úsáid as an modh eastósctha fuar chun sliocht uiscí a fháilLeucoxylon Vitexduilleoga i gcóimheas 1:10. Rinneadh nanacháithníní iarainn (FeNPs) a shintéisiú ag baint úsáide as sliocht duille uiscí deV. leucoxylonmar ghníomhaire laghdaithe. Baineadh úsáid as an gcur chuige fítea-mhíochaine chun FeNPanna a dhéanamh trí 1 ml de eastóscán plandaí a mheascadh le 1 mM de shulfáit ferric. Baineadh úsáid as scanadh micreascópachta leictreoin (SEM), speictreascópacht infridhearg Fourier-transform (FTIR), speictreascópacht Ultraviolet-infheicthe (UV-Vis), agus speictreascópacht X-ghathaithe atá scaipthe ar fhuinneamh chun na FeNPanna sintéiseithe a scrúdú. Léiríodh an t-imoibriú laghdaithe trí athrú ar dhath an tuaslagáin, agus deimhníonn foirmiú dath dubh go bhfuil FeNPanna déanta. Fuarthas an bhuaic ionsúcháin is mó (uas) ag 395 nm in anailís speictreach UV-Vis. Speictream FTIR deV. leucoxylonLéirigh sliocht duille uiscí athruithe i roinnt beanna, eadhon 923.96 cm−1 agus 1709.89 cm−1, le grúpaí feidhme aigéid charbocsaileacha, aildéid neamhsháithithe, agus cetóin, a bhí in easnamh i speictream FTIR FeNPanna agus atá freagrach as foirmiú FeNPanna. Breathnaíodh FeNPanna le trastomhais idir 45 agus 100 nm in íomhánna SEM. Dheimhnigh EDX cruthú FeNPanna, rud a léiríonn comhartha láidir sa réigiún iarainn mhiotalacha ag 6-8 Kev. Nocht XRD nádúr criostalach agus trastomhas meán de 136.43 nm.Frithocsaídeach,frith-athlastach, cíteatocsaineach, agusleighis fhoirceannadhthuairiscigh tástálacha in vitro gníomhaíocht shuntasach de chuid na FeNPanna. Léiríonn torthaí carnacha an staidéir seo go bhfuil sintéis ghlas FeNPannaboosts a ghníomhaíocht bhitheolaíochagus féadfaidh sé fónamh margníomhaire cneasaithe créachta deirmeach féidearthaagusgníomhaire citotocsaineach i gcoinne ailse. Tá gá le staidéar amach anseo ar shainaithint na meicníochtaí a bhaineann le sintéis FeNPanna tríV. leucoxylonagus a feidhmeanna bithleighis.

Eochairfhocail:Leucoxylon Vitex; nanacháithníní iarainn; SEM; leighis fhoirceannadh; cíteatocsaineach

SOCHAIR CISTANCHE DOFRITHOCSAÍDEOIR,FRITH-ATHAILIMH, CYTOTOXIC, AGUSCréachta Créachta

1. Réamhrá

Is réimse atá ag fás go tapa é cur i bhfeidhm na nanaitheicneolaíochta san eolaíocht agus sa teicneolaíocht chun ábhair nua a mhonarú ar leibhéal na nanascála [1]. Déileálann nanaitheicneolaíocht le hábhair déantúsaíochta ag an leibhéal adamhach chun airíonna sainiúla a fháil, ar féidir iad a láimhseáil le haghaidh feidhmchláir roghnaithe. Tá an réimse seo ag fás go tapa lena n-iarratas san eolaíocht agus sa teicneolaíocht chun ábhair nua a mhonarú ag leibhéal na nanascála [2]. Tá earnálacha tionsclaíocha éagsúla tar éis glacadh le nanaitheicneolaíocht le blianta beaga anuas mar gheall ar a feidhmeanna i réimsí na gcóras stórála leictreonaí [3], na biteicneolaíochta [4], scaradh maighnéadach agus réamh-chomhchruinniú spriocanailítí, seachadadh spriocdhírithe drugaí [5], agus feithiclí géine agus drugaí. seachadadh [3,5,6]. Dá bhrí sin, tá an cumas ag na cáithníní seo tionchar suntasach a imirt ar an tsochaí mar thoradh ar an raon leathan feidhmeanna ar féidir iad a úsáid. Is éard is nanacháithníní (NPanna) ann maiseanna cáithníní a bhfuil méid níos lú ná céad nanaiméadar acu agus a mheastar gur príomhmhaiseanna struchtúracha iad i réimse na nanaitheicneolaíochta. Is í gníomhaíocht níos airde na NPanna a saintréith shainithe agus an cháilíocht dá bhfuil siad is suntasaí [7]. Is iad NPanna orgánacha agus neamhorgánacha an dá aicmiú príomhúla is féidir a chur i bhfeidhm ar nanacháithníní. Féadfaidh NPanna maighnéadacha, NPanna miotail uasal (amhail ór agus airgead), agus NPanna leathsheoltóra (cosúil le dé-ocsaíd tíotáiniam agus ocsaíd since) a bheith i nanacháithníní neamhorgánacha. Féadfaidh NPanna carbóin a bheith i nanacháithníní orgánacha. Tá aird mhór á tarraingt ar nanacháithníní neamhorgánacha mar go dtugann siad airíonna ábhair níos fearr chomh maith le solúbthacht feidhmiúil. Tá imscrúdú déanta orthu mar uirlisí féideartha le haghaidh íomháithe leighis agus chun galair a chóireáil mar gheall ar na tréithe méide atá acu [8]. Bíonn tionchar mór ag éagsúlacht paraiméadair ar airíonna ceimiceacha, fisiceacha agus bitheolaíocha éagsúla NPanna, lena n-áirítear méid nana-cháithníní agus moirfeolaíocht, chomh maith le sciath dromchla, a chinntear de ghnáth le linn shintéis na nanacháithníní. Laghdú ar chobhsaíocht cholóideach is cúis le caillteanas na gníomhaíochta bitheolaíocha atá beartaithe. Bíonn tionchar ag pH, neart ianach, agus líon na bpróitéiní a idirghníomhaíonn le AgNPanna faoi imthosca ábhartha ar chobhsaíocht cholóideach. Mar thoradh air sin, tá roghnú ceart teicníc sintéise ríthábhachtach chun na tréithe cáithníní atá ag teastáil a fháil le haghaidh feidhmeanna sonracha [9].

Faoi láthair, tá raon leathan de NPanna ann ar féidir iad a shintéisiú ag baint úsáide as próisis éagsúla fisiceacha, ceimiceacha, bitheolaíocha agus hibrideacha. De réir thorthaí líon mór staidéar taighde, cuimsíonn na próisis fhisiceacha agus cheimiceacha chun nanacháithníní a tháirgeadh úsáid tuaslagóirí orgánacha, comhdhúile guaiseacha, méideanna suntasacha fuinnimh, agus oibreáin chobhsaithe nach bhfuil in-bhithmhillte [10]. Dá bhrí sin, i réimse na nanaitheicneolaíochta glas, tá sé ag éirí níos mó tóir ar shintéis NPanna ag baint úsáide as ábhair atá ar fáil go nádúrtha cosúil le sleachta plandaí, miocrorgánaigh éagsúla, a meitibilítí, agus cúpla substaintí humic nádúrtha [11,12] mar ghníomhairí laghdaithe agus caipínithe. Baineadh úsáid as modhanna sintéise atá neamhdhíobhálach don chomhshaol chun raon leathan nanacháithníní miotalacha a tháirgeadh, lena n-áirítear airgead, óir, iarann, copar agus since. Tá forbairt modhanna éasca agus inghlactha don chomhshaol do shintéisiú NPanna ar cheann de phríomhfhócas na nanaitheicneolaíochta. Is féidir úsáid a bhaint as bith-ábhair cosúil le miocrorgánaigh agus sleachta plandaí sa phróiseas chun raon leathan NPanna a ullmhú [13,14]. Mar sin féin, toisc gur pataiginí iad roinnt orgánaigh, tá sé contúirteach iad a láimhseáil. D'fhonn a bheith rathúil, ní mór miocrorgánaigh a choinneáil sa chultúr agus a bheith faoi réir coinníollacha rialaithe go cúramach, lena n-áirítear teocht, pH, agus paraiméadair eile. Toisc go gcuireann sé deireadh leis an bpróiseas saothair a bhaineann le cultúr miocróbach a chothabháil, is féidir uaireanta níos mó buntáistí a bhaint as NPanna a úsáideann páirteanna plandaí ná próisis bhitheolaíocha eile [15]. Mar thoradh air sin, tá go leor airde tarraingthe aige mar gheall ar a shaintréithe dúchasacha, lena n-áirítear úsáid acmhainní nádúrtha, tapacht, éicea-cairdiúlacht, agus neamhchinnteacht. Tá na tréithe alluring seo fíor-riachtanach le húsáid in iarratais leighis. Tá méid atá sainithe go maith agus faoi smacht ag na nanacháithníní a tháirgtear trí shintéis glas, tá siad saor ó thruailleáin, agus tá an modh simplí le scála suas. Seo cuid de na buntáistí breise a bhaineann le sintéis glas [16]. Déantar gníomhaíocht bhitheolaíoch na nanacháithníní sintéisithe a chinneadh agus a mhionchoigeartú den chuid is mó ag na hábhair ghlasa a úsáidtear chun ian miotail a chobhsaíocht agus a laghdú. Ba cheart gurb é ceann de na hairíonna idéalach atá ag na NPanna ná go gcaithfidh sé cumas gan íoc idirdhealú a dhéanamh idir spriocanna féideartha (pataiginí) agus cealla mamaigh (óstach) [17].

Mar gheall air seo, rinneadh imscrúdú ar an sliocht uiscí de duilleoga leucoxylon V. as a chumas chun foirmiú nanacháithníní iarainn (FeNPs) a éascú sa taighde reatha. Tá iarann ​​ar cheann de na heilimintí is féidir a fháil sa raidhse is mó ar domhan. Le déanaí, tá sé aitheanta mar aicme nua de NPanna tábhachtacha mar gheall ar an bhfíric go bhfuil éagsúlacht airíonna uathúla aige, lena n-áirítear coerciveness ard agus superparamagnetism. Níl iontu ach cataly sis, gléasanna leictreonacha, stóráil faisnéise, braiteoirí, teicneolaíocht seachadta drugaí, bithleighis, gléasanna taifeadta maighnéadacha, agus glantachán comhshaoil ​​ach cuid de na hiarratais shuimiúla iomadúla a bhain úsáid as FeNPanna [18]. Thairis sin, de réir roinnt staidéar, féadfar FeNPanna a chruthú ó shleachta plandaí éagsúla. Áirítear ar na sleachta plandaí seo duille Eucalyptus globulus [19], duille pomegranate [20], agus fuinseog craiceann banana [21]. Is ball den teaghlach Verbenaceae é an gléasra V. leucoxylon, a úsáideadh sa staidéar reatha. Tugtar an crann chaste cúig-leaved air freisin (Kannada: Sengeni, Holenekki, Hollalakki) agus is féidir é a fháil sa réigiún cois abhann i bhforaoisí síorghlasa agus leathghlasa agus i bhforaoisí duillsilteacha tais feadh sruthanna. Is féidir leis airde suas le 20 m a bhaint amach agus tá sé rangaithe mar chrann duillsilteach measartha go mór. Ar fhad fhoraoisí Ghats an Iarthair na hIndia, is féidir é a fháil i líon mór. Tuairiscíodh go bhfuil raon leathan de ghníomhaíochtaí cógaseolaíochta ag insileadh sliocht duille V. leucoxylon, mar shampla gníomhaíochtaí frith-athlastacha, frithocsaídeacha, antipsychotic, antidepressant, antiparkinsonian, agus antihyperlipidemic [22]. Baineadh úsáid as táirgí nádúrtha, le linn na staire agus go háirithe i leigheas tíre, chun cóireáil a dhéanamh ar raon leathan tinnis agus tinnis. Téann an cleachtas seo siar go dtí ré ársa. Mar gheall ar na modhanna a bhaineann le ceimic táirgí nádúrtha a bhí thart ar feadh i bhfad tá sé indéanta teacht ar éagsúlacht mhór de mheitibilítí tánaisteacha bithghníomhacha a thagann ó fhoinsí talún agus mara. Tá líon suntasach de na substaintí seo a fhaightear go nádúrtha á meas anois lena n-úsáid mar chógaisíocht fhéideartha[23].

Tá líon mór ceimiceán agus cothaitheach a fhaightear go nádúrtha atá fós le nochtadh atá úsáideach don chine daonna. Mar thoradh air sin, tá éileamh láithreach ar thaighde agus ar fhorbairt roghanna teiripeacha nuálacha a d’fhéadfaí a úsáid go rathúil in idirghabhálacha teiripeacha agus íosmhéid éifeachtaí díobhálacha á gcruthú ag an am céanna.

Tá an próiseas sintéise glas atá molta faoi láthair le haghaidh FeNPanna sainiúil agus costéifeachtach. Sa staidéar reatha, rinneadh iarracht nanacháithníní a chruthú ag teocht an tseomra gan úsáid a bhaint as aon cheimiceáin nó teicnící fisiceacha. Roghnaíodh gléasra leucoxylon Vitex mar iarracht chun nanacháithníní iarainn a shintéisiú, agus rinneadh samhlacha córasacha cuimsitheacha in vitro chun cumas na nanacháithníní iarainn a mheas. Níl ach líon teoranta staidéar taighde ar choincheap na nanacháithníní agus a bhfeidhmeanna bithleighis foilsithe ar an bplanda seo. Mar thoradh air sin, chinneamar go mbeadh sé tairbheach an taighde seo a dhéanamh agus na spriocanna seo a leanas á gcur san áireamh: scagadh le haghaidh fíteiceimiceach agus líon na meitibilítí tánaisteacha i V. leucoxylon a thomhas; sintéis glas agus tréithriú FeNPanna ó V. leucoxylon; staidéar comparáideach ar éifeachtaí frithocsaídeacha agus frith-athlastacha V. leucoxylon agus a FeNPanna in vitro; gníomhaíocht cíteatocsaineach in vitro de sliocht duille uiscí de V. leucoxylon agus a FeNPanna i gcoinne ailse craicinn, ailse scamhóg, agus ailse béil; gníomhaíocht cneasaithe créachta in vitro de shleachta duille uiscí de V. leucoxylon agus a FeNPanna sintéiseacha trí thástáil scratch.

2. Ábhair agus Modhanna

2.1. Bailiú Ábhar Plandaí

I mí an Mhárta 2022, roghnaíodh duilleoga úra V. leucoxylon ó limistéar foraoise Anshi de na Ghats Thiar i gCeantar Uttar Cannadais i stát Karnataka san India. D'aithin an Dr Kotresha K., Tacsanomaí, Roinn na Luibheolaíochta, Coláiste Eolaíochta Karnataka, Dharwad na duilleoga; Karnataka, trí thagairt a dhéanamh don eiseamal dearbhán a thaisceadh i Roinn na Luibheolaíochta, Coláiste Eolaíochta Karnataka, Dharwad, Karnataka. Tar éis a bheith bailithe, nitear an t-ábhar duille plandaí úra faoi uisce sconna reatha, triomaithe ag an ngrian, agus ansin meilte isteach i bpúdar garbh ag baint úsáide as grinder meicniúil. Coinníodh an púdar i gcoimeádáin a bhí séalaithe ag teocht an tseomra ionas go bhféadfaí é a úsáid níos déanaí sa phróiseas eastóscadh tuaslagóirí amh.

2.2. Sliocht Plandaí a Ullmhú

Ag baint úsáide as gléas Soxhlet, baineadh 25 g de duilleoga púdraithe ar feadh 48 h le 250 mL uisce driogtha. Díríodh an t-eastóscadh uiscí a thuilleadh ag baint úsáide as roto-evaporator, agus ansin triomaíodh é i triomadán sula gcoimeádtar é i mbuidéal iata ag 4 ◦C go dtí go n-úsáidfí é. Chun FeNPanna a shintéisiú, baineadh úsáid as an sliocht uiscí mar ghníomhaire laghdaithe agus cobhsaíochta.

2.3. Tuaslagóirí agus Imoibrithe

Bhain cáilíocht anailíseach leis na ceimiceáin agus na tuaslagóirí go léir a bhí fostaithe agus ceannaíodh iad ó Hi-media (Hubli, an India).

2.4. Anailís Fhíteiceimiceach

Tar éis an nós imeachta a ndearna Deepti et al. (2012), rinneadh tástáil cháilíochtúil ar an sliocht duille uiscí amh V. leucoxylon maidir le láithreacht comhábhair fíteasiceimiceacha éagsúla cosúil le flavonoids, alcaloidí, feanóil, glycosídí, stéaróil, lignins, saponins, anthraquinones, tannins, agus siúcraí laghdaithe [24].

2.5. Sintéis de Nanacháithníní Iarainn

Ar dtús, cuireadh 1 ml de V. sliocht duille uiscí leucoxylon le 10 mL de thuaslagán uiscí FeSO4 0.05 mM, agus croith an meascán. Ag teocht an tseomra agus i dtimpeallacht dorcha, rinneadh an próiseas iomlán meascán imoibrithe. Bhí an t-imoibriú ocsaídiúcháin/laghdaithe le feiceáil go soiléir tar éis don mheascán imoibriúcháin gan dath a bheith gortha agus imoibriúcháin ar feadh na tréimhse riachtanacha [25]. D'fhonn aon rianta de eastóscadh uiscí a bhaint as na FeNPanna a bhí sintéisithe úrnua, ar ceadaíodh iad a thriomú i bpúdar tar éis lártheifneoraithe ag 10,000 rpm ar feadh deich 10 nóiméad le linn na tréimhse imoibrithe inmhianaithe, lártheifneoiríodh an meascán uiscí ina raibh FeNPanna. an dara huair agus athscaipeadh in uisce driogtha dúbailte agus triomaithe [26].

2.6. Tréithriú FeNPanna

Roinnt modhanna, mar shampla speictreascópacht Ultraviolet-infheicthe (UV-Vis), speictreascópacht infridhearg Fourier-transform (FTIR), scanadh micreascópachta leictreon, agus speictreascópacht X-ghathaithe scaipthe fuinnimh, Díraonta X-gha (XRD), anailísí ar mhéid na gcáithníní, agus zeta. acmhainneacht, chun na FeNPanna a shaintréithe.

2.6.1. Anailís UV-Infheicthe Speictreascópachta-Bhunaithe

Ar dtús, rinneadh measúnú ar aliquot 1 ml de thuaslagán FeNPanna collóideach i gcuvettes Grianchloch ag baint úsáide as speictreascópacht UV-infheicthe (U-3310, Hitachi, Tóiceo, an tSeapáin), ag baint úsáide as uisce driogtha mar thagairt agus 0.05 mM FeSO4 mar bán, chun laghdú na n-ian ferric sa tuaslagán collóideach a bhailíochtú [27].

2.6.2. Anailís Bunaithe ar FTIR

Aithníodh na grúpaí feidhme (grúpaí) a bhí faoi cheangal ar an dromchla iarainn agus a raibh baint acu le sintéis FeNPanna ag baint úsáide as speictreascópacht FTIR (S700, Nicolet, MA, SAM), [28]. Tar éis 72 h goir, rinneadh na FeNPanna a aonrú trí lártheifneoiriú arís agus arís eile (3-4 huaire) de na meascáin imoibriúcháin ag 10,000 rpm ar feadh 15 nóiméad. Cuireadh uisce dí-ianaithe in ionad an fheithleáin agus stóráladh an millín mar phúdar. Tar éis a bheith triomaithe, cuireadh na FeNPanna trí anailís FTIR ag baint úsáide as an bpróiseas millíní bróimíd photaisiam ag cóimheas 1:100.

2.6.3. Scanadh-Leictreon-Micreascópacht-Bunaithe Anailís

Baineadh úsáid as micreascópacht scanadh leictreon (JSM-IT 500, Jeol, Boston, MA, SAM), chun na nanacháithníní a scrúdú agus a gcruth dromchla a bhunú. Ullmhaíodh foshraitheanna ar shubstráit Si glan 5 mm × 5 mm scoilte ó wafer trastomhas 100 mm. Ceadaíodh don tsubstráit imoibriú ar feadh 2 h go 6 h agus ullmhaíodh an sampla trí thuaslagán collóideach a lártheifneoiriú ag 10,000 rpm ar feadh 5 nóiméad. Triomaíodh an millín tar éis é a theifigh arís agus arís eile, tar éis é a athscaipeadh in uisce dí-ianaithe agus rinneadh an nós imeachta arís agus arís eile. Ar deireadh, fuarthas an millíní tirim, a cuireadh faoi réir an tréithrithe struchtúracha trí anailís SEM de réir an nós imeachta a ndearna an Institiúid Náisiúnta um Chaighdeáin agus Teicneolaíocht, NIST-2007 [29], cur síos air.

2.6.4. X-ghathaithe Scaipthe Fuinnimh

Tar éis triomú ar ghreille copair brataithe le carbón, rinneadh anailís ar na FeNPanna laghdaithe ag baint úsáide as EDX (JSM-IT 500, Jeol, Boston, MA, SAM), rud a cheadaigh an comhdhéanamh eiliminteach a chinneadh freisin.

2.6.5. Acmhainneacht Zeta

Tuairimí ar NPanna Is uirlis úsáideach é an poitéinseal zeta chun léargas breise a fháil ar chobhsaíocht na NPanna colóideach. Soláthraíonn aimplitiúid an acmhainneacht zeta leid maidir le cobhsaíocht fhéideartha an choilóideach. De réir Meléndrez et al. (2010), meastar go bhfuil cáithníní cobhsaí má tá a luachanna poitéinsiúla zéite níos dearfaí ná móide 30 mV nó níos diúltaí ná 30 mV [30]. Ba cheart an fhíric seo a chur san áireamh. Baineadh úsáid as an méadar zeta léasair chun léamha a fháil ar na féidearthachtaí dromchla zeta (Seizer zeta Malvern 2000, Malvern, RA). Caolaíodh samplaí leachtacha na nanacháithníní, 5 millilítear san iomlán, le 50 millilítear uisce driogtha dúbailte, agus úsáideadh 2 mm in aghaidh an mhéadair cearnach de chlóiríd sóidiam mar an tuaslagán leictrilít fionraí. Tar éis sin, athraíodh an pH go dtí gur shroich sé an leibhéal inmhianaithe. Bhí na samplaí corraithe ar feadh 30 nóiméad san iomlán. Tar éis an coimeádán a chroitheadh, tugadh faoi deara an pH ag cothromaíocht, agus socraíodh acmhainneacht zeta na gcáithníní miotalacha. Chun poitéinseal dromchla na FeNPanna a chinneadh, baineadh úsáid as poitéinseal zeta. I ngach cás, b’ionann an luach luaite agus meán na dtorthaí ar thrí thomhas aonair. Nuair a bhí luachanna an acmhainneacht zeta sa raon ó níos airde ná móide 30 mV go dtí níos ísle ná 30 mV, socraíodh na critéir maidir le cobhsaíocht NPanna [31].

2.6.6. Anailíseoir Méid na gCáithníní

D'fhonn méid cáithníní an tsampla a chinneadh, rinneadh tástáil PSA air tar éis é a lyophilized agus ansin scaipeadh ag baint úsáide as ultrasonicator (SZ-100, Horiba, Kyoto, an tSeapáin).

2.6.7. Anailís Díraonta X-gha (XRD).

Rinneadh anailís XRD (Smart Lab SE, Rigaku, Tóiceo, an tSeapáin) ar na nanacháithníní iarainn sintéisithe ó eastóscán duille uiscí de V. leucoxylon chun nádúr na nanacháithníní a chinneadh chomh maith le meánmhéid na nanacháithníní.

2.7. Gníomhaíocht Frithocsaídeach a Chinneadh trí Mhodhanna In Vitro a Úsáid

2.7.1. Measúnacht Cumhachta Frithocsaídeach a Laghdaíonn Ian Ferric (FRAP)

De réir Oyaizu (1986), le mionathrú, rinneadh measúnú ar chumhacht laghdaithe na n-ian ferric [32]. Ar feadh 30 nóim ag 50 ◦C, cuireadh 2.5 mL de mhaolán fosfáite 20 mM agus 2.5 mL de ferricyanide potaisiam 1 faoin gcéad le 2.5 mL de V. sliocht duille leucoxylon agus a FeNPanna sintéiseithe a chumasc le an teaglaim. Tar éis na tréimhse goir, forlíontar an meascán le 2.5 ml d'aigéad tríchlóraaicéiteach 10 faoin gcéad w/v agus 0.5 mL de 0.1 faoin gcéad w/w clóiríd ferric sular ghoradh é ar feadh 10 nóiméad sa bhreis. Ar deireadh, baineadh úsáid as speictreafótaiméadar UV-V chun an t-ionsúcht a bhrath ag 700 nm. Mar chaighdeán, baineadh úsáid as aigéad ascorbic. Rinneadh tástáil ar gach sampla trí huaire.

2.7.2. Measúnacht Scavening Sárocsaíd Hidrigin

Bunaithe ar chumas V. leucoxylon sliocht duille uiscí agus a FeNPs sintéiseacha sárocsaíd hidrigine a scavenge, rinneadh meastóireacht ar ghníomhaíocht frithocsaídeach na gcomhdhúile seo. Ar dtús, cuireadh {{0}}.6 mL de mhaolán fosfáite (pH-7.4) ina raibh 4 mM H2O2 le 0.5 mL d’aigéad ascorbach caighdeánach ag tiúchan aithnid, chomh maith le feadáin ina raibh eastóscáin phlanda ag tiúchana éagsúla sa raon ó 100 µL go 500 µL (pH-7.4). Ag baint úsáide as maolán fosfáit agus tuaslagán bán saor ó shárocsaíd hidrigine, rinneamar measúnú ar ionsúchán an tuaslagáin ag 230 nm tar éis 10 nóiméad. Baineadh úsáid as maolán fosfáite chun an rialú a chruthú in ionad an tsampla nó an chaighdeáin [33]. Rinneadh tástáil ar gach sampla trí huaire. Baineadh úsáid as cur chuige na foirmle chun an céatadán coiscthe a ríomh.

2.7.3. DPPH Saor-Radacach-scavening

Assay V. Rinneadh sliocht duille leucoxylon agus FeNPanna sintéiseithe a thástáil as a gcumas fréamhacha saor in aisce a scavenge ag baint úsáide as radacach DPPH mar imoibrí [34]. Comhcheanglaíodh samplaí le tuaslagán radacach DPPH (60 M) in eatánól (100 µL) ag tiúchana éagsúla (w/v). Baineadh úsáid as speictreafótaiméadar UV-Vis chun ionsúiteacht an mheascáin a thomhas ag 517 nm tar éis 30 nóiméad goir sa dorchadas ag teocht an tseomra. Úsáideadh aigéad ascorbic mar chaighdeán don turgnamh. Úsáideadh an chothromóid seo a leanas chun gníomhaíocht scabhála DPPH gach sampla a chinneadh:

nuair is ionann Ac agus ionsúiteacht an imoibrithe rialaithe, a dhéantar trí 100 L eatánóil a mheascadh le 100 L den tuaslagán DPPH, agus seasann At ionsúcht an tsampla tástála. Rinneadh turgnaimh i dtrílets. Ríomhadh an luach IC50 do gach sampla. Léiríodh leibhéal níos airde de ghníomhaíocht radacach saor in aisce leis an ionsúiteacht níos ísle ag an meascán imoibriúcháin.

2.7.4. Measúnacht Fosfamoluibdín (PM).

Cinneadh gníomhaíocht frithocsaídeach iomlán trí úsáid a bhaint as teicníc chaighdeánach Prieto et al., 1999. Fuair ​​gach promhadán ina raibh 3 ml d'uisce driogtha agus 1 ml de thuaslagán imoibrí molybdate eastóscán duille uiscí de V. leucocsalon agus a FeNPanna i dtiúchain éagsúla idir 100 µL agus 500 µL. Goradh na feadáin seo ar feadh 90 nóiméad ag 95 ◦C. Rinneadh ionsúchán an mheascáin imoibriúcháin a thomhas ag 695 nm tar éis na feadáin seo a choigeartú go teocht an tseomra ar feadh 20-30 nóiméad tar éis goir. Ba é an caighdeán tagartha aigéad ascorbic [35].

2.8. Measúnú ar Ghníomhaíocht Fhrith-Alasta In Vitro

Rinneadh measúnú ar éifeacht frith-athlastach sliocht duille uiscí V. leucoxylon agus a FeNPanna ginte ag baint úsáide as an modh dínádúraithe próitéine atá leagtha amach ag Elias et al., 1988, le modhnuithe beaga [36]. Mar dhruga caighdeánach, baineadh úsáid as sóidiam diclofenac. Meascaíodh meascán imoibrithe ina raibh 2 ml de thiúchan aitheanta FeNPanna monaraithe (100 g/mL) le sóidiam caighdeánach diclofenac (100 g/mL) agus 2.8 ml de saline maolánach fosfáite (pH 6.4) le 2 mL d'uibheacha cearc úr. albaimin (1 mM) agus gortha ag 27 ± 1 ◦C ar feadh 15 nóiméad. Spreagadh dínádúrú trí mheascán an imoibrithe a chur i ndabhach uisce ag 70 ◦C ar feadh 10 nóiméad. Tar éis fuaraithe, tomhaiseadh an t-ionsúchtúchán ag 660 nm ag baint úsáide as uisce driogtha dúbailte mar bhán. Rinneadh gach tástáil trí huaire. Úsáideadh an fhoirmle seo a leanas chun an cosc ​​faoin gcéad ar dhínádúrú próitéin a ríomh:

nuair, Ag=ionsúchán an tsampla tástála; Ac=ionsúchán rialaithe.

2.9. Cinneadh ar Ghníomhaíocht Chitotocsaineach agus Frithailse na Nanacháithníní Iarainn Ag Úsáid Measúnacht MTT

Rinneadh measúnú ar éifeacht V. leucoxylon agus a FeNPanna sintéisithe ar inmharthanacht cealla fibroblast neamh-ailse L292 agus a ghníomhaíocht frith-ailse ar ailse craicinn (A375), ailse scamhóg (A549), agus ailse béil (KB-3-1). ag baint úsáide as an measúnú caighdeánach MTT, de réir Carmichael et al., (1987) [37]. Fuarthas na línte cille go léir ón Ionad Náisiúnta um Eolaíocht na gCeall (NCCS), Pune, India. Díorthaíodh luachanna coiscthe céatadáin ar fhás cille (IC50) ag baint úsáide as cuair dáileog-fhreagartha do gach líne cille, agus úsáideadh an fhoirmle seo a leanas chun an céatadán cosc ​​fáis a ríomh. Tá comhshó MTT go táirge formazan corcra ag mitochondrial dehydrogenase cealla sláintiúil mar bhunús leis an turgnamh seo [38].

2. 10. Staidéar Créachta In Vitro trí Thástáil Scratch Assay a Úsáid

Scrúdaíodh cumais scaipeadh agus imirce cealla líne cealla L292 de bharr samplaí le tiúchain aitheanta de eastóscadh plandaí agus nanacháithníní iarainn san imscrúdú reatha [39]. Baineadh úsáid as plátaí saothraithe cille ainmhithe le meáin DMEM arna bhforlíonadh le 10 faoin gcéad FBS agus 2 faoin gcéad antaibheathach Pen-Strep (Darmstadt, an Ghearmáin) chun tús a chur leis an bpróiseas saothraithe cille. Baineadh úsáid as tip pípéad plaisteach steiriúil chun comhshruth aonchiseal na gceall a scríobadh tar éis dóibh fás go timpeall 50,000 cill in aghaidh an ml. Baineadh úsáid as réiteach PBS chun aon bhruscar cille nach dteastaíonn a bhaint. Mar rialú diúltach, baineadh úsáid as cealla neamhchóireáilte, ach baineadh úsáid as aigéad ascorbic caighdeánach mar rialú dearfach le haghaidh samplaí polaiméire de thiúchan aitheanta. Ar feadh na 24 h eile, coinníodh na cealla ag 37 ◦C le 5 faoin gcéad CO2. Chun imirce choibhneasta cille agus dúnadh créachta a scrúdú, rinneadh na sraitheanna cille scríobtha a ghoradh agus a íomháú ag eatraimh ó 0 h go 6 h go 12 h agus 24 h. Baineadh úsáid as calabrú tomhais MagVision Software (X64, 2016, Magnus, New Delhi, India) ag taifeach 4 × chun an t-achar bearna a chainníochtú. Chun an ráta dúnta créachta agus imirce a chinneadh, úsáideadh an fhoirmle a thaispeántar thíos:

maidir leis an méid seo a leanas: A0h=limistéar créachta tomhaiste díreach tar éis scríobadh; AT=achar créachta tomhaiste tar éis h uair an chloig; Rm=ráta imirce (µm/u); Wf=leithead créachta tosaigh (µm); agus T=am imirce (uair an chloig).

2. 11. Anailís staitistiúil

Cuirtear na sonraí i láthair mar mheándiall caighdeánach agus earráid chaighdeánach, agus rinneadh gach turgnamh trí huaire. Baineadh úsáid as bogearraí SPSS leagan 20 chun anailís aontreo ar an éagsúlacht (ANOVA) a dhéanamh ar na difríochtaí meánscóir a bhí ann idir na grúpaí.

Iarr tuilleadh:

Ríomhphost:wallence.suen@wecistanche.com

Whatsapp/Teil: móide 86 15292862950

SIOPA:

https://www.xjcistanche.com/cistanche-shop