Cinneadh Cúig Chomhpháirt i Rehmannia Glutinosa Agus Bunú Méarlorg HPLC

Coimriú:An modh a chinneadh an t-ábhar na cúig chomhpháirt iRehmannia glutinosa, eadhon,rehmannoside D, leonúirin,echinacoside,cistanches Aagusverbcosside, a bunaíodh, agus bunaíodh méarloirg crómatagrafaíochta leachtach ardfheidhmíochta (HPLC) de Rehmannia glutinosa chun bunús eolaíoch a sholáthar do rialú cáilíochta Rehmannia glutinosa. Baineadh úsáid as colún Shiseido CAPCELL PAK C18, le tuaslagán aigéad formach acetonitrile-0.1% mar an chéim shoghluaiste, elution grádán, teocht colún 30 céim , cinneadh tonnfhad athraitheach, agus ráta sreafa de 1.0 mL/nóim. Rinne an "Córas Measúnaithe Cosúlachta Méarlorg Méarloirg Chrómatagrafach Leigheas na Síne (2012 Edition)" software to evaluate its quality consistency. The results showed that according to the established content determination method, the five components had a good linear relationship within their respective concentration ranges (R2>{{0}}.999 0), ba é 0.12%~1.58% an RSD na tástála beachtas, na tástála atrialltachta agus na tástála cobhsaíochta, agus ba é an meánráta aisghabhála sampla ná 96.5%. ~98.6%; d'aithin méarloirg seanbhunaithe Rehmannia glutinosa HPLC 23 buaic coitianta, agus ba é an cosúlacht idir an sampla Rehmannia glutinosa agus an méarloirg rialaithe ná 0.904~0.950. Tugann na torthaí le fios go bhfuil an modh socraithe ábhar bunaithe agus méarloirg HPLC oiriúnach chun cáilíocht Rehmannia glutinosa a mheas agus aithint amh Rehmannia glutinosa agus Rehmannia glutinosa bruite, le cruinneas ard agus in-atáirgtheacht mhaith, agus is féidir leo tacaíocht theicniúil a sholáthar maidir le rialú cáilíochta. Ábhair íocshláinte Rehmannia glutinosa.

Eochairfhocail:Rehmannia glutinosa; cinneadh ábhar; méarlorg ; meastóireacht cáilíochta

CISTANCHE Luibhe NUA LEECHINACOSIDE,AN CISTEAN AAGUSVERBASCOSIDE

Rehmannia glutinosaan tiúbair fréimhe úr nó triomaithe den phlanda Scrophulariaceae Rehmannia glutinosa Libosch. Mar gheall ar mhodhanna próiseála éagsúla, tá sé roinnte go príomha i rehmannia úr, rehmannia amh agus rehmannia bruite [1-2]. Is iad na príomhréimsí táirgthe talamh Henan, Shanxi, Shaanxi, etc. Ina measc, tá éifeachtaí ag rehmannia glutinosa amh fola teasa agus fuaraithe a ghlanadh, ceann a chothú agus táirgeadh sreabhán a chur chun cinn, agus úsáidtear é go príomha chun teas a chóireáil san fhuil, tocsainí te agus spotaí, etc .; Tá éifeachtaí ag rehmannia glutinosa bruite fola agus ceann nourishing, athlánú bunúsach agus smior athlánaithe, agus úsáidtear go príomha é chun easnamh fola, clóiróis, etc. Palpitations, restlessness, etc.[1-2] a chóireáil. Tá airíonna agus blasanna éagsúla ag an dá cheann, ach baineann an dá cheann leis an ae agus fadlínte na duáin. Tá comhpháirteanna ceimiceacha casta ag Rehmannia glutinosa, go príomha lena n-áirítear iridoids, ianóin, gliocóisídí feinileatánóil, flavonoids, etc. [3-5].

Tar éis Rehmannia glutinosa a phróiseáil trí mhodhanna próiseála éagsúla, athraíonn cineálacha, ábhar agus comhréireanna na gcomhpháirteanna ceimiceacha i ngach táirge próiseáilte go mór, rud a fhágann go bhfuil difríochtaí suntasacha ina ghníomhaíocht cógaseolaíochta [6-10]. de réir

Léiríonn staidéir ghaolmhara[11-12] gur tháinig laghdú suntasach ar inneachar na gcomhpháirteanna ceimiceacha ar nós catalpol, lus na máthar, stachyose, agus aimínaigéid le linn an phróisis Rehmannia glutinosa ag athrú ó "amh" go "cócaráilte", agus an t-ábhar. de fhruchtós, 5-hiodrocsaimethylfurfural, etc. Méadaíodh go suntasach an t-ábhar atá ag , isorebascoside, etc. Faoi láthair, úsáideann rialú cáilíochta rehmannia glutinosa amh agus bruite go príomha ábhar catalpol agus rehmanniaside D mar tháscairí meastóireachta. Tá táscairí an chórais mheastóireachta sách aonair, rud a fhágann go bhfuil sé deacair rialú cuimsitheach a dhéanamh ar cháilíocht rehmannia glutinosa. Ina theannta sin, léirigh staidéir go n-athraíonn ábhar rehmannia glutinosa D roimh agus tar éis a phróiseáil. Tá sé beag agus tá droch-shainiúlacht aige maidir le saintréithe na n-athruithe ar chomhdhéanamh tar éis próiseála agus an méid próiseála [12-13].

Dá bhrí sin, chun cáilíocht Rehmannia glutinosa a mheas níos cuimsithí, bhunaigh an staidéar seo an gaol idir rehmanniaside D agus Yimu i Rehmannia glutinosa.

Modhanna cinnteoireachta maidir le hábhar cúig chomhpháirt choitianta, lena n-áirítear glucoside, echinaceaside, cistancheoside A, agus verbascoside, agus bhunaigh siad méarloirg HPLC de Rehmannia glutinosa chun anailís a dhéanamh ar ábhar na bpríomhchodanna i Rehmannia glutinosa ó limistéir táirgthe éagsúla agus roimh agus tar éis próiseála, d’fhonn faisnéis a sholáthar maidir le rialú cáilíochta Rehmannia glutinosa. Tacaíocht theicniúil.

Ionstraimí, imoibrithe agus drugaí tástála

Agilent 1260 crómatagraf leachtach ardfheidhmíochta (is é an brathadóir eagar dé-óid); raon athraitheach cothromaíocht anailíse leictreonach (METTLER TOLEDO); glantóir ultrasonaic digiteach (Shanghai Ultrasonach Instrument Factory, KH-500DE). Is grád anailíseach é meatánól (Sinopharm Group); is grád crómatagrafach é acetonitrile (Merck); uisce i mbuidéil Watsons. Substaint thagartha Rehmannia glutinosa D (uimhir bhaisc RFSD8401909016, íonacht 98.0%), substaint thagartha glycosíde leonurus (uimhir bhaisc RFS-Y22002208010, íonacht 98.0%), agus substaint thagartha cistancheside A (batch uimhir RFS-R05002009014, íonacht 96.0%) go léir a ceannaíodh ó Chengdu Ruifensidedan Biotechnology Co., Ltd; ceannaíodh substaint tagartha echinacoside (uimhir bhaisc 111670-201907, íonacht 91.8%) agus substaint thagartha verbascoside (uimhir bhaisc 11530-201914, íonacht 95.2%) ó Institiúidí Cigireachta Bia agus Drugaí na Síne. Bailíodh samplaí Rehmannia (SX1~SX4, HN1 agus HN2) ó limistéir táirgthe éagsúla (féach Tábla 1), a raibh SX4 agus HN2 galaithe ag SX1 agus HN1 faoi seach, agus bailíodh SX2 agus SX3 ón limistéar táirgthe céanna. D'aithin Song Pingshun, príomhchleachtóir leighis na Síne de chuid Gansu Provincial Institute um Rialú Drugaí na samplaí go léir mar shamplaí barántúla.

Tábla 1 Eolas ar shamplaí Seamhan Rehmanniae

2.1 Coinníollacha crómatagrafacha

Baineadh úsáid as an gcolún Shiseido CAPCELL PAK C18 (250.0 mm × 4.6 mm, 5 μm), úsáideadh aicéatóintríle mar chéim shoghluaiste A, agus úsáideadh tuaslagán aigéad formach 0.1% mar chéim shoghluaiste B. . Ba iad na coinníollacha elution grádáin: 0-3 nóim, 1%A; 3-9 nóim, 1%A→5%A; 9-24 nóim, 5%A→35%A; 24-35 nóim, 35%A→65%A; 35-40 nóim, 65%A→90%A. Brath tonnfhad inathraithe (0-24 nóim, 203 nm; 24-40 nóim, 330 nm). Ba é an méid insteallta 15 μL den réiteach tagartha agus 20 μL den réiteach samplach.

2.2 Réitigh a ullmhú

2.2.1 Réitigh tagartha a ullmhú

Glac méideanna cuí de na cúig shubstaint tagartha thuas, cuir 70% meatánóil leis chun tuaslagán tagartha measctha a ullmhú a bhfuil mais tiúchan 0.4 mg/mL aige.

2.2.2 Ullmhúchán réitigh tástála

Meáigh thart ar 1.0 g de phúdar Rehmannia (trí chriathar Uimh. 2), meáigh go cruinn, cuir i bhfleascán cónúil stoptha, cuir go cruinn 25 mL de 70% meatánól, séala, meáigh, cóireáil ultrasonaic (cumhacht 300). W, minicíocht 50 kHz) ar feadh 30 nóiméad, lig dó fuarú go teocht an tseomra, meáigh arís, déan suas an mais caillte le 70% meatánól, scag, agus tóg an scagáit chun a fháil.

2.3 Imscrúdú modheolaíochta

2.3.1 Imscrúdú sainiúlachta

Glac an tuaslagán tagartha measctha faoi "2.2.1" agus an tuaslagán tástála (sampla SX1) faoi "2.2.2", agus instealladh agus tomhas de réir na gcoinníollacha crómatagrafaíochta faoi "2.1". Léiríonn na torthaí go gcuireann crómatagram sampla Rehmannia buaic chromatagrafaíochta i láthair leis an am coinneála céanna le caighdeáin tagartha Rehmannia glutinosa D, Leonurin, Echinacoside, Cistanche deserticola A, agus Verbascoside (féach Fíor 1), rud a léiríonn go bhfuil an modh seo láidir. sainiúlacht.

2.3.2 Imscrúdú caidrimh líneach

Cuir 70% meatánól leis an réiteach tagartha measctha, caolaigh 5 huaire, 10 uair, 25 uair, 50 uair, 100 uair, agus 250 uair faoi seach, agus instealladh agus tomhas de réir na gcoinníollacha crómatagrafaíochta faoi "2.1". Tarraingíodh na cuair chaighdeánacha le mais tiúchan gach tagartha mar an ais chothrománach (x) agus an buaic-achar crómatagrafaíochta comhfhreagrach mar an ais ingearach (y). Taispeántar na torthaí i dTábla 2, rud a léiríonn go bhfuil caidreamh líneach maith ag gach comhpháirt laistigh den raon mais tiúchana comhfhreagrach.

1.rehmannioside D; 2. leouride; 3. echinacoside; 4. castanoside A;5. aicteóis

Fíor 1 Crómatagram d'imscrúdú sainiúlachta

Tábla 2 Gaol líneach de 5 chomhpháirt sa Seamhan Rehmanniae

2.3.3 Imscrúdú beachta

Glac an réiteach tástála (sampla SX1) faoi "2.2.2", agus déan an tástáil insteallta de réir na gcoinníollacha crómatagrafacha faoi "2.1". Instealladh an sampla 6 huaire go leanúnach, taifead achar buaic gach comhpháirt, agus ríomh an limistéar buaic RSD de rehmannia glutinosa D, glycosíd motherwort, glycosíd echinacea, glycoside cistanche A, agus verbascoside sa sampla tástála a bheith 0. 46%, 0.12%, 0.85%, 0.48%, agus 0.82%, faoi seach, rud a léiríonn go bhfuil cruinneas maith ag an ionstraim.

2.3.4 Staidéar Atrialach

Ullmhaíodh sé shampla den fhréamhshampla Rehmannia céanna (SX1) go comhthreomhar de réir an mhodha i "2.2.2" agus iad a instealladh agus a chinneadh de réir na gcoinníollacha crómatagrafaíochta i "2.1". Ba iad na RSDanna d'ábhar glycosíde fréimhe rehmannia D, glycosíd motherwort, glycoside echinacea, glycoside cistanche A agus verbascoside sna sé shampla 0.46%, 0.69%, 1.42%, {{ 12}}.48% agus 1.58%, faoi seach, rud a léiríonn go bhfuil dea-atrialltacht ag an modh.

2.3.5 Staidéar Cobhsaíochta

Glac an réiteach tástála (sampla SX1) faoi "2.2.2" agus instealladh agus tomhas de réir na gcoinníollacha crómatagrafaíochta faoi "2.1" ag 0 h, 2 h, 4 h, 6 h, 8 h, 1{{ 15}} h, 12 h, 18 h, agus 24 h, faoi seach. Ba iad na RSD de na buaic-réimsí de rehmannia glutinosa D, gliocóisíd lus na máthar, echinacoside, glycosíd cistanche A, agus verbascoside ná 0.94%, 1.04%, 0.73%. , 0.83%, agus 0.71%, faoi seach, rud a léiríonn go bhfuil cobhsaíocht mhaith ag an réiteach tástála laistigh de 24 h.

2.3.6 Ráta aisghabhála samplach

{{0}}. Rinneadh 5 g de fhréamhshampla Rehmannia (SX1) a raibh 5 chomhpháirt ann a mheá go cruinn i bhfleascán cónúil stoptha, agus cuireadh 6 chuid chomhthreomhara leis, agus cuireadh 5 tuaslagán tagartha de thiúchan áirithe leis faoi ​​seach. Ullmhaíodh na samplaí de réir an mhodha faoi "2.2.2", agus rinneadh na samplaí a instealladh agus a thomhas de réir na gcoinníollacha crómatagrafaíochta faoi "2.1". Ríomhadh an ráta aisghabhála, agus léirítear na torthaí i dTábla 3. Ba é meánráta aisghabhála sampla gach comhpháirte ná 96.5% ~ 98.6%, agus bhí an RSD 0.73% ~ 1.52%, rud a léiríonn go bhfuil cruinneas maith ag an modh.