Baint Glicóisídí Feinileatánóideach Ó Cistanche Tubulosa Trí Eastóscadh Homogenization lomadh Ardluais

Teagmháil: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Ríomhphost:audrey.hu@wecistanche.com

Wenjing Pei agus Ruili Guo

Cúlra:

Cistanche tubulosaIs leigheas traidisiúnta Síneach cáiliúil é de thionscnamh Xinjiang. Tá sé scaipthe go forleathan i dtuaisceart na hAfraice, san India, etc. Cuspóir: An phríomh-chomhpháirt bhithghníomhach deC. tubulosais gliocóisídí feinileatánóideach (PhGanna). Is iad Echinacoside agus acteoside na comhpháirteanna táscacha chun PhG a chinneadh agus úsáidtear iad go príomha le haghaidh cosaint ae, cosaint imdhíonachta, etc. Dá bhrí sin, tá sé an-tábhachtach na PhGanna a bhaint as C. tubulosa. Modhanna: Sa staidéar seo, rinneadh comparáid idir na modhanna eastóscadh ultrafhuaime le cúnamh (UAE), eastóscadh le cúnamh micreathonn (MAE), agus eastóscadh homogenization lomadh ardluais (HSHE). Ina theannta sin, rinneadh barrfheabhsú ar choinníollacha eastósctha an mhodha HSHE. Torthaí: Léirigh na torthaí go raibh an modh HSHE níos fearr ná an dá mhodh UAE agus MAE, agus na paraiméadair eastóscadh optamach de HSHE bhí tiúchan eatánóil de 5- faoin gcéad, teocht eastóscadh de 70 céim, luas rothlaithe de 16000 rpm, am eastósctha 2 nóiméad, cóimheas soladach-go-leachtach de 1:9, agus timthriall eastósctha amháin. Ba é an táirgeacht echinacoside agus acteoside 1.366 agus 0.519 faoin gcéad , faoi seach, agus na rátaí aistrithe echinacoside agus acteoside shroich 87 agus 94 faoin gcéad , faoi seach. Conclúidí: Is féidir a thabhairt i gcrích gur teicníc shimplí, thapa agus éifeachtach é modh HSHE chun PhGanna a bhaint as C. tubulosa. Buaicphointí: Tá imscrúdú déanta ar mhodh HSHE atá éifeachtach agus neamhdhíobhálach don chomhshaol chun PhGanna a bhaint as C. tubulosa. Fuarthas na coinníollacha is fearr a bhaineann leis an modh HSHE chun PhGanna a bhaint as C. tubulosa. Soláthraíonn an taighde seo modh nua le haghaidh eastóscadh tionsclaíoch PhGanna óC. tubulosa.

Cistanche tubulosa

Cistanche tubulosaIs leigheas Sínis coitianta traidisiúnta a thionscnaíonn i Xinjiang. Tá sé scaipthe go forleathan i dtuaisceart na hAfraice, Leithinis na hAraibe, an Phacastáin, agus an India agus taifeadadh go hoifigiúil é i Pharmacopoeia na Síne i 2010. Is é an príomh-chomhpháirt bithghníomhach deC. tubulosais gliocóisídí feinileatánóideach (PhGanna), aicme de tháirgí nádúrtha intuaslagtha in uisce lena n-áirítear éiceachóisíd, aicteóisíd, isoacteoside, agus 2-aicéitilacteoside (1, 2). Is éard atá i struchtúr PhGanna aigéad cinnamic agus moieties hidroxyphenylethyl, agus tá an dá cheann acu ceangailte le -glucopyranose trí naisc eistear agus glycosidic, faoi seach (3). Staidéar cógaseolaíochta Tá sé léirithe go bhfuil PhGs de C. tubulosa feidhmeanna leighis go leor, mar shampla antifatigue (4), neuroprotective (5-7), ae cosanta (8-10), agus éifeachtaí immunoprotective (11). Mar sin, tá tábhacht mhór ag baint le heastóscadh éifeachtach PhG ó C. tubulosa maidir le forbairt agus úsáid táirgí nádúrtha.

Is iad na modhanna eastósctha traidisiúnta atá ag PhGanna faoi láthair ná eastóscadh te-aife, eastóscadh le cúnamh ultrafhuaime (UAE), agus eastóscadh le cúnamh micreathonn (MAE; 12–16). Tá míbhuntáistí éagsúla ag na modhanna seo, mar shampla éifeachtacht íseal, amanna eastóscadh fada, agus costais arda. I gcomparáid leis na modhanna traidisiúnta, is modh eastósctha nua atá ag teacht chun cinn é an modh eastóscadh homogenization lomadh ardluais (HSHE) agus tá na buntáistí a bhaineann le hamanna eastósctha níos tapúla, níos lú dramhaíola tuaslagóirí, táirgeacht níos airde, gléas níos simplí, agus oibriú níos éasca (17). Tá prionsabal oibre an mhodha HSHE bunaithe ar ghearrthóir istigh rothlach atá tiomáinte ag mótar ardluais. Táirgeann na gearrthóirí inmheánacha agus seachtracha fórsa lomadh cumhachtach chun cur isteach ar na samplaí agus iad a mheascadh. Idir an dá linn, tá an gearrthóir le rothlú ardluais ina chúis le difríochtaí brú idir cuas istigh agus taobh amuigh an gearrthóra, agus mar thoradh ar aistriú mais idir na samplaí agus na tuaslagóirí. Leis an meascán d'fhórsa lomadh ard, fórsa imbhuailte, brú, agus fórsaí eile, is féidir cothromaíocht intuaslagtha idir samplaí soladacha agus tuaslagóirí a bhaint amach go tapa (18). Mar sin, is féidir an próiseas eastósctha HSHE a chur i gcrích i gceann cúpla nóiméad, agus fiú chomh tapa agus is an iliomad soicind (19-22).

Le déanaí, rinneadh iniúchadh ar HSHE maidir le comhpháirteanna bithghníomhacha a bhaint as táirgí nádúrtha éagsúla (23-25). Tá Cheng et al. úsáid HSHE chun cúig lignans a bhaint as torthaí Schisandra Chinensis (26). Léirigh na torthaí gurb iad na coinníollacha is fearr ná tiúchan eatánóil de 75 faoin gcéad, am eastósctha 1 nóiméad, cóimheas soladach-go-leachtach de 1:19, voltas eastósctha 180 V, agus cáithnín samplach. méid 120 mogaill. Ba é toradh iomlán na gcúig lignans ná 13.89 ± 0.014 mg/g faoi na coinníollacha optamaithe. Tá Tang et al. úsáid HSHE chun ola bithghníomhach a fháil ó shíolta perilla (27). Ba iad na coinníollacha is fearr ná am eastósctha 2 min, cóimheas soladach-le-leachtach de 1:10, voltas eastósctha 150 V, agus dhá thimthriall eastósctha. Shroich toradh na síolta ola perilla 59.3 faoin gcéad. Léiríonn na torthaí thuas go bhfuil na buntáistí a bhaineann le hamanna eastóscadh gearr, costais íseal, agus táirgeacht ard ag HSHE. Mar sin féin, tá easpa taighde ar asbhaint PhGanna ag FSS.

Sa staidéar reatha, baineadh úsáid as HSHE chun iniúchadh a dhéanamh ar a fheidhm a d’fhéadfaí a bhaint as PhGanna a bhaint asC. tubulosa. Chinn HPLC toradh PhGanna. Rinneadh comparáid idir na trí mhodh eastósctha, HSHE, UAE, agus MAE, faoi na coinníollacha céanna. Rinneadh imscrúdú ar éifeachtaí tiúchan eatánóil, teocht eastósctha, luas rothlaithe, am eastósctha, cóimheas soladach-go-leachtach, agus líon na dtimthriallta eastósctha den toradh. Déantar buntáistí agus míbhuntáistí na hoibre seo agus na tagairtí a chur i gcomparáid agus a phlé.

Abhair agus modhanna

Imoibrithe Ábhar agus Ceimiceacha

C. tubulosaceannaíodh ó Xinjiang Congrongtang Bitheolaíochta Teicneolaíocht Co, Teo (Xinjiang, an tSín). Ceannaíodh caighdeáin echinacoside (íonachtaí Níos mó ná nó cothrom le 98 faoin gcéad ) agus acteoside (íonachtaí Níos mó ná nó cothrom le 98 faoin gcéad) ó Shanghai Standard Biological Technology Co., Ltd (Shanghai, an tSín). Bhí aicéatóintríle, meatánól, agus aigéad aicéiteach de ghrád HPLC (Fisher Scientific, Fair Lawn, NJ). Ceannaíodh an t-eatánól de ghrád anailíseach ó Tianjin Yongsheng Fine Chemical Co., Ltd (Tianjin, an tSín). Baineadh úsáid as uisce dí-ianaithe le linn na dturgnaimh.

Anailís HPLC

Rinneadh anailís HPLC ar chrómatagrafaíocht leachta Waters e2695 (Waters, Baile na nGallóglach, MA) a bhí feistithe le Brathadóir 2489 UV/Infheicthe agus colún Siméadrachta C18 (Uiscí), 250 × 4.6 mm, méid cáithníní 5 μm. Rinneadh anailís ar na tiúchain echinacoside agus acteoside trí mhodh HPLC. Is éard a bhí sa chéim shoghluaiste ná (1) aicéatóintríle agus (2) tuaslagán uiscí d'aigéad aicéiteach oighreach 2 faoin gcéad. Léirítear an clár leachtú grádáin i dTábla 1.

Ba é an tonnfhad braite ná 330 nm, ba é an ráta sreafa 1 mL / min, ba é an toirt insteallta 10 μL, agus socraíodh teocht an oigheann ag 30 céim. Deimhníodh buaic crómatagrafaíochta na hanailíte trí a chuid ama coinneála a chur i gcomparáid leis na caighdeáin. Rinneadh cainníochtú tríd an mbuaic a chomhtháthú ag baint úsáide as modh caighdeánach seachtrach.

Rinneadh an tástáil bheachtais trí na samplaí eastósctha céanna a instealladh cúig huaire. Maidir leis an tástáil cobhsaíochta, rinneadh anailís ar na samplaí céanna in incrimintí de 0, 1, 2, 4, 12, 24, agus 48 h. Rinneadh na tástálacha aisghabhála echinacoside agus acteoside trí na caighdeáin a chur leis na samplaí eastósctha. Taifeadadh na buaic-réimsí agus na hamanna coinneála uile echinacoside agus acteoside. Tá torthaí na gcuar calabrúcháin le haghaidh echinacoside agus acteoside liostaithe i dTábla 2.

An Toradh a Ríomh

Baineadh úsáid as Echinacoside agus acteoside mar na comhpháirteanna táscacha chun PhGanna a chinneadh. Ríomhadh toradh echinacoside nó acteoside ag baint úsáide as an gcothromóid seo a leanas:

Y=CV/W×100 faoin gcéad (1)

i gcás Y=táirgeacht echinacoside nó acteoside ( faoin gcéad ); C=tiúchan echinacoside nó acteoside (mg/mL); V=toirt an tuaslagáin eastósctha (mL); agus W=meáchan an púdar C. tubulosa (mg).

Modhanna Asbhainte PhGanna

Rinneadh na gais C. tubulosa a mheilt ar dtús le grinder leictreach (JC-500g; Yongkang Kaiyuan Industry & Trade Co., Ltd, Yongkang, an tSín) agus a scagadh le criathar scagaire (thart ar 380 μm). Ansin, triomaíodh an púdar C. tubulosa san oigheann ag 70 céim go dtí go raibh an meáchan seasmhach. Measctha cúig ghram C. tubulosa púdar leis an tuaslagóir eastósctha agus a chur i buidéal eastóscadh. Ina dhiaidh sin, réamhthéitear an meascán leachtach (30-80 céim) ar feadh 5 nóiméad i ndabhach uisce ar theocht tairiseach (DF-101S; Jintan Analytical Instrument Co., Ltd, Jintan, an tSín).

(a) Modh HSHE.—Córas FA25 (FLUKO Co., Ltd, Shanghai, China) a rinne an HSHE, arbh éard a bhí ann gearrthóir rothlach, mótar ardluais, agus rialtóir. Rialaíodh luas rothlaithe an ghearrthóra istigh sa raon 10000-28000 rpm, agus coigeartaíodh na hamanna eastósctha sa raon 2-15 min.

(b) Modh UAE.—Cúig ghram an sampla triomaithe agus 300 ml meatánóil a mheá go cruinn agus a chur isteach i mbuidéal eastósctha. Tumadh an buidéal eastósctha isteach i ndabhach ultrasonaic agus rinneadh é ag cumhacht ultrasonaic 300 W ar feadh 10 nóiméad. Socraíodh an teocht eastósctha ag 30 céim.

(c) Modh MAE.—Cúig ghram an sampla triomaithe agus 300 ml meatánóil a mheá go cruinn agus a chur isteach i mbuidéal eastósctha. Cuireadh an buidéal eastósctha isteach san imoibreoir micreathonn agus rinneadh é ag 180 W ar feadh 10 nóiméad. Socraíodh an teocht eastósctha ag 30 céim.

Cuireadh an modh HSHE i gcomparáid le modhanna UAE agus MAE leis an tuaslagóir eastósctha céanna, an t-am eastósctha, an teocht eastósctha, an cóimheas soladach-go-leachtach, agus an uimhir timthriall eastósctha. Scagadh membrane 0.22 μm an tuaslagán eastósctha agus rinneadh anailís air trí HPLC chun tiúchain echinacoside agus aicteóisíd a chinneadh. Rinneadh na próisis eastósctha go léir arís agus arís eile trí huaire

Rátaí Aistrithe a Chinneadh

Bunaithe ar an modh caighdeánach sa 2015 China Pharmacopoeia, socraíodh an t-ábhar echinacoside agus acteoside i púdar C. tubulosa (28). Rinneadh púdar amháin C. tubulosa a mheá go cruinn agus 50 mL 50 faoin gcéad meatánóil agus cuireadh isteach i bhfleascán toirtmhéadrach donn 50 mL iad. Meáigh an meascán leachtach agus é sáithithe ar feadh 30 nóiméad. Ansin, tumadh an fleascán toirtmhéadrach donn i ndabhach ultrasonaic agus rinneadh é ag cumhacht ultrasonaic de 250 W agus minicíocht 35 kHz ar feadh 40 nóiméad. Rinneadh an meascán leachtach a mheá arís, agus cuireadh meatánól 50 faoin gcéad leis an soláthar le haghaidh caillteanas tuaslagóra. Scagadh membrane 0.22 μm an réiteach eastósctha agus rinneadh anailís air ag baint úsáide as HPLC chun tiúchain echinacoside agus acteoside a chinneadh. Rinneadh na próisis eastósctha arís agus arís eile trí huaire.

Ríomhadh na rátaí aistrithe echinacoside nó acteoside ag baint úsáide as an gcothromóid seo a leanas:

X= M1/M2 × 100 faoin gcéad (2)

áit a bhfuil X=ráta aistrithe echinacoside nó acteoside ( faoin gcéad ); M1=cáilíocht echinacoside nó aicteóisíd sa sliocht (mg); agus M2=cáilíocht echinacoside nó acteoside i púdar C. tubulosa (mg).

Torthaí agus Plé

Modh HPLC a bhailíochtú

Léirítear próifílí HPLC echinacoside agus acteoside ó C. tubulosa ag baint úsáide as HSHE i bhFíor 1. Ba é RSD na mbuaic-réimsí echinacoside agus acteoside ná 1.89 agus 1.40 faoin gcéad, faoi seach. Léirigh na torthaí go bhfuil cruinneas maith ag modh HPLC san anailís chainníochtúil ar an echinacoside agus acteoside. Ag amanna éagsúla (0-48 h), b'ionann RSDanna na mbuaic-réimsí echinacoside agus acteoside 1.71 agus 1.70 faoin gcéad , faoi seach, rud a thugann le fios go raibh an sampla cobhsaí i 48 h. B'ionann aisghabháil echinacoside agus acteoside 99.3 agus 99.1 faoin gcéad , faoi seach, agus bhí a n-RSD 0.70 agus 0.67 faoin gcéad , faoi seach, rud a dheimhnigh iontaofacht an mhodha HPLC.

Comparáid idir na Modhanna Éagsúla Eastósctha

Rinneadh comparáid idir an modh HSHE agus modhanna MAE agus UAE maidir le táirgeacht echinacoside agus acteoside, a léirítear na torthaí i bhFíor 2. Tugadh faoi deara go raibh táirgeacht echinacoside agus acteoside a fuair HSHE níos airde ná iad siúd a fuarthas. ag MAE agus UAE araon. I gcomparáid le MAE, bhí an táirgeacht echinacoside agus acteoside a fuair HSHE níos airde de 20.5 agus 20.8 faoin gcéad, faoi seach. Agus i gcomparáid le UAE, bhí an táirgeacht echinacoside agus acteoside a fuair HSHE níos mó ag 6.6 agus 7.4 faoin gcéad , faoi seach. Tugann na torthaí seo le fios gur féidir le HSHE méadú suntasach a dhéanamh ar thorthaí PhGanna.

Optamú Modh HSHE

Áirítear ar pharaiméadair eastóscadh PhG ag HSHE tiúchan eatánóil, teocht eastósctha, luas rothlaithe, am eastósctha, cóimheas soladach-go-leachtach, agus líon na dtimthriallta eastósctha (26, 29).

Éifeacht Tiúchan Eatánóil ar Bhaint PhGanna

Is fachtóir tábhachtach é tiúchan eatánóil a théann i bhfeidhm ar thorthaí PhGanna. Mar a léirítear i bhFíor 3, rinneadh imscrúdú ar thorthaí echinacoside agus acteoside ó C. tubulosa faoi thiúchan eatánóil éagsúla. Léirigh sé gur mhéadaigh táirgeacht echinacoside ó 0 go 30 faoin gcéad agus ansin laghdaigh sé ó 30 go 90 faoin gcéad le méadú ar na tiúchan eatánóil. Mhéadaigh an táirgeacht acteoside ó 0 go 70 faoin gcéad agus ansin laghdaigh sé ó 70 go 90 faoin gcéad le méadú ar thiúchan eatánóil. Nuair a bhí an tiúchan eatánóil 50 faoin gcéad , bhí suim an táirgeacht echinacoside agus acteoside ag a uasta. Tá polaraíochtaí difriúla ag na tiúchain eatánóil éagsúla, rud a fhágann go bhfuil tuaslagthachtaí éagsúla echinacoside agus acteoside. Dá bhrí sin , ba é an tiúchan eatánóil is fearr is féidir 50 faoin gcéad .

Éifeacht Luas Rothlaithe ar Bhaint PhGanna

Taispeánann Figiúr 5 éifeachtaí luasanna rothlaithe éagsúla ar thorthaí PhGanna. Mhéadaigh táirgeacht echinacoside agus acteoside le luasanna rothlaithe méadaithe. Is féidir le méadú ar luas rothlaithe fórsa lomadh an ghearrthóra laistigh agus lasmuigh a mhéadú, rud a fhágann go dtiocfaidh méadú ar thorthaí PhG. Ba é an luas rothlaithe is fearr ná 16000 rpm.

Tionchar Ama Astarraingthe ar Eastóscadh PhGanna

Léirítear táirgeacht echinacoside agus acteoside faoi na hamanna eastósctha éagsúla i bhFíor 6. Bhí táirgeacht echinacoside agus acteoside cobhsaí le hamanna eastósctha méadaithe. Mar sin is féidir a thabhairt i gcrích gur féidir PhGanna a bhaint go hiomlán ó C. tubulosa i 2 min, agus ba é an t-am eastósctha is fearr ná 2 min.

Éifeacht Cóimheas Soladach le Leacht ar Eastóscadh PhGanna

Mar a léirítear i bhFíor 7, pléadh torthaí echinacoside agus acteoside faoi na cóimheasa difriúla soladach-go-leachtach. Mhéadaigh táirgeacht echinacoside agus acteoside ó 1:3 go 1:9 agus tháinig sé cobhsaí ó 1:9 go 1:24. Toisc nach féidir le méid beag tuaslagóir eastósctha echinacoside agus acteoside a dhíscaoileadh go hiomlán, laghdaíodh na rátaí mais aistrithe. Mar gheall ar eastóscadh iomarcach tuaslagóirí dramhaíl neamhriachtanach. Mar sin, ba é 1:9 an cóimheas soladach-le-leacht ab fhearr.

Tionchar Líon na dTimthriallta Astarraingthe ar Astarraingt PhGanna

Léiríonn Fíor 8 go bhfuil tionchar ag roinnt timthriallta eastósctha ar thorthaí PhGanna. Tháinig méadú ar tháirgeacht echinacoside agus acteoside le méadú ar líon na dtimthriallta eastósctha. Mar sin féin, mhéadaigh na hamanna eastósctha go suntasach le timthriallta eastóscadh méadaithe, agus ídíodh níos mó fuinnimh. Ba é an líon is fearr de thimthriallta eastósctha ná a haon.

An Modh HSHE a chur i gcomparáid le Modhanna Eastósctha Eile chun PhGanna a Bhaint

Tá torthaí an mhodha HSHE i gcomparáid le modhanna eastósctha eile chun PhGanna a bhaint as C. tubulosa liostaithe i dTábla 3. Tá HSHE níos simplí agus níos éasca ná na modhanna cúplála ar nós eastóscadh dhá chéim uiscí le cúnamh ultrafhuaime agus teicneolaíocht eastóscadh micreathonn ultrasonaic. modhanna. Ina theannta sin, tá brú eastóscadh HSHE níos ísle ná an modh eastóscadh leacht faoi bhrú, agus tá coinníollacha oibríochta an chéad cheann níos sábháilte. Níos tábhachtaí fós, is féidir a fheiceáil ó Tábla 3 go léiríonn HSHE an t-am eastósctha is giorra agus an tomhaltas is lú tuaslagóirí i measc na modhanna eastósctha go léir. Is féidir a thabhairt i gcrích go bhfuil go leor buntáistí ag modh HSHE, mar shampla ard-éifeachtúlacht, coinníollacha oibriúcháin éadroma, leibhéil tomhaltais íseal, trealamh simplí, agus oibriú éasca le haghaidh eastóscadh táirgí nádúrtha.

Conclúidí

Sa staidéar seo, rinneadh imscrúdú ar mhodh HSHE atá éifeachtach agus neamhdhíobhálach don chomhshaol chun PhGanna a bhaint as C. tubulosa. I gcomparáid leis na modhanna UAE agus MAE, táirgeann an modh nua HSHE toradh níos airde de PhGanna faoi na coinníollacha céanna. I gcomparáid leis an modh SML, méadaíodh táirgeacht echinacoside agus acteoside faoi 20.5 agus 20.8 faoin gcéad, faoi seach. Agus i gcomparáid le UAE , tháinig méadú ar an táirgeacht echinacoside agus acteoside ag 6.6 agus 7.4 faoin gcéad , faoi seach . Optamaíodh paraiméadair eastósctha HSHE de PhG ó C. tubulosa. Faoi na paraiméadair optamaithe, shroich táirgeacht echinacoside agus acteoside 1.366 agus 0.519 faoin gcéad, faoi seach, agus shroich rátaí aistrithe echinacoside agus acteoside 87 agus 94 faoin gcéad, faoi seach. Tá buntáistí ag baint le modh HSHE a bhaineann le héifeachtacht ard, coinníollacha oibriúcháin éadroma, leibhéil tomhaltais íseal, trealamh simplí, oibriú éasca, agus costais íseal. Soláthraíonn an taighde seo modh nua le haghaidh eastóscadh tionsclaíoch PhGanna ó C. tubulosa.