Staidéar Turgnamhach ar Mheicníochtaí Déirciúla Tuirse Frith-Spóirt Cistanche Deserticola

Teagmháil: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Ríomhphost:audrey.hu@wecistanche.com

Yang Hong-Xin, Yang Yong², YAN Xiao-hong'

Coimriú:Cuspóir Staidéar a dhéanamh ar éifeacht nacistanche deserticolaar lachtáit díhidrigineáise (LDH)is-einsím, glycogen, agus ocsaíd nítreach synthase 3 (NOS3) den ae sa snámh ualach lucha agus iniúchadh meicníochtaí móilíneacha ábhartha detuirse frith-spóirt. Modh Roinneadh na lucha sa ghnáthghrúpa rialaithe, sa ghrúpa rialaithe spóirt, agus sa ghrúpa rialaithecistanche deserticolagrúpa turgnamhach. Tugadh seile 0.2 ml in aghaidh an lae do gach luch den ghnáthghrúpa rialaithe agus don ghrúpa rialaithe spóirt. Tugadh decoction uisce de do gach luch den ghrúpa turgnamhach cistanche deserticolacistanche deserticola0.2 mL(3 g/kg in aghaidh an lae. Bhí an riarachán ar feadh 15 lá. Rinneadh an t-ualach ag snámh ar feadh 90 nóiméad ar lucha an ghrúpa rialaithe spóirt agus ancistanche deserticolagrúpa turgnamhach ag 1 uair an chloig tar éis an riaracháin dheireanach. Baineadh aenna na lucha tar éis 10 n-uaire snámha. Socraíodh cuid amháin den ae sa leacht neodrach formalin chun na hailt paraifín a ullmhú agus úsáideadh na cinn eile chun gníomhaíocht LDH a thomhas. Breathnaíodh struchtúr an ae trí HE a staining agus rinneadh an glycogen ae a thomhas trí glycogen a staining. Scrúdaíodh NOS3 trí mhodh imdhíon-histochemical SP. Rei Gortaíodh struchtúr ae an ghrúpa rialaithe spóirt go dona, bhí an isoenzyme LDH4 agus LDH5 níos airde, bhí an glycogen ae bocht, laghdaíodh NOS3 i gcomparáid leis an ngnáthghrúpa rialaithe (P<0.05). the="" liver="" structure="" of="" the="" cistanche="" deserticola="" experimental="" group="" was="" good,="" ldh5="" isoenzyme="" was="" low,="" the="" glycogen="" was="" rich="" and="" expression="" of="" nos3="" was="" upregulated="" compared="" with="" the="" sport="" control="" group=""><0.05). conclusion:="">Cistanche deserticolaD'fhéadfadh LDH5 a laghdú, an t-ae a chosaint ar ualach na lucha ag snámh, agus dlús a chur le carnadh glycogen trí léiriú NOS3 a mhéadú chun an t-ae a chosaint agus feabhas a chur ar aisghabháil cumas fisiceach.

Eochairfhocail; cistanche deserticola;glycogen ae; ocsaíd nítreach synthase 3; lucha

Cistanche, ar a dtugtar Dayun freisin, is luibh seadánacha dhá bhliain de theaghlach Lydanaceae. Tá gais méithe tirim aige le scálaí. Déantar é a tháirgeadh go príomha in ithreacha gainimh agus féaraigh leath-ghainmheacha i Lár Mhongóil, Gansu, Xinjiang, agus Qinghai.Cistanchesa Mhongóil Istigh tá an caighdeán is fearr i measc na limistéar táirgthe.Cistanchetá sé milis, goirt amháin, agus te sa nádúr. Téann sé isteach sna duáin agus fadlíne stéig mhór. Is é a phríomhfheidhm ná an duán a fhuinneamh agus an yang a neartú, an bunúsach agus an fhuil a chothú, agus an intestines a chothú. Is minic a úsáidtear é chun impotence, infertility, laige sa choim agus na glúine, laige na matáin agus na cnámha, intestines tirim, agus constipation a chóireáil. . Is é cuspóir an staidéir seo breathnú ar éifeachtaíCistanchear an ae lactate dehydrogenase (LDH), glycogen ae agus ocsaíd nítreach synthase 3 (NOS3) i lucha snámha meáchain-iompartha trí thástáil snámha ualachiompartha i lucha, agus chun a mheicníocht chosanta ar an ae a iniúchadh, bonn teoiriciúil a sholáthar do an domhaintaighde, forbairt, agus úsáid naCistanchei mbia sláinte spóirt.

1 Ábhar turgnamhach

1.1 Ainmhithe 30 francaigh Kunming fireann, grád glan, meáchan (20±0.5) g, arna sholáthar ag Ionad Ainmhithe Ollscoil Lár Mhongóil.

1.2 Cistin Míochaine (Cistanche deserticolaYC Ma) a tháirgtear in Ejina Banner, Lár Mhongóil, agus tá sé aitheanta. De réir an ábhair íocshláinte bunaidh: uisce =100g: 400ml, soak ar feadh 30 nóiméad, teas, agus boil, ansin decoct ar tine te ar feadh 30 nóiméad, Doirt amach an réiteach íocshláinte, agus ath-mhaisiú ag an gcóimheas 100g: 200ml. Measc an dá decoctions le chéile, iad a scagadh le dhá shraith uige, agus ansin iad a dhíriú go dtí comhionann le 1g de na hábhair íocshláinte bunaidh in aghaidh an millilítear an decoction bunaidh, agus é a stóráil i refrigerator ag 4 céim. 1.3 Imoibrithe agus ionstraimí Ceannaíodh antashubstaint pholaclónacha NOS3 ó Wuhan Boster Bioengineering Co., Ltd. Ceannaíodh trealamh SP ó Fujian Maixin Reagent Company. Ceannaíodh an trealamh isoenzyme lactate dehydrogenase ó Inner Mongolia Tongri Reagent Co., Ltd (ar úinéireacht iomlán Nissan). Anailíseoir íomhánna datha Nanjing JD-80. Córas anailíse íomhá glóthach UVP Mheiriceá.

Frith-tuirseforlíonadh cistanche

2. Modhanna turgnamhacha

2.1 Grúpáil agus riarachán Rinneadh lucha Kunming a roinnt go randamach i ngrúpa rialaithe gnáth, grúpa rialaithe aclaíochta, agusCistanchegrúpa turgnamhach, gach ceann acu le 10 lucha. Tugadh gnáth-seile uair sa lá don ghnáthghrúpa rialaithe agus don ghrúpa rialaithe aclaíochta, 0.2mL/am; anCistancheTugadh decoction cistanche don ghrúpa turgnamhach (tóg 3ml den decoction uisce bunaidh agus cuir uisce go 10 mL), uair amháin sa lá, 0 ．2mL/time, dáileog laethúil de 3g/kg, riarachán leanúnach ar feadh 15 lá. Uair an chloig tar éis an riaracháin dheireanach, bhí na lucha sa ghrúpa rialaithe aclaíochta agus an grúpa turgnamh Cistanche luchtaithe le meáchan luaidhe 1g ar a n-eireabaill, agus cuireadh iad i linn snámha le airde 50cm, fad 50cm, agus a leithead 35cm le snámh. Coinníodh an teocht ag céim (30±0.5) agus coinníodh tairiseach. Breathnaigh ar an luch, má aimsítear go stopann an luch ag snámh, bain úsáid as bata adhmaid chun a ghluaiseacht a spreagadh ar feadh 90 nóiméad. Tar éis a fheidhmiú, ithe gnáth-aiste bia, scíth ar feadh 10 uair an chloig agus na lucha a mharú mar aon leis na lucha gnáthghrúpa rialaithe trí mhodh dí-mhuineál, tóg amach an t-ae, socraigh cuid le 10 faoin gcéad formaildéad neodrach, díhiodráitithe, trédhearcach, soak i céir. , agus leabú chun 4 Slice leanúnach tiubh a dhéanamh, bain úsáid as modh staining HF chun struchtúr fíocháin ae gach grúpa a urramú: nite an chuid eile le gnáth-seile, reoite ag 20 céim, leáite ag teocht an tseomra le linn tomhais, triomaithe le páipéar scagaire agus a mheá, agus ansin ullmhaíodh homogenate ae le gnáth-salanda, 3500r Lártheifneoir ar feadh 15 nóiméad ag / nóim, agus glac an súthach chun gníomhaíocht isoenzyme lactate dehydrogenase trí leictreafóiréis a thomhas.

2.2 Cinneadh gníomhaíocht lactate dehydrogenase Ag baint úsáide as leictreafóiréis glóthach polyacrylamide, déantar isoenzymes LDH a dheighilt de réir a ndifríochtaí soghluaisteachta leictreafóiréiseacha. Is é tiúchan glóthach scaradh an tsampla ná 7 faoin gcéad, pH 8.9, agus is é an tiúchan glóthach tiubhaithe 4 faoin gcéad, pH 6.8.10. Tá an sampla measctha le 1 titim de tháscaire gorm glycerin agus bromophenol. Is é an maolán leictreoid ná Tris-Glycine (pH 8.7), tosú ar an mbrú a chobhsú ag 1o0-150V, cuir le 2o0-250V tar éis 30 nóiméad, agus déan leictreafóiréis ar feadh 4 h. Tar éis leictreafóiréis, bhí sé dhaite leis an Kit Isoenzyme Lactate Dehydrogenase, dhaite ag 37 céim ar feadh 30 nóiméad, ag taispeáint banna isoenzyme dehydrogenase dehydrogenase gorm lactate, ansin sruthlaithe le huisce, socraithe le haigéad aicéiteach oighreach, agus úsáidtear córas anailís íomhá glóthach UVP Déan anailís sonraí. .

2,3 Glycogen staining 4um codanna sraitheach tiubh deparaffinized go traidisiúnta le huisce, a chur i dtuaslagán d'aigéad tréimhsiúil 1 faoin gcéad ag 37 céim ar feadh 15 nóiméad, rinsed in uisce reatha, a chur i dtuaslagán Schiff ar feadh 60 nóiméad, rinsed in uisce reatha, díhiodráitithe ag grádán. eatánól, tá xiléin trédhearcach, neodrach Mount na sleamhnáin le guma agus breathnú ar na torthaí staining faoi micreascóp.

2.4 Rinneadh an t-alt staining inmunhistochemical a dhíphairifiú go rialta le huisce, agus deisíodh an antigen le micreathonn maolán aigéad citreach, agus baineadh an peroxidase endogenous le leacht A ar feadh 10 nóiméad, agus ansin é a bhlocáil le leacht B (séiream gabhar caolaithe) ar feadh 10 nóiméad. Cuir an antashubstaint phríomhúil thar oíche ag 4 céim i mbosca tais, nigh le tuaslagán pH 7.4 PBS ar feadh 5 nóiméad × 3 huaire ar an dara lá, cuir an tuaslagán biotin-lipéadaithe C (réiteach oibre antasubstainte tánaisteach) ar feadh 10 nóiméad, nigh le tuaslagán PBS. ar feadh 5 nóiméad × 3 huaire, agus cuir an tuaslagán Horseradish peroxidase-lipéadaithe D gortha ar feadh 10 nóiméad, nite le tuaslagán PBS ar feadh 5minX3 huaire, agus ar deireadh forbraíodh é i dtuaslagán DAB ar feadh 5 nóiméad, nite le huisce sconna, frithdhaite HE, díhiodráitíodh é le halcól grádán, trédhearcach le xiléin, agus gléasta le guma neodrach. Tar éis an scannán a shuiteáil, breathnaigh faoi mhicreascóp solais. I ngach baisc turgnaimh, baineadh úsáid as saline maolánach fosfáit (PBS) mar rialú diúltach in ionad an phríomh-antasubstainte.

2.5 Anailís ar léiriú ocsaíd nítreach synthase 3 Réamhbhreithnithe ag an modh leathchainníochtúil amhairc faoi mhicreascóp solais, tá táirge dearfach NOS3 dorcha donn nó buí donn, agus tá an táirge dearfach suite i cíteaplasma heipitocytes nó idir heipitocytes. . I cíteaplasma na gcealla endothelial, tá an cúlra gorm diúltach. Ansin, úsáidtear an córas anailíse íomhá dath chun luach liath an imoibreora dearfach a thomhas, agus déantar paraiméadair na 4 réimse radhairc a thomhas go randamach do gach scannán faoi lionsa cuspóir fillte 40-, agus is é an meánluach. tógtha. Úsáidtear an paraiméadar seo chun an t-athrú ar dhéine ruaime NOS3 a léiriú. 2.6 Modhanna staidrimh Léirítear na sonraí go léir ag. SPSS11.0 úsáidtear pacáiste bogearraí staidrimh don tástáil t, agus P<0.05 is="" considered="" a="" significant="">

Frith-tuirse

3 Torthaí

3.1 Breathnú ar struchtúr fíocháin faoi mhicreascóp éadrom Sa ghnáthghrúpa rialaithe, tá struchtúr na lobules ae soiléir, socraítear na cordaí cille go néata, tá na sinusoids ae gnáth, níl aon loit soiléir ag na cealla ae, agus tá an struchtúr núicléach soiléir. Sa ghrúpa rialaithe a fheidhmiú, d'imigh an gnáth-struchtúr fíocháin, ní raibh na lobules soiléir, bhí na cordaí cille neamhord, d'imigh an chuid is mó de na sinusoids ae, agus bhí na heipitocytes degeneration vacuolar fairsing, arna léiriú ag méid cille méadaithe, cíteaplasma scaoilte, staining éadrom, agus fiú soiléir agus trédhearcach. Léirigh roinnt cealla ae athrú tipiciúil cosúil le balún, le méid beag necróis fócasach nó punctate. Na cealla ae anCistanchebhí grúpa turgnamhach beagán suarach, ach socraíodh iad go rialta, ní raibh aon fholús agus scaoilte soiléir sna cealla, socraíodh na cordaí cille go néata, agus bhí an struchtúr núicléas soiléir.

3.2 Éifeachtaí ar ghníomhaíocht isoenzymes dehydrogenase lactate ae i lucha faoi fheidhmiú ualaigh (féach Tábla 1)

Tábla 1 ÉifeachtCistanchear an ae lactate isoenzyme dehydrogenase de Xiaofeng luchtaithe (x±s)

Nóta: I gcomparáid leis an ngrúpa rialaithe gnáth, P<0, 05;="" compared="" with="" the="" exercise="" control="" group,=""><0.05 (the="" same="">

3.3 Breathnú micreascóp éadrom ar staining glycogen ae. Cé nach bhfuil ábhar glycogen an ghnáthghrúpa rialaithe ard, tá glycogen dáileadh go cothrom i ngach cill ae gan folúis; tá níos lú glycogen ag an ngrúpa rialaithe aclaíochta, scaipthe sna Cealla ae, bhí folúis le feiceáil i roinnt réimsí; anCistanchegrúpa turgnamhach a bhí saibhir i glycogen, ach a bailíodh go leor ar thaobh amháin de na cille. 3.4 Breathnú ar shloinneadh ocsaíd nítreach synthase 3 leis an micreascóp solais agus anailís chainníochtúil íomhá. Léirigh cíteaplasma heipitocytes gnáthrialaithe léiriú dearfach láidir i ndáileadh idirleata, go háirithe i gcealla dénúicléacha, agus léiriú dearfach i gcealla endothelial. . Bhí lagú ar an léiriú i cíteaplasma heipitocytes agus cealla endothelial sa ghrúpa rialaithe a fheidhmiú. Léirigh an grúpa turgnamh cistanche léiriú dearfach i gcíteaplasma heipitocytes agus léiriú dearfach láidir i gcealla endothelial. Léirítear torthaí anailíse an anailísí íomhá datha i dTábla 2.

Tábla 2 Comparáid idir difríocht slonn №s3 i heipiticítí agus i gcealla endothelial (x±s)

4 Pléigh

Go dteastaíonn fuinneamh ón gcorp an duine le haghaidh aclaíochta, agus go dteastaíonn fuinneamh ón gcorp freisin sa phróiseas meitibileachta. Úsáideann meitibileacht cille go díreach fuinneamh ó dhianscaoileadh adenosine triphosphate (ATP). Is é an catabolism siúcra a sholáthraíonn an fuinneamh is gá do shintéisiú ATP ar deireadh thiar. Staidéar a thaispeáint nach tar éis a fheidhmiú dian, beidh an comhlacht a tháirgeadh cuid mhór de H ', fréamhacha saor in aisce, aigéad lachtaigh, agus substaintí eile a chuireann isteach ar an metabolism gnáth na cealla. Ag an am céanna, mar thoradh ar an easpa glúcóis sna ceallatuirse a fheidhmiúagus damáiste cille. Léiríonn torthaí an staidéir seo go bhfuil damáiste struchtúr fíocháin ae an-tromchúiseach tar éis líon mór cleachtaí, agus bíonn tionchar aige freisin ar shintéis na gcealla, mar shampla laghdú ar shintéis glycogen ae. Tar éis go leor cleachtaí, ag cur luchaCistancheIs féidir breathnú ar laghdú damáiste ae, go príomha mar gheall ar laghdú LDH5, agus tá an t-ábhar glycogen ae i bhfad níos airde ná sin an ghrúpa rialaithe aclaíochta, rud a thugann le tuiscint go bhféadfaidh Cistanche cosaint ae a bhaint amach agus gnáthfhiseolaíocht a chothabháil trí fheidhm LDH5 a laghdú. Ó thorthaí staining glycogen.

Tá an t-ábhar glycogen sa ghrúpa turgnamhach Cistanche níos airde ná an gnáthghrúpa rialaithe. An méadaíonn Cistanche stóráil glycogen ae roimh aclaíocht nó luasghéaraíonn sé sintéis glycogen faoi strus tar éis aclaíocht. Toisc nach bhfuil aon rialú neamh-fheidhmiú arCistanchesa turgnamh. Tá sé dodhéanta a tharraingt ar chonclúid, agus ní mór é a dhearbhú sa chéad chéim eile, ach an cosantaéifeacht na Cistanchear an ae agus cur chun cinn shintéis glycogen tar éis go leor cleachtaí soiléir. Is substaint mhóilín bhig é N{{{{0}} a bhfuil ardmheas ag an bpobal spóirt air le blianta beaga anuas. Is é NOS an príomhfhachtóir teorannaithe ráta do tháirgeadh N0. Deimhníodh go bhfuil trí chineál isoenzymes ag NOS, agus tugtar synthase ocsaíd nítreach neuronal ar NOSI.

Tá an einsím, atá ann i gcealla neuronal, cealla muscle cnámharlaigh, etc., páirteach go príomha i néarfhorbairt, neurocretion, foghlaim, agus próisis chuimhne: Is synthase ocsaíd nítreach inducible é NOS2, a fhaightear go príomha i gcealla muscle réidh, macrophages, agus limficítí Uair amháin. tá an einsím seo ionduchtaithe, is féidir leis leanúint ar aghaidh ag sintéisiú NÍL go dtí go bhfuil an tsubstráit ídithe nó bás cille. Meastar faoi láthair go bhfuil baint aige le damáiste cille; 'Is synthase ocsaíd nítreach endothelial é NOS3, a dháiltear go príomha i gcealla endothelial agus heipitocytes, ag táirgeadh NÍL baint go príomha le feidhmeanna fiseolaíocha. Léiríonn torthaí an staidéir seo, tar éis go leor cleachtaí, go lagaítear léiriú NOS3 i gcealla endothelial agus heipitocytes, agus laghdaítear an N0 mar thoradh air, ionas nach féidir na soithigh fola a leathnú go héifeachtach, laghdaítear sreabhadh fola, agus ní féidir na hamhábhair do shintéis glycogen a iompar chuig cealla ae, mar sin laghdaítear sintéis glycogen. ;Cistancheis féidir leis an abairt NOS3 i gcealla endothelial agus cealla ae a uas-rialáil, soithigh fola a leathnú go himoibríoch, sreabhadh fola a mhéadú, cumas amhábhar sintéise glycogen a iompar, sintéis glycogen a luathú, agus an comhlacht a chothabháil ag gnáthleibhéal fiseolaíoch meitibileach. Dá bhrí sin, d'fhéadfadh sé gur meicníocht thábhachtach é laghdú LDH5 chun an t-ae a chosaint agus léiriú NOS3 a mhéadú chun gluconeogenesis aigéid lachtaigh a chur chun cinn.Cistanchechun an t-ae a chosaint agus téarnamh fisiceach a chur chun cinn. Soláthraíonn an taighde seo an bonn turgnamhach eolaíoch chun tuilleadh forbartha agus úsáid a bhaint asCistanchei réimse na míochaine spóirt agus freisin leagann sé an bonn d'fhorbairt agus íonúÉifeacht Cistanchesubstaintí.