Meastóireacht ar Chomhdhúile Aigéad Sailligh, Frithocsaídeach, agus Gníomhaíochtaí Cógaseolaíochta Ola Síl Pumpkin (Cucurbita Moschata) Ó Eastóscadh Einsímeach Uisciúil Cuid 1

May 08, 2023

Coimriú:Is seachtháirge é síolta ola pumpkin, flúirseach i gcothaithigh agus i gcomhpháirteanna bithghníomhacha a chuireann roinnt buntáistí sláinte chun cinn. Bhí sé mar aidhm ag an staidéar seo comparáid a dhéanamh idir comhdhéanamh ceimiceach, frithocsaídeoirí agus gníomhaíochtaí cógaseolaíochta olaí síolta pumpkin a bhaintear as Cucurbita moschata Duch. Ex Poir. (PSO1) agus Cucurbita moschata (pumpkin Seapánach) (PSO2) trí eastóscadh einsímeach uiscí. Baineadh úsáid as meascán einsíme comhdhéanta de peictinase, ceallafás, agus próitéas (1:1:1) sa phróiseas eastósctha einsímeach. Cinneadh comhdhéanamh aigéid shailligh na n-olaí trí úsáid a bhaint as mais-speictriméadracht eistear meitile/gáis aigéid shailligh. Tomhaiseadh measúnachtaí gníomhaíochta frithocsaídeacha trí úsáid a bhaint as défheinilpicrylhydrazyl saor-radacach cobhsaí, catation radacach 2,20 -asinobis-({10}} eitilbenzothiazoline-6-sulfónáit, cumhacht laghdaithe ferric/frithocsaídeach, agus measúnacht tiogianáit ferric. Rinneadh imscrúdú ar einsímí a bhaineann le haosú craicinn agus próiseas whitening.Bhí aigéad linóleic ina phríomhchuid de gach olaí síolta pumpkin.Ina theannta sin, braitheadh ​​méid suntasach d'aigéad oiléach, d'aigéad palmitic agus d'aigéad stéarach.Bhí na gníomhaíochtaí frithocsaídeacha is airde ag PSO2 i gcomparáid le PSO1 agus olaí síolta pumpkin tráchtála (COM1 agus COM2) Léirigh PSO1 agus PSO2 araon éifeachtaí coisctheacha níos airde ar hyaluronidase, collagenase, agus tyrosinase ná na fógraí. Tá sé seo tairbheach le haghaidh tuilleadh staidéir chógaseolaíochta agus is féidir é a úsáid mar bhia feidhmiúil chun sochair craicinn.

De réir staidéir ábhartha,cistéiris luibh choiteann é ar a dtugtar “an luibh mhíorúilteach a shíneann an bheatha”. Is é a phríomh-chomhpháirtCistanoside, a bhfuil éifeachtaí éagsúla cosúil lefrithocsaídeach, frith-athlastach, aguscur chun cinn feidhm imdhíonachta. An mheicníocht idir cistanche aguscraiceann ag fiuchadhluíonn an éifeacht antioxidant de cistanchegliocóisídí. Tá melanin i gcraiceann an duine a tháirgtear trí ocsaídiú tyrosine catalyzed agTyrosinase, agus éilíonn imoibriú ocsaídiúcháin rannpháirtíocht ocsaigine, agus mar sin déantar na fréamhacha saor ó ocsaigine sa chorp a bheith ina fhachtóir tábhachtach a dhéanann difear do tháirgeadh melanin. Tá cistanche ag cistanoside, ar frithocsaídeoir é agus is féidir leis giniúint fréamhacha saor in aisce sa chorp a laghdú, mar sincosc a chur ar tháirgeadh melanin.

cistanche para que serve

Cliceáil ar Fhorlíonadh Cistanche Tubulosa

Tuilleadh eolais:

david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501

Eochairfhocail:Cucurbita moschata; pumpkin Seapánach; ola síolta pumpkin; eastóscadh einsímeach uiscí; aigéid sailleacha; frithocsaídeach; frith-aosú

1. Réamhrá

Tá Pumpkin sa ghéineas Cucurbita agus an teaghlach Cucurbitaceae, planda coitianta agus cáiliúil a shaothraíodh i dtuaisceart Mheicsiceo agus atá scaipthe go dtí an Eoraip, Meiriceá Thiar, agus san Áise [1]. Meastar gur bia feidhmiúil é pumpkin ina bhfuil cothaithigh flúirseach cosúil le próitéin, carbaihiodráit, lipid, snáithín, etc., in éineacht le comhdhúile fíteiceimiceacha cosúil le tócaifearóil, carotenoidí, agus -sitosterol [2]. Fuarthas amach go bhfuil gníomhaíochtaí cógaseolaíochta ag na phytonutrients ó chodanna éagsúla de phumpkin [2]. Léirigh sliocht craiceann pumpkin éifeachtaí créachta dóite tairbhiúla i samhlacha ainmhithe [3]. Léirigh laíon pumpkin gníomhaíocht frithocsaídeach, frith-athlasadh, agus frith-angiogenesis [2], chomh maith le gníomhaíocht frith-tuirse i lucha [4]. Ina theannta sin, is foinse nádúrtha maith d'aigéid shailleacha riachtanacha agus fíteastaróil é síol pumpkin a íslíonn an baol mortlaíochta cardashoithíoch [5,6]. Is seachtháirge é ola síolta pumpkin de phróiseáil síolta pumpkin, atá saibhir i aigéid shailleacha éagsúla agus comhdhúile bithghníomhacha mar -carotenes, -tócaifearóil, vitimín B, lutein, fíteastaróil, agus mianraí eile [7,8]. Feidhmíonn an ola éifeachtaí frithocsaídeacha, frith-athlasta, antibacterial, agus leighis créachta [1,9]. Ina theannta sin, tá roinnt buntáistí sláinte aige i gcoinne galair, mar shampla Hipirtheannas, diaibéiteas, agus ailse [8,10].

Forbraíodh modhanna éagsúla chun ola síolta a bhaint, lena n-áirítear modhanna meicniúla amhail fuarbhrú [11] agus eastóscadh ardbhrú [12]. Tá eastóscadh tuaslagóirí síolta ola ag baint úsáide as tuaslagóirí orgánacha cosúil le heacsán, aicéatáit eitile, aicéatón, agus meatánól doiciméadaithe freisin [13,14]. Is modh eile é eastóscadh le cúnamh einsím don tionscal ola plandaí toisc gur teicneolaíocht atá neamhdhíobhálach don chomhshaol agus atá sábháilte é. Is é príomh-mheicníocht eastóscadh einsímeach uiscí ná hidrealú agus briseadh ballaí cille ábhar plandaí, rud a fhágann go bhfuil níos mó tréscaoilteachta agus ag scaoileadh comhpháirteanna bithghníomhacha, lena n-áirítear an chéim ola [15]. Tá meascáin einsíme éagsúla a chuirtear i bhfeidhm san eastóscadh seo comhdhéanta de peictinase, ceallafán, hemicellulases, arabinose, -glucanase, agus xylanase [16,17]. Chuir coinníollacha optamaithe meascán einsím, mar shampla, teocht, pH, am imoibrithe, méid na gcáithníní, agus tiúchan einsím, feabhas ar ghníomhaíocht einsím freisin [16]. Sa lá atá inniu ann, baineadh úsáid as an modh seo go forleathan chun ola a bhaint as go leor torthaí agus síolta plandaí [18,19]. Léirigh roinnt staidéir roimhe seo riocht optamaithe an ola síolta pumpkin chun toradh ard agus gníomhaíochtaí cógaseolaíochta éifeachtacha a fháil [20,21].

Faoi láthair, itheann daoine síolta ola pumpkin i milseoga nó feistis sailéad, agus is comhábhar coitianta é i gcosmaidí freisin. Is próiseas casta bitheolaíoch é aosú craiceann arb iad is sainairíonna é wrinkling, caillteanas leaisteachas, caillteanas taise, agus uigeacht garbh de bharr strus ocsaídiúcháin, damáiste DNA, agus carnadh táirge deiridh glycation chun cinn [22]. Is féidir aigéad hyaluronic, collagen, agus elastin, atá ina gcomhpháirteanna tábhachtacha den chraiceann, a dhíghrádú le heinsímí hyaluronidase, collagenase, agus elastase, faoi seach, rud a fhágann go bhfuil dul in aois craiceann. Baineadh úsáid as roinnt olaí plandaí, mar shampla ola olóige, ola síolta lus na gréine, ola síolta fíonchaor, agus ola jojoba le haghaidh airíonna cosmaideacha craiceann chun taise a choinneáil, feabhas a chur ar fheidhm bhacainn an chraiceann, agus cosc ​​a chur ar aosú craiceann [23]. Ina theannta sin, is feinitíopa athraitheach agus suntasach é pigmentation craiceann i ndaoine a bhaineann le melanogenesis agus atá á rialú ag an einsím tyrosinase [24]. Faoi láthair, tá tástáil déanta ar shleachta plandaí éagsúla le haghaidh cosmaidí agus cógaisíochta chun táirgeadh melanin a laghdú, ag gníomhú mar ghníomhairí whitening [25,26].

cistanche tubulosa supplement

Le déanaí, C. moschata Duch. Is saothrán pumpkin amháin é Ex Poir a shaothraítear go coitianta agus a bhfuil tóir air sa Téalainn, ach is beag staidéar a bhaineann lena luachanna feidhmiúla agus a n-airíonna cógaseolaíochta. Ina theannta sin, is modh suimiúil é eastóscadh einsímeach uiscí chun ola a bhaint as síolta pumpkin chun ard-toradh agus éifeachtacht a fháil. Dá bhrí sin, dhírigh an staidéar seo ar chinneadh na bpríomh-chomhábhair, frithocsaídeoirí, agus gníomhaíochtaí cógaseolaíochta ola síolta pumpkin ó C. moschata Duch. Ex Poir. (saothrachán Téalainnis) agus C. moschata (pumpkin Seapánach) ag baint úsáide as an modh eastósctha uiscí einsímeach.

2. Ábhair agus Modhanna

2.1. Ábhair Plandaí

Tá torthaí úra C. moschata Duch. Ceannaíodh Ex Poir agus C. moschata (pumpkin Seapánach) ó mhargadh áitiúil i Chiang Mai, sa Téalainn i mí na Nollag 2020. Bailíodh na síolta agus baineadh gach snáithe snáithíneach. Tar éis an cóta síolta a dhíchur, nite agus triomaíodh na síolta pumpkin caolaithe ag teocht chomhthimpeallach. Coinníodh na síolta i mála plaisteach séalaithe go dtí go ndéanfaí a thuilleadh turgnamh. Ina theannta sin, ceannaíodh dhá shampla ola síolta pumpkin tráchtála (COM1 agus COM2) ó ollmhargadh i Chiang Mai, sa Téalainn. Rinneadh na turgnaimh go léir laistigh den dáta oiriúnachta chun olaí tráchtála a chaitheamh.

2.2. Ceimiceáin agus Imoibrithe 

Collagenase ó Clostridium histolyticum (ChC-EC.3.4.23.3), elastase ó briseán muc (PE-EC 3.4.21.36), N-succinyl-Ala-Ala-p-nitroanilide, sulfáit ferric (FeSO4), salann sóidiam aigéad hyaluronic ó Streptococcus equi, hyaluronidase ó thástálacha bó-ainmhithe, peictinase ó Aspergillus niger (EC 3.2.1.15, níos mó ná nó cothrom le 5 aonad/mg próitéin, an pH is fearr=4.{{2{0}}, an teocht is fearr=61 ◦C), ceallafás ó Aspergillus niger (EC 3.2.1.4, Níos mó ná nó cothrom le 0.3 aonad/mg soladach, an pH is fearr=6.5, an teocht is fearr {{ 30}}–55 ◦C), próitéáis ó Aspergillus Saito (EC 3.4.21.112, Níos mó ná nó cothrom le 0.6 aonad/mg soladach, an pH is fearr=5.1, an teocht is fearr=57.2 ◦ C), 2,20 -azinobis 3-ethylbenzothiazoline{-6-sulfónáit (ABTS), 2,2-défheinile{-1-picricrihidrazilhiodráit (DPPH), 2,4,6 tripyridyl-s-triazine (TPTZ), 6-hiodrocsa-2,5,7,8-tetramethylchroman-2-aigéad carbocsaileach (Trolox), albaimin séiream buaibheach, aigéad kojic, L Ceannaíodh -tyrosine, L-DOPA, aigéad linóleic, monobasic fosfáit sóidiam (NaH2PO4 · 2H2O), dibasic fosfáit sóidiam, agus tyrosinase ó muisiriún ó Sigma-Aldrrich (St. Louis, MO, SAM). Ina theannta sin, ceannaíodh 37 faoin gcéad aigéad hidreaclórach, eatánól 95 faoin gcéad, uisce driogtha (DI), sulfoxide dimethyl (DMSO), agus meatánól ó RCI Labscan Co., Ltd (Bancác, An Téalainn). Ceannaíodh thiocyanate amóiniam (NH4SCN) agus clóiríd neamhfheiriúil (FeCl2) ó Loba Chemie Pvt. Ltd (Mumbai, India). Ceannaíodh aimínaimeatán Tris (hydroxymethyl) ó Merck (Darmstadt, an Ghearmáin).

2.3. Eastóscadh Einsímeach Uisciúil

Olaí síolta pumpkin ón dá C. moschata Duch. Baineadh Ex Poir agus C. moschata (pumpkin Seapánach) trí mhodh eastósctha uiscí einsímeach ag baint úsáide as na paraiméadair hidrealú einsímeacha ó staidéar roimhe seo le Kanopka et al. (2016), lena n-áirítear tiúchan einsíme, cóimheas einsím-go-foshraith, teocht imoibrithe, pH, agus am imoibrithe [21]. Comhcheanglaíodh trí chineál éagsúla einsímí, lena n-áirítear peictinase, ceallafás, agus próitéas, i gcóimheas meáchain 1:1:1 chun manglam tiubhaithe einsímí a ghiniúint. Ina dhiaidh sin, caolaíodh an manglam tiubhaithe a d’eascair as sin in uisce DI chun meascán einsímeach uiscí 2 faoin gcéad w/w a ghiniúint. Cuireadh na síolta pumpkin gan chabhail ansin leis an meascán uiscí einsímeach mar thoradh air i gcóimheas meáchain 1:1. Ansin meilte go mín an meascán ag baint úsáide as cumascóir Moulinex DB81 ag teocht an tseomra go dtí go raibh sé aonchineálach. Coigeartaíodh pH an sciodair a bhí mar thoradh air ansin go 4.7 ag baint úsáide as 0.1 M HCl agus é a ghoradh ag 54 ◦C ar feadh 15 u. Tar éis an sciodar a fhuarú go dtí teocht an tseomra, lártheifneoiríodh é ag 11,500 × g ar feadh 10 nóiméad. Bailíodh an ciseal uachtarach de sháithíní, a bhí sa chéim ola. Níor eiblíodh an t-uachtar a táirgeadh le linn an phróisis eastósctha ach baineadh as é trí sheafónú le micripipéad. Baineadh an t-iarmhar de shíol pumpkin trí scagachán trí pháipéar scagaire Whatman Uimh.1 faoi fholús [21]. Ola síl pumpkin ó C. moschata Duch. Coinníodh Ex Poir (PSO1) agus C. moschata (pumpkin Seapánach) (PSO2) i gcoimeádáin dea-dhúnta, solas-resistant ag teocht an tseomra go dtí go ndéanfaí a thuilleadh turgnamh.

2.4. Comhdhéanamh Ceimiceach d'Ola Síolta Pumpkin a Chinneadh ag Úsáid Modh Eistir Meitil Aigéad Sailleach/Gás Crómatagrafach-Mais-Speictriméadrach (FAME/GC/MS)

Cinneadh ola síolta pumpkin do chomhdhéanamh aigéid shailligh trí úsáid a bhaint as an modh mais-speictriméadrach eistear meitile/gáis crómatagrafach-mhaise (FAME/GC/MS). Is cineál eistir aigéid shailligh é FAME a dhíorthaítear trí thras-aistriú saillte aigéad-catalyzed le meatánól. Sa staidéar seo, rinneadh olaí síolta pumpkin (PSO1, PSO2, COM1, agus COM2) a sháithiú trí 0.5 M tuaslagán NaOH a chur i meatánól ag 100 ◦C ar feadh 15 nóiméad . Tar éis fuarú síos, díorthaíodh na samplaí ola le trífhluairíd bórón (BF3) i dtuaslagán meatánóil ag 100 ◦C ar feadh 1 nóiméad chun táirgí FAME a fhoirmiú. Tar éis an fhuaraithe agus NaCl agus heacsán sáithithe a chur leis, rinneadh an FAME a dheighilt ina chéim heacsán agus bailíodh iad ina vials le haghaidh instealladh. Rinneadh anailís ar na sleachta FAME trí úsáid a bhaint as teicníc GC/MS faoi na coinníollacha seo a leanas: toise an cholúin ribeach (TR-FAME, méid 60 m × 0.25 mm, 0.25-µm méid na gcáithníní), clár teochta reatha 50 ◦C ; coinnigh 2 nóiméad le rampa 1 ráta 10 ◦C/nóiméad suas go dtí 180 ◦C, coinnigh 15 min; ráta rampa 2 de 4 ◦C/min, teocht deiridh 230 ◦C, coinnigh 22.50 min. Úsáideadh héiliam mar ghás iompróra ag ráta sreafa de 1.0 ml/nóim. Instealladh na samplaí ola i modh scoilte (cóimheas scoilte 1:20 agus comhalta scoilte 20 ml/nóim) ag 235 ◦C ag uathshamplóir. Brathadóir MS atá feistithe le foinse ianaithe leictrispré (ESI) a oibrítear ag 70 eV le teocht na foinse ian agus an líne aistrithe socraithe ag 200 ◦C agus 220 ◦C, faoi seach, mais-speictrim taifeadta sa raon m/z de 38–600. Sannadh comhdhúile anailísithe trína mais-speictrim a chur i gcomparáid le sonraí foilsithe (An Institiúid Náisiúnta um Chaighdeáin agus Teicneolaíocht, 2008). Ríomhadh an comhdhéanamh céatadáin trí bhuaiceanna a chomhtháthú i gcrómatagramanna ian iomlána (TIC). Rinne an tSaotharlann Taighde agus Seirbhíse, Ionad Eolaíochta Halal, Ollscoil Chulalongkorn, Bancác, an Téalainn gach tomhas faoi Halal GMP/HACCP agus Halal-QHS/ISO 22000.

cistanches herba

2.5. Gníomhaíochtaí Frithocsaídeacha a Chinneadh

2.5.1. 2,2-Défheinile-1-Measúnú Scálú Radacach Piicricrihidrazile (DPPH)

Cinneadh gníomhaíocht scavening radacach DPPH (DPPH• ) trí úsáid a bhaint as an modh a bhunaigh Chaiyana et al. (2017) [27]. Go hachomair, rinneadh 20 µL de shamplaí ola (PSO1, PSO2, COM1, COM2) agus aigéad linóleic tuaslagtha i DMSO a mheascadh le 180 µL de thuaslagán eatánólach 167 µM DPPH i 96-phláta tobair agus ansin goradh ar feadh 30 nóiméad ag teocht an tseomra sa dorchadas. Baineadh úsáid as aigéad ascorbic (1 mg/mL) mar rialú dearfach. Rinneadh an dlús optúil (OD) a thomhas ag 520 nm trí úsáid a bhaint as léitheoir microplate (léitheoirí microplate EZ Read 2000, Biochrome, Sasana). Rinneadh na turgnaimh i dtrí chóip agus rinneadh iad i dtrí neamhspleách. Ríomhadh an céatadán den chosc ar DPPH ag baint úsáide as Cothromóid (1):

Cosc ar DPPH ( faoin gcéad )={[(ODA − ODB) − (ODC − ODD)]/(ODA − ODB)} × 100, (1)

nuair is ODA an OD de mheascán ina bhfuil uisce DI agus tuaslagán DPPH•; Is é B an ODB de mheascán ina bhfuil uisce DI agus DMSO; Is é C an ODC de mheascán ina bhfuil samplaí ola agus tuaslagán DPPH; agus is é ODD an OD de mheascán ina bhfuil samplaí ola agus DMSO.

2.5.2. 2,20 -Azino-Bis-3-Ethylbenzthiazoline-6-Measúnú ar Aigéad Sulphonic (ABTS)

Rinneadh gníomhaíocht scabhála radacach cationic ABTS (ABTS• móide ) a thomhas tríd an modh dathmhéadrach de réir Chaiyana et al. (2017) agus Paradee et al. (2019) [27,28] le mionathrú. Gineadh ABTS• móide trí 2 ml de 7 mM ABTS a chur leis le 3 ml de shársulfate potaisiam 2.45 mM agus é a ghoradh ar feadh 16-24 u ag teocht an tseomra sa dorchadas. Caolaíodh an ABTS• móide a bhí mar thoradh air ina dhiaidh sin le eatánól chun OD de 0.7 ± 0.1 ag 750 nm a fháil. Go hachomair, rinneadh 20 µL de shamplaí ola (PSO1, PSO2, COM1, COM2) agus aigéad linóleic tuaslagtha i DMSO a mheascadh le 180 µL ABTS• móide tuaslagán eatánólach i 96-pláta tobair agus gor iad ar feadh 5 nóiméad ag teocht an tseomra. . Tomhaiseadh an OD ag 750 nm trí úsáid a bhaint as léitheoir microplate (léitheoirí micreaphláta EZ Read 2000, Biochrome, Sasana). Baineadh úsáid as aigéad ascorbic (1 mg/mL) mar rialú dearfach. Táirgeadh an cuar caighdeánach tríd an ionsúchán a bhreacadh ag 750 nm i gcoinne tiúchain éagsúla Trolox sa raon 2.5–30 µg/mL. Ríomhadh ABTS• móide gníomhaíocht scabhála ó chuar caighdeánach Trolox (R2=0.9922) agus léiríodh é mar acmhainn fhrithocsaídeach coibhéiseach Trolox (TEAC). Rinneadh na turgnaimh i dtrí chóip agus rinneadh iad i dtrí neamhspleách.

2.5.3. Measúnacht Cumhachta Frithocsaídeach Laghdaithe Ferric (FRAP).

Cinneadh cumhacht frithocsaídeach laghdaithe ferric (FRAP) de gach ceann de na samplaí trí úsáid a bhaint as measúnacht FRAP mar a thuairiscítear i staidéar roimhe seo le Chaiyana et al. (2017) a bhí mionathraithe ó Saeio et al. (2011) [27,29]. Gineadh imoibrí FRAP go úr trí mhaolán aicéatáite 300 mM (pH 3.6), 10 mM 2,4,6 tripyridyl-s-triazine (TPTZ) a mheascadh i 40 mM HCl, agus 20 mM FeCl3 sa chomhréir 10:1:1. Sa staidéar seo, rinneadh 20 µL de shamplaí ola (PSO1, PSO2, COM1, COM2) agus aigéad linóleic a mheascadh le 180 µL d’imoibrí FRAP i 96-phláta tobair agus goraíodh iad ar feadh 5 nóiméad ag teocht an tseomra sa dorchadas. Rinneadh an OD a thomhas ag 595 nm trí úsáid a bhaint as léitheoir microplate (léitheoirí micreaphláta EZ Read 2000, Biochrome, Sasana). Baineadh úsáid as aigéad ascorbic (1 mg/mL) mar rialú dearfach. Táirgeadh an cuar caighdeánach tríd an ionsúchán a bhreacadh ag 595 nm i gcomparáid le tiúchain éagsúla sulfáit fheiric (FeSO4) idir 0.003-0.5 mM. Ríomhadh luach FRAP ó chuar caighdeánach FeSO4 (R2=0.9965) agus léiríodh é mar acmhainn choibhéiseach (EC1). Rinneadh na turgnaimh i dtrí chóip agus rinneadh iad i dtrí neamhspleách.

2.5.4. Measúnacht Ferric Thiocianáit (FTC).

Rinneadh imscrúdú ar chosc ar shárocsaídiú lipid leis an modh ferric thiocyanate (FTC). Rinneadh an modh seo de réir na gcéimeanna a thuairiscigh Osawa et al. (1981) [30] le mionathrú. Bhí an meascán comhdhéanta de 50 µL de shamplaí ola (PSO1, PSO2, COM1, COM2) agus aigéad linóleic, 50 µL d’aigéad linóleic 50 faoin gcéad i DMSO, 50 µL de thuaslagán uiscí 10 faoin gcéad amóiniam thiocianáit (NH4SCN). , agus 50 µL de chlóiríd neamhfheiriúil 2 mM (FeCl2). Ina dhiaidh sin, gor an meascán ag 37 ± 2 ◦C ar feadh 1 h agus tomhaiseadh OD ag 500 nm trí úsáid a bhaint as léitheoir microplate (léitheoirí micreaphláta EZ Read 2000, Biochrome, Sasana). -Úsáideadh tócaifearól (0.025–0.1 mg/mL) mar rialú dearfach. Rinneadh na turgnaimh i dtrí chóip agus rinneadh iad i dtrí neamhspleách. Ríomhadh an ghníomhaíocht choiscthe sárocsaídiúcháin lipid ag baint úsáide as Cothromóid (2):
Cosc sárocsaídiúcháin lipid ( faoin gcéad )={[(ODA − ODB) − (ODC − ODD)]/(ODA−ODB)} × 100, (2)
i gcás inarb é ODA OD an mheascáin ina bhfuil aigéad linóleic, NH4SCN, agus FeCl2; Is é ODB an OD de DMSO; Is é ODC an OD den mheascán ina bhfuil samplaí ola, aigéad linóleic, NH4SCN, agus FeCl2; agus is é ODD OD an mheascáin ina bhfuil samplaí ola agus DMSO.

2.6. Gníomhaíochtaí Frith-Aosaithe a Chinneadh

2.6.1. Gníomhaíocht Frith-Hyauronidase

Rinneadh tomhas gníomhaíochta frith-hyaluronidase mar a thuairiscigh Chaiyana et al. (2020) [31]. Ar dtús, rinneadh 20 µL de shamplaí ola (PSO1, PSO2, COM1, COM2) a mheascadh le 100 µL de thuaslagán hyaluronidase 15 U/mL agus gortha ag 37 ◦C ar feadh 10 nóiméad. Tar éis an goir, cuireadh 100 µL de 0.03 faoin gcéad w/v aigéad hyaluronic a tuaslagadh i maolán fosfáit 20 mM (pH 5.35), agus ansin gor ag 37 ◦C ar feadh 45 nóiméad. Ina dhiaidh sin, cuireadh 1 ml de 0.1 faoin gcéad de shéiream albaimin buaibheach leis agus gor é ag teocht an tseomra ar feadh 10 nóiméad. Socraíodh an OD ag 600 nm ag baint úsáide as brathadóir ilmhód (Beckman Coulter DTX880, Fullerton, CA, SAM). Baineadh úsáid as aigéad oleanólach (0.25 faoin gcéad w/v) mar rialú dearfach. Rinneadh na turgnaimh i dtrí chóip agus rinneadh iad i dtrí neamhspleách. Ríomhadh an céatadán den chosc ar hyaluronidase trí úsáid a bhaint as Cothromóid (3):

Cosc Hyaluronidase ( faoin gcéad )={[(ODA − ODB) − (ODC − ODD)]/(ODA - ODB)} × 100, (3)
i gcás inarb é ODA OD an mheascáin ina bhfuil uisce DI, tuaslagán hyaluronidase, agus aigéad hyaluronic; Is é ODB an OD den mheascán ina bhfuil maolán uisce agus fosfáit DI (pH 5.35); Is é ODC an OD den mheascán ina bhfuil samplaí ola, tuaslagán hyaluronidase, agus aigéad hyaluronic; agus is é ODD OD an mheascáin ina bhfuil samplaí ola agus maolán fosfáite (pH 5.35).

2.6.2. Gníomhaíocht Frith-Collagenase

Rinneadh tomhas gníomhaíochta frith-collagenase de réir an phróisis a bhunaigh Chaiyana et al. (2019) agus Thring et al. (2009) le modhnuithe beaga [32,33]. Go hachomair, rinneadh 20 µL de shamplaí ola (PSO1, PSO2, COM1, COM2) a mheascadh le 20 µL de thuaslagán collagenase 0.1 U/mL ó Clostridium histolyticum agus gortha ag 37 ◦C ar feadh 15 nóiméad. Tar éis gortha, 80 µL de mhaolán trínín 50 mM (400 mM NaCl agus 10 mM CaCl2, pH 7.5) agus 40 µL de N-[3-({2-fuiril) aicriléine]-Leu-Gly- Cuireadh réiteach substráit Pro-Ala (FALGPA) leis. Braitheadh ​​an OD láithreach ag 340 nm agus ansin tomhaistear go leanúnach ar feadh 20 min trí úsáid a bhaint as léitheoir microplate (léitheoirí microplate EZ Read 2000, Biochrome, Sasana). Úsáideadh aigéad oleanólach (1 faoin gcéad w/v) mar rialú dearfach. Rinneadh na turgnaimh i dtrí chóip agus rinneadh iad i dtrí neamhspleách. Ríomhadh an céatadán den chosc ar cholangáis ag baint úsáide as Cothromóid (4):

Cosc collagenase ( faoin gcéad )=[(ODA − ODB)/ODA] × 100, (4)
648/2012 Téacs atá ábhartha maidir leis an LEE i gcás inarb é ODA an OD den mheascán ina bhfuil samplaí ola, tuaslagán collagenase, maolán trínín, agus foshraith FALGPA; agus is é ODB an OD den mheascán ina bhfuil DMSO, tuaslagán collagenase, maolán tricine, agus substráit FALGPA.

2.6.3. Gníomhaíocht Frith-Elastase

Rinneadh tomhas gníomhaíochta frith-elastase de réir an phróisis a bhunaigh Chaiyana et al. (2019) agus Thring et al. (2009) le mionathruithe [32,33]. Go hachomair, rinneadh 10 µL de shamplaí ola (PSO1, PSO2, COM1, COM2) a mheascadh le 40 µL de thuaslagán elastase 0.03 U/mL ó briseán muiceola, ansin 50 µL de 200 mM maolán Tris-HCL (pH 8.0) agus 10 µL de Cuireadh tuaslagán substráit 0.8 mM N-Succinyl-Ala-Ala-Ala-p-nitroanilide (AAAPVN). Braitheadh ​​​​an OD láithreach ag 410 nm agus ansin tomhaistear go leanúnach ar feadh 20 min trí úsáid a bhaint as léitheoir microplate (léitheoirí microplate EZ Read 2000, Biochrome, Sasana). Úsáideadh aigéad oleanólach (1 faoin gcéad w/v) mar rialú dearfach. Rinneadh na turgnaimh i dtrí chóip agus rinneadh iad i dtrí neamhspleách. Ríomhadh an céatadán den chosc ar elastáis trí úsáid a bhaint as Cothromóid (5):

Cosc leaistáis ( faoin gcéad )=[(ODA − ODB)/ODA] × 100, (5)
i gcás inarb é ODA an OD den mheascán ina bhfuil samplaí ola, tuaslagán elastase, maolán Tris-HCl, agus foshraith AAAPVN; agus is é ODB an OD den mheascán ina bhfuil DMSO, tuaslagán elastase, maolán Tris-HCl, agus substráit AAAPVN.

2.7. Cinneadh Gníomhaíochtaí Frith-Tyrosinase

Bunaíodh éifeacht whitening sliocht nádúrtha trí thomhas gníomhaíochta frith-tyrosinase a rinneadh de réir Saeio et al. (2011) agus Laosirisathian et al. (2020) [29,34]. Ba iad L-tyrosine agus L-DOPA foshraitheanna na heinsíme tyrosinase sa staidéar seo. Go hachomair, meascadh 10 µL de shamplaí ola (PSO1, PSO2, COM1, COM2) le 30 µL tyrosinase i 96-pláta tobair, ansin gortha ag teocht an tseomra ar feadh 10 nóiméad. Tar éis gor, cuireadh 100 µL den tsubstráit, atá 2.5 mM de L-tyrosine nó L-DOPA, leis agus gor é ar feadh 30 nóiméad. Socraíodh an OD ag 450 nm ag baint úsáide as léitheoir microplate (léitheoirí microplate EZ Read 2000, Biochrome, Sasana). Úsáideadh aigéad kojic (20 µg/mL) mar rialú dearfach. Rinneadh na turgnaimh i dtrí chóip agus rinneadh iad i dtrí neamhspleách. Ríomhadh an céatadán den chosc ar tyrosinase trí úsáid a bhaint as Cothromóid (6):

Cosc Tyrosinase ( faoin gcéad )={[(ODA − ODB) − (ODC − ODD)]/(ODA - ODB)} × 100, (6)
i gcás inarb é ODA OD an mheascáin ina bhfuil DMSO, einsím tyrosinase, agus L-tyrosine; Is é ODB an OD den mheascán ina bhfuil einsím tyrosinase agus PBS le pH de 6.8; Is é ODC an OD den mheascán ina bhfuil samplaí ola, einsím tyrosinase, agus L-tyrosine; agus is é ODD OD an mheascáin ina bhfuil samplaí ola, einsím tyrosinase, agus PBS le pH de 6.8.

2.8. Anailís staitistiúil

Léiríodh na sonraí go léir mar mheán ± diall caighdeánach (SD). Rinneadh anailís ar thábhacht staitistiúil trí úsáid a bhaint as anailís aontreo ar athraitheacht (ANOVA) agus ina dhiaidh sin triail iar-hoc Tukey ag baint úsáide as GraphPad Prism (leagan 8.0, Bogearraí GraphPad), agus breithníodh p < 0.05 suntasach go staitistiúil.

cistanche herb

3. Torthaí agus Plé

3.1. Carachtar Ola Síl Pumpkin

Sa staidéar seo, d'úsáideamar eastóscadh einsímeach uiscí in ionad eastóscadh tuaslagóir orgánach chun síolta ola pumpkin a bhaint as C. moschata Duch. Ex Poir (PSO1) agus C. moschata (PSO2) toisc gur próiseas simplí, éifeachtach agus táirgiúil é [15,21]. Ba leacht donn dorcha é PSO1 le slaodacht íseal, ach ba leacht glas-donn é PSO2 le slaodacht íseal. Bhí boladh tréithiúil ag an dá olaí síolta pumpkin. Ba é an táirgeacht PSO1 agus PSO2 ná 17.7 faoin gcéad v/w agus 15.6 faoin gcéad v/w, faoi seach. Seachas an ola, tuairiscíodh go bhfuil éagsúlacht de chomhdhúile cothaitheacha i síolta pumpkin. Ba iad na cumadóireachta cóngarach de C. moschata carbaihiodráit den chuid is mó (39.51 faoin gcéad ), agus saill (28.49 faoin gcéad ), próitéin (19.23 faoin gcéad), uisce (7.67 faoin gcéad), agus fuinseog (5.18 faoin gcéad), faoi seach [35]. Mar sin féin, i gcomparáid leis na staidéir roimhe seo ag baint úsáide as tuaslagóir agus brú meicniúil, léirigh an staidéar reatha táirgeacht níos ísle d'ola C. moschata. Cé go ndearnadh cur síos ar eastóscadh tuaslagóirí mar an modh eastósctha ola is éifeachtaí, ag baint suas le 98 faoin gcéad de olaí ó shíolta, tá roinnt saincheisteanna ann maidir le hiarmhair tuaslagóirí agus íonacht an ola a tháirgtear [36]. Ina theannta sin, chuir an tuaslagóir a úsáideadh sa phróiseas eastósctha isteach ar tháirgeacht na hola ginte. Fuarthas 43.4–64.4 faoin gcéad as eastóscadh le heacsán, éitear peitriliam, beinséin peitriliam, cicliheacsán, éitear iseapróipile, aicéatáit eitile, tetrahydrofuran, própán, agus aicéatón [37,38]. Ar an ábhar sin, b'fhearr le fuarphreas ná eastóscadh tuaslagóirí. Mar sin féin, féadfaidh preas fuar a bheith ina chúis le roinnt castachtaí sa chéim tosaigh maidir le brúigh scriú a úsáid [39]. Mar sin, d’fhéadfadh eastóscadh einsímeach uiscí a bheith ina mhodh eastósctha eile ós rud é gur thug sé cion ola síolta pumpkin níos airde (36.0 faoin gcéad ) i gcomparáid le hola fuarbhrúite (33.5 faoin gcéad) [21]. Cé go raibh an próiseas eastóscadh einsímeach uiscí níos casta ná an fuarphreas, cuimsíonn sé costas infheistíochta réasúnta níos saoire, laghdú leanúnach ar chostas ullmhóidí einsímí tráchtála, an cumas chun comhpháirteanna uathúla agus luachmhara fíteiceimiceacha a leithlisiú ag an am céanna, chomh maith le tabhairt faoi. an fonn forleathan do chur chun feidhme na dteicneolaíochtaí glasa [21]. Rinne réamh-staidéir cur síos ar gur minic a úsáideadh roinnt einsímí cosúil le ceallafán, peictinase, hemicellulase, agus protease chun struchtúr balla cille plandaí a scriosadh chun eastóscadh bithghníomhach ó phlandaí a fheabhsú [16,17]. Dá bhrí sin, dhearamar an staidéar seo chun síolta ola a bhaint as trí úsáid a bhaint as meascán einsíme ina bhfuil peictinase, ceallafán, agus próitéas (1:1:1) mar a chuir Kanopka et al síos air roimhe seo. (2016), a rinne na coinníollacha hidrealú einsímeacha a bharrfheabhsú chun an toradh is airde d'ola síolta pumpkin a fháil [21]. Ina theannta sin, taispeánann an modh seo roghanna eile atá níos sábháilte agus níos inbhuanaithe ó thaobh an chomhshaoil ​​de seachas eastóscadh tuaslagóirí, ar a dtugtar "eastóscadh glas" anseo.

3.2. Comhdhéanamh Ceimiceach de Ola Síl Pumpkin

Le haghaidh anailíse ar chomhdhéanamh aigéid shailligh, rinneadh comparáid agus anailís ar shíol ola pumpkin ag baint úsáide as eastóscadh einsímeach uiscí (PSO1 agus PSO2) in éineacht le hola síolta pumpkin tráchtála (COM1 agus COM2) a tháirgtear trí eastóscadh fuarphreas. Taispeántar comhdhéanamh aigéad sailleach PSO1, PSO2, COM1, agus COM2 i dTábla 1. Bhí gach sampla ola síolta pumpkin comhdhéanta d'aigéid shailleacha il-neamhsháithithe (PUFA), monai-neamhsháithithe (MUFA), agus sáithithe. Ba é aigéad cis-linóileach (C18:2) an príomh-chomhpháirt i ngach sampla ola. Bhí an cion is airde d'aigéad sailleach (51.74 faoin gcéad ) i COM2, agus ina dhiaidh sin bhí COM1 (48.00 faoin gcéad ), PSO1 (39.09 faoin gcéad), agus PSO2 (37.63 faoin gcéad), faoi seach. Mar an gcéanna, bhí céatadán ard aigéad cis-oiléach (C18:1) i láthair, go háirithe i PSO2 (37.45 faoin gcéad ), agus ina dhiaidh sin COM1 (33.39 faoin gcéad ), PSO1 (31.22 faoin gcéad ), agus COM2 (28.64 faoin gcéad ). Ní bhfuarthas aigéid shailleacha sháithithe ar nós aigéad pailmítiúil (C16:{0) agus aigéad stéarach (C18:0) ach i méideanna beaga i ngach ceann de na samplaí ola. Breathnaíodh agus aithníodh méideanna rianta PUFA, MUFA, agus aigéid shailleacha sháithithe eile.

Sa litríocht, tugtar omega-6 ar aigéad linóleic freisin, aigéad sailleach riachtanach nach féidir leis an gcorp daonna a shintéisiú, a fhaightear trí thomhaltas aiste bia amháin. Is cothaitheach tábhachtach é aigéad linóleic le haghaidh feidhmeanna sláinte i ndaoine, a bhaineann le réamhtheachtaí ceramides atá ina chomhpháirt mhór de na seicní ceallacha, vitimín D, agus éagsúlacht hormóin [40,41]. Tá sé léirithe ag staidéir ar ainmhithe gur féidir le craiceann scaly agus itchy a bheith mar thoradh ar easnamh aigéad linoleic [23]. Ina theannta sin, tá aigéad linóleic ó ola plandaí tar éis tacú le cneasaithe créachta craiceann, chomh maith le hathlasadh craiceann agus acne a chosc [23]. Ina theannta sin, tá aigéad oleic, nó omega-9, tar éis a bheith tairbheach chun ailse, galair uath-imdhíonachta agus athlastacha a chosc [42]. Go deimhin, laghdaigh aigéad oleic go mór táirgeadh ocsaíd nítreach ag an suíomh créachta, rud a d'eascair dúnadh créachta níos tapúla [43]. Tacaíonn na sonraí seo go bhfuil buntáistí sláinte féideartha ag ola síolta pumpkin, a shaibhríonn aigéad linóleic (omega-6) ​​agus aigéad oiléach (omega-9).

cistanche tubulosa

Ónár dtorthaí, bhí ola síolta pumpkin (PSO1, PSO2, COM1, agus COM2) comhdhéanta de go leor aigéid shailleacha lena n-áirítear aigéad linóleic (C18:2), aigéad oiléach (C18:2), aigéad pailmíteach (C16:0) agus aigéad stéarach (C18:0) atá ina gcomhpháirteanna coitianta a fhaightear in ola síolta pumpkin [44]. Bhí aigéad linóleic (omega-6) agus aigéid oiléacha (omega-9) ceannasach i ngach sampla ola. Ba é an méid is airde d'aigéad linóleic ná COM2, agus ina dhiaidh sin COM1, PSO1, agus PSO2, faoi seach. Chomh maith leis sin, ba é PSO2 an méid ab airde d'aigéad oiléach, agus COM1, PSO1, agus COM2 ina dhiaidh sin. Míníonn na torthaí seo go raibh aigéad linóleic beagán níos ísle, ach ní aigéad oiléach, ná eastóscadh fuarphreas ag eastóscadh einsímeach uiscí de shíol ola pumpkin. Ba é an chúis atá leis an ábhar níos ísle d'aigéad linóleic i síolta pumpkin ó eastóscadh uiscí einsímeach ná i samplaí ola tráchtála mar gheall ar dhifríocht sa phróiseas eastósctha. D'aimsigh staidéir roimhe seo neamhréireachtaí i méid aigéid shailleacha neamhsháithithe, go háirithe aigéad oiléach, agus aigéad linóleic, in olaí síolta pumpkin ó eastóscadh ar leith [39]. Mhéadaigh ábhar an aigéid oiléigh ó 28.19 faoin gcéad in ola síolta pumpkin fuarbhrúite go 30.56 faoin gcéad in ola síolta pumpkin a bhaintear as peinteán, ach bhí raon an ábhair aigéid linóleic ó 43.86 faoin gcéad in ola síolta pumpkin a bhaintear as peinteán. go 46.67 faoin gcéad in ola síolta pumpkin fuar-bhrú [39]. Seachas modhanna eastósctha éagsúla, chuir na tuaslagóirí a úsáideadh sa phróiseas eastósctha agus an teocht le linn aibithe síolta isteach freisin ar ábhar aigéad linóleic na síolta plandaí. Léirigh staidéar a rinneadh roimhe seo gur thug éitear peitriliam ola shíolta rois le hábhar íseal linóleic (26.2 faoin gcéad ), agus thug n-heacsán torthaí contrártha le cion aigéad linóleic de 46.5 faoin gcéad [45]. Ina theannta sin, tá aigéad linóleic comhréireach go contrártha le teocht le linn aibithe síolta lus na gréine [46].

Ina theannta sin, fuair staidéar coibhneasta amach gur léirigh an comhdhéanamh ceimiceach i dtéarmaí comhdhéanamh aigéid sailleacha go raibh aigéid linóleic agus oleic i láthair i 47.45 faoin gcéad agus 35 faoin gcéad, faoi seach, in ola síolta pumpkin (C. maxima) a bhaintear úsáid as éitear dieitile [47]. . De réir Akin et al. (2018), bhí an t-ábhar aigéid linóleic sa raon ó 53.19 faoin gcéad go 53.27 faoin gcéad , agus ina dhiaidh sin aigéad oiléach, a bhí i láthair freisin i méideanna ard ó 27.52 faoin gcéad go 27.59 faoin gcéad in eastóscadh ola síolta C. pepo L. fuar-bhrú [48 ]. Mar sin, fuair eastóscadh einsímeach uiscí sa staidéar seo táirgeacht níos ísle d’aigéad sailleacha ná eastóscadh tuaslagóirí agus eastóscadh fuarphreas a luadh i staidéir roimhe seo. I gcomparáid le cultivar, fuair muid amach gur léirigh PSO1 (C. moschata Duch. Ex Poir) méid níos airde d'aigéad linóleic ná PSO2 (C. moschata, nó, pumpkin Seapáine). Go héagsúil, chuir PSO2 méid níos airde d'aigéad oiléach i láthair ná PSO1. Rud atá tábhachtach, bhí éagsúlachtaí i bpróifílí aigéid shailligh agus méideanna ola síolta pumpkin ag brath ar thionscnamh cultivars ar leith, coinníollacha aeráide, agus bainistíocht iar-fhómhair [49]. Seachas difríochtaí i bpróifílí aigéad sailleach olaí síolta pumpkin a fhaightear ó mhodhanna éagsúla eastósctha, tuairiscíodh go raibh na holaí ó theicneolaíocht einsímeach uiscí saibhir i fíteastaról agus tócaifearól [50]. Dá bhrí sin, moltar PSO1 agus PSO2, a tháirgtear ón modh eastósctha glas, mar olaí síolta pumpkin malartacha le haghaidh tuilleadh iarratais.


Tuilleadh eolais: david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501

B’fhéidir gur mhaith leat freisin