Feabhsú Bithshintéise Glicóisídí Feinileatánóideach i gCultúr Cille Deserticola Cistanche De réir Strus Osmotic

Déan teagmháil le:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Chun-Zhao Liu. Xi-Yu Cheng

TeibíImscrúdaíodh éifeacht strus osmotic ar fhás cille agus bithsintéis gliocóisídí feinileatánóideach (PeGs) i gcultúir fionraí cille deCistanche deserticolaYC Ma, planda íocshláinte fásaigh a fhástar i réigiún iarthar na Síne. Chuir comhchruinnithe tosaigh éagsúla de shiúcrós isteach go mór ar fhás cille agus bithshintéis PeGs sna cultúir chrochta, agus shroich an meáchan tirim ab airde agus carnadh PeGanna 15.9 gl–1-DW agus 20.7 mg g–1-DW faoi seach ag an osmotic tosaigh. strus 300 mOsm kg–1 áit a raibh an tiúchan siúcróis 175.3 mM. Léirigh anailís stoichiometric le teaglaim éagsúla de shiúcrós agus de shiúcra neamh-mheitibileach (mannitol) nó gníomhairí osmotic neamh-siúcra (PEG agus NaCl) go raibh strus osmotic féin ina fhachtóir tábhachtach chun biosintéis PeGs a fheabhsú i gcultúir fionraí cille de.Cistanche deserticola. Fuarthas uas-ábhar PeGs de 26.9 agus 23.8 mg g–1-DW tar éis 21 lá ag na teaglamaí de shiúcrós 87.6 mM le mannitol 164.7 mM (303 mOsm kg–1) nó 20 mM PEG faoi seach, a bhí níos airde ná sin de chultúir C. deserticola a fhástar faoi thiúchan tosaigh shiúcrós de 175.3 mM tar éis 30 lá. Rinneadh carnadh spreagtha PeGs i gcultúir fionraí cille a chomhghaolú leis an méadú ar ghníomhaíocht lyase amóiniam feiniolalainín (PAL) de bharr strus osmotic.

Eochairfhocail Cistanche deserticola, Gléasra íocshláinte fásaigh, gliocóisídí feanilethanoid, strus osmotic, amóinia-lyase feiniolalainín

CistanchetubulosaTá go leor éifeachtaí, cliceáil anseo chun tuilleadh eolais a fháil

Réamhrá

Cistanche deserticolaDéanann YC Ma, luibh lómhar Síneach, fréamhacha ammodendrun Haloxylon a pharasús agus fásann sé i gceantair fhásacha in iarthar na Síne. Tá gníomhaíochtaí marcáilte ag gliocóisídí feanilethanoid (PeGs), na príomhchodanna bithghníomhacha atá scoite ó C. deserticola, maidir le fréamhacha saor in aisce a scavening, díolúine a fheabhsú, feidhm ghnéasach a fheabhsú, etc. (Zong et al. 1996; Lu 1998; Wang et al. 2001). Mar gheall ar shaothrú agus úsáid neamhrialaithe naCistanche deserticola, acmhainn nádúrtha naCistanche deserticola bhí ar imeall traochta. I bhfianaise na bhfadhbanna seo, measadh go bhfuil táirgeadh PeG de réir cultúir fionraí cille C. deserticola mar rogha eile a bhfuil gealladh fúthu chun an ganntanas a réiteach.Cistanche deserticolaábhair phlandaí (Lu agus Mei 2003; Ouyang et al. 2003; Cheng et al. 2005a).

Is fachtóir tábhachtach é strus osmotic a dhéanann difear d'fhás plandaí, d'fhorbairt, do mhorphogenesis, agus foirmiú meitibilítí tánaisteacha. Tuairiscíodh táirgeadh feabhsaithe meitibilítí tánaisteacha ó chultúir fíocháin in vitro faoi strus osmotic optamach i roinnt speiceas plandaí míochaine (Kim et al. 2001; Wang et al. 1999; Wu et al. 2005). Is gnáthghníomhaire strus osmotic é siúcrós a úsáidtear sna cásanna seo, agus feidhmíonn sé freisin mar fhoinse ríthábhachtach carbóin agus fuinnimh. Mar sin, tá sé an-deacair éifeacht an strus osmotic agus ról cothaitheach na siúcraí mar fhoinsí carbóin a scaradh. D'fheabhsaigh méadú ar strus osmotic tosaigh le mannitol nonmetabolic, sorbitol, agus PEG carnadh paclitaxel i gcultúir cille Taxus Chinensis, carnadh saponin agus polaisiúicríd i gcultúir cille Panax notoginseng, agus carnadh eleutherosides i gcultúir embryogenic Eleutherococcus sessiliflorus (Z1995). et al. 2001; Shohael et al. 2006). Léirigh a gcuid torthaí go raibh éifeachtaí tiúchan carbaihiodráit agus strus osmotic difriúil de réir speiceas plandaí agus meitibilítí tánaisteacha.

Tá cuspóir an staidéir reatha dírithe ar na héifeachtaí osmotic de shiúcrós, mannitol, PEG, agus NaCl ar fhás ceall agus bithshintéis PeGs iCistanche deserticolacultúir fionraí cille. Rinneadh imscrúdú ar ghníomhaíocht PAL sna cultúir fionraí faoi chomhcheangail éagsúla de ghníomhairí osmotic tosaigh, agus pléitear an mheicníocht a d'fhéadfadh a bheith ann maidir le carnadh feabhsaithe PeGanna trí strus osmotic a mhéadú.

abhair agus modhanna

Ábhair phlandaí agus ionduchtú callus

Síolta deCistanche deserticolaBailíodh YC Ma ó cheantair fhásacha i gCúige Xinjiang na Síne agus stóráiltear é i 4C roimh úsáid. Deimhníodh féiniúlacht luibheolaíoch trí chomparáid a dhéanamh le caighdeáin tagartha ag Institiúid na Luibheolaíochta, Acadamh Eolaíochtaí na Síne, PR tSín. Steiriliú dromchla na síolta trí thumadh in eatánól 70 faoin gcéad ar feadh 30 s, ansin tumtha i dtuaslagán uiscí 20 faoin gcéad de fhochlóirít sóidiam 5.4 faoin gcéad in uisce ar feadh 20 nóiméad, agus ina dhiaidh sin trí sruthlú le huisce driogtha steiriúla. Spreagadh Calli ó na síolta dromchla-sterilized deCistanche deserticolaar mheán MS (Murashige agus Skoog 1962) arna fhorlíonadh le 1.0 mg l–1 aigéad naftailéinaicéiteach (NAA), 2.0 mg l–1 6-beinsile adenine ({{7}) }BA), 0.25 mg l–1 2, 4-aigéad déchlóreaphenocsaéiteach (2, 4-D), 6 gl–1 agar (PhytoTechnology LaboratoriesTM, ID Táirge: A181) agus 30 gl–1 shiúcrós ar feadh 60 lá i gcomh-aireachta fáis sa dorchadas ag 25C. Ina dhiaidh sin, foshaothraíodh na cultúir callus a tharlódh ó na síolphlandaí go dtí an meán soladach thuas ag eatramh de 30 lá (Cheng et al. 2005a).

Bunú agus cothabháil cultúir fionraí ceall

Rinneadh na saothráin callus fionraí (3.0g meáchan úr) a scagadh trí scáileán mogaill 1,000 lm agus a coinníodh ar scáileán mogaill 200 lm a fhoshaothrú go 500-ml Erlenmeyer fleascán ina bhfuil 100 ml den mheán leachtach thuas ar chrithaire rothlach ag 110 rpm ag 25C sa dorchadas le eatramh foshaothraithe 18 lá. Coigeartaíodh an pH meánach go 5.8 le 1 M NaOH nó 1 M HCl roimh uathchlátáil. Úsáideadh na cultúir callus fionraí a foshaothraíodh tar éis deich n-uaire mar inoculum don chultúr fleascach turgnamhach seo a leanas. Rinneadh na turgnaimh fleascáin go léir i bhfleascáin 250 ml Erlenmeyer a raibh meán leachtach 50 ml iontu le 30 gl–1 siúcrós agus ionaclaithe le 1.5 g úrmheáchan de 18-saothrúchán cille lá d'aois. Goradh na fleascáin Erlenmeyer seo ar chroiteoir rothlach (110 rpm) ag 25C sa dorchadas.

Turgnamh strus osmotic

Imscrúdú a dhéanamh ar an éifeacht atá ag tiúchan tosaigh siúcrós arfás cille agus carnadh PeGanna,Cistanche deserticolasaothraíodh cultúir fionraí i meán MS le 87.6,175.3, agus 262.9 mM siúcrós. Le haghaidh coinníollacha strus osmotic,Cistanche deserticolagoraíodh cultúir fionraí sna Ballstáitmeán ina bhfuil 87.6 mM siúcrós in éineacht le164.7 mM mannitol. Oibreáin osmotic eile (PEG 4,000 agusNaCl) i gcoibhéis osmolarity de87.6 mM siúcrós. Na tiúchain choibhéiseacha osmoticde ghníomhairí osmotic a chinneadh go turgnamhach mar PEG4,000 de 20 mM agus NaCl de 50 mM, faoi seach. Baineadh úsáid as fleascáin thríchosúla i ngach turgnamh agus i ngach luacha bhí mar mhodh chun fleascáin thriarach ±SD.

Anailís

Cistanche deserticolaChonacthas cealla saothraithe faoi strus osmotic éagsúla ag micreascóp solais Nikon AFX-DX (Nikon, an tSeapáin) faoi mhéaduithe 400·. Rinneadh osmolarity an mheáin chultúir a thomhas le osmometer brú gaile (Fiske One-Ten Osmometer, MA, USA). Chun meáchan úr (FW) a chinneadh, beidh anCistanche deserticolabrúdh na cealla go réidh ar an scagpháipéar chun barraíocht uisce a bhaint agus rinneadh iad a mheá. Ina dhiaidh sin, triomaíodh na cealla in oigheann ag 60C ar feadh 24 h agus taifeadadh an meáchan tirim (DW). Socraíodh an tiúchan siúcra iarmharach trí úsáid a bhaint as feanól agus aigéad sulfarach tiubhaithe, ag baint úsáide as glúcóis mar chaighdeán (Dubois et al. 1956).

Baineadh PeGanna as na cealla triomaithe le meatánól ar feadh 15 min ag 60C i ndabhach uisce ultrasonaic (KQ2200, Shanghai Cany Precision Instrument Co., Ltd, an tSín) le minicíocht 40 kHz agus cumhacht 100 W. Bhí an scagáit comhchruinnithe agus tuaslagtha an t-iarmhar in uisce driogtha agus ansin chuaigh sé trí cholún roisín macra-reticular (AB-8, táirge ceimiceach Ollscoil Nankai, Tianjin, an tSín). Bailíodh an eluate meatánóil agus rinneadh measúnú ar ábhar iomlán na PeG ag 333 nm trí úsáid a bhaint as echinacoside mar chaighdeán (Du agus Liu 1993a; Du et al. 1993b).

Measadh inmharthanacht cille trí laghdú de 2, 3, 5-clóiríd tetrazolium triphenyl (TTC) (Steponkus agus Lanphear 1967). Sainmhínítear an t-innéacs inmharthanachta mar an t-ionsúcht a thomhaistear in aghaidh gach graim den fhíochán úr. Bhí cinneadh gníomhaíochta PAL bunaithe ar mhodh Koukol and Conn (1961). Sainmhínítear aonad amháin den ghníomhaíocht PAL (U) mar an méid comhathraithe ionsúcháin de 0.01.

Torthaí agus plé

Éifeacht an chomhchruinnithe tosaigh siúcróis ar fhás cille agus biosintéis PeGs i gcultúir fionraí cille deCistanche deserticola.Freagra naCistanche deserticolaRinneadh tástáil ar chultúir fionraí cille go tiúchan tosaigh siúcróis idir 87.6 agus 262.9 mM. Mar a léirítear i bhFíor 1, d'fhás na cealla agus charnadh PeGanna go tapa ag tiúchan siúcrós tosaigh íseal de 87.6 mm, agus is léir go raibh fás cille agus carnadh PeGanna faoi chois ag tiúchan ard tosaigh siúcrós de 262.9 mM. Tháinig laghdú ar an gcóimheas idir an meáchan úr agus an meáchan tirim nuair a tháinig méadú ar an tiúchan tosaigh de shiúcrós ó 87.6 ó 262.9 mM (níl na sonraí léirithe). Fuarthas an t-uasmheáchan tirim de 15.9 gl–1 agus cion PeG de 20.7 mg g–1-DW ar lá 30 ag tiúchan siúcrós tosaigh de 175.3 mM agus bhí osmolarity de thart ar 300 mOsm kg–1. Faoi bhreathnóireacht mhicreascópach, scaradh ballaí cille óna cíteaplasma ag an strus osmotic is airde de 388 mOsm kg–1 áit a raibh tiúchan tosaigh siúcrós 262.9 mM (Fíor 2), agus d'fhéadfadh an strus osmotic is airde cur isteach ar mheitibileacht na gceall agus mar thoradh air. cosc dianfhás agus meath bithshintéise PeGs. Breathnaíodh feiniméan den chineál céanna freisin i gcultúir fionraí de chultúir cille fionraí T. Chinensis, agus ba é an tiúchan siúcrós is fearr le haghaidh táirgeadh paclitaxel ná 175.3 mM (Kim et al. 2001). Mar sin féin, bhí tiúchan tosaigh siúcrós de 204.5 mM tairbheach d'fhás cultúir cille E. sessiliflorus. Chuir tiúchan siúcrós níos airde de 262.9 mM biosintéis feabhsaithe eleutherosides, feanól, agus flavonoids i gcultúir Eleutherococcus (Sohael et al. 2006). Tá sé soiléir go bhfuil an tiúchan siúcrós tosaigh tábhachtach maidir le fás agus carnadh meitibilítí tánaisteacha de chultúir cille plandaí agus baineann a éifeacht le líne cille ar leith.

Éifeacht oibreán osmotic éagsúla ar fhás ceall agus biosintéis PeGs i gcultúir fionraí cille C. deserticola

Ról osmotic shiúcrós meitibileach agus foshraitheanna ceimiceacha neamh-mheitibileacha eile ar biosintéis PeG i gcultúir fionraí cille a thuiscintCistanche deserticola, Rinneadh sraith turgnaimh ag baint úsáide as siúcrós in éineacht leis na gníomhairí osmotic nonmetabolic (mannitol, PEG, agus NaCl). Sna turgnaimh seo, cuireadh mannitol 164.7 mM, 20 mM PEG, agus 50 mM NaCl leis an meán ina raibh 87.6 mM siúcrós agus rinne siad an osmolarity tosaigh timpeall 300 mOsm kg–1, a bhí ina riocht osmotic coibhéiseach inchomparáide leis an meán le 175.3 mM siúcrós.

Mar a léirítear i bhFíor 3a, b, chuir cur leis mannitol (gníomhaire osmotic siúcra neamh-mheitibileach) agus PEG (gníomhaire osmotic neamh-thréscaoilteach) beagán bac ar ráta fáis cille ach chuir sé go mór le biosintéis PeG iCistanche deserticolacultúir fionraí cille. Fuarthas uasmhéid inneachar PeGs de 26.9 agus 23.8 mg g–1-DW, faoi seach, ar an lá 21 nuair a fhásadh na cealla i gcomhcheangail de shiúcrós 87.6 mM le mannitol 164.7 mM (303 mOsm kg–1) nó 20 mM PEG (299 mOsm kg–1). Bhí na méideanna PeGanna níos airde ná sin deCistanche deserticolasaothráin cille a fhástar i meán leachtach MS le tiúchan tosaigh siúcróis de 175.3 mM ar an 30 lá.Cistanche deserticolacultúr cille, agus ansin thit an strus osmotic siúcra-spreagtha dá réir sin (Fíor 3c, d). Thit strus osmotic an mheán leachta le tiúchan tosaigh de shiúcrós de 175.3 mM ó 280 go 110 mOsm kg–1 nuair a thosaigh PeGanna i gcultúir na gceall ag carnadh ar an 9ú lá agus shroich siad a n-uasleibhéal ar an lá 30 (sonraí nach bhfuil léirithe). Níor ídíodh gníomhairí osmotic neamh-mheitibileacha (mannitol agus PEG) le linn an chultúir cille, rud a fhágann gur féidir strus osmotic de mheán leachtach a choinneáil idir 200 agus 280 mOsm kg–1, brú osmotic atá fabhrach do bhithshintéis PeGs. Léirigh na torthaí seo go raibh ról tábhachtach ag strus osmotic féin i bhfeabhsú bithsintéise PeGs saCistanche deserticolacultúir cille.

Tuairiscíodh go bhfeabhsaigh breisiú NaCl alcalóidigh indole agus biosintéis saponin faoi seach i gcultúir cille Catharanthus roseus agus Panax ginseng (Smith et al. 1987; Wu et al. 2005), ach chuir cóireáil NaCl bac ar fhás cille T. Chinensis cé nach léiríonn sé aon difríocht i mbithshintéis palitaxel (Kim et al. 2001). Dá bhrí sin, tá gá le himscrúdú mionsonraithe do gach cás. Chuir coibhéis osmotic de 50 mM NaCl fás cille faoi chois agus bithshintéis PeGs. D'fhéadfadh an toradh seo a bheith mar gheall ar nádúr tréscaoilteach NaCl nach bhfuil tairbheach do chultúir an speicis phlandaí fhásaigh seo ar féidir leo strus triomach a fhulaingt go han-mhaith.

Fíor 3 Éifeacht na dteaglaim de shiúcrós agus de ghníomhairí osmotic neamh-mheitibileacha eile ar fhás cille (a), carnadh PeGs (b), tomhaltas siúcra (c), agus athrú ar strus osmotic (d) le linn cille C. deserticola cultúr. Is éard atá i luachanna ná modhanna trí fhleascáin ± SD

Éifeacht oibreán osmotic éagsúla ar inmharthanacht cille agus gníomhaíocht PAL i gcultúir fionraí cille Cistanche deserticola

Inár staidéir roimhe seo (Cheng et al. 2005b, 2006), spreag suimiú elicitor biosintéis PeG go mór iCistanche deserticolacultúir cille, agus rinneadh an spreagadh a chomhghaolú le gníomhaíocht mhéadaithe PAL, an chéad eochair-einsím i biosintéis PeGs (Hahlbrock agus Grisebach 1979). Mar a léirítear i bhFíor 4, laghdaigh cur le mannitol neamh-mheitibileach 164.7 mM nó 20 mM PEG isteach i meán leachtach MS ina raibh 87.6 mM siúcrós inmharthanacht cille, ach chuir sé go mór le gníomhaíocht PAL a bhí níos airde ná mar a spreag tiúchan tosaigh siúcróis de 175.3 mM. An carnadh feabhsaithe PeGs iCistanche deserticolabhí baint ag cultúir fionraí cille le méadú ar ghníomhaíocht PAL spreagtha ag strus osmotic féin. Mar thoradh ar thiúchan tosaigh siúcrós de 175.3 mM i meán leachtach MS tháinig laghdú ar inmharthanacht na gceall i 15 lá agus chuir sé bac ar ghníomhaíocht PAL i 21 lá. Tar éis tréimhse tomhaltas siúcra ag an fásCistanche deserticolacultúir cille, idir inmharthanacht cille agus gníomhaíocht PAL na cealla saothraithe agus shroich a n-uasráta ar an 24 lá agus lá 30, faoi seach. Breathnaíodh freisin ar ghníomhaíocht PAL feabhsaithe ag strus osmotic chun feabhas a chur ar bithsintéis saponin i gcultúir chealla P. ginseng agus carnadh alcalóideach i gcealla saothraithe C. roseus (Godoy-Hernandez et al. 2000; Wu et al. 2005). Mar sin féin, nuair a cuireadh NaCl tréscaoilteach isteach i meán leachtach MS a raibh 87.6 mM de shiúcrós ann, laghdaíodh inmharthanacht na gceall agus chuir sé bac ar ghníomhaíocht PAL le linn na tréimhse cultúir ar fad. Mar thoradh air sin, is léir go raibh fás cille agus biosintéis PeGs faoi chois.

Fíor 4 Inmharthanacht cille a athrú (a) agus gníomhaíocht PAL (b) i gcultúir C. deserticola faoi strus osmotic éagsúla le linnCistanche deserticolacultúr cille. Is éard atá i luachanna ná modhanna trí fhleascáin ± SD

Cistanche deserticolaIs speiceas fásaigh é agus chuir imscrúdú ar speiceas fásaigh cultúir chealla in vitro dúshláin agus deiseanna nua chun cinn chun fiseolaíocht plandaí agus oiriúnuithe éiceolaíochta a thuiscint. Sa staidéar seo, d’fhorbraíomar córas a d’fhéadfadh staidéar a dhéanamh ar chonair bithshintéise trasduchtaithe comhartha strus-idirghabhála osmotic, agus sholáthair an córas an bonn le haghaidh táirgeadh ar scála mór de PeGanna ag baint úsáide as anCistanche deserticolacultúir cille trí straitéis nua osmotic rialaithe strus.

Buíochas

Admhaíonn na húdair an tacaíocht airgeadais ó Chlár Taighde Nuálaíochta Acadamh Eolaíochtaí na Síne.

Ó: 'Feabhsú ar bhithintéis gliocóisídí feinileatánóideach i gcultúir cille deserticola Cistanche trí strus osmotic' le Chun-Zhao Liu. Xi-Yu Cheng

---Plant Cell Rep (2008) 27:357–362 DOI 10.1007/s00299-007-0443-3

Tagairtí

Cheng XY, Wei T, Guo B, Ni W, Liu CZ (2005a)Cistanche deserticolacultúir fionraí cille: biosintéis gliocóisídí feanylthanoid agus gníomhaíocht frithocsaídeach. Próiseas Bithcheimic 40:3119–3124
Cheng XY, Guo B, Zhou HY, Ni W, Liu CZ (2005b) Cuireann múscailt arís agus arís eile le carnadh gliocóisídí feinileatánóideach i gcultúir fionraí cille deCistanche deserticola. Biochem Eng J 24:203–207
Cheng XY, Zhou HY, Cui X, Ni W, Liu CZ (2006) Feabhsú bithsintéise gliocóisídí feinileatánóideach i gcultúir fionraí cille Cistanche deserticola ag elicitor chitosan. J Biotech 121:253-260
Du NS, Liu JL (1993a) Cinneadh gliocóisídí feinileatánóideach iCistanche deserticolatrí speictreafótaiméadracht roisín macra reticular. Nat Prod Res Dev 5:30-33
Du NS, Wang H, Yi YH (1993b) Leithlisiú agus sainaithint gliocóisídí feinileatánóideach óCistanche deserticola. Nat Prod Res Dev 5:5-8
Dubois M, Gilles KA, Hamilton JK (1956) Modhanna dathmhéadracha chun siúcra agus substaintí gaolmhara a chinneadh. Ceimic anal 28:350-357

Godoy-Hernandez GC, Vazquez-Flota FA, Loyola-Vargas VM (2000) Méadaítear carnadh alcalóideach de bharr nochtadh d’aigéad tras-cinnameach de chealla Catharanthus roseus ar a bhfuil strus osmotach agus saothraithe i mbith-imoibreoir 14-l. Biteicneolaíocht Lett 22:921–925
Hahlbrock K, Grisebach H (1979) Rialuithe einsímeacha i mbithshintéis ligin agus flavonoids. Ann Rev Plant Fisiol 30:105–130
Kim SI, Choi HK, Kim JH (2001) Éifeacht brú osmotic ar tháirgeadh paclitaxel i gcultúir cille fionraí Taxus Chinensis. Tech Miocrób einsím 28:202–209
Koukol J, Conn EE (1961) Meitibileacht aramatacha agus airíonna an deaminase feiniolalainín de Hordeum vulgare. J Biol Chem 236:2692–2698
Lu MC (1998) Staidéir ar éifeacht sedative deCistanche deserticola.J Ethnopharmacol 59:161-165

Lu CT, Mei XG (2003) Feabhsú ar tháirgeadh gliocóisídí feinileatánóideach ag éilitheoir fungasach i gcultúr fionraí cille deCistanche deserticola. Biteicneolaíocht Lett 25:1437–1439
Murashige T, Skoog F (1962) Meán athbhreithnithe le haghaidh fáis thapa agus bith-mheasúnuithe le cultúir fíocháin tobac. Fisiol Planda 15:473-497
Ouyang J, Wang XD, Zhao B, Yuan XF, Wang YC (2003) Éifeacht eilimintí tearc-chré ar fhás naCistanche deserticolacealla agus táirgeadh gliocóisídí feinileatánóideach. J Biteicneolaíocht 102:129–134
Shohael AM, Hakrabarty D, Ali MB, Yu KW, Hahn EJ, Lee HL, Paek KY (2006) Feabhas a chur ar tháirgeadh eleutherosides i gcultúir embryogenic Eleutherococcus sessiliflorus mar fhreagra ar strus osmotic de bharr siúcrós. Próiseas Bithcheimic 41:512-518
Smith JL, Smart NJ, Kurd WGW, Misawa M (1987) Úsáid comhdhúile orgánacha agus neamhorgánacha chun carnadh alcalóidigh indole i gCatharanthus roseus (L.) Cultúir fionraí cille Don a mhéadú. J Cait 38:1507–1511
Steponkus PL, Lanphear FO (1967) Míniúchán ar an modh clóiríd triphenyl tetrazolium chun gortú fuar a chinneadh. Planda Physiol 42:1423–1426Wang Ceanncheathrú, Wu JT, Zhong JJ (1999) Feabhas suntasach ar tháirgeadh taxane i gcultúir fionraí Taxus Chinensis trí straitéis bheathú shiúcrós. Próiseas Bithcheimic 35:479–483
Wang XW, Jiang XY, Wu LY, Wang XF (2001) Éifeacht scavening gliocóisídí deCistanche deserticolaar shaorfhréamhacha agus a chosaint ar dhamáiste DNA in vitro de bharr OH. Sig Pharm J 36:29-31
Wu JY, Wong K, Ho KP, Zhou LG (2005) Feabhas a chur ar tháirgeadh saponin i gcultúr cille ginseng Panax trí strus osmotic agus beathú cothaitheach. Teicneo Miocrób einsím 36:133–138
Zhang YH, Zhong JJ, Yu JT (1995) Éifeacht brú osmotic ar fhás cille agus táirgeadh Ginseng saponin agus polaisiúicríd i gcultúir fionraí Panax Notoginseng. Biteicneolaíocht Lett 17:1347–1350
Zong GZ, He W, Wu GL, Chen LH (1996) Comparáidí idirCistanche deserticolaYC Ma agus Cistanche tubulosa (Scheak) Wight roinnt gníomhaíochtaí cógaseolaíochta. Tradit Chin Med J 21:436–438