Éifeachtaí Saponin Ó Shíol Litchi Chinensis Sonn Ar TGF- 1, FN Agus SOCS-1 i gCealla Eipitileacha Tubular Duánach faoi Ghlúcós Ard

Déan teagmháil le:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Hai-Yang Nie, Rui Chen, Hong-Na Zhang, Zhi Pan

1 Ollscoil Changchun Leighis na Síne, Changchun, an tSín.

2 Ospidéal Shunyi de Beijing Ospidéal Leigheas na Síne, Beijing, an tSín.

Buaicphointí

Laghdaíonn Saponin ó shíol Litchi chinensis Sonn apoptosis na gcealla epithelial tubular duánach agus an secretion TGF- 1 agus FN.

Teibí

Cuspóir: Imscrúdú a dhéanamh ar éifeacht saponin ó shíol Litchi chinensis Sonn (SLS) ar fhás agus apoptosisduineduáncealla epithelial (HKC) saothraithe i glúcóis ard. Modhanna: Saothraíodh HKC i meán DMEM/F12 arna fhorlíonadh le glúcóis 30 mmol/L agus cóireáilte le SLS nó gan é. Sa ghnáthghrúpa, cuireadh meán isiméadrach DMEM/F12 le glúcóis 5.5mmol/L leis. Braith ELISA an secretion TGF- 1 agus fibronectin (FN). Braitheadh ​​apoptosis cille trí smálú dúbailte Annexin V-FITC/PI. Baineadh úsáid as blot an iarthair chun leibhéal an tsochtaitheora de chomharthaíocht chitocine-1 (SOCS-1) ​​a bhrath.

Torthaí: Léirigh toradh ELISA gur laghdaíodh an secretion TGF{{{0}} agus FN i ngrúpaí SLS i gcomparáid leo siúd i 30 mmol/L grúpaí glúcóis-chóireáilte (P < {{).="" 9}}.05).="" bhí="" níos="" mó="" cealla="" apoptosis="" sa="" ghrúpa="" cóireáilte="" glúcóis="" 30="" mmol/l="" ná="" mar="" a="" bhí="" sa="" ghnáthghrúpa="" (p="">< 0.01).="" i="" gcomparáid="" leis="" an="" ngrúpa="" cóireáilte="" glúcóis="" 30="" mmol/l,="" tháinig="" laghdú="" suntasach="" ar="" apoptosis="" hkc="" i="" ngrúpaí="" sls="" (p="">< 0.01).="" léirigh="" blot="" an="" iarthair="" gur="" laghdaíodh="" an="" leibhéal="" socs-1="" sa="" ghrúpa="" ard-ghlúcóis="" móide="" sls="" (p="">< 0.01),="" i="" gcomparáid="" leis="" an="" ngrúpa="" glúcóis="">

Conclúid: Is féidir le SLS an secretion TGF- 1 agus FN i HKC a laghdú trí sil-leagan na maitrís eischeallach a laghdú. Laghdaigh SLS freisin apoptosis HKC trí leibhéal SOCS a chosc-1. Tugann na torthaí seo le fios na róil atá ag SLS maidir le dul chun cinn sclerosis glomerular a chosc.

Eochairfhocail: Saponin, Síl Litchi chinensis Sonn, Glúcós,Duáncealla epithelial, TGF- 1, Fibronectin, Apoptosis

cistéiris féidir a chóireáilgalar duáinfeabhasfeidhm duánach

Cúlra

Tá nephropathy diaibéitis (DN) ar cheann de na haimhréití is tromchúisí a bhaineann le diaibéiteas mellitus le minicíocht ard agus marfacht, arb iad is sainairíonna é scléaróis glomerular agus fiobróis idir-reannach duánach. DuineduánIs iad cealla epithelial (HKC) na príomhspriocanna in DN agus cuireann siad líon mór cítocíní i bhfolach, mar shampla TGF- 1 agus fibronectin (FN), as a dtagann glomerulosclerosis agus fiobróis duánach interstitial. Idir an dá linn, tá sé tuairiscithe gur féidir le glúcóis ard apoptosis HKC a luathú trí leibhéal na suppressor na comharthaíochta cítocine a mhéadú-1(SOCS-1)[1,2]. Dá bhrí sin, tá sé tábhachtach an leibhéal TGF- 1, FN agus SOCS-1 a chosc chun dul chun cinn scléaróis glomerular a chosc. Is luibh Síneach é síol Litchi chinensis Somm (SLS), a dháiltear go príomha i Guangdong. Taifeadadh cúigí Fujian agus Guangxi na Síne den chéad uair i Bencaogangmu i Ríshliocht Ming na Síne (1518 AD-1593 AD). Is é Saponin an comhábhar gníomhach de shíol Litchi chinensis Sony. Bunaithe ar ár staidéar roimhe seo, déanann an staidéar seo iniúchadh breise ar éifeacht SLS ar leibhéal TGF- 1 agus FN i HKC saothraithe le glúcóis ard, apoptosis HKC, agus an mheicníocht bhunúsach maidir le cosc ​​​​agus teiripe glomerulosclerosis. 3].

cistéiris féidir a chóireáilteip duánach géarmhíochaine

Ábhair agus modhanna Ábhair

Ceannaíodh SLS le íonacht níos mó ná 98 faoin gcéad ó Xianqingle Biological Co., LTD (Xi'an, China). Ceannaíodh HKC ó Shanghai Fuxiang Biotechnology Co., Ltd (Shanghai, An tSín). DMEM/F12 mheán, féatais caighdeánach séiream buaibheach, agus trypsin ó Hyclone (SAM). Ba as Sigma (SAM) an fotheaghlach démheitile. Ceannaíodh trealamh ELISA ó Shanghai Longton Biotechnology Company (Shanghai, an tSín). Ba ó Nanjing Kaiji Biotechnology Co., Ltd (Nanjing, an tSín) a tháinig an Kit Braite Apoptosis V-FITC/PI Annexin.

Cultúr cealla

Coinníodh HKC in DMEM/F12 le 10 faoin gcéad de shéiream lao féatais agus saothraíodh iad ag 37 céim in atmaisféar tais de 95 faoin gcéad aeir agus díleádh 5 faoin gcéad CO.Cealla le 0.25 faoin gcéad trypsin tar éis 2-3 laethanta le húsáid.

Measúnacht imdhíonta-nasctha le heinsím

Roinneadh HKC i sé ghrúpa, lena n-áirítear grúpa rialaithe (DMEM le glúcóis 5.5mmol / L), grúpa glúcóis ard (DMEM le glúcóis 30mmol / L), grúpa dáileog íseal SLS (5mg / ml, S1 móide glúcóis 30mmol / L), SLS grúpa dáileog mheán (10mg/ml, S2 móide glúcóis 30mmol/L), grúpa dáileog ard SLS (20mg / ml, S3 móide 30mmol / Lglúcóis), agus grúpa ton bán (DMEM gan cealla).

48 uair an chloig ina dhiaidh sin, bailíodh comhshamhail gach grúpa, agus bhraith ELISA ábhar TGF- 1 agus FN. Rinneadh an oibríocht de réir an lámhleabhair. Léadh an luach OD ag 450nm ag léitheoir micreaphláta. Socraíodh na tiúchain TGF- 1 agus FN de réir an chuair chaighdeánaigh.

aicteóisisteachcistéiréifeachtaí maith arduán

Cíteiméadracht sreafa

Bhí na grúpaí turgnamhacha mar a chéile thuas. Braitheadh ​​na cealla apoptóis le cítoiméadracht sreafa le staining dúbailte Annexin V-FITC/PI. B'ionann an ceathrú cuid uachtarach ar chlé agus céatadán na gcealla necrotic, b'ionann an ceathrú cuid uachtarach ar dheis agus céatadán na gcealla apoptóis déanach, b'ionann an ceathrú íochtair ar chlé agus céatadán na gcealla inmharthana, agus b'ionann an ceathrú íochtair ar dheis agus céatadán na gcealla apoptóis luath.

Anailís blot an Iarthair

Cóireáladh HKC le 10* mol/L d’Angiotension (Ang) Ⅱ, 20mg/Lof SLS agus 10*mol/L ofAngⅡ, meán DMEM/F12, 20mg/L de SLS agus 25mmol/L glúcóis agus 25mmol/L glúcóis. , faoi seach.

Réitíodh próitéiní lysate cealla ar leictreafóiréis glóthach dodecyl sulfate-polyacrylamide sóidiam agus aistríodh chuig seicní PVDF. Goradh gach scannán le antasubstaint mhonaclónach, agus ina dhiaidh sin gor le antasubstaintí tánaisteacha comhchuingeacha sárocsaíd-áise agus braite cemiluminescence.

Anailís staitistiúil

Rinneadh na hanailísí staitistiúla go léir agus úsáid á baint as leagan 19 de SPSS.0. Rinneadh anailís ar an difríocht idir na grúpaí sonraí turgnamhacha ag ANOVA aon-bhealach, agus baineadh úsáid as an difríocht is lú suntasach idir na grúpaí. p<0.05 was="" considered="" to="" indicate="" statistical="">

Torthaí

Éifeachtaí SLS ar an secretion TGF-B1 agus FN I gcomparáid leis an ngrúpa glúcóis ard, d'fhéadfadh SLS bac a chur ar leibhéil TGF-B1 agus FN i HKC (P).<0.01 or=""><0.05)(figure 1,="" figure="">

I gcomparáid leis an ngrúpa glúcóis ard: * P<0.05, **=""><0.01. control="" group:="" dmem="" with="" 5.5mmol/l="" glucose,="" high="" glucose="" group:="" dmem="" with="" 30mmol/l="" glucose,="" s1="" group:="" 5mg/ml="" sls+30mmol/l="" glucose,="" s2="" group:="" 10mg/ml="" sls+30mmol/l="" glucose,="" s3="" group:="" 20mg="" l="" sls+30mmol/l="" glucose.="" sls,="" seed="" of="" litchi="" chinensis="">

Éifeacht SLS ar apoptosis HKC Léirigh toradh cítoiméadracht sreafa go raibh apoptosis an ghrúpa glúcóis ard i bhfad níos airde ná an gnáthghrúpa (P <{{0}}.01). i="" gcomparáid="" leis="" an="" ngrúpa="" glúcóis="" ard,="" comhghaolaíodh="" ráta="" apoptosis="" hkc="" go="" diúltach="" le="" tiúchain="" sls="" (p="">< 0.01)="" (fíor="">

Éifeacht SLS ar leibhéal SOCS Bhí leibhéal na próitéine SOCS-1 sa ghrúpa AngII i bhfad níos airde ná é sin sa ghnáthghrúpa (P < 0.{="" {8}}1).="" bhí="" an="" leibhéal="" socs-1="" sa="" ghrúpa="" angii="" móide="" sls="" níos="" ísle="" ná="" mar="" a="" bhí="" sa="" ghrúpa="" angii="" ach="" fós="" níos="" airde="" ná="" é="" sin="" sa="" ghrúpa="" rialaithe="" (p="">< 0.01).="" i="" gcomparáid="" leis="" an="" ngnáthghrúpa,="" méadaíodh="" an="" leibhéal="" próitéine="" socs{-1="" sa="" ghrúpa="" glúcóis="" ard="" (p="">< 0.01).="" i="" gcomparáid="" leis="" an="" ngrúpa="" glúcóis="" ard,="" laghdaíodh="" leibhéal="" próitéine="" an="" ghrúpa="" ard="" glúcóis="" móide="" sls="" (p="">< 0.01)="" (fíor="">

Fíor 4 Éifeacht SLS ar shloinneadh SOCS-1 a. Grúpa AngII: 10-6 mol/L Angiotension Ⅱ, b. Grúpa AngII móide SLS: 20mg/L SLS agus 10-6 mol/L AngⅡ, c. Grúpa rialaithe: meán DMEM/F12, d. Grúpa ard glúcóis móide SLS: 20mg/L SLS móide 25mmol/L glúcóis, e. Grúpa rialaithe: meán DMEM/F12, f. Grúpa ard glúcóis: glúcóis 25mmol/L. SOCS-1, suppressor de chomharthaíocht chitocine-1. SLS, Síl Litchi chinensis Sonn.

Plé

Is é taisceadh maitrís extracellular agus apoptosis an epithelium tubular duánach na príomh-athruithe paiteolaíocha i bhforbairt DN. Faoi imthosca gnáth, d'fhan moirfeolaíocht agus líon na HKC sách cobhsaí. Ach i réimse fachtóirí spreagthacha cosúil le athlasadh, is féidir le HKC iomadú suntasach [4]. Mar thoradh ar ard-glúcós tá secretion ard TGF- 1 agus FN de HKC agus luasghéaraíonn sé apoptosis HKC, rud atá ina fhachtóir díreach chun tarlú DN a chur chun cinn. Sa turgnamh seo, baineadh úsáid as glúcóis ard mar spreagadh. Fuarthas amach go bhféadfadh SLS bac a chur ar secretion TGF- 1, FN agus an apoptosis HKC a laghdú trí leibhéal SOCS-1 a laghdú.

Déantar Litchi chinensis Sonn a dháileadh go príomha i gcúigí Guangdong, Fujian, agus Guangxi na Síne. Tuairiscíodh go raibh gníomhaíochtaí antihyperglycemic, antihyperlipidemic, antiplatelet, agus antiviral ag an SLS [5]. De réir thaifead Bencaogangmu i Ríshliocht Ming na Síne (1518 AD - 1593 AD), is féidir leis an SLS "tart a mhaolú". Le blianta beaga anuas, tá go leor scoláirí déanta go leor taighde ar a éifeachtaí cógaseolaíochta agus comhdhéanamh ceimiceach. Is iad príomh-chomhpháirteanna ceimiceacha an SLS comhdhúile cosúil le saponins lychee, flavonoids, polyphenols, chisels, aimínaigéid, aigéid sailleacha, agus comhpháirteanna so-ghalaithe. Is é SLS an príomh-chomhábhar gníomhach. Úsáidtear an SLS go forleathan i diaibéitis agus nephropathy diaibéitis, le hipoglycemic, hypolipidemic, ar chosc ar éifeachtaí athlasadh imdhíonachta [6]. Dhearbhaigh staidéir turgnamhacha nua-aimseartha freisin go bhfuil éifeacht hypoglycemic ag SLS [7]. Mar sin féin, níl meicníocht na héifeachta seo soiléir.

Sa staidéar seo, tháinig méadú suntasach ar leibhéal TGF- 1 agus FN i HKC tar éis spreagadh le glúcóis ard, agus tháinig laghdú suntasach ar leibhéal TGF- 1 agus FN tar éis cóireáil SLS ar bhealach dáileog-spleách. . Tháinig laghdú suntasach ar leibhéal próitéine SOCS-1 tar éis cóireála SLS. Cuireadh bonn teoiriciúil ar fáil don staidéar seo maidir le cur i bhfeidhm cliniciúil SLS.

Cistancheféidir faoiseamhgalar duáin

Tagairtí

1 Zhang AH, Huang SM, Ding GX, et al. JNK-c-Jun/AP-1 Iomadú Cille Mesangial Daonna de bharr AngiotensinⅡ arna Rialáil ag Cosán Comhartha. Gníomhartha Nanjing Med Univ 2004, 24(1): 4-8.

2. Nishimoto N, Kishimoto T, Yoshizakik. Cóireáil antasubstainte receptor frith-interleukin6 i ngalar rheumatic. Ann Rheum Dis 2000, 59(supple1):121.

3. Lou ZM, Tian XJ, Wang WX, et al. Éifeacht sliocht iomlán saponin ó chroí litchi ar leibhéil glúcóis fola lucha diaibéitis. Zhejiang Med J 2007, 29(6): 548-550.

4. Kolset SO, Reinholt FP, Jenssen T. nephropathy diaibéitis agus maitrís extracellular. J Histochem Cytochem 2012, 60(12): 976-986.

5. Li JW. Foclóir Leighis na Síne (Dara hEagrán). Béising: Teach Foilsitheoireachta People's Med 2013, 1184. 6. Zhang YJ, Zhang C. Dul chun cinn síolta litchi ar na príomh-chomhábhair ghníomhacha agus ar na héifeachtaí cógaseolaíochta. J Guangdong Pharm Univ 2014, 30(6):792-797. 7. Jiang ZG, Ren K, Lín Z, et al. Staidéar ar an chuid éifeachtach de Litchi chinensis laghdú glúcóis fola. J Changchun Univ Tradit Chin Med 2011, 27(1):14-16.