Éifeachtaí Gliocóisídí Cistéise ar Phlaisteacht Mhoirfeolaíoch Shionaipteach i Lucha Luathaithe Senescence
Mar 11, 2022
Teagmháil: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Ríomhphost:audrey.hu@wecistanche.com
LIAN Juanqi1, WANG Lu2, ZHAO Fujun3, LIN Shuai3, YAN Xusheng4, JIA Jianxin4, CAI Zhiping4
(1. Grád 2014 de Scoil Iarchéime Choláiste Leighis Baotou, Baotou 014060, an tSín)
(2. Aicme 12 de Grád 2015 Leigheas Cliniciúil i gColáiste Leighis Baotou)
(3. Aicme 1 de Grád 2013 Leigheas Fóiréinseach i gColáiste Leighis Baotou)
(4. Roinn Anatamaíochta Daonna Choláiste Leighis Baotou)
Teibí
Cuspóir: Chun imscrúdú a dhéanamh ar éifeachtgliocóisídí decistéir (GCanna) ar phlaisteacht shionaptach néaróin hippocampal i lucha luathaithe senescence 8 (SAMP8).Modhanna: 40 lucha roinnte go randamach i ngrúpa rialaithe, grúpa feithicle, grúpa dáileog íseal (GCs 2.5 mg / kg ·d á riaradh), grúpa meán-dáileog (GCanna 5 arna riar.0 mg / kg ?d) agus grúpa dáileog ard (GCs 10. 0 mg / kg · d). Níor tugadh aon idirghabháil do na lucha sa ghrúpa rialaithe; iad siúd i ngrúpaí arna riar agus sa ghrúpa feithiclí a ndearnadh riarachán ion-peritoneal (GCs / saline) nó saline ar feadh 30 d. Rinneadh líon na néaróin phirimideacha gnáth sa réigiún hippocampal CA1 a chomhaireamh ag staining Nissl; rinne staining Golgi líon na spíne dendritic i synapses a chomhaireamh, agus rinneadh slonn próitéin PSD-95 a chainníochtú trí imdhíon-histochemistry.Torthaí: I gcomparáid leo siúd sa ghrúpa rialaithe, mhéadaigh GCanna go suntasach líon na néaróin pirimide gnáth sa réigiún CA1 hippocampal (P<0.05) and="" increased="" the="" number="" of="" dendritic="" spines="" in="" synapses="" (p=""><0.05). the="" expression="" levels="" of="" psd-95="" in="" administered="" groups="" were="" significantly="" higher="" than="" that="" in="" the="" control="" group="" (p=""><0.05), and="" the="" effect="" in="" the="" middle="" dose="" group="" was="" the="" most="" significant.="">Conclúid: Is féidir le GCanna ráta marthanais na gceall pirimide hippocampal a fheabhsú agus plaisteacht shionaptach a fheabhsú.
EOCHAIRFHOCAL: Gliocóisídí cistéise (GCanna); Luch luathaithe Senescence; spine dendritic; PSD: 95
Le dul in aois an daonra sóisialta ag éirí níos mó agus níos tromchúisí, tá leitheadúlacht naGalar Alzheimer(AD) méadaithe de réir a chéile, rud a chuir ualach trom ar theaghlaigh na n-othar agus ar an tsochaí
[1]. Is iad na príomh-léirithe cliniciúla AD ná lagú cognaíocha agus lagú cuimhne, agus is iad na príomhghnéithe cáis ná plaiceanna gana atá déanta ag taiscí amyloid extracellular agus tangles néarafibrillary intracellular[2]. Tá an pathogenesis AD fós neamhchinntitheach. Meastar go bhfuil athruithe paiteolaíocha na synapses mar bhunús neurobiological de chuimhne AD agus dysfunction cognaíocha. Féadfaidh athruithe neamhghnácha i synapses a bheith mar an nasc lárnach i bpataigineas AD. Is luch samhail inbred aosaithe é luch luathaithe Senescence (SAM). Tá tréithe paiteolaíocha aonfhoirmeacha agus cobhsaí ag dul in aois ag a subline P8, rud a léirítear ag meath forásach ar fhoghlaim agus ar chuimhne agus ar aitheantas le méadú míonna. Tá mífheidhm aitheanta agus léirithe paiteolaíocha cosúil le hothair AD, mar sin is samhail ainmhithe idéalach iad lucha SAMP8 chun staidéar a dhéanamh ar mheicníocht foghlama a bhaineann le dul in aois agus lagú cuimhne.
Tá sé beartaithe ag an alt seo anailís a dhéanamh ar an ráta marthanais cille, dlús spine dendritic a thomhas, agus dlúthdhioscaí iar-synaptic a bhrath chun meicníocht féideartha GCanna a iniúchadh.(gliocóisídí decistéir)a dhéanann difear do phlaisteacht moirfeolaíoch synaptic néaróin hippocampal i lucha atá ag dul in aois go tapa, d’fhonn cóireáil a dhéanamh ar AD-bhainteachcistéirgliocóisídí(GCanna) Soláthraíonn an fhoghlaim spásúil agus lagú cuimhne bunús teoiriciúil agus turgnamhach.
1 Ábhar agus modhanna
1.1 Ainmhithe turgnamhacha agus grúpáil lucha SAMP8 fireann 40 10-mí d'aois (cheannaithe ó Tianjin University of Traditional Chinese Medicine), a tógadh i dtimpeallacht ghlan, teocht chomhthimpeallach (24.0 ± 1.0) céim , taise (50.0 ± 5.0) faoin gcéad , bia saor in aisce agus uisce. Ardaíodh na hainmhithe go dtí 11 mhí d'aois chun an turgnamh a thosú. Roinneadh na hainmhithe go randamach i 5 ghrúpa (8 ainmhí / grúpa): grúpa rialaithe bán (rialú), grúpa rialaithe tuaslagóra (feithicil),gliocóisídí cistanche iomlán(GCanna) grúpa dáileog íseal [2.5 mg / (kg ·d)], grúpa dáileog meánach [5. 0 mg / (kg · d)], grúpa dáileog ard [10.0 mg / (kg · d)]. Níor tugadh aon idirghabháil d'ainmhithe sa ghrúpa rialaithe. Tugadh GCs 2.5 mg / (kg ·d) do na hainmhithe sa ghrúpa dáileog íseal, tugadh GCs 5.0 mg / (kg ·d) do na hainmhithe sa ghrúpa dáileog meánach, agus do na hainmhithe i tugadh GCanna don ghrúpa ard-dáileog. 0 mg / (kg ·d), tugadh an méid céanna gnáth-seile d'ainmhithe sa ghrúpa feithiclí. Instealladh intraperitoneal leanúnach drugaí nó saline fiseolaíocha ar feadh 30 lá, 0.5 mL/d.
1.2 Ullmhúchán agus próiseáil eiseamail Rinneadh na hainmhithe a íobairt 24 uair an chloig tar éis an riaracháin dheireanach, ainéistéiseach, agus rinneadh an muineál a íobairt. Gearr an cuas thoracach chun an croí a nochtadh, gearr an t-aguisín atrial ceart chun an fhuil a ligean amach, agus cuir isteach an tsnáthaid perfusion isteach sa ventricle clé. Tar éis 100 ml de ghnáth-seile a insileadh, leanadh le 4 faoin gcéad paraformaildéad a insileadh go dtí go raibh géaga na lucha righin. Tóg an inchinn agus é a chur i 4 faoin gcéad paraformaldehyde ar feadh níos mó ná 24 uair an chloig.
1.3 Drugaí agus imoibrithe GCs(gliocóisídí decistéir) ceannaíodh ó Acadamh na Síne um Leigheas Sínis Traidisiúnta, dlús postsynaptic －95, PSD －95 ó Epitomic, ceannaíodh trealamh Coomassie Brilliant Blue CBBG 250 ó Nanjing Jiancheng Biotechnology Co., Ltd. Institiúid Innealtóireachta, ceannaíodh trealamh imdhíon-histochemistry DAB ó Beijing Zhongshan Jinqiao Cuideachta Biteicneolaíochta.
1.4 staining Nissl agus cille 4 faoin gcéad socrú paraformaldehyde fíochán inchinn ar feadh níos mó ná 24 uair an chloig, scamhadh agus díhiodráitíodh iad le halcól grádán, xiléin trédhearcach, tumoideachas céir, leabú pairifín traidisiúnta, 5 μm sraith sraitheach tiús. Gearr slices agus dewax chun uisce, dath le 1 faoin gcéad toluidín gorm ag 37 céim ar feadh 60 nóiméad, nigh ar feadh 5 nóiméad × 3 huaire, idirdhealú le 95 faoin gcéad alcól, alcól 100 faoin gcéad Dehydrate, xiléin trédhearcach, mount le guma neodrach, faoi deara faoi na micreascóp. Roghnaíodh limistéar CA1 den chuid céanna hippocampal de gach grúpa go randamach ó 3 réimse breathnóireachta (×100), áiríodh líon na gcealla pirimide gnáth laistigh de 1 mm, agus tógadh an meán le haghaidh anailíse.
1.5 staining Golgi Athraithe Cuir an fíochán inchinne deisithe i dtuaslagán ruaimnithe Golgi-Cox, cosnaigh ó sholas ar feadh 14 lá, agus athraigh an réiteach gach 2 lá; cuir an fíochán inchinn i 30 faoin gcéad siúcrós, agus é a chur i refrigerator ag 4 céim . Is féidir an fíochán a sectioned tar éis fiachmhúchta go bun; microtome creathadh le haghaidh gearrtha agus staining; réiteach fixer le haghaidh forbartha; triomú an phláta gléasta, breathnóireacht, agus comhaireamh faoin micreascóp. Breathnaigh ar na hathruithe i spine dendritic APEX néarónach an hippocampus CA1 agus CA3 de gach grúpa lucha, agus ríomh dlús an spine dendritic.
1.6 Rinneadh na hailt imdhíon-histochemical a dhíphairifiú go huisce, gortha le 3 faoin gcéad H2O2 ar feadh 10 nóiméad chun deireadh a chur le gníomhaíocht peroxidase endogenous, nite le huisce driogtha ar feadh 5 nóiméad × 3 huaire, deisithe ag micreathonn ardbhrú, nite le PBS do 5 nóiméad × 3 huaire, cuireadh bac ar serum gabhar ar feadh 30 nóiméad ag teocht an tseomra, cuireadh antashubstaint bunscoile frith-luch coinín PSD-95 dropwise, thar oíche ag 4 céim , nite le PBS ar feadh 5 nóiméad × 3 huaire, cuireadh antashubstaint tánaisteach biotin-lipéadaithe dropwise, gor ag 37 céim ar feadh 2 h, nite le PBS ar feadh 5 nóiméad × 3 huaire, scaoil an horseradish streptavidin lipéadaithe peroxidase, nigh le PBS ar feadh 5 nóiméad × 3 huaire, nigh le DAB ar feadh 2 nóiméad, counterstain le hematoxylin, díhiodráitithe le halcól grádán, trédhearcach le xiléin, agus mount. 1.7 Próiseáil íomhá agus anailís staitistiúil. Roghnaíodh na trasghearrtha hippocampal céanna de gach grúpa le haghaidh breathnóireachta. Roghnaíodh trí réimse radhairc (×100) go randamach i limistéar CA1 chun líon na gcealla pirimide gnáth laistigh de 1 mm a chomhaireamh, agus rinneadh anailís ar an meán. Rinneadh torthaí imdhíonhistochemistry a thomhas ag bogearraí anailíse íomhá IPP 7.0. Rinne bogearraí SPSS 17.0 anailís ar na sonraí turgnamhacha, agus úsáideadh ANOVA aontreo chun comparáid a dhéanamh idir modhanna ilshamplaí. p<0.05 was="" considered="" statistically="">
Galar frith-Alzheimer
2 thoradh
2.1 Éifeacht na gliocóisídí iomlána decistéirar chomhaireamh na ngnáthchealla pirimideacha sa hippocampus de lucha SAMP8 staining Nissl Léirigh torthaí staining Nissl gur tháinig laghdú ar líon na néaróin i limistéar CA1 an ghrúpa rialaithe, bhí an socrú neamhord, agus bhí an chuid is mó de na cealla neamhghnácha i moirfeolaíocht agus lysis agus necróis. Moirfeolaíocht na gcealla sna GCanna(gliocóisídí decistéir)grúpa sách soiléir agus iomlán, le líon mór de na n-aschur le feiceáil, bhí an comhlacht Nissl corcra, bhí na nucleoli dhaite go domhain, soiléir, agus dírithe, agus ní raibh na núicléis dhaite. Tá moirfeolaíocht chill an ghrúpa feithiclí cosúil le moirfeolaíocht an ghrúpa rialaithe. Léirigh an comhaireamh cille gur mhéadaigh líon na néaróin phirimidiúla gnáth i limistéar CA1 den ghrúpa riaracháin (P<0.05); the="" difference="" between="" the="" medium="" and="" high="" dose="" groups="" was="" not="" statistically="" significant="" (p="">0.05), the number of normal pyramidal neurons To a certain extent, it shows an upward trend with increasing dose. There was no significant difference in the number of normal pyramidal cells between the vehicle group and the control group (P>0.05). Féach Tábla 1 .
Tábla 1 Éifeacht Glicóisídí Cistanche ar Shamáil Hippocampal Nis Luiche SAMP8, Gnáth-Chomhaireamh Ceall Pirimideach agus Uimhir Dhromlaigh Dhindrític (ríomhairí pearsanta)
a i gcomparáid leis an ngrúpa rialaithe t=0.193, P=0.582; cuirtear b i gcomparáid leis an ngrúpa rialaithe t=13.621, P=0.008; cuirtear c i gcomparáid leis an ngrúpa rialaithe t=21.798 , P=0.005; d i gcomparáid le grúpa rialaithe t=18.326, P=0.006; Cuirtear e i gcomparáid le grúpa rialaithe t=0.244, P=0.463; déantar f a chur i gcomparáid le grúpa rialaithe I gcomparáid le t=10.903, P=0.010; cuirtear g i gcomparáid leis an ngrúpa rialaithe t=21.817, P=0.005; cuirtear h i gcomparáid leis an ngrúpa rialaithe t=15.572, P=0. 007.
2.2 Tá anéifeacht na gliocóisídí iomlánacistéir ar dhlús na spines dendritic i lucha SAMP8 Léirigh staining Golgi gur tháinig laghdú ar líon na spines dendritic sa ghrúpa rialaithe, agus tháinig laghdú ar an dlús. Tar éis GCanna ainmhithe a thabhairt, mhéadaigh líon agus dlús na spines dendritic, agus chonacthas líon mór protrusions (P=0.048). Ní raibh aon difríocht shuntasach staitistiúil idir an grúpa meán-dáileog agus an grúpa ard-dáileog (P=0.853). Líon agus dlús an spine dendritic Léiríonn an chéim treocht aníos leis an méadú dáileog. grúpa feithicle agus rialú
Níl aon tábhacht staitistiúil ag líon agus dlús na spines dendritic sa ghrúpa (P=0.764). Féach Tábla 1 .
2.3 ÉifeachtCistanchegliocóisídí ar shloinneadh PSD-95 i lucha SAMP8 Léirigh braite cáilíochtúil inmunhistochemical PSD-95 go raibh níos lú léirithe PSD-95 ag an ngrúpa rialaithe, go raibh staining an choirp chill níos éadroime, agus an bhí ráta dearfach cainte níos ísle. Tar éis GCanna in vitro a fhorlíonadh, dhaite an corp cille níos doimhne, agus mhéadaigh slonn agus ráta dearfach PSD-95 (t=5.751, P<0.05). there="" was="" no="" significant="" difference="" between="" the="" middle-dose="" group="" and="" the="" high-dose="" group="" (t="1.077," p="">0.05). Go pointe áirithe, léirigh slonn PSD-95 treocht aníos le dáileoga méadaithe. feithicil
There was no statistically significant difference in PSD-95 expression between the control group and the control group (t = 0.585, P>0.05).
3 Plé
Is é PSD-95 an phríomh-chomhpháirt de postsynaptic agus tá baint aige le héagsúlacht feidhmeanna synaptic, a bhaineann le cainéil ian, gníomhaíocht shionaptach, conairí aistrithe comhartha intracellular, etc. [3]. Cnuasaíonn PSD-95 próitéiní a bhaineann le cosán comharthaíochta receptor NMDA chun coimpléasc móilín dírithe ar mhóilín-rialaithe-comhartha gabhdóra a fhoirmiú [4], a bhfuil ról lárnach aige sa chonair aistrithe comhartha. Tá baint ag gabhdóirí NMDA le hionduchtú potentiation fadtéarmach (LTP) i réigiún CA1 an hippocampus agus leis an bpróiseas foghlama agus cuimhne [5]. Tá príomhról rialála ag PSD-95 sa phróiseas seo, agus is féidir a chion próitéine a úsáid mar mharcóir móilíneach eile chun plaisteacht shionaptach a thomhas. Inár staidéir roimhe seo, tá sé cruthaithe againn go bhfuil GCanna(gliocóisídí decistéir)in ann foghlaim agus lagú cognaíocha a fheabhsú i lucha SAMP8, ach níl a mheicníocht moirfeolaíoch cille féideartha soiléirithe againn. Tá sé mar aidhm ag an turgnamh seo staidéar a dhéanamh ar a mheicníocht mhoirfeolaíoch féideartha cille.
Sa turgnamh seo, feabhsaítear ráta marthanais pirimideach cille agus plaisteacht synaptic sna GCanna(gliocóisídí decistéir)bhí an grúpa níos fearr ná an grúpa feithicle agus an grúpa rialaithe. Is féidir a fheiceáil gur chuir GCanna feabhas níos suntasaí ar mhoirfeolaíocht na gcealla pirimide. Léiríonn na torthaí turgnamhacha gur féidir le dáileoga níos airde de GCanna éifeacht níos fearr a bheith acu. Ón gcomparáid idir an grúpa dáileog lár agus an grúpa dáileog ard, is féidir a fheiceáil nach n-athraíonn an éifeacht go mór nuair a shroicheann an dáileog tiúchan áirithe. Dá bhrí sin, d'fhonn dramhaíl agus fo-iarsmaí GC a sheachaint nuair a bhíonn GCanna á n-úsáid, ba cheart an tiúchan is oiriúnaí a roghnú [6].
Léirigh staidéir roimhe seo go bhfuil GCanna(gliocóisídí decistéir)is féidir feabhas a chur ar fhoghlaim agus lagú cognaíocha lucha SAMP8 trí fheabhas a chur ar ráta marthanais na gceall pirimideach [7]. Tá sonraí ann freisin a thugann le fios go bhféadfadh GCanna galair néar-mheathlúcháin a fheabhsú trí iomadú agus difreáil gascheall néaracha a chur chun cinn [8-10]. Creideann an t-údar go bhféadfaí an mheicníocht do GCanna chun AD a fheabhsú a bhaint amach trí fheabhas a chur ar phlaisteacht moirfeolaíocht synaptic agus líon na gcealla pirimideacha a chothabháil, rud a leagann an bonn d'úsáid deiridh GCanna i gcosc agus cóireáil AD cliniciúil.
Tagairtí
[1] Úsáideann Chen Juluo, Chen Xingui, Hu Panpan, etc othair galar Alzheimer feidhmeanna Réamhthaighde [J]. Chinese Journal of Behavioral Medicine agus Inch Science, 2013, 22 (10): 889-891.
[2] Jin Chunhui, Liu Xiaowei, Yuan Jianmin, et al. Glacadóir Sórtála 1 Géin Núicléóisíde Aonair Comhghaol idir polymorphism aigéadach agus galar Alzheimer treallach［J］. Chinese Journal of Behavioral Medicine and Brain Science, 2014, 23 (5): 427-429.
[3] Schliebs R, Arendt T. An tábhacht a bhaineann leis an gcóras cholinergic san inchinn le linn aosaithe agus i ngalar Alzheimer［J］. Neural Transm, 2006, 113 (11): 1625-1644.
[4] Soriano FX. Díriú sonrach ar chomharthaí gabhdóra NMDA pro-bháis le brath éagsúil ar an ligand PDZ NR2B［J］． J Neurosci, 2008, 28 (42): 10696-10710.
[5] Selkoe DJ. Cuireann olagaiméirí intuaslagtha den béite-próitéin amyloid isteach ar phlaisteacht agus iompar synaptic ［J］. Behav Brain Res, 2008, 192 (1): 106 -113.
[6] Huang Zonghui, Chen Guanmin, Zhao Kangtao, et al. Staidéar ar thocsaineacht Cistanche ［J］. China Journal of Hygiene Inspection, 2014, 24 (8): 1098 -1100.
[7] Jia Jianxin, Song Wei, Yan Xusheng, et al. Tá éifeacht ag gliocóisídí iomlána cistanche ar lucha SAMP8. Tionchar agus meicníocht na hidirfhoghlama agus na cuimhne［J］. Journal of Baotou Medical College, 2014, 30 (6): 6-8.
[8] Bhí Xiao Q, Yan P, Ma X, et al. Éascaíonn Feabhas a chur ar bhithgenesis astrocytic lysosome A imréiteach agus attenuates plaic amyloid pathogenesis ［J］. J Neurosci, 2014, 34 (29): 9607-9620.
[9] Li QJ, Tang YM, Liu J, et al. Cóireáil galar Parkinson le gaschealla néaracha C172 ró-léiriú NURR1 le poblacht ath-chomhcheangailte - adenovirus easnamhach ina bhfuil an ghéin NURR1［J］. Synapse, 2007, 61 (12): 971-977.
[10] Qin Wei, Wei Wei, Xu Qian, et al. Cistanche ar an iomadú de C172 gaschealla neural Tionchar [J]. Cógaisíocht Caolas, 2015, 27 (12): 263-265.