Éifeachtaí Páirteanna Éagsúla Bainte As Cistanche Deserticola Ar Éifeachtaí Hypoglycemic As Db / Db Mice Duibhe Ⅱ

2 Modhanna turgnamhacha

2.1 Ullmhú táirgí próiseáilte Cistanche deserticola Cistanche deserticola:

Tóg ábhair íocshláinte Cistanche deserticola, nigh amach neamhíonachtaí, gal i bpota ag gnáthbhrú ar feadh 2 uair an chloig, gearrtha i 6 mm, agus tirim ag 70 céim . Cistanche deserticola: Tóg píosaí decoction Cistanche deserticola, cuir an méid cuí fíona ríse, mheascadh go maith, moisten ar feadh 8 uair an chloig (fíon ríse buí: uisce=1: 1), gal faoi bhrú ard ar feadh 4 uair an chloig, agus tirim ag 70 céim . (Bain úsáid as 30 ml d'fhíon ríse do gach 100 g de Cistanche deserticola).

Sliocht CISTANCHE NÁDÚRTHA ORGÁNACH

Seirbhís Tacaíochta Wecistanche-An t-onnmhaireoir cistanche is mó sa tSín:

Ríomhphost:wallence.suen@wecistanche.com

Whatsapp/Teil:+86 15292862950

Siopa Le Tuilleadh Sonraí Sonraíochtaí:

https://www.xjcistanche.com/cistanche-shop

2.2 Saibhriú codanna eastósctha éagsúla de Cistanche deserticola/Cistanche deserticola

Glac 30 g de púdar Cistanche deserticola / Tamarococcus deserticola, cuir 10 n-uaire an méid uisce, teasa agus aife le haghaidh eastóscadh faoi dhó, 2 uair an chloig gach uair, comhcheangail na sleachta, díriú, cuir eatánól go dtí go sroicheann an cion alcóil 60%, deascán ag teocht íseal ar feadh 12 uair an chloig, agus scagaire le súchán. , is é an deascán an chuid polaisiúicríd amh. Dírigh an comhshó go dtí tiúchan cuí, cuir i bhfeidhm é ar roisín asaithe macraporous D101, agus é a mhaolú le huisce agus le eatánól de thiúchan éagsúla in ord. Bailigh an t-uisce eluate agus comhchruinnigh faoi bhrú laghdaithe go dtí taos tiubh, arb é an codán iomlán oligosaccharide; nigh le eatánól 40%. Leachtaigh, comhchruinnigh, agus tirim faoi bhrú laghdaithe, arb é an codán glycosíde iomlán de Cistanche deserticola.

2.3 Cinneadh ábhair na gcodanna éagsúla eastósctha de Cistanche deserticola/Cistanche deserticola

2.3.1 Cion polaisiúicríde iomlán Cistanche deserticola/Cistanche deserticola a chinneadh.

Meáigh an sampla glúcóis 20. 00 mg i bhfleascán toirtmhéadrach 50 mL chun 0 a dhéanamh. Le haghaidh tuaslagán caighdeánach glúcóis 4 mg·mL-1, pípéad 3, 4, 5, 6, agus 7mL faoi seach isteach i bhfleascán toirtmhéadrach 5{0 mL, caolaigh go toirt le huisce, agus pípéad 2.0 mL de gach tuaslagán glúcóis grádán tiúchana isteach i bpromhadán. Glac méid comhionann eile d'uisce driogtha mar rialú bán, cuir 1 mL de feanól 5% le gach feadán, croith go maith, cuir 5 mL d'aigéad sulfarach tiubhaithe go tapa, é a fhágáil ar feadh 10 nóiméad, cuir i ndabhach uisce 40 céim é le haghaidh 15 nóiméad, é a thógáil amach, fuarú go tapa go teocht an tseomra, agus Tomhais an luach ionsúcháin ag 490 nm, glac an t-ionsúite (A) mar an ordachán agus an tiúchan glúcóis (C) mar an abscissa, tarraing cuar caighdeánach, agus faigh an cothromóid aischéimnithí Y=8.37X-0.162 8 (R2=0.994 6). Meáigh 1.0 g de phúdar polaisiúicríde iomlán na n-amhábhar agus na dtáirgí go cruinn, cuir iad i bhfleascáin toirtmhéadracha 50 ml faoi seach, cuir uisce chun an méid a thuaslagadh agus a choigeartú go dtí an marc, tarraing 2.0 mL isteach i bhfeadán tástála go cruinn, agus tomhas mar an gcéanna. mar mhodh caighdeánach ullmhúcháin cuar. , sin é.

2.3.2 Cinneadh ar ábhar betaine i Cistanche deserticola/Cistanche deserticola

2.3.2.1 Réiteach tagartha a ullmhú:

Meáigh 1.17 mg den tuaslagán tagartha betaine go cruinn, cuir isteach i bhfleascán toirtmhéadrach 5 mL é, cuir 50% meatánól chun é a thuaslagadh agus caolaigh go dtí an toirt, agus tá sé réidh.

2.3. 2. 2 Coinníollacha crómatagrafacha

Is é an colún crómatagrafaíochta ná Ecosil {{0}}colún crómatagrafaíochta AMINO (4.6 mm × 250 mm, 5 μm), céim shoghluaiste: uisce-aicéatrile (99.5 ∶ 0.5) , teocht an cholúin: 30 céim , tonnfhad braite: 194 nm, ráta sreafa: 0.6 mL·min-1, toirt insteallta 10 μL, crómatagram a thaispeántar i bhFíor 1. 2.3.2.3 Réiteach tástála a ullmhú go beacht meáigh púdar an chodáin oligosaccharide iomlán de tháirgí amh agus críochnaithe 1.0 g, faoi seach a chuirtear i bhfleascán toirtmhéadrach 5 ml, cuir uisce driogtha a thuaslagadh agus caolaigh go toirt, croith go maith, pas a fháil trí 0.45 μL membrane scagaire microporous, agus tá sé réidh.

2.3.2.4 Cinneadh Ábhar Samplach

Déan an réiteach tástála iomlán oligosaccharide a ionsú go beacht i Cistanche deserticola amh agus ullmhaithe, é a thomhas de réir na gcoinníollacha faoi "2.3.2.2", agus ríomh an t-ábhar betaine sa sampla.

2.3.3 Cinneadh a dhéanamh ar an ábhar echinacoside, verbascoside, agus heitreacipicifugarin i Cistanche deserticola/Cistanche deserticola

2.3.3.1 Réiteach tagartha a ullmhú

Meáigh go beacht 4.50 mg echinacoside, 4.80 mg de verbascoside, agus 5.05 mg de comimicin heitrologach i bhfleascáin toirtmhéadracha 5 ml, cuir 50% meatánól chun é a thuaslagadh agus a chaolú go dtí an marc, agus glac gach rialú Cuir 200 μL den tuaslagán samplach isteach san instealladh. vial, cuir 400 μL de 50% meatánól, agus meascadh go maith chun réiteach tagartha measctha a dhéanamh, croith go maith, agus tá sé réidh.

2.3.3.2 Coinníollacha crómatagrafacha

Is é Ecosil C18 an colún crómatagrafaíochta (4.6 mm × 250 mm, 5 μm), is é meatánól an chéim shoghluaiste A, 0.1% aigéad formach an chéim shoghluaiste B, elution grádán, {{ 12}}~45 min, 30% A→ 70% A, is é an ráta sreafa 1.0mL·min-1, tá an teocht colún 30 céim, is é an tonnfhad braite 330 nm, is é an méid insteallta 10μL, agus Taispeántar an crómatagram i bhFíor 2.

2.3.3.3 Réiteach tástála a ullmhú

Meáigh go beacht 1.0 g de phúdar iomlán glycosíde na n-amhábhar agus na dtáirgí, cuir i bhfleascáin toirtmhéadracha 10 0 ml iad, cuir 50% meatánól leis chun an toirt a thuaslagadh a choigeartú go dtí an marc, agus croith go maith. Tarraing go beacht 5 mL de gach sampla isteach i bhfleascán toirtmhéadrach 10 mL, cuir 50% meatánól chun an toirt a dhéanamh suas, croith go maith, agus pas a fháil trí membrane scagaire microporous 0.45 μm chun é a fháil.

2.3.3.4 Cinneadh Ábhar Samplach

Tarraing go beacht sampla gliocóisídí iomlána Cistanche deserticola agus déan é a thomhas de réir na gcoinníollacha faoi "2.3.3.2". Ríomh an t-ábhar atá in éiceachóisíd, in verbascoside, agus san ilchineálach atá sa sampla.

2.4 Grúpáil ainmhithe, samhaltú, agus riaradh drugaí

Tá 12 uair an chloig solais agus 12 uair an chloig de dhorchadas ag an seomra ainmhithe, taiseachas coibhneasta 50% go 70%, agus teocht an tseomra 18 go 22 céim. db/db tugadh lucha dubha agus db/m lucha dubha (gnáthghrúpa rialaithe) le gnáthchothú, agus thosaigh an turgnamh ag 9 seachtaine d'aois. Seachas an gnáthghrúpa rialaithe, roghnaíodh na lucha dubha db/db a bhí fágtha go randamach de réir leibhéil siúcra fola agus meáchan coirp. Roinnte i 8 ngrúpa, eadhon grúpa múnla, grúpa rialaithe dearfach, grúpa polaisiúicríde iomlán Cistanche deserticola, grúpa iomlán oligosaccharide Cistanche deserticola, grúpa glúcóisídí iomlán deserticola Cistanche, grúpa polaisiúicríde iomlán deserticola Tartschistanche, grúpa polaisiúicríd iomlán deserticola deserticola, grúpa iomlán oligosaccharide Tartschistangluche deserticola. Ach amháin i gcás rialú gnáth

Seachas an grúpa múnla agus an grúpa múnla, tugadh riarachán intragastrach do na francaigh sna grúpaí eile ag dáileog de 2 mL/100 g ar feadh 4 seachtaine as a chéile. Ba é tiúchan an leachta ná 4.1 g·kg-1. Cuireadh cóireáil ar an ngnáthghrúpa rialaithe agus ar an ngrúpa múnla ar an mbealach céanna. Tabhair méid áirithe de ghnáth-salanda don bholg.

2.5 Éifeachtaí codanna éagsúla eastósctha de Cistanche deserticola ar leibhéil glúcóis fola lucha dubha db/db

2.5.1 Tástáil lamháltas glúcóis bhéil (OGTT).

Tar éis 26 lá riartha, rinne siad troscadh ar feadh 12 uair an chloig, agus 60 nóiméad tar éis an riaracháin an lá dár gcionn, tugadh 2.0 g·kg-1 glúcóis do lucha dubha i ngach grúpa. ag 0, {{10}}.5, 1.0, agus 2 faoi seach. .0 h tógadh fuil vein eireaball chun luach glúcóis fola a thomhas. Leis an luach glúcóis fola mar an t-ord agus an t-am mar an abscissa, rinneadh cairt athraithe glúcóis fola, agus ríomhadh an limistéar faoi líne chuar glúcóis fola gach grúpa turgnamhach de réir na foirmle (AUC, hmmoL·L{ {13}}) [19]. AUC=A × {{{20}}.25 + B × 0.50 + C × 0.75 + D. San fhoirmle: Is iad A, B, C, agus D na luachanna glúcóis fola ag 0, 0.5, 1.0, agus 2.0 h faoi seach.

2.5.2 Innéacs friotaíochta inslin agus innéacs arteriosclerosis a ríomh

Ríomhadh an t-innéacs friotaíochta insulin de réir an mhodha litríochta [20]: HOMA-IR=Glúcóis × Insulin / 22. 5. HOMA - =20 × Insulin / (Glúcóis - 3.5) × 100%. Is friotaíocht inslin é IR agus (%) is feidhm chill é. Is é mmoL·L-1 aonad molar glúcóis

. Tugtar inslin i mU·L-1. Déantar líon glúcóis agus inslin a thomhas le linn troscadh. Ríomhadh an t-innéacs arteriosclerosis (innéacs Atherogenic) de réir an mhodha a ndearna Zheng et al cur síos air. [21]. Modh ríofa: Atherogenic i ndex=(TC-HDL-C) / HDL-C.

2.5.3 Éifeachtaí codanna eastósctha éagsúla de Cistanche deserticola/Cistanche deserticola ar serum INS agus HbA1c de lucha dubha db/db

Tóg na samplaí séiream reoite agus tabhair chuig teocht an tseomra iad sula n-úsáidfear iad le haghaidh tástála le feisteáin imdhíonta einsím-nasctha INS agus HbA1c. Lean go docht na modhanna agus na céimeanna atá sna treoracha feiste.

2.6 Éifeachtaí páirteanna eastósctha éagsúla de Cistanche deserticola/Cistanche deserticola ar an ae leibhéal struis ocsaídiúcháin de lucha dubha db/db

Tóg na samplaí séiream reoite agus tabhair chuig teocht an tseomra iad sula n-úsáidfidh tú iad le haghaidh tástála le feisteáin imdhíonta atá nasctha le heinsímí MDA agus SOD. Lean go docht na modhanna agus na céimeanna atá sna treoracha feiste.

2.7 Éifeachtaí codanna eastósctha éagsúla de Cistanche deserticola/Cistanche deserticola ar mheitibileacht hepatic saille i lucha dubha db/db

Tomhaiseadh leibhéil Rat serum TG, TC, HDL-C, agus LDL-C ag baint úsáide as feisteáin ábhartha. Le haghaidh céimeanna sonracha tomhais, féach ar na treoracha feiste.

2.8 Éifeachtaí páirteanna eastósctha éagsúla de chamfar Cistanche deserticola/Ratiana ar UA, Cr, agus mALB i bplasma agus fual lucha dubha db/db

Glac samplaí plasma reoite agus fuail agus tabhair chuig teocht an tseomra iad sula n-úsáidfear iad chun trealamh imdhíonta imdhíonta UA, Cr, agus mALB a thástáil. Lean go docht na modhanna agus na céimeanna atá sna treoracha feiste.

2.9 Breathnú ar chodanna paiteolaíocha pancreatacha agus duánacha trí sileadh HE

Baineadh an briseán agus na fíocháin duáin a bhí sáithithe i 10% fostóir paraformaildéad ar feadh 24 uair an chloig, nite le huisce driogtha, agus stóráiltear iad in eatánól 70%. Baineadh samplaí fíocháin, díhiodráitíodh iad le eatánól grádaithe, glanadh iad, leabaíodh iad i bpaifín, gearradh iad, agus ansin dathaíodh iad le hematocsailín agus eóisin (smálú H&E). Tar éis an gliú ailt a thriomú, bain úsáid as córas íomháithe digiteach ardtaifigh chun grianghraif de na hailt a bhreathnú agus a ghlacadh.

2.10 Cinneadh collaigine cineál-IV fíocháin duáin trí imdhíon-histochemistry

Le cur in iúl, díchéiríodh na hailt duáin go huisce agus ansin cuireadh faoi réir aisghabháil antaiginí. Cuireadh bac orthu le séiream gabhar 10% agus goradh iad leis an bpríomhantasubstaint ag 4 chéim thar oíche. Tar éis níocháin, gor an antashubstaint tánaisteach. Ba é an réiteach reatha DAB le haghaidh forbairt dathanna. Rinneadh níocháin, díhiodráitiú agus séalaithe faoi mhicreascóp optúil. Breathnaigh ar an abairt próitéin collagen cineál-IV i bhfíochán duáin.

2.11 Modhanna staidrimh

Ag baint úsáide as bogearraí GraphPad Prism Leagan 5.01 (2007, GraphPad Software re inc) chun anailís a dhéanamh ar na sonraí agus na torthaí

Is é an toradh meán±SEM Léiríonn sé go bhfuil an difríocht idir an dá ghrúpa Aon-bhealach

Péire amháin tástála colún) modh, P<0.05 is a significant difference and has statistical significance.