Cothaíonn Forlíonadh Aiste Bia Arsanaic Strus Ocsaídeach Trí Fhachtóir Núicléach a Shochtadh 2-Fachtóir Gaolmhar Erythroid 2 in Aenna agus Duáin na gCearc

Déan teagmháil le:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Teibí

Rinne an staidéar seo imscrúdú ar éifeachtaí forlíonta arsanaic chothaithe ar fheidhmíocht breithe, cáilíocht uibheacha, histeapaiteolaíocht hepatic agus duánach, agus strus ocsaídiúcháin sna haenna agusduáin na gcearc breithe. Ina theannta sin, scrúdaíodh cosán próitéine 1(Keap1) atá bainteach le ECH fachtóir núicléach erythroid {{{0}}fachtóir 2 (Nrf2) atá cosúil le Kelch-chosúil le meicníocht mhóilíneach an struis a nochtadh. Leithdháileadh cúig chéad is a dó dhéag de chearca breithe Hyline White ar 4 ghrúpa go randamach le 8 bpeann in aghaidh an ghrúpa agus 16 chearc in aghaidh an phinn. Ba iad na dáileoga arsanaic a tugadh do na 4 ghrúpa ná 0.95, 20.78, 40.67, agus 60.25 mg/kg. Léirigh na torthaí gur laghdaigh forlíonadh arsanaic chothaithe go suntasach táirgeadh uibheacha na gcearc (P, 0.05), meánmheáchan uibheacha (P, 0.05), aonaid Haugh (P, 0.05), airde albaimin (P, 0.05). , agus neart bhlaosc uibhe (P, 0.05). Spreag forlíonadh aiste bia arsanaic freisin carnadh damáistí arsanaic agus histeapaiteolaíocha san ae agusduán. De réir, d'fheabhsaigh forlíonadh arsanaic chothaithe go suntasach serum alanine aminotransferase (P, {{0}}.05), aspartate aminotransferase (P, 0.05) , nítrigin úiré fola (P, {{1{05}}.05), agus leibhéil aigéid úiric (P, 0.05). Tar éis nochtadh arsanaic, rinneadh gníomhaíochtaí superoxide dismutase (SOD) (P , 0.05), catalase (P , 0.01), glutathione reductase (P, 0.05), glutathione peroxidase (P, 0.05), agus ábhar glutathione (P, 0.05) laghdú suntasach, agus tháinig méadú suntasach ar an leibhéal malondialdehyde (P, 0.05) san ae agus na duáin. Tharla comhghaolta dearfacha idir gníomhaíochtaí einsímí frithocsaídeacha agus léiriú géine einsím frithocsaídeach san ae agus na duáin, ach amháin i gcás léiriú géine dismutase superoxide mangainéise duánach agus gníomhaíocht SOD. Ina theannta sin, rinneadh comhghaolú dearfach ar léiriú mRNA hepatic agus duánach Nrf2 le léiriú géine frithocsaídeach agus comhghaolú diúltach le léiriú Keap1 mRNA. Go hachomair, chothaigh forlíonadh arsanaic chothaithe strus ocsaídiúcháin trí chonair Keap1 Nrf a shochtadh in ae agus i nduáin na gcearc breithe.

Eochairfhocail:arsanaic, cearc bhreithe, Nrf2-chonair Keap1, strus ocsaídiúcháin, na duáin

RÉAMHRÁ

Le blianta beaga anuas, fuarthas amach go bhfuil guaiseacha comhshaoil ​​i dtiúchan méadaithe. Is tocsain an-mhiotalóideach é arsanaic, fiú ag tiúchan an-íseal in ábhar cothaithe éanlaithe clóis. Tá a ról fiseolaíoch in éanlaith chlóis sainmhínithe go maith, toisc go bhfuil sé riachtanach chun meitibilítí meitiainín a shintéisiú lena n-áirítear cistéin. Tá na tiúchana arsanaic molta in ábhar cothaithe éanlaithe clóis idir {{0}}.012 agus 0.050 mg/kg (Balo s et al., 2019). Léirigh imscrúdú roimhe seo, áfach, gur dóichí go mbeidh na tiúchain arsanaic in ábhar cothaithe éanlaith chlóis níos airde ná leibhéil lamháltais ainmhithe nuair a bhíonn feamainn, carbónáit cupric, peintehiodráit chuprach sulfáit, tríhiodrocsaíd clóiríd déchóipéir, nó carbónáit neamhfheiriúil san ábhar cothaithe éanlaithe (Adamse et al., 2017). . Kazi et al. (2013) go bhfuil an-fhéidearthacht ann go ndéanfaidh arsanaic in ábhar cothaithe éanlaithe difear do shláinte sicíní gríoscáin. Is fadhbanna tromchúiseacha fós iad na méideanna iomarcacha arsanaic in ábhar cothaithe éanlaithe agus a éifeachtaí tocsaineolaíocha ar éanlaith chlóis. Nuair a théann an iomarca arsanaic isteach in ainmhí, féadann sé éagsúlacht d’iarmhairtí díobhálacha sláinte a chothú, amhail imdhíon-tocsaineacht, tocsaineacht riospráide, tocsaineacht chardashoithíoch, hepatotocsaineacht, hepatotocsaineacht, nephratocsaineacht, néarthocsaineacht, tocsaineacht atáirgthe, agus géineatocsaineacht. Rinneadh éifeachtaí tocsaineolaíocha arsanaic ar orgáin visceral a dhoiciméadú go príomha i staidéir ar mhamaigh, rud a thugann le tuiscint go bhfuil arsanaic i mbaol feidhmeanna hepatic agus duánach (Waalkes et al., 2004; Mazumder, 2005; Zheng et al., 2014). Mar sin féin, níl na héifeachtaí tocsaineolaíocha a bhaineann le nochtadh arsanaic chothaithe ar ae agus ar dhuáin na gcearc breithe soiléir go fóill. Tá dlúthbhaint idir tocsaineacht arsanaic in ainmhithe agus strus ocsaídiúcháin, rud a chuireann isteach ar an gcothromaíocht pro/frithocsaídeach (Flora, 2011). Nuair a théann arsanaic isteach i gcill, ceanglaíonn sé le glutathione intracellular (GSH) nó ocsaídíonn sé é, rud a fhágann giniúint radacach saor in aisce. Mar is eol dúinn, is féidir géinte cytoprotective a rialáil le roinnt fachtóirí trascríobh intracellular, lena n-áirítear fachtóir núicléach erythroid 2-fachtóir gaolmhar 2 (Nrf2), próitéin gníomhachtaithe 1, agus fachtóir núicléach kappa-B (Kwak et al., 2001 ). Is móilín ríthábhachtach é an fachtóir trascríobh Nrf2 a rialaíonn leibhéil strus i gcealla. Faoi choinníollacha ciúine, idirghníomhaíonn Nrf2 le próitéin 1 (Keap1) a bhaineann le ECH atá cosúil le Kelch, atá lonnaithe den chuid is mó sa chíteaplasma. Nuair a spreagtar strus ocsaídiúcháin, aistríonn Nrf2 ón gcíteaplasma go dtí an núicléas tar éis scaradh ón móilín Keap1 agus ansin gníomhaíonn sé na habairtí de ghéinte cytoprotective (Motohashi agus Yamamoto, 2004). Ina dhiaidh sin, déanann géinte cytoprotective rialáil bhreise ar ghníomhaíochtaí einsímí frithocsaídeacha iartheachtacha, lena n-áirítear superoxide dismutase (SOD), glutathione reductase (GR), glutathione peroxidase (GSH-Px), agus catalase (CAT). Léiríodh i staidéar roimhe seo go bhfuil an fachtóir trascríobh Nrf2 rannpháirteach i strus arna spreagadh ag arsanaic i mamaigh (Sinha et al., 2013). Mar sin féin, tá na héifeachtaí beachta a bhaineann le nochtadh arsanaic ar éifeachtaí struis ocsaídiúcháin ar chearca breith dothuigthe. Sa staidéar seo, rinneamar imscrúdú ar an éifeacht atá ag forlíonadh arsanaic chothaithe ar fheidhmíocht breithe, ar cháilíocht uibheacha, ar innéacsanna bithcheimiceacha serum, ar athruithe histeapaiteolaíocha hepatic agus duánach, agus ar strus ocsaídiúcháin i gcearc breithe. Ina theannta sin, rinneadh iniúchadh ar chonair Keap1 Nrf chun an mheicníocht mhóilíneach sna haenna agusduáinna gcearc breith. Tugann an staidéar seo roinnt léargais ar an teoiric bhitheolaíoch maidir le ró-thocsaineacht arsanaic chothaithe san ae agusduánna gcearc breith.

cistanche redditchunfaoiseamh pian duáin

ABHAIR AGUS MODHANNA

D’fhaomh an Coiste Institiúideach um Chúram agus Úsáid Ainmhithe an staidéar seo. Cuireadh na nósanna imeachta turgnamhacha go léir a dhéantar ar ainmhithe i bhfeidhm i gcomhréir le Cumann na Síne le haghaidh Eolaíochtaí Ainmhithe Saotharlainne.

Ainmhithe, Aistí bia, agus Dearadh Turgnamhach

Roghnaíodh go randamach cúig chéad is a dó dhéag de chearca breithe Hyline White a raibh coinníollacha coirp cosúla orthu agus roinneadh iad i 4 ghrúpa. Bhí 8 macasamhail de 16 éan i ngach grúpa. Cuireadh arsanaic leis an aiste bia basal-bean arbhar ag 4 thiúchan éagsúla (0, 20, 40, agus 60 mg/kg; i bhfoirm aigéid arsanailic) (Tábla Forlíonta 1). Rinneadh na tiúchain arsanaic sa bheatha a thomhas trí speictriméadracht ionsúcháin adamhach giniúna hidríde de réir na modheolaíochta a rinneadh roimhe seo (Dos Passos et al., 2012). Ba iad na tiúchain iarbhír arsanaic sna 4 ghrúpa ná 0.95, 20.78, 40.67, agus 60.25 mg/kg. Coinníodh na héin i cages (60! 50! 50 cm3) feistithe le 1 friothálacha agus 2 ólachán clúidín, agus cuireadh 2 chearc in aghaidh an chliabháin. Le linn na tréimhse turgnamhacha ar fad, bhí rochtain saor in aisce ag na cearca ar bhia agus ar dheoch. Mhair an turgnamh ar fad 10 seachtaine, lena n-áirítear 1-tréimhse choigeartaithe seachtaine agus 9-tréimhse fhoirmiúil thurgnamhach seachtaine.

Feidhmíocht a leagan agus Cáilíocht Uibheacha

Le linn na tréimhse turgnamhacha ar fad, rinneadh innéacsanna feidhmíochta breithe a thaifeadadh go laethúil, lena n-áirítear tomhaltas beatha, táirgeadh uibheacha lá na gcearc, agus meáchan uibheacha (EW). Rinneadh cinntí ar iontógáil beatha agus EW i ngach grúpa ag baint úsáide as scála íogair meáchain (XS2002S, Mettler Toledo, Zurich, an Eilvéis). Ríomhadh an cóimheas comhshó beathaithe (FCR) de réir na foirmle seo a leanas: iontógáil beatha FCR 5 i ngraim / mais uibheacha i ngraim. Bailíodh iomlán de 40 uibheacha ó gach grúpa go randamach chun paraiméadair cháilíochta uibheacha a thomhas laistigh de 24 h ó oviposition ag deireadh an turgnaimh. Rinneadh na huibheacha a mheá le scála íogair meáchain (XS2002S, Mettler Toledo). Ina dhiaidh sin, chinn tástálaí digiteach uibheacha (DET6000, Nabel Co. Ltd., Kyoto, an tSeapáin) aonad Haugh, airde albaimin, dath buíocáin, agus neart bhlaosc uibhe. Socraíodh tiús uibheachashell leis an scannán istigh ag an réigiún géar, lár agus maol den ubh ag baint úsáide as micriméadar diailithe(547-350, Mitutoyo, Kawasaki, an tSeapáin), agus baineadh úsáid as na meánluachanna don anailís staitistiúil.

Bailiúchán Samplaí

Tar éis an turgnaimh tógála, roghnaíodh 32 éan ó gach grúpa go randamach agus rinneadh iad a eotanú trí veins an mhuineál a ghearradh amach. Bailíodh samplaí fola i bhfeadáin lártheifneora steiriúla agus iompraíodh iad láithreach chuig an tsaotharlann chun innéacsanna bithcheimiceacha serum a thomhas. Ina dhiaidh sin, rinneadh na héin a scaradh, agus an t-ae agusduáinbaineadh as an cavity bhoilg. An t-ae agusduángearradh samplaí i 4 chuid. Socraíodh cuid amháin láithreach i 4 faoin gcéad paraformaildéad le haghaidh scrúdú histeapaiteolaíoch. Stóráladh na 3 chuid eile láithreach i nítrigin leachtach chun paraiméadair strus ocsaídiúcháin, sil-leagan arsanaic agus léiriú géine a chinneadh tuilleadh.

Measúnacht Taiscí Arsanaic

Tar éis cáilíocht uibhe a thomhas, scaradh an buíocán ón albam. Rinneadh carnadh arsanaic san albaimin agus buíocán a thomhas trí speictriméadracht ionsúcháin adamhach giniúna hidríde de réir na modheolaíochta a rinneadh roimhe seo (Dos Passos et al., 2012). Ríomhadh carnadh arsanaic san ubh iomlán tríd an ábhar arsanaic san albaimin agus sa buíocán a achoimriú. Ar an mbealach céanna, baineadh úsáid as speictriméadracht ionsúcháin adamhach giniúna hidríde chun carnadh arsanaic san ae a chinneadh agusduáin na gcearc breithe(Dos Passos et al., 2012).

Innéacsanna Bithcheimiceacha Séiream a Chinneadh

Is innéacsanna tábhachtacha iad leibhéil iomlána próitéine, albaimin, globulin, alanine aminotransferase (ALT), agus aspartate aminotransferase (AST) chun feidhm ae a mheas. Rinneadh na paraiméadair seo a thomhas ag baint úsáide as feisteáin measúnaithe cuí (Institiúid Bithinnealtóireacht Nanjing Jiancheng, Nanjing, an tSín) de réir threoracha an mhonaróra. Is innéacsanna tábhachtacha iad na leibhéil nítrigine úiré fola (BUN), aigéad uric (UA), agus creatinine (CT) chun feidhm na duáin a mheas agus socraíodh iad ag baint úsáide as trealamh braite (Institiúid Bithinnealtóireacht Nanjing Jiancheng).

Athruithe Histeapaiteolaíocha

Díhiodráitíodh fíocháin hepatic agus duánach atá socraithe i 4 faoin gcéad paraformaildéad i 70, 80, 90, 95, agus 100 faoin gcéad eatánól agus ar deireadh leabaithe i pairifín. Rinneadh na fíocháin a slisnithe ina gcodanna de thiús 6-mm agus ansin iad a dhathú le hematocsailín agus eoisin. Ina dhiaidh sin, breathnuithe ar athruithe histeapaiteolaíocha san ae agusduánRinne paiteolaí fíocháin faoi mhicreascóp optúil (Olympus, Melville, NY).

Sárocsaídiú lipid (LPO) agus Measúnachtaí ar Ghníomhaíocht Einsím Frithocsaídeach

Socraíodh gníomhaíochtaí SOD, CAT, GR, agus GSH-Px, agus ábhar malondialdehyde (MDA) agus GSH san ae agus sna duáin ag feisteáin anailíse cuí (Institiúid Bithinnealtóireacht Nanjing Jiancheng). Go hachomair, rinneadh ábhar MDA a thomhas trí mhodh speictrophotiméadrach bunaithe ar an imoibriú idir aigéad thiobarbituric agus MDA (Janero, 1990). Rinneadh gníomhaíocht GR agus ábhar GSH a chinneadh trí úsáid a bhaint as 5,5- dithiobis(2-aigéad nítribenzoic) (Carlberg agus Mannervik, 1985; Abegg et al., 2012). Socraíodh gníomhaíocht SOD de réir an imoibrithe coisctheach idir laghdú tetrazolium nitro gorm agus xanthine oxidase. Socraíodh gníomhaíocht CAT bunaithe ar fhoirmiú coimpléasc moluibdáit amóiniam sárocsaíd hidrigine cobhsaí (Aebi, 1984). Socraíodh gníomhaíocht GSH-Px trí mheastóireacht a dhéanamh ar laghdú hidroperoxide t-butyl (Wheeler et al., 1990).

Leithlisiú RNA Iomlán agus PCR Cainníochtúil Fíor-Ama

Rinneadh RNA iomlán a leithlisiú ón ae agus fíocháin duáin leis an Kit RNAiso Trizol (Invitrogen, Carlsbad, CA) de réir threoracha an mhonaróra. Trascríobhadh na samplaí RNA droim ar ais go cDNA ag baint úsáide as Kit Imoibrí PrimeScript RT (TaKaRa, Dalian, an tSín). Léirítear na primers tosaigh agus droim ar ais le haghaidh mangainéise superoxide dismutase (MnSOD), superoxide dismutase copar-since (CuZnSOD), CAT, GR, GSH-Px, Nrf2, Keap1, agus an ghéin coimeád tí (b-actin) i dTábla Forlíontach 2. Rinneadh raidhse géine a thomhas trí chóras PCR Fíor-Ama StepOnePlus (ABI 7500, Applied Biosystems, Foster City, CA). Ba iad na coinníollacha rothaíochta ná 95 C ar feadh 30s agus ina dhiaidh sin 35 timthriall de 95 C ar feadh 5 s, 59 C ar feadh 10 s, agus 72 C ar feadh 30 s. Tomhaiseadh an difríocht fillte i slonn mRNA ag baint úsáide as an modh cainníochtaithe coibhneasta ag baint úsáide as éifeachtúlachtaí PCR fíor-ama agus normalaithe go leibhéal b-actin, chun na hathruithe CT coibhneasta i measc na ngrúpaí go léir a chur i gcomparáid (Livak agus Schmittgen, 2001).

Anailísí Staidrimh

Cuirtear na sonraí go léir in iúl mar mheán 6 SE. Rinne ANOVA anailís staitistiúil ag baint úsáide as leagan SPSS 20.0 (SPSS Inc., Chicago, IL). Nuair a bhí na difríochtaí idir na grúpaí suntasach (léirithe ag P, 0.05), cuireadh na modhanna i gcomparáid le difríocht shuntasach macánta Tukey do chomparáidí iolracha post hoc. Rinneadh anailís ar chomhghaolú Pearson trí anailís ar chomhghaolú déathraitheach (leagan SPSS 20.0, SPSS Inc.). Léirítear na comhéifeachtaí suntasacha agus comhghaol mar "p" agus "r," faoi seach.

TORTHAÍ

Feidhmíocht Leagan agus Cáilíocht Uibheacha I gcomparáid leo siúd sa ghrúpa arsanaic {{{0}}.95 mg/kg, tháinig laghdú suntasach ar tháirgeadh uibheacha lá na gcearc, agus EW sna 60.25 mg/ kg grúpa arsanaic (P, 0.05). Mar sin féin, níor chuir arsanaic chothaithe isteach ar iontógáil beatha nó FCR (Tábla 1). I gcomparáid leis sin sa ghrúpa arsanaic {{20}.95 mg/kg, tháinig laghdú suntasach ar aonad Haugh sna 40.67 mg/kg (P, 0.05) agus 60.25 mg /kg (P, 0.05) grúpaí arsanaic. Ina theannta sin, tháinig laghdú suntasach ar airde albaimin agus neart sceall uibhe sa ghrúpa arsanaic 20.78 mg/kg i gcomparáid leis an ngrúpa arsanaic 0.95 mg/kg (P, 0.05), ardchláraithe sa ghrúpa arsanaic 40.67 mg/kg, agus laghdaigh sé go géar sa 60.25 mg/kg grúpa arsanaic (P, 0.05). Ní raibh tionchar ag arsanaic chothaithe ar dhath buíocáin ná ar thiús bhlaosc uibhe (Tábla 1)

sil-leagan Arsanaic

sil-leagan arsanaic san albaimin (P, {{0}}.05), buíocán (P, 0.05), agus san ubh iomlán (P, 0.05) méadú suntasach de réir mar a mhéadaigh an dáileog arsanaic chothaithe ó 0.95 go 60.25 mg/kg (Tábla 2). Mar an gcéanna, de réir mar a mhéadaigh an dáileog arsanaic chothaithe ó 0.95 go 60.25 mg/kg, tháinig méadú suntasach ar sil-leagan arsanaic san ae (P, 0.05) agus sna duáin (P, 0.05) (Tábla 2).

Anailís ar an gComhghaol idir Cáilíocht Uibheacha agus Sil-leagan Arsanaic san Uibheacha

Rinneadh comhghaol diúltach idir sil-leagan arsanaic san albaimin agus aonad Haugh (r {{0}}.622, P, 0.{{10}}1), albamen airde (r 5 20.878, P, 0.01), agus neart bhlaosc uibhe (r 5 20.897, P, 0.{{ 30}}1). Idir an dá linn, bhí baint diúltach freisin ag sil-leagan arsanaic sa buíocán le haonad Haugh (r 5 20.654, P, 0.01), airde albaimin (r 5 20.893, P, 0.01), agus neart sliogán uibhe (r 5 20.902, P, 0.01). Ar an gcaoi chéanna, fuarthas caidreamh diúltach idir sil-leagan arsanaic san ubh iomlán agus aonad Haugh (r 5 20.640, P, 0.01), airde albaimin (r 5 20.888, P, 0.01). , agus neart bhlaosc uibhe (r 5 20.902, P, 0.01) (Tábla 3)

Innéacsanna Bithcheimiceacha Séiream

I gcomparáid leo siúd sa ghrúpa arsanaic {{{0}.95 mg/kg, méadaíodh leibhéil ALT go suntasach sa 20.78 mg/ kg (P , 0.{ {16}}5), 40.67 mg/kg (P , 0.05), agus 60.25 mg/kg (P , 0.05) grúpaí arsanaic. Idir an dá linn, méadaíodh leibhéil AST sa ghrúpa arsanaic 60.25 mg/kg go suntasach i gcomparáid leo siúd sa ghrúpa arsanaic 0.95 mg/kg (P, 0.05). Ní raibh tionchar ag arsanaic chothaithe ar leibhéil iomlána próitéine nó albaimin i serum (Tábla 4).

I gcomparáid leo siúd sa ghrúpa arsanaic {{{0}.95 mg/kg, méadaíodh leibhéil BUN agus UA go suntasach sa ghrúpa arsanaic 60.25 mg/kg (P, 0.05), cé nach raibh nochtadh arsanaic chothaithe ann. difear don leibhéal CT sa serum (Tábla 4).

Athruithe Histeapaiteolaíocha

Bhí cuma an fhíocháin hepatic gnáth agus gan athrú sa ghrúpa arsanaic {{{0}}.95 mg/kg. Mar sin féin, de réir mar a mhéadaigh an dáileog arsanaic chothaithe ó 20.78 go 60.25 mg/ kg, tháinig méadú níos déine ar iomadú na duchtanna bile, steatóis heipitocyte, agus dífhoirmiú na vein lárnach (Figiúirí 1A–1D). Bhí cuma fíocháin duánach gnáth agus gan athrú sa ghrúpa arsanaic 0.95 mg/kg. Mar sin féin, bhí crapadh glomerular mór sa ghrúpa arsanaic 20.78 mg/kg i gcomparáid leis an ngrúpa arsanaic 0.95 mg/kg. De réir mar a mhéadaigh an dáileog d’arsanaic chothaithe ó 40.67 go 60.25 mg/kg, d’éirigh méadú tubules duánach, fiobróis tiúbacha, agus hyalinization níos déine (Fíoracha 1E–1H).

Bithmharcóirí Strus Ocsaídeacha

I gcomparáid leo siúd sa ghrúpa arsanaic {{{0}.95 mg/kg, méadaíodh leibhéil hepatic MDA go suntasach sa ghrúpa arsanaic 6{0.25 mg/kg (P , {{12}) }.05), agus méadaíodh leibhéil MDA duánach go suntasach san arsanaic 20.78 mg/kg (P , 0.05), 40.67 mg/kg (P , 0.05), agus 60.25 mg/kg (P , 0.05) grúpaí (Fíor 2A). Leibhéil GSH san ae agusduánlaghdú suntasach ar an ngrúpa arsanaic 20.78 mg/kg i gcomparáid leo siúd sa ghrúpa arsanaic 0.95 mg/kg (P, 0.05) , agus ardchlárú sna grúpaí arsanaic 4{0.67 agus 6{{{0.25 mg/kg (Fíor 2B). Laghdaíodh gníomhaíocht hepatic SOD go suntasach sna grúpaí arsanaic 4{0.67 mg/kg (P, 0.05) agus 60.25 mg/kg (P, 0.05) i gcomparáid leis an ngrúpa arsanaic 0.95 mg/kg. Tháinig laghdú suntasach ar ghníomhaíocht SOD duánach sa ghrúpa arsanaic 20.78 mg/kg i gcomparáid leis an ngrúpa arsanaic 0.95 mg/kg (P, 0.05) agus ardchlárú sna grúpaí arsanaic 40.67 agus 60.25 mg/kg (Fíor 2C). Gníomhaíocht CAT san ae agusduánlaghdaíodh go suntasach an dáileog arsanaic chothaithe ó {{0}}.95 go 60.25 mg/kg (P, 0.05, Fíor 2D). I gcomparáid leis sin sa ghrúpa arsanaic 0.95 mg/kg, tháinig laghdú suntasach ar ghníomhaíocht GR san ae agus sna duáin sa ghrúpa arsanaic 6{0.25 mg/kg (P, 0.05, Fíor 2E ). Ina theannta sin, i gcomparáid leis an ngrúpa arsanaic 0.95 mg/kg, tháinig laghdú suntasach ar ghníomhaíocht hepatic GSH-Px sa ghrúpa arsanaic 60.25 mg/kg (P, 0.05), agus tháinig laghdú géar ar ghníomhaíocht GSH Px duánach sa ghrúpa arsanaic 20.78 mg/kg. (P, 0.05) agus ardchlárú sna grúpaí arsanaic 40.67 agus 60.25 mg/kg (Fíor 2F).

Léirithe Géine Einsímí Frithocsaídeacha, Nrf2, agus Móilíní Keap1

Laghdaíodh slonn géine Hepatic CuZnSOD go suntasach sa ghrúpa arsanaic 20.78 mg/kg i gcomparáid leis an ngrúpa arsanaic 0.95 mg/kg (P, 0.{{16}). }5) agus ardchlárú sna grúpaí arsanaic 4{0.67 agus 6{{0.25 mg/kg. Laghdaíodh slonn géine Duánach CuZnSOD go suntasach sna 40.67 mg/kg (P , 0.05) agus 60.25 mg/kg (P , 0.05) grúpa arsanaic i gcomparáid leis an ngrúpa arsanaic 0.95 mg/kg (Fíor 3A). I gcomparáid leis an ngrúpa arsanaic 0.95 mg/kg, laghdaíodh slonn géine hepatic MnSOD go suntasach sa ghrúpa arsanaic 20.78 mg/kg (P, 0.{73) }}5) agus ardchlárú sna grúpaí arsanaic 4{{8{{{0}}.67 agus 6{{{{{{0.25 mg/kg). Ní raibh difríocht shuntasach idir léiriú géine MnSOD Duánach i measc na ngrúpaí (Fíor 3B). Laghdaíodh slonn géine hepatic CAT go suntasach sa ghrúpa arsanaic 20.78 mg/ kg i gcomparáid leis an ngrúpa arsanaic {{105}}.95 mg/kg (P, 0.05) agus ardchláraithe sna grúpaí arsanaic 40.67 agus 60.25 mg/kg. Tháinig laghdú suntasach ar léiriú géine CAT duánach sa ghrúpa arsanaic 20.78 mg/kg i gcomparáid leis an ngrúpa arsanaic 0.95 mg/kg (P, 0.05) agus ardchlárú sa ghrúpa arsanaic 40.67 mg/kg, agus laghdaíodh go mór é sa 60.25 mg/kg grúpa arsanaic i gcomparáid leis an ngrúpa arsanaic 0.95 mg/kg (P, 0.05, Fíor 3C). Tháinig laghdú suntasach ar léiriú géine GR san ae agus na duáin sa ghrúpa arsanaic 20.78 mg/kg i gcomparáid leis an ngrúpa arsanaic 0.95 mg/kg (P, 0.05) agus ardchláraíodh sna grúpaí arsanaic 40.67 agus 60.25 mg/kg (Fíor 3D). Ina theannta sin, tháinig laghdú suntasach ar léiriú géine hepatic GSH-Px de réir mar a mhéadaigh an dáileog arsanaic chothaithe ó 0.95 go 40.67 mg/kg (P, 0.05) agus ansin ardchláraigh sa ghrúpa arsanaic 60.25 mg/kg. Tháinig laghdú suntasach ar léiriú géine GSH-Px duánach sa ghrúpa arsanaic 20.78 mg/kg i gcomparáid leis an ngrúpa arsanaic 0.95 mg/kg (P, 0.05) agus ardchlárú sna grúpaí arsanaic 40.67 agus 60.25 mg/kg (Fíor 3E). Tháinig laghdú suntasach ar léiriú géine Nrf2 san ae agus sna duáin sa ghrúpa arsanaic 20.78 mg/kg i gcomparáid leis an ngrúpa arsanaic 0.95 mg/kg (P, 0.05) agus ardchláraíodh sna grúpaí arsanaic 40.67 agus 60.25 mg/kg (Fíoracha 4A agus 4C). ). I gcodarsnacht leis sin, méadaíodh léiriú géine Keap1 san ae agus sna duáin go mór sa ghrúpa arsanaic 20.78 mg/kg i gcomparáid leis an ngrúpa arsanaic 0.95 mg/kg (P, 0.05) agus ardchláraíodh é sna grúpaí arsanaic 40.67 agus 60.25 mg/kg (Figiúirí 4B agus 4D).

Anailísí Comhghaolaithe a Bhaineann le Conair Keap1 Nrf2-

Léiriú géine CuZnSOD (ae, r {{0}}.613, P , 0.01;duán, r {{0}}.687, P , 0.{{10}}1), CAT (ae, r 5 0.738, P , 0.01; duán, r 5 0.903, P , 0.01), GR (ae, r 5 0.477, P , 0.05; duáin, r 5 0.485, P , 0.05), agus GSH-Px (ae, r 5 0.450, P , 0.05; duáin; , r 5 0.767, P , 0.01) san ae agus na duáin, agus bhí sé patic abairt géine MnSOD (r 5 0.707, P , 0.01) comhghaolú dearfach le gníomhaíochtaí a n-sponding comhghaolmhara einsímí frithocsaídeacha. Ina theannta sin, rinneadh comhghaolú dearfach ar shloinneadh géine Nrf2 le habairtí géine CuZnSOD (ae, r 5 0.756, P , 0.01;duán, r {{0}}.736, P , 0.01), CAT (ae, r 5 0.893, P , 0.01;duán, r {{0}}.740, P , {{10}}.01), GR (ae, r 5 0 .837, P , 0.01; duáin, r 5 0.915, P , 0.01), agus GSH-Px (ae, r 5 0.822, P , 0.01; duáin, r {{17} }.722, P , 0.01) san ae agusduán, agus slonn géine hepatic MnSOD (r {{0}}.720, P , 0.01). Bhí comhghaol diúltach idir Nrf2 agus Keap1 mRNA léiriú (ae, r 5 20.746, P , 0.01;duán, r {{0}}.771, P , 0.01) san ae agus na duáin. Ina theannta sin, ní raibh aon chomhghaol idir slonn géine MnSOD agus gníomhaíocht einsímeach SOD, nó slonn Nrf2 mRNA saduáin na gcearc breithe(Tábla 5).

PLÉ

Is miotallóid uileláithreach agus tocsaineach é Arsanaic. Cothaíonn sé roinnt tocsainí i ndaoine agus in ainmhithe, lena n-áirítear hepatotocsaineacht, nephrotocsaineacht, néarthocsaineacht, imdhíonthocsaineacht, tocsaineacht chardashoithíoch, hepatotocsaineacht, agus tocsaineacht atáirgthe (Mandal agus Suzuki, 2002). Is fearr a dhíríonn Arsanaic ar chóras atáirgthe ainmhithe. Léirigh staidéir roimhe seo go gcuireann nochtadh roxarsone ar aiste bia isteach ar an ráta breithe agus ar tháirgeadh uibheacha (Chiou et al., 1999; Zhang et al., 2017). Sa staidéar seo, laghdaigh forlíonadh arsanaic chothaithe go suntasach feidhmíocht breithe, lena n-áirítear táirgeadh uibheacha agus EW. Fuarthas amach i staidéir roimhe seo go spreagann forlíonadh arsanaic aiste bia carnadh arsanaic in uibheacha agus go laghdaíonn sé cáilíocht uibheacha (Chiou et al., 1998; Zhang et al., 2017). Sa staidéar seo, laghdaigh forlíonadh arsanaic chothaithe go suntasach aonad Haugh, airde albaimin, agus neart sceall uibhe. Ach amháin i gcás dath buíocán agus tiús bhlaosc uibhe, thángthas ar chomhghaolta diúltacha idir sil-leagan arsanaic in uibheacha agus paraiméadair cháilíochta uibheacha. Tugann sé seo le tuiscint go bhféadfadh tionchar a bheith ag sil-leagan arsanaic san ubh ar aonad Haugh, ar airde albaimin agus ar neart sceall uibhe. Mar is eol dúinn, is é an tiús ciseal pailis sa bhlaosc uibhe an cinntitheach de thiús sceall uibhe (Ruiz agus Lunam, 2000), agus cinneann sil-leagan dath buíocán. Mar sin, rinneamar tuairimíocht go mb’fhéidir nach gcuirfeadh forlíonadh arsanaic chothaithe isteach ar thiús na ciseal pailise den sil-leagan lí in uibheacha na gcearc breithe. Léiríonn fianaise atá ag teacht chun cinn go bhfuil neamhoird hepatic agus duánach coitianta i mamaigh tar éis nochtadh arsanaic (Liu agus Waalkes, 2008; Huang et al., 2009). Léirigh staidéar roimhe seo go gcothaíonn nochtadh arsanaic loit histeapaiteolaíocha san ae, lena n-áirítear míshuaimhneas fíocháin, peliosis, agus vacuolization in éineacht le karyolysis, apoptosis, agus neacróis heipitocytes i Channa punctatus (Roy agus Bhattacharya, 2006). Sa staidéar seo, thugamar faoi deara athruithe móra ar iomadú na duchtanna bile, steatosis heipitocyte, agus dífhoirmiú na vein lárnach san ae de réir mar a mhéadaigh an dáileog arsanaic chothaithe ó 20.78 go 60.25 mg/kg. Fuair ​​Roy agus Bhattacharya (2006) amach freisin go gcothaíonn nochtadh arsanaic crapadh an glomerulus, neamhrialtachtaí sa tubule duánach, agus méadú ar spás Bowman. San imscrúdú seo, mar an dáileog de arsanaic aiste bia

méadaithe ó 20.78 go 60.25 mg/kg, bhí athruithe histeapaiteolaíocha duánach an-dian, lena n-áirítear méadú ar na feadáin duánach, crapadh glomerular, agus fiobróis tubular agus hyalinization, atá ag teacht le staidéar roimhe seo (Roy agus Bhattacharya, 2006). De réir tuairiscí roimhe seo, tá sé cruthaithe go bhfuil leibhéil serum AST agus ALT ina marcóirí ionaid ar an imoibriú athlastach hepatic agus fiobróis (Wang et al., 2008; Khattab et al., 2015). Sa staidéar seo, thug méaduithe ar leibhéil AST agus ALT i serum le tuiscint go ndearnadh an freagra athlastach hepatic a dhianú tar éis nochtadh arsanaic, a bhí ag teacht leis na hathruithe histeapaiteolaíocha a breathnaíodh in ae na gcearc breithe. Fuair ​​Patel agus Kalia (2013) freisin go bhfuil heipittocsaineacht arna spreagadh ag arsanaic le sonrú ag méadú ar leibhéil serum ALT agus AST i bhfrancaigh Wistar. Déantar monatóireacht rialta ar fheidhm duánach ag leibhéil BUN, CT, agus UA sa serum. Fuair ​​​​muid amach go raibh méadú suntasach ar leibhéil serum BUN agus UA, agus go raibh claonadh ag an leibhéal serum CT méadú tar éis forlíonadh arsanaic aiste bia, rud a thugann le tuiscint goduándamáistímar thoradh ar nochtadh arsanaic i gcearca breithe, atá ag teacht le taighde roimhe seo (Liu et al., 2000). Tá sé bunaithe go maith go bhfuil dlúthbhaint ag damáiste fíocháin de bharr nochtadh arsanaic le strus ocsaídiúcháin (Jomova et al., 2011). Nuair a tharraingítear strus ocsaídiúcháin, spreagann speicis ocsaigine imoibríocha intracellular (ROS) LPO, ar féidir monatóireacht a dhéanamh air ag leibhéil MDA intracellular (Storey, 1996). Sa staidéar seo, méadaíodh leibhéil MDA hepatic agus duánach go suntasach tar éis forlíonadh arsanaic aiste bia, rud a thugann le tuiscint go raibh méadú ar LPO, rud a d'fhéadfadh gortú ocsaídiúcháin san ae agusduáin na gcearc breithe.Tá ról ríthábhachtach ag GSH freisin i rialáil strus ocsaídiúcháin intracellular (Finkel agus Holbrook, 2000). I gcomparáid leo siúd sa ghrúpa arsanaic 0.95 mg/kg, leibhéil GSH

laghdú suntasach ar na grúpaí ar cuireadh cóireáil orthu le tiúchain níos airde arsanaic, rud a thugann le tuiscint go bhféadfadh arsanaic ceangal le GSH chun cumais frithocsaídeacha an ae a mhaolú agusduán.Bhí Flora et al. (1997) go laghdaíonn nochtadh arsanaic an tiúchan GSH agus go gcruthaíonn sé loit fhuaimnithe sna haenna agusduáinde francaigh. Ina theannta sin, tugann córais einsímeacha frithocsaídeacha intracellular róil chosanta chun cosaint i gcoinne strus ocsaídiúcháin, lena n-áirítear SOD, CAT, GR, agus GSH-Px (Finkel agus Holbrook, 2000). Sa staidéar seo, laghdaigh forlíonadh arsanaic aiste bia go suntasach gníomhaíochtaí SOD, CAT, GR, agus GSH-Px in ae agus duán na gcearc breithe. Nuair nach féidir le córais frithocsaídeacha barraíocht ROS infhéitheach a neodrú, tarlaíonn damáiste ocsaídiúcháin de bharr LPO, rud a d'fhéadfadh, ar a seal, gníomhaíochtaí na n-einsímí frithocsaídeacha a mhaolú. Thuairiscigh staidéar roimhe seo ar an gcaoi chéanna go gcothaíonn arsanaic strus ocsaídiúcháin sa duán francach (Sener et al., 2016). Is próitéiní iad einsímí frithocsaídeacha agus d’fhéadfaidís iad a rialú ag géinte ag an leibhéal trascríobh. Sa staidéar reatha, laghdaigh nochtadh arsanaic go suntasach an slonn mRNA de CuZnSOD, CAT, GR, agus GSHPx. Ina theannta sin, rinneadh comhghaol dearfach idir léiriú géine CuZnSOD, CAT, GR, agus GSH-Px le gníomhaíochtaí na n-einsímí frithocsaídeacha, rud a thugann le tuiscint gur laghdaigh nochtadh arsanaic gníomhaíochtaí einsímí frithocsaídeacha trí léiriú mRNA a chosc. Tuairiscíodh mar an gcéanna comhghaolta idir gníomhaíochtaí na n-einsímí frithocsaídeacha agus léiriú géine in ae agus i nduáin na gcearc breithe tar éis nochtadh mearcair. Mar sin féin, níor chuir forlíonadh arsanaic aiste bia isteach ar léiriú MnSOD saduán.D'fhéadfadh sé seo a bheith toisc go bhfuil roinnt isoenzymes ag SOD, agus nach bhfuil tionchar ag géine MnSOD ar a ghníomhaíocht. Tá ról ríthábhachtach ag Nrf2 sa chóras cosanta i gcoinne strus ocsaídiúcháin. Faoi choinníollacha basal, ceanglaíonn Nrf2 le Keap1 sa chiteaplasma. Nuair a bhíonn an leibhéal ROS intracellular ard go leor chun na grúpaí thiol imoibríocha de Keap1 a mhodhnú, aistríonn Nrf2 isteach sa núicléas i bhfad níos éasca, áit a gcuireann sé greannú ar na grúpaí frithghníomhacha atá freagrach as.

eilimint agus ansin gníomhaíonn sé géinte cosanta iartheachtacha (Sinha et al., 2013). Sa staidéar seo, fuair muid amach gur laghdaigh nochtadh arsanaic go suntasach léiriú géine Nrf2 agus léiriú einsímí frithocsaídeacha iartheachtacha. Nuair a laghdaíodh Nrf2 agus géinte einsímí frithocsaídeacha iartheachtacha tar éis nochtadh arsanaic, mhol arsanaic gur chuir arsanaic bac ar léiriú géinte einsíme frithocsaídeacha trí léiriú géine Nrf2 a shochtadh san ae agusduán. Ina theannta sin, rinneadh comhghaolú diúltach ar fheabhsú slonn Keap1gene le Nrf2 agus léiriú géine einsím frithocsaídeach, rud a thugann le tuiscint go gcuireann upregulation of cytoplasmic Keap1 traslonnú Nrf2 ón gcíteaplasma go dtí an núicléas chun cinn (Kensler et al., 2007). Thuairiscigh staidéar comhchosúil go bhfuil conair intracellular Nrf2-Keap1 díghníomhaithe mar fhreagra ar nochtadh arsanaic (Janasik et al., 2018). Mar sin féin, thuairiscigh staidéar roimhe seo freisin go gcuireann nochtadh arsanaic leis an gcosán Nrf Keap1 chun cosaint a dhéanamh ar dhamáiste ocsaídiúcháin (Massrieh et al., 2006). Níl na torthaí seo ar neamhréir leis an staidéar seo. Sna céimeanna tosaigh den strus ocsaídiúcháin, d’fhéadfadh éifeachtaí cosanta Nrf Keap1 a chur i ngníomh chun strus ocsaídiúcháin a chosc. Mar sin féin, d’fhéadfadh sé nach gcuirfeadh conair Nrf2-Keap1 in aghaidh damáistí ocsaídiúcháin a tharlódh de bharr nochtadh marthanach do dáileog ard arsanaic (Kensler et al., 2007). Ina dhiaidh sin, d’fhéadfadh go gcuirfí bac ar chonair Keap1 Nrf, agus d’fhéadfadh damáiste ocsaídiúcháin intracellular nó fiú apoptosis tarlú in ae agus duán na gcearc breithe. I bhfianaise na dtorthaí atá ann faoi láthair, cuireann an staidéar seo roinnt fianaise nua ar fáil do chosaint frithocsaídeach hepatic agus duánach faoi nochtadh arsanaic i gcearc breithe agus léiríonn sé ról lárnach chonair Keap1 i strus ocsaídiúcháin arsanaic den chéad uair. . Go hachomair, laghdaigh forlíonadh arsanaic chothaithe feidhmíocht breithe agus cáilíocht uibheacha na gcearc breithe. Tharla damáistí histeapaiteolaíocha san ae agusduántar éis nochtadh arsanaic aiste bia. Ina theannta sin, chothaigh nochtadh arsanaic chothaithe strus hepatic agus ocsaídiúcháin duánach trí lagú a dhéanamh ar chonair Keap1 i gcearca breithe.