Cinneadh Echinacoside in Uisce Sliocht As Cistanche Herba Ag HPLC

Coimriú:

Cuspóir Bunaíodh modh HPLC doncinneadh echinacosidesnasliocht uisce de Cistancheluibhe.

Modhanna Chinn HPLC Echinacoside. Rinneadh an deighilt ar cholún Inertsil ODS-SP C18 le céim shoghluaiste comhdhéanta d'aicéataitrile(A) agus 0.4% tuaslagán d'aigéad fosfarach(B), de réir elution grádáin. Socraíodh an tonnfhad braite ag 333 nm, agus bhí teocht an cholúin 30 céim . Ba é an ráta sreafa ná 1.0 mL·nóiméad-1 agus ba é toirt an insteallta ná 10 μL. Torthaí Bhí an gaol líneach d'echinacoside laistigh den raon tiúchana de 44.939 7-539.276 4 ug ·mL- 1 go maith(r=0.999 8). B'ionann na haisghabháil agus 94.59%-105.31% (RSD= 2.93%,n=9). Ba é 15.527,7.347,12.267 mg·g-1 ábhar echinacoside i eastóscáin uisce de luibh Cistanche. Conclúid Tá modh bunaithe HPLC le dea-atrialltacht cruinn, simplí agus indéanta. Tá sé oiriúnach chun echinacoside a chinneadh i sliocht uisce Cistanche herba.

Eochairfhocail:HPLC;sliocht uisce de luibh Cistanche; echinacoside; ábhar a chinneadh

Is leigheas Sínis traidisiúnta tonic é Cistanche deserticola a úsáidtear go coitianta i gcleachtas cliniciúil agus ar a dtugtar "ginseng Desert" [1]. Is é an Cistanche deserticola a taifeadadh in eagrán 2015 den Pharmacopoeia Síneach ná an gas méithe triomaithe le duilleoga scaly de Cistanche deserticola YC Ma nó Cistanche tubulosa (Schenk) Wight. Tá sé te, milis agus saillte, agus filleann sé ar fhadlínte na duáin agus an intestine mór. Tá éifeachtaí aige maidir le yang duáin a chothú, bunúsacht agus fola a athlánú, agus moisturizing an intestines agus laxatives [2]. "Materia Medica Shen Nong," a deir gur féidir leis "tonify an lár, cothaigh na cúig orgáin inmheánacha, ceann a neartú agus cothaigh bunúsach". Cistanche deserticola den chuid is mó tá gliocóisídí feanileatánóideach, iridoids agus a n-gliocóisídí, lignans agus a gliocóisídí, polaisiúicrídí, comhdhúile eistir agus alcalóidigh [3]. Is iad gliocóisídí feanileatánóil príomh-chomhábhair ghníomhacha Cistanche deserticola. Ina measc, tá echinacoside agus verbascoside liostaithe i Cistanche deserticola sa Pharmacopoeia Síneach.

Comhpháirteanna táscacha le haghaidh sainaithint agus inneachar a chinneadh. Léiríonn staidéir chógaseolaíochta [4] go bhfuil éifeachtaí cógaseolaíochta éagsúla ag Cistanche deserticola, mar laxative, cosaint ae, frith-oistéapóróis, frithocsaídeach, frith-aging, agus frith-tuirse. Is féidir le sliocht uiscí Cistanche deserticola léiriú géine próitéin morphogenetic cnámh 2 a chur chun cinn in osteoblasts francach, fosfatase aigéad tartrate-resistant, osteocalcin sa serum de lucha ovarectomized, agus géinte Smad1, mad5, ag athrú fachtóir fáis-, etc. sa smior. , tá éifeachtaí frith-oistéapóróis [5-6] aige.

Is féidir le Echinacea iomadú osteoblasts a chur chun cinn agus idirdhealú na gascheall mesenchymal smeara a shaothraítear in vitro in osteoblasts [7-9] a chur chun cinn. Le blianta beaga anuas, tá go leor tuarascálacha taighde ar chinneadh ábhar echinacoside agus verbascoside i sliocht eatánól Cistanche deserticola agus a ullmhóidí cumaisc [10-12], ach is beag tuairiscí ar chinneadh ábhar comhpháirteanna innéacs i Cistanche deserticola. sliocht uiscí. Sa staidéar seo, baineadh úsáid as crómatagrafaíocht leachtach ardfheidhmíochta (HPLC) chun ábhar echinaceaside a chinneadh i sliocht uiscí Cistanche deserticola.

1 ábhar

1.1 Ionstraimí

LC{0}}AT crómatagrafaíocht leachta ardfheidhmíochta, SPD-20Brathadóir, SIL-20Uathshamplóir, CTO-10Oigheann colún ASvp, stáisiún oibre crómatagrafaíocht leacht tuaslagáin LC, Shimadzu Corporation of an tSeapáin; MES125P-OCE-DU cothromaíocht anailíse leictreonach, Sartorius Company, an Ghearmáin; SHZ-D (Ⅲ) caidéal folúis ilchuspóireach uisce a scaiptear, Henan Yuhua Instrument Co., Ltd; Córas cúrsaíochta fuaraithe evaporator rothlach RC2B SO25, evaporator rothlacha RV 10 D S96, Cuideachta IKA, an Ghearmáin; DK-S26

Folctha uisce teocht tairiseach leictreach, Shanghai Jinghong Experimental Equipment Co., Ltd; Meaisín uisce ultrapure sraith UPR, Sichuan Youpu Ultrapure Technology Co., Ltd.

1.2 Ábhair agus imoibrithe íocshláinte

Ceannaíodh ábhar íocshláinte Cistanche deserticola ó Guangzhou Lingnan Traditional Chinese Medicine Pieces Co., Ltd., uimhir bhaisc: 1801001, 1806001, 181001. D'aithin Tu Xingming, príomhchógaiseoir Sínis traidisiúnta ag Tríú Ospidéal Cleamhnaithe Ollscoil Guangzhou de Leigheas na Síne, é mar an gas méithe triomaithe le duilleoga sceacha de Cistanche deserticola YCMa. Stóráiltear an sampla i Seomra Tástála Drugaí an Tríú Ospidéal Cleamhnaithe de Guangzhou Ollscoil Leighis na Síne; Substaint tagartha Echinacea Glycoside, ábhar 89.7%, Institiúid um Rialú Bia agus Drugaí na Síne, uimhir bhaisc: 111670-

201706; tá acetonitrile íon crómatagrafaíochta (Merck, an Ghearmáin); tá meatánól agus aigéad fosfarach íon go hanailíseach (Tianjin Fuyu Fine Chemical Co., Ltd.); Is uisce ultrapure é uisce.

2 Modhanna agus torthaí

2.1 Ullmhú sliocht uisce de Cistanche deserticola

Glac an púdar garbh d'ábhar míochaine Cistanche deserticola, cuir 10 uair an méid uisce driogtha, teasa agus aife le haghaidh eastóscadh dhá uair, 1 uair gach uair, scagaire, comhcheangail an scagáit, agus dírigh an scagáit le evaporator rothlacha. go dtí cion drugaí amh de 0.100 g·mL-1, agus é a stóráil ag 4 céim le húsáid níos déanaí.

2.2 Coinníollacha crómatagrafacha agus oiriúnacht an chórais

Colún crómatagrafach: colún Inertsil ODS SP C18 (150 mm × 4.6 mm, 5 μm); céim soghluaiste: acetonitrile (A) -0.4% tuaslagán d'aigéad fosfarach (B), elution grádán: 0 ~ 5 min, 17%

A; 5 ~ 25 nóim, 20 % A; 25 ~ 30 min, 17% A; tonnfhad braite: 333 nm; teocht colún: 30 céim; ráta sreafa: 1.0 mL·nóim-1;

Toirt insteallta: 10 μL. Faoi na coinníollacha crómatagrafaíochta seo, tá an scaradh idir echinacoside agus buaiceanna comhpháirte in aice láimhe níos mó ná 1.5, agus níor cheart go mbeadh líon na plátaí teoiriciúla bunaithe ar bhuaic echinaceaside níos lú ná 4,000. Taispeántar an crómatagram i bhFíor 1.

2.3 Réiteach a ullmhú

2.3.1 Tuaslagán substainte tagartha Meáigh méid iomchuí de shubstaint thagartha echinacoside, meáigh go cruinn é, cuir i bhfleascán toirtmhéadrach 10 mL é, cuir meatánól chun é a thuaslagadh, agus ullmhaigh tuaslagán substainte tagartha a bhfuil 898.794 ug de echinaceaside in aghaidh an ml, 4 céim ann. Sábháil le húsáid níos déanaí.

2.3.2 Réiteach tástála

Tomhais go beacht 2.0 ml de eastóscán uiscí Cistanche deserticola, galú go triomacht i ndabhach uisce, cuir meatánól lena thuaslagadh, caolaigh go toirt i bhfleascán toirtmhéadrach 10 mL, croith go maith, agus scag le membrane microporous 0.22 μm le fáil.

2.4 Imscrúdú ar ghaolmhaireacht líneach

Tomhais go beacht {{0}}.25, 0.50, 1.00, 2.00, 2.50, 3.00 mL den tuaslagán tagartha faoi mhír 2.3.1, cuir i bhfleascán toirtmhéadrach 5 ml é, cuir meatánól suas go dtí an toirt, agus croith go maith chun tiúchan grádáin de 44 a fháil.{{17} }, 89.879 4. 179.758 8, 359.517 6, 449.397 0, 539.276 4 ug·mL-1 réiteach tagartha, scagtha trí membrane micreapóiriúil 0.22 μm. Déan tomhas de réir na gcoinníollacha crómatagrafaíochta faoi 2.2, agus taifead an limistéar buaic. Déan aischéimniú líneach le tiúchan mais na substainte tagartha mar an abscissa (X, ug·mL-1) agus an buaicachar mar an t-ordanáid (Y), agus faightear an chothromóid aischéimnithe: Y=13 185 .0X-32 273.0, r=0.999 8. Léiríonn na torthaí go bhfuil gaol líneach maith ag an echinacea laistigh den raon tiúchana 44.939 7 ~ 539.276 4 ug·mL-1.

2.5 Tástáil bheachtais

Tóg 539.276 4 ug ·mL- 1 réiteach tagartha, instealladh agus tomhas 6 huaire go leanúnach de réir na gcoinníollacha crómatagrafaíochta faoi 2.2, agus taifead an t-achar buaic. Léirigh na torthaí go raibh an RSD de limistéar buaic echinacoside 1.81%, rud a léiríonn cruinneas ionstraim maith.

2.6 Tástáil cobhsaíochta

Tomhais go beacht 2.0 ml de eastóscán uiscí Cistanche deserticola, galú go triomacht i ndabhach uisce, cuir meatánól chun thuaslagadh, caolaigh go fleascán toirtmhéadrach 10 mL, croith go maith, scag le {{ 7}}.22 μm membrane microporous, lean na coinníollacha crómatagrafaíochta faoi mhír 2.2, agus cuir ag 0 agus 2 faoi seach. , 4, 8, 12, 24 h tomhas insteallta, taifead an limistéar buaic. Léirigh na torthaí go raibh an RSD de limistéar buaic echinacoside 1.16%, rud a léiríonn go raibh cobhsaíocht mhaith ag an réiteach tástála laistigh de 24 uair an chloig.

2.7 Tástáil in-atrialach

Tomhais go beacht 2.0 ml d'eastóscadh uisce Cistanche deserticola agus ullmhaigh 6 tuaslagán tástála i gcomhthreo leis an modh faoi 2.3.2. Instealladh samplaí le haghaidh tomhais de réir na gcoinníollacha crómatagrafaíochta faoi 2.2 agus taifead an limistéar buaic. Léirigh na torthaí go bhfuil an RSD anechinacosidebhí tiúchan mais 1.28%, rud a léiríonn atrialltacht mhaith ar an modh.

2.8 Tástáil aisghabhála samplach

Tomhais go beacht 9 gcuid de 1.0 ml d'eastóscadh uisce Cistanche deserticola, cuir 0.8, 1.0, agus 1.2 mL de thuaslagán tagartha (1.552 mg·mL{{11) leis }}) faoi seach, galú go triomacht i ndabhach uisce, cuir meatánól chun thuaslagadh, agus coigeartaigh go fleascán toirtmhéadrach 10 mL; Croith go maith agus scagadh trí membrane microporous 0.22 μm chun réitigh tástála tiúchan ard, meánach agus íseal a ullmhú. Ullmhaigh 3 chóip de gach tiúchan i gcomhthreo. Tomhais de réir na gcoinníollacha crómatagrafaíochta faoi 2.2. Taifead an t-achar buaic agus ríomh aisghabháil an tsampla. Ráta. Taispeántar na torthaí i dTábla 1.

2.9 Ábhar samplach a chinneadh

Tomhais go beacht 3 chuid de 2.0 ml de eastóscán uiscí Cistanche deserticola, galú go triomacht i ndabhach uisce, cuir meatánól lena thuaslagadh, caolaigh go fleascán toirtmhéadrach 10 mL, croith go maith, scag le membrane microporous 0.22 μm, agus tomhas de réir na gcoinníollacha crómatagrafaíochta faoi 2.2. Taifead an t-achar buaic agus ríomh an t-ábhar echinaceaside. Taispeántar na torthaí i dTábla 2.

Tábla 1 Torthaí tástálacha aisghabhála echinacoside

Tábla 2 Torthaí chinneadh ábhar echinacoside i sliocht uisce de Cistanche herba