Polaisiúicrídí Amh ó Cistanche Deserticola YC Ma Mar Imdhíontóir agus mar Chúntóir do Vacsaín Galar Crúb agus Béil

Le haghaidh tuilleadh déan teagmháil le do thoiloscar.xiao@wecistanche.comle haghaidh tuilleadh

Teibí

Is leigheasanna luibhe iontacha iad Cistanche deserticola YC Ma (CD) le haghaidh fadhbanna sláinte. Sa staidéar seo, gníomhaíochtaí modulator de CPCD ar ghníomhachtúcealla dendritic(DCanna) agus rinneadh measúnú ar an acmhainneacht aidiúvach don vacsaín galar crúb agus béil (FMDV). CPCD gancíteatocsaineachtgníomhachtú DC spreagtha trí na marcóirí feinitíopacha agus glacadh antaiginí a rialáil. Shocht antasubstaintí TLR-2 nó TLR-4 leibhéil CD40 agus CD CPCD-idirghabhálaithe86 chomh maith le IL-6 agus IL-1 i DCanna. Spreag CPCD fosfarú móilíní bainteach le MAPK agus NF-κB. Nuair a comh-instealladh ionmhatánach le FMDV i lucha, mhéadaigh CPCD antasubstainte FMDV-shonrach, iomadú limficítí, éifeachtóir T-chealla. Go sonrach, fuair CPCD freagra Th1, mar a léirigh na slonn níos airde de CD4 móide IFN- , CD8 móide IFN- , agus freagra CTL. D'fheabhsaigh CPCD na slonn MHC-II, CD80, CD86, agus CD40 i DCanna agus laghdaigh sé minicíocht Tregs. Mar sin, d’fhéadfadh CPCD freagraí greannacha agus ceallacha níos láidre a spreagadh go héifeachtach trí ghníomhachtú DC a mhodhnú trí bhealaí MAPK agus NF-κB a bhaineann le TLR-2/TLR-4.

Cliceáil anseo le do thoil chun tuilleadh eolais a fháil

Réamhrá

An chuid is mó de napolaisiúicrídía dhíorthaítear ó luibheanna íocshláinte tar éis suim mhéadaithe a tharraingt i réimse na n-aidiúvach mar gheall ar a tocsaineacht íseal agus an teanndáileog imdhíonachta leathan-speictrim (Chen & Huang, 2018; He et al., 2020). D'éirigh le go leor imscrúdaitheoirí úsáid a bhaint as luibheanna leighis mar iarrthóirí aidiúvacha ar go leor vacsaíní. Úsáideadh polaisiúicrídí tipiciúla lena n-áirítear polaisiúicríd Astragalus, polaisiúicríd Panax ginseng, polaisiúicríd Poria cocos, agus lentinan mar aidiúvaigh do vacsaíní roinnt galair thógálacha (P. Li & Wang, 2015; Rey Ladino, Ross, Cripps, McManus, & Quinn, 2011; B. Sun et al., 2018). Úsáidtear Cistanche deserticola YC Ma (C. deserticola, "Rou Cong-Rong" i Chi nese) go traidisiúnta mar fhorlíonadh luibhe tonic le haghaidh cóireáil galair i Leigheas Sínis Traidisiúnta (TCM) de réir Pharmacopoeia na Síne feadh na gcéadta bliain (S. Li). , Wu, & Le, 2021; Yong & Tu, 2009). Léirigh staidéir in vivo agus in vitro go raibh go leor sleachta C. deserticola ar taispeáintfeidhmeanna cógaseolaíochtalena n-áirítear a mhaolú tuirse agusfrith-athlastach, feidhmeanna neuroprotective, frithvíreasacha, agus inmunomodulatory (Fu, Fan, Wang, & Gao, 2018; Tian Wang, 2012). Tá sé cruthaithe go bhfuil gníomhaíochtaí bitheolaíocha leathana ag polaisiúicrídí ó C. deserticola, comhábhair ghníomhacha C. deserticola, lena n-áirítear modhnú freagairt imdhíonachta agus frith-athlastach frithocsaídeach, agus feidhmeanna frith-tuirse (Dong, Yao, Fang, & Ding. , 2007; W. Zhang et al., 2016). In 2018 agus 2019, léirigh muid gur ghníomhaigh polaisiúicrídí amh de C. deserticola (CPCD) mar aidiúvach le haghaidh antaigin OVA ar mhaithe le freagairtí imdhíonachta Th1/Th2. D’fhéadfadh CPCD gníomhachtú DC a aslú trí ghabhdóir cosúil le Dola 4 (TLR-4) (Zhang et al., 2018). Fuarthas amach freisin go bhfuair CPCD freagraí imdhíonachta Th1, lena n-áirítear IFN- secretion agus giniúint IgG2a i gcoinne vacsaíne fliú i lucha (Zhao, Lian, Wang, Li, & Zhang, 2019). Mar sin, is gá bun-mheicníocht na freagartha imdhíonachta a fuarthas ó CPCD agus éifeacht imdhíon-chumhachtach CPCD ar FMDV neamhghníomhaithe a nochtadh.

Is galar víreasach tábhachtach in ainmhithe é an galar crúb agus béil (FMD) mar d’fhéadfadh caillteanais eacnamaíocha arda agus iarmhairtí sóisialta a bheith mar thoradh air. Is iad vacsaíní FMD neamhghníomhaithe (FMDV) na bearta rialaithe is éifeachtaí de FMD. Tá an FMDV díghníomhaithe reatha sábháilte ach tá droch-imdhíon-ghineach acu mar gheall ar tháirgeadh íseal antashubstainte, achar gearr marthanachta antashubstainte chomh maith le droch-fhreagairtí imdhíonachta i muc (Y. Cao, Lu, & Liu, 2016; Doel, 2003). Baineadh úsáid as dáileoga vacsaíne níos airde nó amanna cóireála méadaithe, bealaí insteallta éagsúla (vacsaíniú ionmhatánach i gcoinne intreirmeach), agus cláir dosála luathaithe mar straitéisí tábhachtacha chun éifeachtúlacht chosanta vacsaíní a fheabhsú. Tá sé léirithe ag fianaise mhéadaithe gur féidir le aidiúvaigh éifeachtúlachtaí vacsaíne i gcoinne galair thógálacha a threisiú (Steven G. Reed, Orr, & Fox, 2013; N. Zhang et al., 2010). D’fhéadfadh aidiúvaigh núíosacha agus a n-ionchorprú i FMDV imdhíonacht a mhéadú agus fiú fad na cosanta a fheabhsú (Y. Cao, 2014; Dar, Kalaivanan, Sied, Mamo, & Kondabattula, 2013). Faoi láthair, tá go leor iarrachtaí á ndéanamh chun aidiúvaigh shábháilte agus éifeachtacha a fhorbairt ar féidir leo imdhíon-ghineacht a uasmhéadú le freagairt imdhíonachta sainoiriúnaithe (Pulendran & O'Hagan, 2021). Tá gá le aidiúvaigh éagsúla le haghaidh vacsaíní. I gcomparáid le aidiúvaigh thraidisiúnta, d'fhéadfadh go mbeadh aidiúvaigh polaisiúicríde ó TCM ina chuidiú chun éifeachtaí imdhíon-chumhachtacha a chur i bhfeidhm ar FMDV trí limficítí, cítocíní, agus leibhéil antashubstainte a mhodhnú agus freagairtí imdhíonachta ceallacha agus greanna níos láidre a ghiniúint.

Tá sé cruthaithe go gcuireann gníomhachtú cealla dendritic (DCanna) tús le freagairtí imdhíonachta oiriúnaitheacha agus go rialaíonn sé cothromaíocht imdhíonachta Th1/Th2 (Kapsenberg, 2003). Ní mór éifeacht aidiúvach nua ar DCS a shoiléiriú. D’fhéadfadh polaisiúicrídí TCM feabhas a chur ar shloinneadh na móilíní dromchla ar DCanna, lena n-áirítear MHC II, CD80, CD86, agus CD40, agus cur le leibhéal na cítocíní pro-athlastacha, mar shampla IL-6 agus IL{{ 8}} (J. Li, Li, & Zhang, 2015). Baintear amach gníomhaíochtaí inmunomodulatory polaisiúicrídí TCM trí ghabhdóirí membrane atá ceangailteach go díreach ar DCanna (Jiang, Zhu, & Jiang, 2010). I bhfocail eile, tá baint ag gníomhaíocht inmunadjuvant CPCD leis na héifeachtaí inmunomodulatory ar DCanna. Ina theannta sin, is gabhdóirí feighlithe iad TLRanna a chuireann gníomhachtú agus earcú DCanna chun cinn agus a spreagann freagairtí cealla B agus cealla T. Is cosáin ríthábhachtacha le sruth de TLRanna iad na conairí próitéine kinase próitéine atá gníomhachtaithe le mitogen (MAPK) agus fachtóir núicléach kappa-B (NF-κB) agus is féidir táirgeadh cítocíní pro-athlastacha a spreagadh lena n-áirítear IL-6 agus IL{{15} } (Akira & Takeda, 2004). Dá bhrí sin, is gá bealaí iarmhartacha a bhaineann le TLR a fhiosrú chun freagairtí cille imdhíonachta ar ionfhabhtú a thuiscint.

Sa staidéar seo, roghnaíodh luch ICR de ghnáth mar ainmhí eiseamláireach sa tsaotharlann le haghaidh FMDV chun gaol a chinneadh idir cumas aidiúvach agus vacsaíne mar gheall ar úsáid mhíchaoithiúil ainmhithe spriocdhírithe, agus rinneadh imscrúdú ar CPCD mar aidiúvach FMDV in vitro agus in vivo chun iniúchadh a dhéanamh. a ról i ngníomhú DCanna ag TLR-2/TLR-4-a bhaineann le MAPKs iartheachtacha agus cosáin NF-κB. Soláthraíonn an staidéar seo an bonn chun meicníochtaí ionduchtaithe gníomhaíochtaí imdhíon-mhodúlach ag CPCD a thuiscint chomh maith le hacmhainneacht CPCD mar aidiúvach polaisiúicríde do FMDV in ainmhithe spriocdhírithe.

Ábhar agus modhanna

Chuir an tOllamh Jiang He an t-aitheantas ar fáil do C. deserticola (Uimh. CD17042001). Thairg Tecon Biology Co., Ltd. (An tSín) antaigin víreasach neamhghníomhaithe FMD antaigin 146S agus aidiún ISA-206 go cineálta. Séiream bó féatais (FBS) a tháinig ó Thionscail Bhitheolaíochta. Ceannaíodh meán RPMI 1640 ó GIBCO (SAM). bhí polaimyxin B (PMB), Lipopolysaccharide (LPS), 3-(4,5-dimethyl thiazol-2-il)-2,5- bróimíd défheiniltetrasóiliam (MTT) Táirge Sigma. Ba as Biosharp (tSín) é Cell Counting Kit-8 (CCK-8). Ba ó PeproTech (SAM) a tháinig fachtóir spreagtha coilíneachta muiríne ulocyte-macrophage (GM-CSF). Ba as Boster (tSín) feisteáin IL-6 agus IL-1.

Tháinig maolán Golgistop, Cytofix/Cytoperm, Perm/Wash agus antasubstaintí in aghaidh CD3, CD4, CD8, CD44, CD11c, MHC-II, CD80, CD86, CD40 ó BD Biosciences (SAM). Tháinig feisteáin eastósctha núicléacha agus cíteaplasma agus feisteáin chainníochtaithe próitéin BCA ó Cwbiotech (tSín). Ceannaíodh antasubstaintí frith-TLR-2 agus frith-TLR{{{4 ó Novus Biologicals (USA). Tháinig MAPKs agus feisteáin cosáin NF-κB ó Theicneolaíocht Comharthaíochta Cille (SAM). Antashubstaintí frith-luiche/coinín lipéadaithe mar raidis sárocsaíde (IgG/IgG1/IgG2a) ó Southern Biotech (SAM). Trealamh staining Tregs ó eBiosciences (SAM).

toradh

Cinneadh go raibh cion carbaihiodráit neodrach ag 50.53 faoin gcéad ± 1.28 faoin gcéad agus b'ionann an cion carbaihiodráit aigéadach agus 17.81 ± 0.51 faoin gcéad. Ríomhadh an meánmheáchan móilíneach (Mw) de CPCD a bheith 46.77 kDa le ham coinneála (Fíor 1 A). Léiríonn comhdhéanamh monaisiúicríde CPCD gurb iad na príomhchodanna siúcra de CPCD ná Glc, Ara, Gal, Rha, GlaA agus Man i gcéatadáin molar de 33.17 faoin gcéad , 28.98 faoin gcéad , 16.39 faoin gcéad , 10.97 faoin gcéad , 8.05 faoin gcéad , 2.42 faoin gcéad ( Fíor. ). Taispeánann Fíor 1C speictream FT-IR CPCD. Bhí na brandaí ag 3383.64 cm− 1 mar gheall ar an ngrúpa hiodrocsaile. Breathnaíodh bannaí ionsúcháin an ghrúpa ailcile ag 2926.97 cm− 1 agus 1417.99 cm− 1 . Breathnaíodh bannaí ionsúcháin an ghrúpa charbóinile ag 1635.56 cm− 1 . Léirigh na comharthaí ó 1257.06 go 1032.02 cm− 1 láithreacht fáinní pioránóis. Chun imscrúdú breise a dhéanamh an raibh cóireáil CPCD i ngníomh ag bealaí MAPKs agus NF-κB, spreagadh DCanna le CPCD in am difriúil agus scrúdaíodh léirithe na bpríomhphróitéiní a bhí i gceist leis an dá chonair. CPCD tharlódh an fosfarylation de JNK, ERK agus p38 ar bhealach ag brath ar am agus na leibhéil phosphorylation de JNK, ERK, agus p38 a bhí na cinn ab airde tar éis 15-30 nóiméad (Fíor 5 A D). Ina theannta sin, chothaíodh fosfarylation cíteaplasma NF-κB p65, IκB , IKK / agus núicléach NF-κB p65 ar bhealach a bhí ag brath ar am. Ba iad na leibhéil fosfarylation de cíteaplasma p65, IκB, agus IKK / , agus an cion de p65 sa núicléas na cinn ab airde tar éis am éagsúil: 15-30 min le haghaidh p65, 30 min do IκB, 60 min do IKK / , agus 20 min le haghaidh an chomhréir de p65 sa núicléas (Fíor 5E-5 J).

Ag baint asJournal of Functional Foods 87 (2021) leathanach baile na hirise 104800: www.elsevier.com/locate/jff