Anailís Chuimsitheach ar Rialtóirí Piroptóis agus Micrithimpeallacht Imdhíonachta Meall i gCarcanóma Cille Duánach Glanchill

Le haghaidh tuilleadh eolais. teagmháiltina.xiang@wecistanche.com

Teibí

Cúlra: Tá fianaise mhéadaithe tugtha le fios go bhféadfadh pyroptosis rialáil a dhéanamh ar anmicrithimpeallacht imdhíonachta meall(TIME) chun tionchar a imirt ar fhorbairt meall. Toisc gur meall an-imdhíon-ghineach é, is féidir le carcanóma cille duánach soiléir cille (ccRCC) leas a bhaint as imdhíonteiripe, ach tá taighde gaolmhar ar phiroptóis in AMA ccRCCis fós easnamhach.

Modhanna: Rinneadh anailís ar shonraí atá ar fáil a fuarthas ó bhunachair shonraí TCGA agus GEO chun próifílí léirithe éagsúla piroptóis i ccRCC agus gnáth-fhíocháin a aithint, agus rinneadh measúnú ar chomhghaolú rialtóirí pyroptóis le TIME i cCRCC.

Torthaí: De réir anailíse cnuasaithe comhdhearcadh, aithníodh dhá leibhéal léirithe difreálach de subtypes chun tionchar a imirt ar prognóis an othair, agus bhain siad le céim agus grád meall histological. Ríomhadh cealla imdhíonachta ag algartam CIBERSORT. Breathnaíodh leibhéil insíothlaithe níos airde de chealla B naive, cealla T scíthe cuimhne CD4, cealla NK ag scíthe, monocytes, agus macrophages i mBraisle 1, agus breathnaíodh leibhéil insíothlaithe níos airde de chealla CD8 móide T, cealla cúntóra follicular T, agus Tregs i mBraisle 2. Léirigh anailís saibhrithe tacair géine go raibh Braisle 2 saibhrithe i ilbhealaí imdhíonacha, lena n-áirítear conair chomharthaíochta JAK-STAT. Thairis sin, bhain ró-bhrú ocht bpointe seiceála imdhíonachta le forbairt ccRCC, go háirithe i mBraisle 2. De réir mar a deimhníodh ceithre phríomhrialtóir piriptóis a d'fhéadfadh a bheith ann, AIM2, CASP5, NOD2, agus GZMB a bheith uasrialaithe i ccRCC trí anailís RT-qPCR agus a fhíorú tuilleadh ag an. Bunachar sonraí HPA. Thug tuilleadh anailíse uile-ailse le fios go raibh na ceithre rialtóir piriptóis seo curtha in iúl go difreálach agus go raibh baint acu leis an TIME in iolrach ailsí.

Conclúid: Thug an staidéar reatha léargas cuimsitheach ar rialtóirí pyroptosis i TIME of ccRCC, a d'fhéadfadh luach féideartha a sholáthar d'imdhíonteiripe.

Eochairfhocail: Carcanóma cille duánach soiléir, Piriptóis, Micrea-thimpeallacht imdhíonachta meall, seicphointí imdhíonachta, Imdhíonteiripe

Click to learn herba cistanches chóireáil fheidhm duáin

Cúlra

Carcinoma cille duánach(RCC) an meall soladach urchóideacha is coitianta sa duán i measc daoine fásta, arb ionann é agus thart ar 3 faoin gcéad de na hurchnaimh aosaigh go léir agus 90 faoin gcéad de na hurchóideacht duánach[1]. Faoi láthair, tá líon na mbásanna de bharr RCC gach bliain ar fud an domhain níos mó ná 1,00,000, agus tá na rátaí galrachta agus mortlaíochta ag méadú ag ráta 2-3 faoin gcéad gach 10 mbliana. [2]. De réir leagan 2004 d'aicmiú paiteolaíochta RCC WHO, tá an mhinicíocht carcinoma cille duánach soiléir (ccRCC) thart ar 70 faoin gcéad [3]. Cé gurb é resection máinliachta an chóireáil is fearr fós le haghaidh ccRCC, níl aon chóireáil aidiúvach iar-obráide éifeachtach ann faoi láthair, agus níl ccRCC íogair do radaiteiripe agus ceimiteiripe. De réir na litríochta, éiríonn 20-40 faoin gcéad d’othair arís tar éis obráid [4]. Mar meall an-imdhíon-ghineach, is féidir le ccRCC leas a bhaint as imdhíonteiripe.

Is cineál bás cille cláraithe é pyroptosis ag gabháil leisathlasadhspreagtha ag ionfhabhtú miocrorgánach pataigineach nó comharthaí díobhálacha eile [5]. Is iad príomhthréith an phiroptóis ná at cille, lysis, agus scaoileadh ábhar cíteaplasma. Is meicníocht thábhachtach é pyroptosis cuí don óstach chun seasamh in aghaidh ionfhabhtú ó mhiocrorgánaigh phataigineacha eachtracha. Mar sin féin, tá pyroptosis iomarcach díobhálach nó fiú marfach don óstach. Tá méadú tagtha ar líon na staidéar a léirigh go bhfuil ról tábhachtach ag pyroptosis freisin i bhforbairt tumaí [6]. Cruthaíonn pyroptosis timpeallacht a chuireann bac ar mheall trí fhachtóirí athlastacha a scaoileadh. Mar sin féin, is féidir le pyroptosis feidhm imdhíonachta an chomhlachta i leith cealla meall a lagú freisin agus fás siadaí in ailsí éagsúla a luathú. Tá sé léirithe ag roinnt staidéir go bhfuil baint ag éifeacht éifeachtach proinflammatory pyroptosis le rialáil microenvironment imdhíonachta meall [7]. Tugann na torthaí seo le fios go bhfuil ról tábhachtach ag pyroptosis i bhforbairt siadaí agus sa phróiseas frith-meall. Mar sin féin, níl an éifeacht a bhíonn ag pyroptosis ar prognóis ccRCC soiléir. Tá tuiscint chuimsitheach ar pyroptosis i ccRCC fós in easnamh, lena n-áirítear an crosstalk idir rialtóirí pyroptosis agus microenvironment imdhíonachta meall.

Sa staidéar reatha, rinneamar anailís chúlghabhálach chuimsitheach bunaithe ar bhunachar sonraí The Cancer Genome Atlas (TCGA) agus an Gene Expression Omnibus Database (GEO) chun tionchar na piriptóis ar an TIME a mheas agus rinneamar iniúchadh breise ar na bunmheicníochtaí idir pyroptosis agus TIME aonair. tréithrithe bunaithe ar an anailís bhraisle chomhthoil. Ina theannta sin, dheimhnigh an staidéar seo freisin an gaol idir pioptóis agus léiriú imdhíonach seicphointe te.

abhair agus modhanna

Fáil sonraí agus sainaithint slonn difreálach

Sonraí seicheamhaithe RNA (RNA-seq) de 539 fíochán ccRCC agus 72 gnáthduánFuarthas fíocháin chomh maith leis na gnéithe cliniciúla comhfhreagracha ó bhunachar sonraí TCGA (https://portal.gdc.cancer.gov/). Bailíodh agus úsáideadh na sonraí GSE46699 agus GSE53757 ó bhunachar sonraí GEO (https://www.ncbi.nlm.nih.gov/geo/) chun léiriú rialtóra pyroptosis a mheas. Ina theannta sin, fuarthas sonraí giniúna pan-ailse TCGA do 33 cineál siadaí urchóideacha agus faisnéis chliniciúil chomhfhreagrach, amhail scóir gasta bunaithe ar mRNA (RNAss) agus DNA-meitilation (DNAss) chomh maith le fochineálacha imdhíonachta, ón Ollscoil. Bunachar sonraí Santa Cruz California (UCSC Xena, http://xena.ucsc.edu/). Cuirtear na 37 rialtóir piripteóis i láthair i gComhad Breise 4: Tábla S1 agus baineadh iad as imscrúduithe roimhe seo [8, 9]. Trí úsáid a bhaint as an bpacáiste "limma", níos mó ná athruithe faoi dhó agus ráta fionnachtana bréagach (FDR, p-luach coigeartaithe)<0.05 is="" considered="" differential="" gene="" expression.="" the="" immunohistochemistry="" (ihc)="" staining="" images="" of="" pyroptosis="" regulators="" in="" normal="" kidney="" and="" tumor="" tissues="" were="" analyzed="" and="" obtained="" from="" the="" hpa="" database="" (http://www.proteinatlas.org/).to="" compare="" the="" expression="" between="" normal="" and="" tumor="" samples,="" all="" tissues="" were="" selected="" using="" the="" same="">

Cnuasú comhdhearcadh

Baineadh úsáid as anailís aischéimniúcháin Univariate Cox chun rialtóirí piriptóis a bhaint as an bpacáiste R "marthanais" p-value<0.05). consensus="" clustering="" was="" performed="" to="" explore="" the="" potential="" molecular="" subtype="" between="" the="" bca="" patients="" using="" the="" r="" package"consensus="" cluster="" plus".="" the="" cluster="" count="" (k)="" was="" set="" from="" 1="" to="" 9,="" and="" the="" best="" optimal="" k="" value="" was="" selected="" for="" further="">

Meastachán ar mhicrea-thimpeallacht imdhíonachta meall

Baineadh úsáid as CIBERSORT, uirlis anailíse bunaithe ar shíniú géine imdhíonachta LM22, chun leibhéil insíothlú imdhíonachta meall ccRCC a mheas. Ritheadh ​​an algartam le haghaidh 1000 iomalartú agus samplaí ccRCC le haschur P<0.05 were="" selected="" for="" further="" analysis.="" the="" "estimate"="" package="" in="" r="" was="" used="" to="" evaluate="" the="" immune="" score="" and="" the="" stromal="" score.="" moreover,="" 8="" com-mon="" immune="" checkpoint="" genes,="" including="" pd-1,="" pd-l1,="" pd-l2,="" ctla4,="" siglec15,="" tigit,="" tim3,="" and="" lad3,="" were="" extracted="" and="" evaluated="" for="" their="" correlations="" with="" pyroptosis="" regulators="" in="">

Anailís saibhrithe feidhme

Rinneadh anailís Gene Ontology(GO) agus anailís ar chonair chomharthaíochta Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes (KEGG) agus úsáid á baint as an bpacáiste “braisle-phróifíleora” in R. Chomh maith leis sin, rinneadh Anailís Saibhrithe Socraithe Géinte (GSEA) chun na difríochtaí a aithint sa tacar de géinte a chuirtear in iúl idir an dá bhraisle i saibhriú chonair KEGG. Rinneadh líon na dtréimhsí 1000 uair le haghaidh

gach anailís, agus na cosáin le p-luach coigeartaithe<0.05 and="" q="" values=""><0.05 were="" considered="" statistically="">

Réamh-mheas ar fhreagra drugaí

Bunaithe ar an bhfaisnéis a fuarthas ón mbunachar sonraí Géanómaíocht na hÍogaireachta Drugaí in Ailse (GDSC) (https://www.cancerrxgene.org/), ríomhadh íogaireachtaí ceimiteiripeacha do ccRCC. Roghnaíodh trí dhrugaí cliniciúla coitianta chun an freagra ceimiteiripeach a thuar, agus baineadh úsáid as an bpacáiste R "pRRophetic" chun meastachán a dhéanamh ar an bhfreagra ceimiteiripeach arna chinneadh ag an tiúchan coisctheach leath-uasmhéadrach (IC50).

Línte cille agus anailís RT-qPCR

Sholáthair Haixiang Shen na línte cille daonna ccRCC,786-O agus Caki-1, agus chuir Yanhong Ma.RPMI an gnáthlíne cille epithelial cortex duánach daonna, HK-2 ar fáil. Baineadh úsáid as 1640 meánach (Gibco) arna fhorlíonadh le serum bó féatais 10 faoin gcéad (FBS, Gibco) chun na cealla a chothú. Agus saothraíodh na cealla go léir ag 37 céim le 5 faoin gcéad de dhé-ocsaíd charbóin. Baineadh RNAanna iomlána as na cealla le Trizol Kit (Invitrogen, Carlsbad, CA, SAM) de réir threoracha an mhonaróra. Trascríobhadh an chéad snáithe (cDNA) agus úsáideadh é mar theimpléad le haghaidh anailíse qPCR mar a thuairiscítear roimhe seo [10]. Rinneadh leibhéil léirithe rialtóirí pyroptosis (AIM2, NOD2, GZMB, agus CASP5) a thomhas ag baint úsáide as Kit qPCR SYBR Green (Takara, an tSeapáin). Tá an t-ainm géine agus na seichimh primer liostaithe i gcomhad breise 5: Tábla S2. Normalaíodh leibhéil mRNA na ngéin go léir go GAPDH (tagairt um normalú inghineach).

Anailís staitistiúil

Rinneadh anailís staitistiúil trí úsáid a bhaint as bogearraí R (http://www.R-project.org,leagan 4.0.3), teanga ríomhchlárúcháin PERL (leagan 5.32.1.1, https://www.perl.org /), agus GraphPad Prism 8.0. Rinne Spearmen comhéifeachtaí comhghaoil ​​a ríomh agus anailísí ar chian-chomhghaolú. Breacadh cuair Kaplan-Meier, agus baineadh úsáid as tástáil log-ranga chun an difríocht shuntasach marthanais a ríomh. Baineadh úsáid as tástáil céime sínithe Wilcoxon chun anailís a dhéanamh ar athróga leanúnacha, ach baineadh úsáid as an tástáil chi-cearnach chun anailís a dhéanamh ar na sonraí catagóiriúla. Cuireadh na torthaí RT-qPCR in iúl mar an meán ± SEM. Rinneadh measúnú ar na difríochtaí idir grúpaí ag ANOVA aontreo agus ansin tástáil chomparáidí iolracha Dunnett ad hoc chun comparáid a dhéanamh le gnáthchealla duán. Measadh go raibh p-luach níos lú ná 0.05 suntasach ó thaobh staitistice le haghaidh gach anailíse.

Torthaí

Aithint agus aicmiú rialtóirí a bhaineann le piriptóis difreálach

Rinneadh comparáid idir an abairt de 37 géinte a bhaineann le pyroptosis sa chohórt TCGA-KIRC, agus aithníodh 11 ghéinte mar ghéinte in iúl go difreálach (Fíor 1 A). Tar éis dhá thacar sonraí neamhspleácha ó bhunachar sonraí GEO a úsáid chun léiriú seachtrach a dhéanamh ar léiriú na 11 ghéinte seo i ccRCC, léirigh sé rialtóirí a bhaineann le piriptóis (AIM2, CASP5, NLRP3, NOD2, GZMA, agus GZMB) go mór in iúl i ccRCC (Fig. .1B). In éineacht le faisnéis prognóiseacha othar a íoslódáiltear ó thacair sonraí TCGA, cuireadh aischéimniú Cox univariate i bhfeidhm ansin chun géinte a scagadh ó na 6 rialtóirí seo, agus bhain ceithre cinn acu (AIM2, CASP5, NOD2, agus GZMB) go mór le prognóis othar ccRCC (Fig. 1C). . Chun imscrúdú breise a dhéanamh ar an ngaol idir léiriú na 4 rialtóirí seo agus na fochineálacha ccRCC, rinneadh anailís cnuasaithe comhdhearcadh le hothair chohórt TCGA-KIRC. Rinneadh an anailís cnuasaithe comhdhearcadh le hothair ccRCC bunaithe ar na ceithre rialtóirí pyroptosis seo, agus léirigh an toradh gur aithníodh an athróg cnuasaithe (k) =2 mar an cobhsaíocht bhraisle is airde ó k =1 go 9, rud a léiríonn go bhféadfaí othair ccRCC a roinnt ina dhá bhraisle leis na comhghaolta inghrúpa is airde agus na comhghaolta idirghrúpa is ísle (Fíor 1 D). Ina theannta sin, bhí maireachtáil fhoriomlán fabhrach (OS) ag othair i mBraisle 1 i gcomparáid leo siúd i mBraisle 2 (Fíor 1E).

Anailís TIME ar na braislí de réir na rialtóirí pyroptosis

Chun imscrúdú a dhéanamh ar na conairí atá saibhrithe sna cnuasaigh, rinneadh anailís GSEA chun na conairí suntasacha KEGG a bhaineann leis an dá bhraisle a aithint. Léirigh na torthaí go bhfuil idirghníomhaíocht receptor cítocine, cosán comharthaíochta receptor cille T, próiseáil agus cur i láthair frith-gen, cosán comharthaíochta cemokine, cíteatocsaineacht ceall-idirghabhála marfach nádúrtha, cosán comharthaíochta gabhdóra cosúil le dola, cosán comharthaíochta gabhdóirí cealla B, agus comharthaíocht JAK-STAT. Bhí baint shuntasach ag cosán le Cnuasach 2 (Comhad Breise 1: Fíor S1), rud a thugann le fios go raibh baint ag na braislí ina raibh rialtóirí piriptóis le micrea-thimpeallacht imdhíonachta siadaí. Dá bhrí sin, chun an difríocht i bhfeidhm imdhíonachta idir an dá bhraisle a iniúchadh, ríomhadh scóir ESTIMATE agus léirigh siad go raibh scóir MEASTACHÁIN, stromal, agus imdhíonachta i bhfad níos airde ag Braisle 2 i gcomparáid le Braisle 1 (Fíor 2A), agus bhí na ceithre rialtóir pyroptosis dearfach. a bhaineann leis na scóir seo (Fig. 2B). Ina theannta sin, léirigh an dá bhraisle difríochtaí suntasacha i insíothlú cille imdhíonachta ( Fíor. 2 C ). D’áitigh Braisle 1 leibhéil insíothlaithe níos airde de chealla B naive, cealla T scíthe cuimhne CD4, cealla NK ag scíthe, monocytes, macrophages M0, macrophages M2, cealla dendritic gníomhachtaithe, agus crann-chealla ag scíthe, agus bhí Braisle 2 níos airde a bhaineann le cealla plasma, cealla T CD8, cuimhne cealla T gníomhachtaithe, cúntóir follicular cealla T, cealla T rialála (Tregs), cealla T gáma deilt, agus cealla NK gníomhachtaithe. Léirigh anailís ar an gcomhghaol idir na ceithre rialtóirí agus cineálacha cille imdhíonachta go raibh comhghaol dearfach nó diúltach ag na ceithre rialtóirí leis an gcuid is mó de na cineálacha cealla imdhíonachta (Fig.2D). Is díol spéise é gur léirigh imscrúdú breise ar léiriú difreálach na ngéinte imdhíonachta idir dhá bhraisle go raibh mais ghéinte imdhíonachta uas-rialaithe i mBraisle 2 cé nach raibh ach 5 ghéin íosrialaithe (Comhad breise 2: Fíor S2A). Roghnaíodh na 10 ngéin is mó atá faoi rialáil agus faoi rialáil chun anailís a dhéanamh ar an gcomhghaol agus taispeántar an toradh sa Chomhad Breise 2: Fíor S2B. Léirigh anailís GO ar phróisis bhitheolaíocha gur saibhríodh an léiriú difreálach ar ghéinte imdhíonachta idir braislí chun cosán comharthaíochta gabhdóra dromchla cille a ghníomhachtú agus trasdul comhartha defreagra imdhíonachta. Léirigh anailís ar chomhpháirt cheallacha go raibh na géinte imdhíonachta a cuireadh in iúl go difreálach go flúirseach sa choimpléasc imdhíon-ghlóbailin. Léirigh anailís ar fheidhm mhóilíneach go raibh ceangal antaiginí i gceist leis na géinte imdhíonachta a léiríodh go difreálach. Léirigh anailís KEGG gur saibhríodh na géinte imdhíonachta a léiríodh go difreálach in idirghníomhaíochtaí gabhdóirí cítocín-cítocine (Comhad breise 2: Fíor S2C, D). Léirigh na torthaí seo go bhfuil Braisle 2 agus na ceithre rialtóirí gafa i micri-thimpeallacht imdhíonachta meall.

Comhlachas rialtóirí piriptóis leis na coscairí seicphointe imdhíonachta agus íogaireachtaí drugaí spriocdhírithe Tá teiripí seicphointe coscaire imdhíonachta (ICI) bunaithe mar rogha cóireála cumhachtach le haghaidh cineálacha éagsúla siadaí, cé nach mbaineann ach codán othar leas as teiripe den sórt sin. Dá bhrí sin, rinneadh tuilleadh iniúchta ar shloinneadh difreálach ICIanna i bhfochineálacha éagsúla. Bhí baint dhearfach ag ocht ngéinte seicphointe imdhíonachta te (SIGLEC15, TIGIT, PD-L1, TIM3, PD-1, CTLA4, LAG3, agus PD-L2) le Braisle 2 (Fíor 3A, B). Is díol spéise é go raibh gaol daingean ag ceithre rialtóir leis na ICanna is mó, cé nach raibh aon ghaol suntasach idir GZMB agus SIGLEC15 (Fig.3C). Ina theannta sin, ag cur san áireamh an luach cóireála cliniciúil san íogaireacht spriocdhrugaí, léirigh Sunitinib agus Temsirolimus níos mó íogaireachta i mBraisle 1, agus bhí dlúthbhaint ag Axitinib le Braisle 2 (Fíor 3D-F). Léirigh na torthaí seo go bhféadfadh an t-aicmiú seo luach tagartha áirithe a sholáthar do chógas cliniciúil othar ccRCC éagsúla.

Anailís srathaithe ar an bhfóntas cliniciúil braisle Chun iniúchadh breise a dhéanamh ar luach cliniciúil an chaidrimh idir an rangú seo agus tréithe cliniciúla éagsúla, roinntear othair ccRCC i ngrúpaí éagsúla de réir aois, inscne, grád, agus céim an ghalair. Is fiú a thabhairt faoi deara go raibh baint níos mó ag céim an ghalair níos airde leis na hothair i mBraisle 2, chomh maith leis an ngrád paiteolaíoch (Tábla 1; Fíor 4B). Léirigh anailís bhreise ar an ngaol idir rialtóirí pyroptóis agus gnéithe cliniciúla gur tháinig ardú ar leibhéal léirithe na gceithre rialtóir le méadú ar chéim an ghalair agus ar ghrád paiteolaíochta, cé nach raibh ach AIM2 in iúl níos airde i bhfireannaigh ná sna baineannaigh. Ní raibh aon difríocht shuntasach idir léiriú na gceithre rialtóir agus aois an othair (Fig.4A).

Fíorú turgnamhach ar léiriú na gceithre rialtóir Bunaithe ar an anailís bhithfhaisnéiseach ar léiriú na gceithre rialtóirí seo, rinneamar anailís ar na leibhéil mRNA agus léirithe próitéine. I gcomparáid le cealla gnáth, bhí na leibhéil abairt de na 4 genes upregulated go céimeanna éagsúla sa dá líne cille ccRCC (Fig. 5 A). Dá réir sin, léirigh patrúin léirithe próitéin AIM2, NOD2, agus GZMB ó bhunachar sonraí HPA go raibh na rialtóirí ró-bhrú freisin i bhfíochán ccRCC i gcomparáid le gnáthfhíochán (Fíor 5 B).

Ceithre phatrún slonn rialtóra piriptóis in ailsí iolracha

Léirigh imscrúdú breise ar phatrún léirithe na gceithre rialtóir piriptóis seo i bpanna-ailse go raibh ceithre rialtóir piripteóis curtha in iúl go difreálach in ailsí iolracha (Fíor 6A). , scamhóg, boilg, agus endometrium, chomh maith le CASP5, NOD2, agus GZMB (Fig.6A). Fuarthas amach in anailís bhreise gurbh é AIM2 an ceann ba dhearfaí a bhain le HNSC, agus go raibh baint diúltach ag CASP5 le COAD(Fig.6B). Agus ba iad AIM2 agus GZMB an dá ghéin a raibh an comhlachas dearfach is suntasaí acu (Comhéifeacht comhghaoil ​​=0.59, Fig.6C).

Le linn dul chun cinn na hailse, féadann cealla meall feinitíopa difreáilte a chailleadh de réir a chéile agus gnéithe ginteora agus gaschealla a fháil[11]. Go ginearálta, is féidir an RNAss agus an DNAss a úsáid chun gaschealla ailse a mheas [12]. Dá bhrí sin, rinneadh iniúchadh ar an gcomhghaol idir rialtóirí pyroptóis le gas siadaí arna dtomhas ag RNAss agus DNAss. Bhí comhghaol suntasach dearfach nó diúltach ag na ceithre rialtóirí le RNAss agus DNAss sa chuid is mó de na hailse uile (Fig.6D). Go háirithe, i KIRC, bhí baint dhearfach nó dhiúltach ag AIM2 agus GZMB le RNAs, faoi seach, agus bhí baint diúltach ag NOD2 le DNAss (Comhad breise 3: Fíor S3).

Comhlachas na gceithre rialtóir piriptóis le micri-thimpeallacht imdhíonachta meall i uile-ailse

Bunaithe ar an éifeacht rialála tábhachtach a bhaineann le géinte pyroptosis ar chineálacha éagsúla cealla imdhíonachta, rinneadh imscrúdú breise ar na ceithre rialtóirí sa mhicrea-thimpeallacht pan-ailse. Is díol spéise é, seachas go raibh baint diúltach ag AIM2 le DLBC agus bhí baint diúltach ag CASP5 le COAD agus LÉIGH i scór ESTIMATE agus scór stromal, bhí baint dearfach ag cuid eile le hailsí sa scór imdhíonachta, scór stromal, agus scór ESTI-MATE (Fíor 7A ). Chun iniúchadh a dhéanamh ar léiriú na gceithre rialtóir pyroptosis i bhfochineálacha imdhíonachta éagsúla i bpanna-ailse, roinneadh infiltrates imdhíonachta i sé chineál le haghaidh anailíse a fhreagraíonn ó chur chun cinn meall go forghabhálach meall, faoi seach, lena n-áirítear cneasaithe créachta, IFN-y ceannasach, athlastach, lymphocyte. ídithe, imdhíoneolaíoch ciúin, agus TGF- ceannasach. Is díol spéise é go raibh baint shuntasach ag na ceithre rialtóirí piriptóis go léir le fochineálacha imdhíonachta, agus ba iad na ceithre rialtóirí piriptóis ba mhó a cuireadh in iúl in IFN-y ceannasach, agus TGF ceannasach (Fig.7B) ina dhiaidh sin. I KIRC, áfach, bhí léiriú na gceithre rialtóir piroptóis ar an gceann ab airde i C2 mar an gcéanna le hanailís uile-ailse. Bhain AIM2, a raibh an dara léiriú is airde aige i bhfochineálacha imdhíonachta, le Cl, agus bhain NOD2, CASP5, agus GZMB le C6 (Fíor 2E).

Plé

Is é resection máinliachta an chéad chóireáil le haghaidh carcinoma cille duánach inár gcleachtas cliniciúil. Mar sin féin, tá sé deacair fós metastasis carcinoma cille duánach a bhaint. Tá carcinoma cealla duánach meiteastatach resistant do radaiteiripe agus teiripe sistéamach, lena n-áirítear teiripe hormone, agus ceimiteiripe [13]. Tá sé léirithe ag triail chliniciúil ar nivolumab, inhibitor seicphointe imdhíonachta frith-PD-L1, chun cóireáil a dhéanamh ar ccRCC meiteastatach (CheckMate-025) go bhfuil OS, cóimheas guaise, ORR, agus ráta freagartha foriomlán níos fearr i bhfad níos fearr ag nivolumab [ 14]. Léiríonn na staidéir seo go bhfuil ionchais iontach ag cur i bhfeidhm imdhíonteiripe i gcóireáil ccRCC. D’fhéadfadh anailís dhomhain ar ilchineálacht an ccRCC TIME cuidiú le bainistíocht imdhíonteiripe beacht agus aonair a sholáthar chun éifeacht cóireála agus cáilíocht marthanais prognóis an othair a fheabhsú. Anseo, scartha othair ccRCC ina dhá fhochineál neamhspleácha mhóilíneacha le tréithe cliniciúla éagsúla, léiriú géine imdhíonachta, agus TIME trí bhraisliú comhdhearcadh ar feadh ceithre phríomh-rialtóir piroptóis. De réir an staidéir reatha, bhí prognóis níos measa ag Cnuasach 2 ná Cnuasach 1, ach bhí Braisle 2 níos íogaire d’imdhíonteiripe.

I measc meicníochtaí báis intreacha na gcealla, tá aird mhéadaitheach faighte ag pyroptosis. Is cineál nua-aitheanta de bhás inflamach cille ríomhchláraithe é pyroptosis a ghníomhaítear trí bhealaí idirghabhála ag caspase clasaiceach-1 inflammasomes nó caspase neamhchlasaiceach-4,caspase-5, agus caspase{{4} } [15]. Le déanaí, thuairiscigh fianaise atá ag teacht chun cinn an ról tábhachtach a bhaineann le pyroptosis i tumorigenesis na malignanachtaí daonna [16,17]. Cuireann pyroptosis bac ar fhás siadaí in ailse cholaireicteach, ailse ae, agus ailse craicinn, ach tá éifeacht dhá threo aige ar ailse chíche [18-20]. In ccRCC, ní fios fós conas a idirghníomhaíonn géinte a bhaineann le piriptóis agus an mbaineann siad le ham marthanais othair. Tá comhghaolú dearfach ag léiriú an chuid is mó de ghéinte rialála pyroptosis agus tá ról tábhachtach prognóiseach aige i ccRCC. Tugann na torthaí seo le fios go bhféadfadh ról lárnach a bheith ag rialtóirí pyroptóis maidir le tumorigenesis agus forbairt ccRCC a rialáil. Sa staidéar reatha, aithníodh ceithre rialtóir pyroptosis atá in iúl go mór i ailse duáin agus is cúis le prognóis lag. Is gabhdóir imdhíonachta dúchasach citosólach é AIM2 a aithníonn DNA dhá shnáithe (dsDNA) a scaoiltear le linn suaitheadh ​​​​ceall agus ionsaí pataigineach. Gníomhaíonn AIM2 gníomhachtaithe an chonair chlasaiceach de phiroptóis trí caspase-1 [21]. D’fhéadfadh ról ar leith a bheith ag AIM2 i gcineálacha éagsúla ailse [22-25], agus léirigh an staidéar reatha go bhfuil ról cothú ailse ag AIM2 in ccRCC. Is próitéin feidhmiúcháin de caspase é Caspase(CASP5), cosúil le caspase-4 agus caspase{-1l,-1-piroptóis neamhspleách [26]. Úsáideann limficítí cíteatocsaineacha GZMB mar arm móilíneach chun cosaint a dhéanamh ar chealla óstaigh atá ionfhabhtaithe le víreas agus atá claochlaithe go hurchóideach[27]. Baineann léiriú íseal GZMB le metastasis luath in ailse cholaireicteach, rud a thugann le tuiscint go bhfuil insíothlú na soithigh fola agus nerves [28]. Suimiúil go leor, d'aimsigh ár n-anailís gur géine comhghaolaithe dearfach é GZMB in ailse duáin. Is receptor aitheanta patrún é NOD2 a fhéadfaidh freagairt imdhíonachta dúchasach an óstaigh a rialáil agus athlasadh, steatosis agus otracht a chosc [29]. D'fhéadfadh histone seach-cheallacha H3 arna tharlú ag LPS a bheith ina chúis le pyroptosis le linn sepsis trí bhealaí NOD2 agus VSIG4 / NLRP3 [30]. Ní fios fós conas a idirghníomhaíonn na géinte seo lena chéile le linn piriptóis cille i ccRCC.

Inár gcleachtas cliniciúil, tá coscairí tyrosine kinase receptor fachtóir fáis endothelial soithíoch (VEGFR-TKIs) tar éis éirí mar chaighdeán cúraim do mRCC [31]. Baineadh úsáid go forleathan as Sunitinib, inhibitor leathan-speictream de receptor tyrosine kinases, mar chaighdeán cóireála le haghaidh teiripe chéad líne ccRCC chun cinn [32]. Mar sin féin, níl gach othar RCC íogair do chóireáil sunitinib, agus forbróidh an chuid is mó d'othair friotaíocht le sunitinib tar éis cúpla mí de chóireáil. Mar sin, is í an eochair chun sunitinib a roghnú le haghaidh cóireála ná othair atá íogair do sunitinib a roghnú. Léiríodh sa staidéar reatha go bhfuil Braisle 1 níos íogaire do sunitinib, agus go bhfuil Braisle 2 níos íogaire d’aicitínib.

Is féidir go gcabhródh tuiscint ar léiriú rialtóirí piroptóis i ccRCC roimh chóireáil le roghanna cóireála spriocdhírithe níos optamaithe a dhearadh chun leas na n-othar. Tá roinnt staidéir tar éis a thaispeáint go bhfuil baint ag éifeacht éifeachtach proinflammatory pyroptosis le rialáil microenvironment imdhíonachta meall [33]. Mar sin féin, tá ról féideartha piroptóis i micri-thimpeallacht imdhíonachta ccRCC fós doiléir. Bunaithe ar shaintréithe léirithe rialtóirí pyroptosis, léirigh an staidéar reatha go bhfuil comhghaolta difriúla ag othair i mbraislí éagsúla le insíothlú imdhíonachta éagsúla. Breathnaíodh leibhéil níos airde de chealla B naive, cealla T scíthe cuimhne CD4, cealla NK ag scíthe, monocytes, macrophages M0, agus macrophages M2 i mBraisle 1. Ar an láimh eile, bhí baint níos airde ag Braisle 2 le CD8 móide Ceall T, Tregs, agus cealla cúntóra follicular T. Is féidir le tregs éagsúlacht cítocíní imdhíonachta a chur faoi deara, rud a fhágann go n-éalaíonn cealla siadaí imdhíonachta. Tá sé léirithe ag staidéir go gcuireann Tregs bac go héifeachtach ar iomadú cealla éifeachtóra T agus go bhfuil leibhéal ard insíothlaithe cille CD8＋ T ina fhachtóir prognóiseach neamhfhabhrach do ccRCC [34,35]. Tá droch-prognóis Chnuasach 2 agus tátail an dá chonclúid seo comhsheasmhach lena chéile. Tá comhghaolú dearfach ag Braisle 2 le hocht ICI te (SIGLEC15, TIGIT, PD-L1, T IM3, PD-1, CTLA4, L AG3, agus PD-L2). Bunaithe ar na torthaí seo, d'fhéadfadh an leibhéal laghdaithe díolúine frith-meall a bheith mar thoradh ar thorthaí marthanais bochta Braisle 2, agus d'fhéadfadh go mbeadh Braisle 2 níos tairbhí i teiripe imdhíonachta. Léiríonn torthaí GSEA go bhfuil baint ag Braisle 2 le bealaí éagsúla comharthaíochta rialála imdhíonachta. Rud atá tábhachtach, tá baint ag cosán comharthaíochta JAK-STAT le carcanaigineas agus insíothlú imdhíonachta ccRCC. Mar sin, rinneamar tuairimíocht go bhféadfadh pyroptosis comhdhéanamh micri-thimpeallacht imdhíonachta an meall a rialáil. Mhol ár staidéar go bhféadfadh ccRCC le léiriú ard ar na 4 ghéinte seo a bheith níos íogaire d’imdhíonteiripe.

Tháinig méadú ar leibhéal léirithe na gceithre rialtóir le méadú ar chéim galair agus ar ghrád paiteolaíochta, agus ní raibh aon difríocht shuntasach idir léiriú na gceithre rialtóir agus aois an othair, a bhí ag teacht le prognóis níos measa Braisle 2.

Ós rud é go bhfuil baint mhór ag pyroptosis i bpróisis bhitheolaíocha éagsúla, rinneamar imscrúdú an bhfuil ról tábhachtach ag na ceithre rialtóir piroptóis seo i mBraisle 2 freisin i gcineálacha ailse eile. Rinneadh anailís uile-ailse ina dhiaidh sin, agus léirigh na torthaí go raibh dlúthbhaint ag na ceithre rialtóirí pyroptosis seo leis an scór stromal, an scór imdhíonachta, agus an scór ESTIMATE i gcineálacha ailse iolracha. Léirigh na torthaí seo gur spriocanna féideartha iad na ceithre rialtóirí piriptóis seo d'éagsúlacht imdhíonteiripe ailse agus nach bhfuil siad teoranta do ccRCC.

Sa todhchaí, beidh gá le tuilleadh anailíse iontaofa fíoraithe i gcohórt níos mó. Ina theannta sin, tá gá le turgnaimh in vitro agus in vivo breise chun an mheicníocht rialála idir rialtóirí piriptóis agus micrea-thimpeallacht imdhíonachta meall a shoiléiriú.

Conclúidí

Go hachomair, rinne an staidéar seo anailís chórasach ar phróifíl léirithe na rialtóirí pyroptosis i ccRCC agus a chomhghaol le seicphointí imdhíonachta agus an ról i micri-thimpeallacht imdhíonachta meall. Tá baint shuntasach ag léiriú rialtóirí pyroptosis le seicphointí imdhíonachta mar PD-L1 agus CTLA4. Bunaíodh dhá fhochineál neamhspleácha freisin trí rialtáin piriptóis a bhraisliú go comhsheasmhach. Breathnaíodh ilchineálacht meall agus difríochtaí i léiriú seicphointe imdhíonachta agus micrea-thimpeallacht imdhíonachta meall idir an dá fhochineál, rud a chuideoidh le srathú riosca agus cóireáil bheacht ar othair ccRCC. Léirigh anailís pan-ailse aon-chéim go bhfuil dlúthbhaint ag na rialtóirí pyroptóis seo le scór stromal, scór imdhíonachta, agus scór MEASTACHÁIN i go leor cineálacha ailse. Rud atá tábhachtach, cabhróidh trialacha cliniciúla agus taighde bunúsach amach anseo le spriocanna a chinneadh chun éifeachtúlacht imdhíonteiripe ailse a fheabhsú.