Spreagann Glicóisídí Feinileatánóideach Cistanche Tubulosa Apoptóis i gCealla Carcanóma Hepatocheallacha H22 Trí Bhealaí Comharthaíochta Eitrinsceacha agus Intreacha araon

Cúlra

Bhí ailse ae sa séú háit maidir le minicíocht ailse agus sa cheathrú háit do bhásanna ailse ar fud an domhain. Ina theannta sin, bhí sé sa cheathrú háit maidir le minicíocht ailse agus sa chéad áit maidir le mortlaíocht ailse i dtíortha a bhfuil innéacs sochdhéimeagrafach íseal acu [1]. Sa tSín, is é ailse ae an tríú príomhchúis le bás a bhaineann le hailse in 2015 [2]. Is carcanóma hepatocellular (HCC) ar fud an domhain iad níos mó ná 90% d’ailsí ae príomhúla [3]. Faoi láthair, is é resection hepatic an príomh-rogha le haghaidh teiripe HCC. Mar sin féin, chomhlíon níos lú ná 30% de na hothair a raibh HCC orthu na critéir a bhaineann le hathghearradh hepatic leigheasach agus tá an ráta foriomlán marthanais 5-bliana fós chomh híseal le 35-50% mar gheall ar an ráta ard atarlaithe [4, 5] . Tá infhaighteacht roghanna cóireála d'othair a bhfuil HCC meánach nó ardleibhéil acu an-teoranta. Tá Sorafenib, druga spriocdhírithe móilíneach, ceadaithe ag an FDA mar an chóireáil chéad líne le haghaidh HCC chun cinn. Mar sin féin, ní shíneann sorafenib ach thart ar 3 mhí de mharthanas agus tá an ráta freagartha níos lú ná 4% [6, 7]. Tá sé práinneach drugaí nó straitéisí nua a fhorbairt i gcoinne HCC.

Baineadh úsáid as leigheas traidisiúnta Síneach (TCM) ina n-aonar nó in éineacht le straitéisí eile chun HCC a chóireáil agus taispeánadh buntáistí cliniciúla lena n-áirítear am marthanais fada, cáilíocht saoil feabhsaithe, frithghníomhartha díobhálacha laghdaithe, agus mar sin de [8, 9]. Tá feidhmeanna bitheolaíocha éagsúla ag Cistanche, ar chineál an TCM, mar shampla frith-ocsaídiúcháin, frith-athlasadh, frith-aging, agus neuroprotection [10, 11]. Measadh go bhfuil gliocóisídí feanylthanoid mar phríomhchodanna gníomhacha Cistanche, a bhfuil gníomhaíochtaí éagsúla acu lena n-áirítear frithocsaídiú, frith-athlasadh, hepatoprotection, agus neuroprotection [12-15]. Tá sé sin tuairiscithe ag ár ngrúpaGlicóisídí feinileatánóideach Cistanche tubulosa (CTPG)d’fhéadfadh apoptosis a chothú i gcealla meileanóma B16-F10 agus bac a chur ar fhás siadaí i lucha [16]. Sa staidéar seo, thomhaiseamar éifeacht antitumor CTPG ar chealla HCC H22 in vitro agus in vivo agus rinneamar imscrúdú ar a meicníochtaí. Fuaireamar amach gur spreag CTPG apoptosis i gcealla H22 trí bhealaí comharthaíochta eistreacha agus intreacha araon agus chuir sé faoi chois fás siadaí H22 i lucha.

TUBULOSA CISTANCHE NÁDÚRTHA CHUN FEIDHM Gnéis A FHEABHSÚ PHGS75% ECH 30% ACT 12%

Modhanna

Líne cille

Fuarthas na cealla carcinoma hepatocellular luch H22 ó Phríomh-Saotharlann Acmhainní Bitheolaíochta agus Innealtóireacht Ghéiniteach Xinjiang, Ollscoil Xinjiang (Urumqi, Xinjiang, an tSín) agus saothraíodh iad i meán RPMI 1640 (Gibco) arna fhorlíonadh le 100 U/ml peinicillin agus 100 ug/ml streptomycin, agus serum bó féatais féatais 10% (Gibco) díghníomhaithe ag teas ag 37 céim in atmaisféar tais de 5% CO2.

Measúnacht MTT

Ceannaíodh CTPG ó Hetian Dichen Biotech Co., Ltd (Hetian, Xinjiang, an tSín) agus bhí na comhdhúile móra CTPG cáilithe agus cainníochtaithe ag crómatagrafaíocht leacht ardfheidhmíochta [16]. Rinneadh inmharthanacht na gceall a mheas le 3- (4, 5-démheitilthiazol-2-il)-2, 5-bróimíd défheiniltetrasóiliam (MTT) (Sigma, St. Louis, MO , USA) measúnacht. Rinneadh cealla H22 a ionaclú i 96-plátaí tobair ag dlús 2 × 104 chealla i 100 meán in aghaidh an tobair agus saothraíodh iad ag 37 céim . Tar éis 24 h, déileáladh le cealla le tiúchain éagsúla CTPG (0, 100, 200, 300, agus 400 ug/ml) nó 0.3% DMSO (comhionann leis sin i 400 ug/ml CTPG) le haghaidh 24, 48 agus 72 h, faoi ​​seach. Tar éis lártheifneoraithe ag 1000 rpm ar feadh 7 nóim, caitheadh ​​amach an súthach agus cuireadh 100 ul de thuaslagán MTT (5 mg/ml i PBS) le gach tobar. Goradh na plátaí ag 37 céim ar feadh 4 h agus cuireadh 100 ul DMSO leis chun na criostail formazan foirmithe a thuaslagadh. Braitheadh ​​96-léitheoir micreaphláta toibreacha (Bio-Rad Laboratories, CA, USA) na luachanna OD490. Ríomhadh inmharthanacht na gceall de réir na foirmle: Inmharthanacht cille (%)=(ODtreated/ODuntreated) × 100%.

Apoptosis a bhrath

Cóireáladh cealla H22 le tiúchain éagsúla CTPG (0, 100, 200, 300, agus 400 ug/ml) nó 0.3% DMSO ar feadh 24 h, agus ansin dhaite iad le Annexin VFITC/Propidium Kit Braite Apoptosis iaidíde (PI) (YEASEN, an tSín) de réir threoracha an mhonaróra. Rinneadh anailís ar shamplaí de réir cíteiméadracht sreafa (BD FACSCalibur, SAM).

Poitéinseal membrane mitochondrial a bhrath

Cóireáladh cealla H22 le tiúchain éagsúla CTPG (0, 200, agus 400 ug/ml) ar feadh 24 h, agus ansin dathaíodh iad leis an dath JC-1 membrane tréscaoilteach (Beyotime, An tSín) ar feadh 20 uair. min ag 37 céim . Tar éis iad a ní faoi dhó le maolán JC-1, athchuireadh samplaí le 300 ul de mhaolán JC{-1 agus rinneadh anailís orthu de réir cítoiméadracht sreafa (BD FACSCalibur, SAM).

Anailís ar thimthriall cille

Rinneadh cealla H22 a ionaclú i miasa saothraithe 60 mm agus cóireáilte le tiúchain éagsúla CTPG (0, 100, 200, 300, agus 400 ug/ml) nó 0.3% DMSO ar feadh 24 h. Bailíodh gach cill agus nite faoi dhó le PBS. Socraíodh cealla i eatánól 70% reoite-fuar ag - 20 céim ar feadh 2 h agus nite faoi dhó le PBS, ansin ath-fhionraí i 300 ul iaidíd Propidium / maolán staining RNase (BD Bitheolaíochtaí). Tar éis 10 nóiméad ag teocht an tseomra, bailíodh samplaí de réir cítoiméadracht sreafa (BD FACSCalibur, SAM), agus rinneadh anailís ar dháileadh timthriall cille le bogearraí ModFit LT 3.0.

Hoechst 33,258 staining

Rinneadh anailís ar na hathruithe moirfeolaíocha ar núicléis cille H22 trí staining Hoechst 33,258 de ruaim DNA-cheangailteach membrane-thréscaoilteach. Síolaíodh cealla H22 i 6-pláta tobair ag tiúchan 1 × 105 cealla/tobar i meán 2 ml. Tar éis cumar 60% ~ 70%, déileáladh leis na cealla le CTPG (0, 100, 200, 300 agus 400 ug/ml) ar feadh 24 h. Bailíodh agus socraíodh na cealla le Paraformaldehyde fuar oighir 4% ag 4 céim ar feadh 10 nóiméad. Tar éis níocháin le PBS, rinneadh cealla a dhaite le Hoechst 33,258 (Beyotime, an tSín) ag 4 céim ar feadh 10 nóiméad. Breathnaíodh samplaí ag micreascóp fluaraiseachta inbhéartaithe (Nikon Eclipse Ti-E, an tSeapáin).

Bloc an Iarthair

Ceannaíodh frith-chaspase-3, caspase frithscoite-3, Frith-Bcl-2, agus frithBax ó Beyotime Biotech Co., Ltd. (Shanghai, An tSín). Frith-chaspase-7, frith-scoite-caspase-7, frith-caspase-8, frith-scoilt-caspase-8, frith-caspase-9, frith ceannaíodh -cleaved-caspase-9, frith-PARP, PARP frith-scréitithe, IgG-HRP antasubstainte agus IgG-HRP frith-choine ó Cell Signaling Technology. Ceannaíodh frith- -actin ó Beijing ComWin Biotech Co., Ltd. (Beijing, an tSín).

Cóireáladh cealla H22 le tiúchain éagsúla CTPG (0, 100, 200, 300, agus 400 ug/ml) nó 0.3% DMSO ar feadh 24 h. Bailíodh cealla agus lísíodh iad leis an Cell Lysis Solution RIPA (Beijing ComWin Biotech Co., Ltd) ar feadh 30 nóiméad ar oighear. Rinneadh samplaí a sníomh (12,000 g ar feadh 15 nóiméad ag 4 céim ) chun na sútháin a bhailiú agus tomhaiseadh tiúchain próitéine ag BCA Kit (Thermo Fisher Scientific, USA). Rinneadh méid comhionann próitéine i ngach sampla a leithlisiú faoi 12% SDS-PAGE agus aistríodh go seicní PVDF (Biosharp, an tSín). Tar éis blocála le maolán TBST ina raibh 5% de bhainne neamhshaille, goraíodh na seicní le hantasubstaintí príomhúla comhfhreagracha agus antasubstaintí tánaisteacha comhchuingeach le horseradish peroxidase (HRP), faoi seach. Tar éis níocháin le TBST, aimsíodh na spriocphróitéiní le trealamh measúnaithe ECL (Beyotime, an tSín).

Ainmhithe agus ráiteas eitice

Ceannaíodh lucha Kunming fireann seachtaine d'aois 6-8 ón Ionad Saotharlainne Ainmhithe, Ollscoil Leighis Xinjiang (Urumqi, Xinjiang, an tSín). Coinníodh lucha i saoráid chaighdeánach ainmhithe atá faoi rialú teochta agus timthriallta éadrom in Ollscoil Xinjiang. Rinneadh na staidéir ainmhithe go léir de réir threoirlínte Choiste Cúraim agus Úsáide Ainmhithe Ollscoil Xinjiang. D'fhormheas an Coiste um Eitic Turgnaimh Ainmhithe de chuid Xinjiang Eochair-Saotharlann Acmhainní Bitheolaíochta agus Innealtóireacht Ghéiniteach (BRGE-AE001), Ollscoil Xinjiang, an prótacal.

Staidéar luch meall

Le haghaidh ionduchtaithe an tsamhail luch meall, cuireadh lucha Kunming fireann instealladh subcutaneously le 1 × 10 6 cealla H22 i 10 0 ul PBS isteach ar an taobh dheis. Tar éis 3 lá, roinneadh lucha go randamach i 3 ghrúpa (7 lucha / grúpa). Instealladh an grúpa rialaithe le 0.1 ml DMSO subcutaneously timpeall an meall. Instealladh subcutaneously do ghrúpaí CTPG-200 agus CTPG-400 le 200 nó 400 mg/kg CTPG i 0.1 ml DMSO timpeall an t-imeall. Cuireadh cóireáil ar lucha gach 2 lá ar feadh suas le 21 lá. Tomhaiseadh méideanna meall ag baint úsáide as calipers ar feadh suas le 25 lá agus ríomhadh toirt siadaí de réir na foirmle: toirt siadaí (mm3 )=(fad × leithead2 )/2. Tar éis 25 lá, rinneadh monatóireacht ar mharthanacht lucha meall gach lá go dtí deireadh an staidéir seo.

Anailís staitistiúil

Rinneadh tábhacht staitistiúil a ríomh trí anailís aontreo ar an éagsúlacht i measc na ngrúpaí cóireála agus rialaithe. Cuireadh na sonraí go léir in iúl mar an meán ± diall caighdeánach (SD). p < 0 measadh go raibh tábhacht staitistiúil ag baint le 05.

Torthaí

Laghdaigh CTPG inmharthanacht cealla H22 in vitro

Chun éifeacht antitumor CTPG ar HCC a iniúchadh, déileáladh le cealla H22 le tiúchain éagsúla CTPG (0, 100, 200, 300, agus 400 ug/ml) in vitro. Tar éis 24 h, breathnaíodh moirfeolaíocht cealla H22 ag baint úsáide as micreascóp inbhéartaithe. Fuaireamar amach gur tháinig athrú mór ar mhoirfeolaíocht cealla H22 le cóireáil CTPG. Le méadú ar thiúchan CTPG, tháinig cealla beag agus cruinn, agus laghdaíodh líon na gceall go mór freisin (Fíor 1a). Baineadh úsáid as measúnacht MTT chun anailís a dhéanamh ar inmharthanacht cealla H22 tar éis cóireála CTPG ar feadh 24, 48, agus 72 h, faoi seach. Laghdaigh CTPG inmharthanacht cille H22 go suntasach ar bhealach dáileog-spleách agus am-spleách (Fíor 1b). Shroich CTPG ag 300 ug/ml an ráta coisctheach is fearr (Fíor 1c). Is iad na luachanna IC50 de CTPG do chealla H22 ná 236 ug/ml ag 24 h agus 169.8 ug/ml ag 48 h.

TUBULOSA CISTANCHE NÁDÚRTHA CHUN CUIMHNE A FHEABHSÚ PHGS75% ECH 30% ACT 12%

Apoptosis spreagtha CTPG i gcealla H22

Chun imscrúdú a dhéanamh an bhfuil inmharthanacht laghdaithe cealla H22 idirghabhála ag ionduchtú apoptosis, déileáladh le cealla H22 le tiúchain éagsúla CTPG (0, 100, 200, 300 agus 400 ug/ml) ar feadh 24 h agus dhaite le PI agus Annexin V. Léirigh na torthaí citeiméadracht sreafa gur spreag CTPG go suntasach apoptosis de chealla H22 (lena n-áirítear apoptosis luath agus déanach) ar bhealach dáileog-spleách (Fíor 2a). Cé gur mhéadaigh an dáileog ard CTPG go suntasach necróis de chealla H22, tá ról beag ag necróis i gcosc ar fhás cille H22 mar gheall ar a chomhréir níos ísle (8.3%) i gcomparáid le apoptosis (52.6%). Ina theannta sin, rinneadh próitéiní iomlána de chealla H22 a leithlisiú tar éis cóireála CTPG, agus bhraith an Iarthair na slonn de linfoma cille B frith-apoptotic 2 (Bcl-2) agus BCL proapoptotic BCL{{-2-próitéin bhainteach (Bax)). blot. Léirigh sonraí scanadh liathscála gur méadaíodh agus gur laghdaíodh leibhéil slonn Bax agus Bcl-2, faoi seach. Méadaíodh an cóimheas Bax/Bcl-2 go suntasach (Fíor 2b). Tugann na torthaí seo le fios go spreagann CTPG apoptosis i gcealla H22.

Spreagann CTPG comhdhlúthú crómasómach agus gabháil timthriall cille i gcealla H22

Tuairiscíodh gur féidir le damáiste DNA agus gabháil timthriall cille de bharr drugaí bac a chur ar fhás cille siadaí agus apoptosis a chur faoi deara i gcealla meall [17, 18]. Chun moirfeolaíocht na núicléis a bhrath i gcealla H22 tar éis cóireála CTPG ar feadh 24 h, dhaite Hoechst 33,342 cealla H22 agus breathnaíodh ag baint úsáide as micreascópacht fluaraiseachta inbhéartaithe. Léirigh cealla cóireáilte CTPG méadú dáileog-spleách ar chromatin geal comhdhlúite de núicléis, agus léirigh na cealla neamhchóireáilte núicléis dhaite aonchineálach (Fíor 3a). Rinneadh anailís bhreise ar dháileadh timthriall cille i gcealla H22 trí staining PI tar éisCóireáil CTPGar feadh 24 h. Mar a léirítear i bhFíor 3b, mhéadaigh cóireáil CTPG go suntasach an céatadán de chealla G0/G1- agus G2/M-chéim agus laghdaigh go suntasach an céatadán de chealla S-phas, rud a thugann le tuiscint gur spreagtha CTPG G. 0/G1 agus G2/Mphase gafa i gcealla H22. Mhéadaigh an dáileog ard CTPG go suntasach freisin an cion de chealla fo-G1.

Laghdaigh CTPG acmhainneacht membrane mitochondrial agus mhéadaigh sé scaoileadh cytochrome c

Tá ról tábhachtach ag cosán mitochondrial-spleách in ionduchtú apoptosis [19, 20]. Is féidir monatóireacht a dhéanamh ar athruithe i bpoitéinseal membrane mitochondrial (Δψm) trí staining JC-1 toisc gur féidir le comhiomlán JC-1 (fluaraiseacht dearg) a dhí-chomhtháthú i monaiméir (fluaraiseacht glas) le laghdú Δψm [21]. Tar éis cóireála CTPG ar feadh 24 h, dhaite cealla H22 le dath JC- 1. Léiríodh sna sonraí cíteaiméadrachta sreafa gur tháinig laghdú suntasach ar fhluaraiseacht dearg sa chainéal FL-2 agus ar fhluaraiseacht glas sa chainéal FL{-1 agus gur méadaíodh é ar chóireáil CTPG. Méadaíodh go suntasach an céatadán de chealla PE - FITC + (Fíor 4a), rud a thugann le tuiscint gur laghdaigh CTPG an Δψm i gcealla H22. Tá sé seo comhsheasmhach leis an gcóimheas méadaithe Bax/Bcl-2. Dá bhrí sin, thugamar faoi deara go raibh méadú suntasach ar scaoileadh cytochrome c ar chóireáil CTPG (Fíor 4b). Thug na torthaí seo le fios go bhféadfadh CTPG apoptosis a aslú go páirteach i gcealla H22 trí chosán mitochondrial-spleách (intreach).

Chuir CTPG an cosán caspase i ngníomh agus chuir sé cosc ​​ar dheisiú DNA

Ansin, rinneadh anailís ar ghníomhachtú caspase arna tharlú ag CTPG trí bhealaí comharthaíochta eistreacha agus intreacha araon. Tar éis cóireáil CTPG ar feadh 24 h, leithlisíodh próitéiní iomlána ó chealla H22 agus braitheadh ​​​​blot an Iarthair na leibhéil caspáis pro- agus scoilte. I gcomparáid leis an rialú neamhchóireáilte nó an rialú DMSO, rinne cóireáil CTPG suas-rialú go suntasach ní hamháin ar an leibhéal caspase scoilte-8 (cosán eistreach) ach freisin ar an leibhéal caspase scoilte-9 (cosán intreach) (Fíor. 5). Go seicheamhach, scoilt caspase gníomhachtaithe-8 agus -9 an pro-caspase le sruth-3 agus -7 a breathnaíodh i bhFíor 5. Scoilt an caspase gníomhachtaithe-3 an DNA einsím deisiúcháin polai (ADP-ribose) polymerase (PARP) chun deisiú DNA a chosc agus damáiste DNA a charnadh mar a breathnaíodh i bhFíor 3a.

Léirigh na torthaí seo gur spreag CTPG apoptosis i gcealla H22 trí bhealaí comharthaíochta eistreacha agus intreacha araon.

Cuireann CTPG bac ar fhás H22 HCC in vivo agus feabhsaíonn sé ráta marthanais lucha siadaí

Ar deireadh, rinneadh meastóireacht ar éifeacht antitumor CTPG ar HCC i múnla luch meall, a bunaíodh trí instealladh subcutaneous de chealla H22. Tar éis 3 lá d'instealladh cille H22, déileáladh le lucha meall le CTPG 8 n-uaire. Rinneadh monatóireacht ar mheáchan coirp na lucha agus méideanna siadaí ag pointí ama sonraithe. Mar a léirítear i bhFíor 6a, níl aon difríocht shuntasach ag meáchan coirp na lucha i ngach grúpa, rud a thugann le tuiscint nach bhfuil aon fho-iarmhairtí soiléire ag dáileoga roghnaithe CTPG.

Suimiúil go leor, cuireadh bac suntasach ar fhás siadaí i lucha a ndearnadh cóireáil orthu le 200 mg/kg agus 400 mg/kg de CTPG araon (Fíor 6b). Ina theannta sin, chuir an dá dháileog de chóireáil CTPG feabhas mór ar mharthanas na lucha meall (3/7, 3/7) i gcomparáid leis an ngrúpa rialaithe (0/7) ag deireadh an turgnaimh (Fíor 6b). Fuaireamar amach freisin gur chuir CTPG feabhas suntasach ar iomadú splenocytes scoite ó lucha Kunming fireann ar bhealach dáileog-spleách (Fíor 6c), rud a thugann le tuiscint go bhfuil éifeacht inmunostimulatory ag CTPG.

TUBULOSA CISTANCHE CÁILÍOCHTA IS AIRDE CHUN FEIDHM GNÉASACH A FHEABHSÚ PHGS75% ECH 30% ACHT 12%

Plé

Tá TCM in úsáid le fada an lá chun galair éagsúla a chóireáil lena n-áirítear ailsí. Tuairiscíodh gur féidir le TCM apoptosis a aslú i gcineálacha éagsúla cealla meall trí bhealaí comharthaíochta eistreach (idirghabhálaithe báis) agus intreacha (mitochondria-spleách) chun éifeachtaí antitumor a chur i bhfeidhm [22-25]. Is féidir leis an dá chonair caspase-8 agus -9 a ghníomhachtú, faoi seach [24, 26]. Anseo, fuair muid amach gur chuir CTPG fás cille H22 faoi chois go suntasach trí ionduchtú apoptosis agus gabháil timthriall cille. Rinneadh leibhéil na caspase scoilte-8 agus -9 a uasghrádú go suntasach agCóireáil CTPG, rud a thugann le tuiscint go raibh baint ag conairí comharthaíochta intreacha agus intreacha araon le hionduchtú apoptóis. Léirigh ár staidéar roimhe seo gur spreag CTPG apoptosis i gcealla meileanóma B16-F10 trí chosán a bhí ag brath ar mhiotochondria a mhéadaigh leibhéal na caspase scoilte-9 ach nár mhéadaigh sé leibhéal na caspase-8 [16]. D’fhéadfadh CTPG conairí comharthaíochta ar leith a ghníomhachtú i gcineálacha éagsúla cealla meall.

Tá sláine membrane mitochondrial rialaithe go docht ag baill an teaghlaigh próitéin BCL-2 lena n-áirítear Bax agus Bcl-2 [27, 28]. Tá ról ríthábhachtach ag an gcóimheas Bax go Bcl-2 sa chonair apoptosis atá ag brath ar mitochondria [29]. I gcealla H22 arna gcóireáil ag CTPG, rinneadh an cóimheas Bax/Bcl-2 a uasghrádú go suntasach, rud a d’fhéadfadh a bheith ina chúis le laghdú Δψm agus scaoileadh cíteochrome c a breathnaíodh sa staidéar seo. Dá bharr sin, scoiltíodh agus gníomhaíodh pro-caspase-9. Ar deireadh, ghníomhaigh tionscnóirí caspase gníomhach-8 agus -9 executioner caspase-3 chun PARP a scoilt chun deisiú DNA a chosc. Nuair a chuirtear le chéile iad, thug na torthaí seo le tuiscint gur spreag CTPG apoptosis i gcealla H22 trí bhealaí comharthaíochta eistreacha agus intreacha araon.

I múnla luch meall, chuir CTPG fás H22 HCC faoi chois go mór agus d'fheabhsaigh sé go mór maireachtáil lucha meall. Go suimiúil, chuir CTPG dáileog-spleách chun cinn iomadú splenocytes ó lucha Kunming, atá ag teacht lenár staidéar roimhe seo [16]. Thug na torthaí seo le tuiscint go bhféadfadh CTPG fás H22 HCC i lucha a chosc trí éifeacht dhíreach antitumor agus trí fheabhsú imdhíonachta indíreach.

Conclúidí

Chuir CTPG fás na gcealla H22 faoi chois in vitro agus in vivo araon agus chuir sé apoptosis ionduchtach i gcealla H22 trí bhealaí comharthaíochta eistreacha agus intreacha araon. Thug na sonraí seo le fios go bhféadfadh CTPG a bheith ina iarrthóir ionchasach le haghaidh cóireáil HCC.