Comhábhair Cheimiceacha Dhuilleoga na Cistéise

Abstract: Cistancheduilleoga a bheith in úsáid le fada mar leigheas traidisiúnta le haghaidhag caitheamhstróc ischemic, aingíne, agusHipirtheannasagus mar dheoch shláintiúil aguscosmaideacha le haghaidhfrith-aosú. Bhí sé mar aidhm ag an staidéar seo a oiread comhdhúile agus ab fhéidir a leithlisiú ó eastóscán eatánóilde na duilleoga persimmon chun na comhdhúile atá gníomhach go bitheolaíoch a aithint. An éifeacht frithocsaídeachden chiseal aicéatáit eitile ó eastóscadh eatánóil na duilleoga persimmon léirithe ag2,2-défheinile-1-measúnacht phicricrihidrazile (DPPH) agus crómatagrafaíocht leachta ardfheidhmíochta ar líne-2,20 -casino-bis (3-ethylbenzothiazoline-6-aigéad sulfónach) (HPLC-ABTS) anailís. Flavonoid nua,kaempferol-3-O- -D-2" - couaroylgalactoside (1), agus comhdhúil nádúrtha nua, kaempferol-3-O- -D-2"-feruloylglucoside (3) scoite amach ón gciseal aicéatáit eitile, mar aon le 25 roimhe seocomhdhúile aitheanta, lena n-áirítearflavonoids déag, aon ian, dhá chúmarin, seacht triterpenoids,agus aicéatafanón amháin. Chinn léirmhíniú sonraí speictriméadracha agus speictreascópacha a struchtúir. Rinneadh measúnú tapa ar gach comhdhúil scoite ag baint úsáide as líneHPLC-ABTSmeasúnacht, agus díobh seo, comhdhúile4–8, 11, 13, 15, agus16 léirigh go soiléiréifeachtaí frithocsaídeacha. Tá anBa é méid na gcomhdhúile seo ná {{0}}.3–0.65 faoin gcéad den eastóscán.

Eochairfhocail:Diospyros cácaí; duilleoga persimmon; flavonoid; frithocsaídeach

Cliceáil Anseo Chun Cistanche a Fháil Saibhir I bhFlavonoids Le haghaidh Frith-Aosaithe Cosmaideacha

1. Réamhrá

Diospyros cácaíThunb. (persimmon) a bhaineann le teaghlach Ebenaceae agus tá sé go forleathandháileadh sa Chóiré, an tSín, agus an tSeapáin. Is é a torthaí a ithe úr nó tirim, cé go bhfuil na duilleogaúsáideadh é le fada mar leigheas traidisiúnta chun stróc ischemic, angina, Hipirtheannas,Atherosclerosis, agus galair thógálacha [1]. Ina theannta sin, baineadh úsáid as a duilleogamar dheochanna sláintiúla agus cosmaidí mar gheall ar a n-airíonna frith-aosaithe agus an cumas chuncabhrú le carnadh colaistéaróil agus melanin a chosc [1]. Tá sé molta ag taighde le déanaígo bhfuil raon leathan airíonna bitheolaíocha ag sleachta duilleoga persimmon,lena n-áirítear scavenging radacach, neuroprotection, cosc ​​thrombosis, frith-Atherosclerosis,agus frith-ailléirge [2–6]. Mhol imscrúdú fíteiceimiceach roimhe seo go bhfuil éagsúlacineálachaflavonoidsagus is iad terpenoids na príomh-chomhábhair [7], agus roinnt tannins,Tuairiscíodh freisin naftaquinones, cúmarins, ianóin, agus aigéid shailleacha [8–12]. Is móilíní imoibríocha iad speicis ocsaigin imoibríocha (ROS) a tháirgtear i gcórais bhitheolaíocha,agus déantar rialú maith ar an gcothromaíocht idir giniúint agus díothú ROSfiseolaíocht cheallacha [13]. Mar sin féin, déanann giniúint iomarcach ROS damáiste ocsaídiúcháin,agus ina dhiaidh sin, aosú agus galair a bhaineann le haois lena n-áirítear ailse, diaibéiteas agus Parkinsongalar [14]. Mar sin, frithocsaídeoirí cosúil le flavonoids agus comhdhúile feanólacha a fhionnadha d’fhéadfadh a bheith ina straitéis geallta chun na galair seo a chóireáil.

Mar chuid dár dtionscadal leanúnach chun comhdhúile atá gníomhach go bitheolaíoch a aimsiú [15], anéifeacht frithocsaídeach an eastóscáin eatánóil (EtOH) agus deighiltí tuaslagóirí ón persimmonRinneadh measúnú ar dhuilleoga agus úsáid á baint as 2,2-défheinile-1-measúnacht phicrylhydrazil (DPPH) agus ardfheidhmíocht ar línecrómatagrafaíocht leachta-2,20 -casino-bis (3-ethylbenzothiazoline-6-aigéad sulfónach)(HPLC-ABTS) anailís. Rinne staidéar fíteiceimiceach ar na duilleoga persimmon an t-aonrúflavonoid nua amháin (1), cumaisc nádúrtha nua amháin (3), agus25 roimhe seocomhdhúile aitheanta. Is sainairíonna iad cur i bhfeidhm modhanna speictreascópacha agus speictriméadracha na struchtúr. Rinneadh scagthástáil tapa ar gach comhdhúil scoite le haghaidh a gcuidéifeachtaí frithocsaídeacha ag baint úsáide as HPLC-ABTS ar líne. Ina theannta sin, an anailís chainníochtúil arRinneadh gach comhdhúil iargúlta sa staidéar seo.

2. Torthaí agus Plé

2.1. Éifeacht Frithocsaídeach na nDuilleoga Persimmon

Rinneadh measúnú ar éifeacht frithocsaídeach sliocht eatánól (EtOH) de duilleoga persimmonle haghaidh réamhscagadh trí DPPH (Fíor1A). Tá 0.125 mg/mL anrinne sliocht thart ar 80 faoin gcéad den radacach DPPH, agus 0.025 mg/mL ascorbicaigéad déanta suas 94 faoin gcéad de na radacach. Rinneadh an measúnú HPLC-ABTS ar líne go tapaiontaofacht na dtorthaí seo a chinntiú (Fíor1D). Baineadh úsáid as aigéad Gallic agus Trolox mar inmheánachcaighdeáin. Mhol an crómatagram ag 734 nm (buaic dhiúltach) go raibh tuairim isd’fhéadfadh gníomhaíochtaí frithocsaídeacha a bheith ag naoi gcomhábhar. Aigéad galach agus Trolox (6-hiodrocsa- 2,5,7,8-cróman teitrimeitile-2-carbocsailaigéad) mar chaighdeáin inmheánacha chun aniontaofacht na dtorthaí. Bhí sé tátal go raibh an chuid is mó de na beanna díorthaigh fllavonoidmar glycosíde flavonoid agus flavanol, bunaithe ar an anailís díreáchtáil a rinneadhtrí ultraivialait (UV) agus mais-speictream na gcomhdhúile a chur i gcomparáid leis an bhfoilsithesonraí. Mhol codánúchán faoi threoir bithmheasúnaithe go raibh na comhdhúile frithocsaídeacha seoflúirseach sa chiseal aicéatáit eitile (EtOAc), agus an t-uisce (H2O) ciseal léirigh laggníomhaíocht (Fíor1B,C). 

Fíor 1. Éifeachtaí scavenging DPPH sliocht EtOH (A), ciseal EtOac (B), agus ciseal HO (C) ciseal Hho de na duilleoga persimmon: (D) crómatagram ABTS-HPLC ar líne den sliocht EtOH.

2.2. Imscrúdú Fíteiceimiceach

Chun na comhdhúile frithocsaídeacha seo a aithint, crómatagrafaíocht agus speictreascópach éagsúlarinneadh modhanna chun aonrú agus tréithriú struchtúrach ancomhdhúile. Fflavonoid nua (1) agus comhdhúil nádúrtha nua (3) a fuarthas ó naciseal aicéatáit eitile den eastóscán eatánóil, mar aon le 25 comhdhúil a tuairiscíodh roimhe seo,eadhon kaempferol-3-O- -2" - couaroylglucoside (2) [16], ( móide ) - catechin (4) [17], hipearóisdeach(5) [17], isoquercitrin (6) [18], quercetin-3-O- -2"-galloylgalactosid (7) [19], quercetin-3-O- -2"-galloylglucoside (8) [20], trifolin (9) [18], astragáin (10) [18], kaempferol-3-O- - 2" - galloylgalactosid (11) [21], kaempferol-3-O- -arabinoside (12) [22], kaempferol-3-O- - 2" - glúcóisíd (13) [23], quercetin-3-O- -2" - couaroylglucoside (14) [24], quercetin(15) [15], kaempferol (16) [25], (6S,9S)-rósóide (17) [26], scopoletin (18) [27], umbelliferone(19) [28], 1-(2,4-déhiodrocsa-6-meitilfeinil)eatánón (20) [29], aigéad barbinervic (21) [30], aigéad diospyric B (22) [7], aigéad rotungenic (23) [31], aigéad pomólach (24) [32], aigéad siaresinolic(25) [33], aigéad oleanólach (26) [25], agus aigéad ursolic (27) [25] trí úsáid a bhaint as speictreascópach agussonraí speictriméadracha agus fisiceacha i gcomparáid leis na sonraí foilsithe agus freisin le sonraí tanaíanailís crómatagrafaíocht ciseal (TLC) (Figiúirí2 agus3). Ina measc seo, comhdhúile2, 16, 17, 19, 20, agus24 ar dtús scoite amach óD. cácaí. 

Fuarthas cumaisc 1 mar phúdar buí, inar bunaíodh an fhoirmle mhóilíneach mar C3olO3 bunaithe ar shonraí mais-speictriméadrachta ardtaifigh (HRMS). Thaispeáin an speictream bandaí ionsúcháin ag 207 agus 315 nm, rud a thugann le fios go raibh cnámh droma flavonol ag cumaisc1. Léirigh na sonraí 'H athshondais mhaighnéadaigh núicléach (NMR) (Tábla 1Fíor S1) patrún tipiciúil de ghliocósíd flavonol coumaroylated, ag taispeáint dhá thacar de chomharthaí de chineál AA'BB' ({{1{0}}.{{11) }} (2H, d, J= 8.5 Hz, H-2' agus H-6 ),6.87 (2H, d, J{{2{0}} .5 HzH-3' agus H{-5')) sa fáinne B de kaempferol chomh maith leis na comharthaí (0 7.45 (2H, d, J=8). 5 HzH-2 agus H{{3{{104}}}}"), 6.81 (2H, d, J=8.5 Hz, H-3 agus H-5 faoin gcéad ) i bhfáinne aramatacha an ghrúpa coumaroyl Dhá chomhartha dúbailte (8H 7.65 (1H, d, J=15.5 Hz, H207") agus 6.35 (1Hd, J=16.0 Hz, H-8"), rud a thugann le fios prótóin tras-oilifiniceacha an ghrúpa tíre. Ina theannta sin, comhartha prótón ainimiciúil (0H 5.57 (1H, d, J=8.0 Hz, H-1) sa réigiún siúcra, rud a thugann le tuiscint go bhfuil an grúpa siúcra timthriallach cumraithe B. An 13C agus feabhsú gan shaobhadh ag aistriú polaraithe sonraí NMR (Iable Léirigh 1Figiúr S2) 30 athshondas a chuimsíonn dhá charbón tras-oilifinic, deich gcarbón aramatacha, agus sé charbón moiety glucosil, agus deich gcarbón neamhphrótónaithe lena n-áirítear dhá charbón carbóinile. Go háirithe, ba shainchomharthaí de ghliocósíd flavonol iad na haistrithe ceimiceacha ag C-2, C-3, agus C-4 (8c 158.1, 134.9 agus 179.2). Ina theannta sin, an comhartha carbóinile carbóin ag C-1" (8c 168.7) agus dhá chomhartha carbóin tras-oilifinic ag C-2'" agus C{-3"({6 146.9 , 115.2) ina n-aistrithe ceimiceacha tipiciúla den ghrúpa coumaroyl. Ba é an comhartha anomeric carbon ag C-1(6C 100.4) agus comharthaí eile don ghluaiseacht glycosil ó C-2" go C-6" ' (6c74.3, 73.4, 70.5, 77.4, agus 62.0). Bhí na sonraí aontoiseach (1D) NMR seo forshuite orthu siúd de kaempferol-3-0-B-2"-coumaroylglucoside (2) (16]. Mar sin féin, thug comparáid chúramach ar shonraí 13C NMR idir an dá chomhdhúil le tuiscint go raibh moiety galactose ag comhdhúil 1, rud a léiríodh a thuilleadh ag sonraí NMR speictreascópachta feabhsaitheOverhauser núicléach (NOESY) (Fíor S6) Cé go raibh an comhghaol NOES idir Breathnaíodh H-2 agus H{-4 i gcomhdhúil 2, ní raibh aon chomhghaol idir na prótóin seo i gcomhdhúil 1. Go ginearálta, is modh éifeachtach é sonraí 13C NMR agus NOESYNMR a léirmhíniú chun an cineál moiety glycosil a chinneadh. . Rinneadh suíomh an ghluaiseacht galactóis a bheith ag C{-3 de réir an aistrithe síos allamuigh de C-2agus C-4, mar is léir ón gcomhghaolmhaireacht il-bhannaí heitrea-núicléigh (HMBCidir H{ {123}}" agus C-3 (Fíor S5). Taispeánadh go raibh suíomh an ghrúpa coumaroyl ag C-2" bunaithe ar an aistriú síos-raoin (0 5.36 (1H, dd, J=10.0, 8.0 Hz, H{ {134}}")) agus comhghaol HMBC idir H-2' agus C-1. Mar thoradh air sin, socraíodh struchtúr cumaisc 1 mar kaempferol-3-0-B-2"-coumaroylgalactoside. Cé go raibh cumaisc 2 scoite amach roimhe seo ó fhoinsí éagsúla, lena n-áirítear Ouercus suber (16] agus Alliumporrum (34), Bhí cumaisc 1 scoite amach agus tréithe struchtúracha den chéad uair.

Comhdhúil3 scoite amach mar phúdar buí, agus bunaíodh an fhoirmle mhóilíneachmar C31H28O14 trí anailís a dhéanamh ar shonraí HRMS. Léirigh an speictream UV UVionsú ag 210 agus 327 nm mar gheall ar an aglycone céanna le comhdhúile1 agus2. Tá an1H Sonraí NMR (Tábla1, Fíor S10) cosúil le cinn na cumaisc2, ach cumaisc3 bhí grúpa feruloyl aige in ionad an ghrúpa coumaroyl, mar is léir ó láithreacht angrúpa meatocsa breise (δH 3.91 (3H, s, 3000 -OCH3)). Ina theannta sin, prótón animéireachcomhartha (δH 5.64 (1H, d, J {{0}}.0 Hz, H-100 )) breathnaíodh, rud a léiríonn go bhfuil an nasc glycosylbhí a-cumraíocht, agus an comhartha aistrithe síos páirce (5.03 (1H, t,J = 8.5 Hz, H-200 )) Léiríodh sa réigiún siúcra, mar atá le cumaisc1. Tá an13C sonraí NMR (Tábla1, FíorS11) léirigh 31 athshondas comhdhéanta de dhá cheanntras-carbóin olaififíneacha, deich gcarbón ráithiúil,deich gcarbón aramatacha, sé charbón taise glucosil, agus aon charbón meatocsa, agus deich gcarbón neamhphrótónáitithecarbóin, lena n-áirítear dhá charbóin charbóin a fhreagraíonn do kaempferol, feruloyl,agus grúpaí glúcóis. Go háirithe, comharthaí carbóin ó C-200 go C-600 (δC 75.8, 76.3, 71.5, 78.8 agus 62.5) mhol sé go raibh moiety glúcóis i láthair. Suímh na glúcóis moietyagus sannadh grúpa feruloyl ag na comhghaolta fadraoin HMBC idir H-100 agusC-3 (δC 134.8) agus H-200 agus C-1000 (δC 168.4) (Fíor S14). An seasamh breiseSocraíodh grúpa methoxy leis an bpríomh-chomhghaol idir 3000 -OCH3 agus C-3000 (δC 149.4). Mhol na torthaí thuas struchtúr cumaisc3 mar kaempferol-3-O- - 2"-feruloyl glucoside. Chomh fada agus is eol dúinn, cumaisc3 níor tuairiscíodh ach mar atáirge hidrealú 3-O- -(2-O-feruloyl)-glúcósyl-7,40 -di-O- -glúcosil kaempferol, scoite óAllium tuberosum[35]. Dá bhrí sin, struchtúr na3 a chur in iúl mar nuacumaisc nádúrtha.

Comhdhúil11 scoite amach mar phúdar buí. Tá an1H sonraí NMR (Fíor S19)thaispeáin sraith AA0 BB0 - cineál comharthaí (δH 8.06 (2H, d, J {{0}}.0 Hz, H-20 , H-60 ), 6.87 (2H, d, J {{0}}.0 Hz, H-30, H-50 )) san fháinne B de kaempferol agus comhartha singil agδH 7.02 (2H, s, H-3000 , H-7000 ) de chuid galaile i réigiún aramatach, ar sainchomhartha éden flavonol leithdháilte. Comhartha prótóin aimhrialta (δH 5.78 (1H, d, J {{0}}.0 Hz, H-100 )) le fios go raibh an nasc glycosil a-cumraíocht. Ina theannta sin, a downfieldcomhartha prótón aistrithe (5.27 (1H, t,J = 9.5 Hz, H-200 )) mhol an grúpa galloylceangailte ag an ngrúpa hiodrocsaile C-200 toisc go bhféadfaí an t-athrú seo a chur i leithtionchar anisotrópach anO- galloyl moiety [21]. Tá an13C Sonraí NMR (Fíor S20)léirigh sé 26 athshondas, rud a léiríonn glycosíd flavonol leithdháilte. Na comharthaí carbóinó C-200 go C-600 (δC 71.1, 72.7, 68.2, 76.0, agus 60.1) go raibh galachtós annmoiety. Dá bhrí sin, an struchtúr cumaisc11 Deimhníodh mar kaempferol-3-O- -200 - galloylgalactosid. Cé go cumaisc11 scoite amach roimhe seo ó fhoinsí éagsúla,san áireamhD. cácaí[21,36], ach an1H Tuairiscíodh sonraí NMR agus MS roimhe seo. Mar sin,an13C Tuairiscíodh sonraí NMR den chéad uair sa staidéar seo

2.3. Gníomhaíochtaí Frithocsaídeacha na gComhdhúl Scoite

Rinneadh measúnú ar gach comhdhúil scoite as a n-éifeachtaí frithocsaídeacha ag baint úsáide as tapa arlíne anailís HPLC-ABTS chun a fháil amach cé na comhdhúile a chuir leis an bhfrithocsaídeachéifeacht na duilleoga persimmon. Comhdhúile4–8, 11, 13, 15, agus16 léirigh antiox potentgníomhaíochtaí idative (Fíor4). Ba kaempferol agus quercetin an chuid is mó de na comhdhúile seodíorthaigh, ach roinnt díorthaigh (1–3, 9, 10, 12, agus14) níor léirigh gníomhaíochtaí. Tá anníor socraíodh an caidreamh struchtúr-gníomhaíochta go hiomlán ach nochtadh i bpáirt é. Igo háirithe, quercetin agus kaempferol le cineálacha galloile (7, 8, 11, agus13) fuarthas gotá gníomhaíochtaí láidre acu, ach iad siúd a bhfuil baint acu le coumaroyl nó feruloyl (1–3 agus16) ní raibhaon ghníomhaíochtaí a thaispeáint.

Fíor 4 .Gníomhaíochtaí radacacha scavenging na gcomhdhúile iargúlta (4–8, 11, 13, 15, agus16) a mheas ar líneMeasúnacht HPLC-ABTS.

2.4. Anailís Chainníochtúil ar Chomhdhúile Leithlisithe

An anailís chainníochtúil ar na comhdhúile leithlisithe go léir sa sliocht EtOAc-intuaslagthachun a dhearbhú go bhféadfadh éifeachtaí frithocsaídeacha na duilleoga persimmon a bheithde bharr na gcomhdhúile gníomhacha seo. Modh sonrach HPLC le brath eagair dé-óid agusforbraíodh brathadóir scaipthe solais galaithe chun é a chinneadh go comhuaineachde 27 comhdhúil. Bhí thart ar 5.9 faoin gcéad de gach ábhar sna triterpenoids scoitean sliocht, agus díobh seo, iad siúd d'aigéad siaresinolic (25), aigéad oleanólach (26), agus ursolicaigéad (27(c) gur bhain cuid shuntasach de, mar a tuairiscíodh i staidéir roimhe seo [7]. Tá anBhí ábhar flavonoids thart ar 5.4 faoin gcéad , agus díobh seo , iad siúd de chomhdhúile gníomhachaBhí 3.2 faoin gcéad (Tábla2). Go háirithe, inneachar kaempferol-3-O- -200 -gailleachlactoside(9), kaempferol-3-O- -2"-galloylglucoside (10), isoquercitrin (13), agus quercetin-3-O- -2"- glúcóisíd (15) níos mó ná 0.3 faoin gcéad . Fíoraíodh an modh anailíse trí úsáid a bhaint as anós imeachta bailíochtaithe simplí chun ábharthacht an mhodha a áirithiú, rud a léirigh go leorsainiúlacht, líneacht, cruinneas, agus beachtas.

Iarr tuilleadh:

Ríomhphost:wallence.suen@wecistanche.com Whatsapp móide 86 15292862950