Scannáin Baictéarach Nanacheallalóis Bithghníomhacha Saibhrithe Le Eucalyptus Globulus Labill. Duilleoga Sliocht Uisciúil Le haghaidh Feidhmchláir Chúram Skin Frith-Aosaithe Cuid 2

Jun 10, 2022

Déan teagmháil le do thoiloscar.xiao@wecistanche.comle haghaidh tuilleadh eolais


3. Torthaí agus Plé

Ullmhaíodh seicní bithghníomhacha BNC, ag ionchorprú dáileoga éagsúla de eastóscán uiscí a fhaightear ó hidrea-dhriogadh duilleoga E.globulus, agus samhlaíodh a gcur i bhfeidhm mar mhaiscí leatháin cúram craicinn frith-aosaithe. Ceithre BNCmembran ina bhfuil 7.5 mg cm-gliocról (ag gníomhú mar phlaisteach agus taisithe)[39,48] agus inneachar éagsúla an HDE, eadhon 1.0 ug cm-2 (BNC-G-HDE1)) ,1.5 ug cm-2(BNC-G-HDE1.5),2.0 ug cm-2 (BNC-G-HDE2), agus 3.0 ug cm-7(BNC-G-HDE3), ullmhaithe (Tábla 1). Ullmhaíodh membrane BNC íon (BNC) agus membrane BNC le gliocról amháin (BNC-G) freisin le haghaidh comparáide (Tábla 1). Rinneadh na seicní BNC-G-HDE leis an modh tuile simplí, bunaithe ar idirleathadh na dtuaslagáin uiscí HDE agus gliocról isteach sa líonra BNC hidreafail agus an-scagach (Fíor 1), de réir staidéir roimhe seo a rinne cur síos ar an bpróiseas seo don ionchorprú. de mheascán de eastóscáin plandaí [13] agus caiféin [23].

image

Le cur leis an HDE agus gliocról, mhéadaigh tiús na seicní tirim BNC ó 50 ± 1 um don BNC íon go 87 ± 4 um don BNC-G, agus go luachanna sa raon 79 ± 4 um go 98 um ±8 μm le haghaidh seicní luchtaithe le HDE agus gliocról, rud a léiríonn ionchorprú rathúil comhpháirteanna an sliocht agus gliocról isteach i struchtúr 3D BNC. Tá gné mhacrascópach na seicní faighte (Fíor 1) táscach ar dháileadh aonchineálach an HDE agus an ghliocról laistigh de nanastruchtúr BNC.cé mhéad cistanche a ghlacadhIs léir freisin go n-iompaíonn cuimsiú gliocról na seicní níos tréshoilseach, mar a thuairiscítear roimhe seo [20]. Ina theannta sin, níor tháinig athrú datha infheicthe ar na seicní bána BNC mar thoradh ar ionchorprú an HDE, rud atá ag teacht le cuma gan dath an tuaslagáin uiscí HDE (Fíor 1).

KSL05

Cliceáil anseo le do thoil chun tuilleadh eolais a fháil

Bhí tréithe na seicní BNC go léir a fuarthas i dtéarmaí moirfeolaíocht, feidhmíocht mheicniúil, cobhsaíocht theirmeach, agus cumas glactha taise. Ina theannta sin, rinneadh measúnú freisin ar ghníomhaíocht frithocsaídeach agus ar chiteatocsaineacht in vitro na seicní. Maidir leis an scannán BNC-G-HDE2(2.0 ug cm--), cobhsaíocht na gníomhaíochta frithocsaídeacha tar éis 3 mhí stórála ag 22-25 céim C agus 52 faoin gcéad RH nó ag 40 Rinneadh measúnú freisin ar chéim C agus 75 faoin gcéad chomh maith leis an ngníomhaíocht in vitro in aghaidh na seanaoise.

3.1.Moirfeolaíocht

Rinneadh measúnú ar mhoirfeolaíocht na seicní BNC, BNC-G, agus BNC-G-HDE trí anailís SEM, mar a léirítear i bhFíor 2. I micreagraf dromchla an BNC íon, tá a líonra nanofibrillar 3D tréith faoi deara go soiléir; áfach, tá an microstructure seo níos lú inbhraite ar na seicní BNC-Gand BNC-G-HDE, go háirithe le méadú ar an méid sliocht, a chlúdaíonn, mar aon le gliocról, na nanaifibril ceallalóis. Breathnaíodh an éifeacht seo cheana féin i seicní BNC nach n-áirítear ach gliocról [49] nó gliocról agus comhábhair ghníomhacha cógaisíochta (m.sh., caiféin, diclofenac, agus lidocaine) [22]. Is féidir a fheiceáil freisin go léiríonn na seicní seo struchtúr níos lú dlúth ná an BNC pristine mar gheall ar iontráil gliocról (chomh maith leis na comhpháirteanna eastóscacha) sa líonra BNC. Laghdaíonn ionchorprú móilíní gliocról idir BNC nanaifibril na bannaí hidrigine idirmhóilíneacha idir nanaifibril ceallalóis[49], agus dá bhrí sin laghdaítear titim struchtúr BNC le linn a thriomú, rud a fhágann go bhfuil seicní le solúbthacht méadaithe [23]. Sna híomhánna trasghearrtha, breathnaítear go soiléir freisin líonadh spásanna lamellar BNC le gliocról agus an sliocht. Tuairiscíodh torthaí comhchosúla freisin maidir le hábhair BNC-bhunaithe atá luchtaithe le tuaslagán ethanolic de sliocht propolis [50]Scrophularia striata Boiss extract [51], nó aigéad hyaluronic [52]. Mar sin, deimhníonn na torthaí seo ionchorprú rathúil gliocról agus HDE isteach sna seicní BNC, gan aon fhoirmiú ceirtleán sleachta soiléir.cad is ciste annIs léiriú é an breathnóireacht seo ar chomhoiriúnacht mhaith na gcomhpháirteanna eastóscacha (comhdhúile feanólacha) leis na snáithíní ceallalóis agus gliocról.

image

3.2. Feidhmíocht Mheicniúil

Rinneadh feidhmíocht mheicniúil gach seicní BNC a mheas trí thástálacha teanntachta agus cuireadh i gcomparáid é le masc aghaidhe tráchtála bunaithe ar BNC. Ag cur san áireamh go gcuirtear masc aghaidh leatháin i bhfeidhm go hiondúil sa staid fhliuch, rinneadh measúnú ar fheidhmíocht mheicniúil na seicní ullmhaithe i stáit thirim agus fliuch (80 faoin gcéad cion taise). Tá an mheastóireacht ar fhriotaíocht agus leaisteachas masc aghaidh leatháin bunúsach toisc go gcaithfidh sé a bheith sách frithsheasmhach le láimhseáil agus, ag an am céanna, leaisteach go leor chun a chumasú go foirfe agus go gcloítear go daingean leis an gcraiceann, rud a fhágann gur féidir dul i bhfód níos fearr ar an gcraiceann. comhdhúile gníomhacha isteach sa chraiceann [13]. Léiríonn torthaí na dtástálacha teanntachta ar na seicní tirime (Fíor 3A) go ndeachaigh ionchorprú gliocról i bhfeidhm go mór ar airíonna meicniúla na seicní BNC trína n-elasticity a fheabhsú go mór. Tá sé seo le feiceáil ag an méadú suntasach ar luach an fhadaithe ag an sos ó 3.6±0.6 faoin gcéad do BNC go 15.5±1.4 faoin gcéad do BNC-G, in éineacht le laghdú suntasach i modúl Young's (ó 1 0.1±1.2 GPa do BNC go 0.5± 0.1 GPa do BNC-G) agus sa neart teanntachta (ó 237 ± 34 MPa do BNC go 40±9 MPa do BNC-G). Aontaíonn na torthaí seo le staidéir roimhe seo maidir le hábhair BNC-bhunaithe a ionchorpraíonn gliocról mar plasticizer [39,49,53]. Mar a mhínítear thuas, is cúis le ionchorprú gliocról isteach sa líonra BNC laghdú ar na fórsaí idirmhóilíneacha idir na nanaifibril ceallalóis, rud a mhéadaíonn an spás idir-snáithíneach agus a soghluaisteacht, rud a fhágann go bhfuil seicní níos leaisteacha [49]. Maidir le hiompar meicniúil na seicní fliucha (Fíor 3B), níl éifeacht an Chomh maith le gliocról ar fhadú na seicní chomh soiléir.cistanche แอ ม เว ย์Go deimhin, léiríonn BNC luach fadaithe comhionann le BNC-G(BNC:15.2±1.3 faoin gcéad , BNC-G:20.8±3.5 faoin gcéad), a d’fhéadfadh a bheith bainteach le láithreacht móilíní uisce sa líonra BNC a lagóidh freisin na bannaí interfibrillar [24], a dhéanamh ar an BNC fliuch níos stretchable. Mar atá sna seicní tirime, áfach, laghdú suntasach ar mhodal Young(BNC:0.3±0.0 GPa vs.BNC-G:0.02 ±0.01 GPa) agus neart teanntachta (BNC:26±1 MPa vs. BNC-G:2±1 MPa) faoi deara tar éis luchtú gliocról.


image

Ní athraíonn ionchorprú an HDE isteach sna seicní BNC, ar bhealach suntasach, an chuid is mó d'airíonna meicniúla na seicní tirime i gcomparáid leis an gcomhghleacaí BNC-G. Is é an eisceacht ná méadú ar neart teanntachta agus modulus Young do BNC-G-HDE2 agus méadú ar an fadú ag briseadh BNC-G-HDE3. Taispeánann gach seicní BNC-G-HDE faduithe arda (11-18 faoin gcéad ) mar aon le luachanna beaga modulus Young ({{10}}.7-1.9 GPa) agus luachanna láidreachta teanntachta idir 51 agus 116 MPa. Ar an gcaoi chéanna, sa staid fhliuch, deimhníodh freisin nach mbíonn tionchar suntasach ag cur HDE leis an gcuid is mó d’airíonna meicniúla BNC-G (Fíor 3B). Léiríonn na seicní fliucha BNC-G-HDE fadaithe arda (19-27 faoin gcéad ), luachanna ísle modulus Young (0.03-0.06 GPa), agus luachanna neart teanntachta idir 4 agus 5 MPa.

KSL06

Agus iad go léir le chéile, deimhníonn na hairíonna meicniúla a pléadh thuas go bhfuil na seicní BNC-G-HDE solúbtha go leor le go bhféadfaí an craiceann a láimhseáil agus a mhúnlú, mar atá inmhianaithe don fheidhm atá beartaithe. Go deimhin, léiríonn na torthaí go bhfuil na seicní seo i ndáiríre gealladh, go háirithe ag smaoineamh ar an gcomparáid leis an masc BNC tráchtála. Tá na seicní tirim BNC-G-HDE comhionann nó fiú go suntasach (lch<0.05)superior mechanical="" properties="" (e.g.,="" elongation="" at="" break="" of="" dry="" bnc-g-hde3)="" to="" those="" of="" the="" commercial="" bnc="" counterpart="" when="" evaluated="" in="" a="" wet="" state,="" the="" commercial="" bnc="" shows="" higher="" values="" of="" elongation="" at="" break="" and="" tensile="" strength="" than="" those="" observed="" in="" the="" bnc-g-hde="" membranes,="" whereas="" values="" of="" young's="" modulus="" are="" identical.="" differences="" in="" the="" content="" of="" plasticizers="" and="" humectants="" (e.g.,="" glycerol,="" hyaluronic="" acid,="" peg-450)="" can="" explain="" the="" increased="" elasticity="" of="" wet="" commercial="" bnc="" compared="" to="" the="" bnc-g-hde="" membranes="" developed="" in="" the="" present="">

3.3. Cobhsaíocht Teirmeach

Chun léargas a fháil ar chobhsaíocht theirmeach na seicní tirime BNC-G-HDE, rinneadh anailís teirmeagmhéadrach faoi atmaisféar támh (N,). Rinneadh anailís ar an scannán BNC-G mar rialú. Léirítear na próifílí díghrádaithe agus na díorthaigh chomhfhreagracha i bhFíor 4. Léiríonn na seicní go léir meáchain caillteanas tosaigh faoi bhun 100 céim, curtha chun sochair galú uisce asaithe ón maitrís polaiméire, a dhearbhaíonn hidreafhileacht BNC agus nádúr hygroscópach gliocról. Seachas an chéim díhiodráitithe seo, taispeánann gach ball-braen próifíl meáchain caillteanais dhá chéim. Léiríonn próifíl theirmeach membrane BNC-G céim meáchain caillteanas le teocht dianscaoilte tosaigh agus uasta de thart ar 125 céim agus 233 céim, faoi seach, a bhaineann go príomha le díghrádú gliocról, i gcomhaontú maith le torthaí roimhe seo a fuarthas in áiteanna eile le BNC plaisteachithe [49]. Tarlaíonn an dara céim meáchain caillteanas ag teochtaí dianscaoilte tosaigh agus uasta de thart ar 295 céim agus 355 céim, faoi seach, agus tá sé curtha i leith dhianscaoileadh na n-aonad glycosil ceallalóis [30].

Maidir leis na seicní a ionchorpraíonn an HDE, taispeánann an chéim meáchain caillteanas a shanntar do dhianscaoileadh gliocról uasteocht dianscaoilte ag ca. 232 céim le haghaidh BNC-G-HDE1,224 céim do BNC-G-HDE1.5,226 céim do BNC-G-HDE2, agus 213 céim do BNC-G-HDE3. Cosúil le BNC-G, breathnaítear an dara céim meáchain caillteanas ag teochtaí dianscaoilte uasta de thart ar 355 céim C do BNC-G-HDE1, 353 céim C do BNC-G-HDE1.5, 343 céim do BNC-G-HDE2, agus 350 céim do BNC-G-HDE3, mar gheall ar dhianscaoileadh na slabhraí BNCpolymeric.cistanche tubulosa dosage redditÓ na teirmeagraim, níorbh fhéidir an meáchain caillteanas a thugtar do dhianscaoileadh na gcomhdhúile feanólacha HDE a aithint, rud a d'fhéadfadh tarlú de réir na litríochta sa raon 100-300 céim [54,55]. Mar sin féin, mar gheall ar an gcóimheas íseal (<0.1%, w/w)of="" the="" hde="" in="" the="" bnc="" membranes,="" the="" weight="" loss="" associated="" with="" the="" extract="" components="" is="" probably="" not="">

Léiríonn na torthaí seo go bhfuil gach seicní cobhsaí suas le ca. 125 céim , atá inchomparáide leis na torthaí a tuairiscíodh roimhe seo le haghaidh seicní BNC gliocról-plaisteach [49] agus atá leordhóthanach don úsáid atá beartaithe mar masc aghaidhe, ag smaoineamh ar a úsáid ag teocht an choirp.

image

3.4.Cumas Glactha Taise

Is maoin an-inmhianaithe é coinneáil taise de mhaiscí aghaidhe leatháin a bhfuil sé mar aidhm aige díhiodráitiú an struchtúir pholaiméirigh a sheachaint agus a chinntiú go gcloíonn an masc leis an gcraiceann le linn am iomlán na cóireála [24]. Ag an am céanna, éascóidh swelling struchtúr nanapóróis BNC, de bharr ceangailteach uisce, seachadadh na gcomhdhúile gníomhacha corpraithe. Mar sin, socraíodh cumas glactha taise na seicní tirime ullmhaithe chun a gcumas taise comhshaoil ​​a ionsú. Mar sin, cuireadh na seicní i dtriomántóir le taise rialaithe (RH ca.52 faoin gcéad) ag teocht an tseomra, agus rinneadh monatóireacht ar ghlacadh taise le himeacht ama, ó 30 nóiméad suas go dtí 48 h (Fíor 5). Tá an RHof thart ar 52 faoin gcéad a úsáidtear sa mheasúnacht gar do luach 45 ± 5 faoin gcéad, léirithe mar threoirlínte ginearálta chun staidéir hiodráitithe a dhéanamh le cosmaidí moisturizing [56].


image

All the prepared BNC membranes can absorb environmental humidity, showing an incremental uptake over time and reaching a maximum at 48 h, which is in agreement with a previous work with BNC loaded with silk-sericin [24]. As expected, the incorporation of glycerol, a highly hygroscopic compound, resulted in BNC membranes with a higher aptitude to uptake environmental humidity, even for short periods of time, such as 1 h, with BNC-G membranes absorbing 5.3±0.3% of moisture after this time, and pristine BNC absorbing only 1.3±0.2%. Similar behavior was observed for the BNC-Gmembranes loaded with the HDE, presenting a moisture uptake of 4.4± 0.6% for BNC-G-HD,4.4± 0.3% for BNC-G-HDE1.5,4.2±0.3% for BNC-G-HDE2, and 3.9±0.6% for BNC-G-HDE3 after 1 h. The amount of the HDE seems to have no influence on the moisture uptake capacity of the membranes since the differences are not significant(p>0.05). Considering that the time of treatment of a beauty mask is generally between 20 min and 1 h, the capacity of the BNC-G-HDE membranes to rapidly absorb environmental humidity is fundamental to guarantee the adherence of the BNC sheet to the skin during the entire treatment and favor the release of the active compounds. It is also noteworthy that for the short period of 1 h, the moisture uptake capacity of BNC-G-HDE membranes is identical (p>{{0}}.05)go dtí sin a fuarthas don masc BNC tráchtála (3.2± 1.0 faoin gcéad ).

3.5. I Gníomhaíocht Frithocsaídeach Chemico

Cinneadh TPC an E.globulus HDE ag baint úsáide as an modh Folin-Ciocalteu, cuntas ar 329 ± 9 mg de GAEg-I de sliocht lyophilized. Deimhníonn an toradh seo láithreacht ard-ábhar comhdhúile feanólacha sa sliocht seo, atá inchomparáide le luachanna TPC a tuairiscíodh roimhe seo maidir le sleachta feanólacha duilleoga E.globulus (311 ± 20 mg sliocht tirim GAEg-Iof) [57].

KSL07

Tá comhdhúile feanólacha ar eolas go maith as a n-airíonna frithocsaídeacha a eascraíonn as scavenging na fréamhacha saor in aisce, atá ar cheann de na meicníochtaí chun cosc ​​a chur ar strus ocsaídiúcháin cheallacha [29]. Mar sin, rinneadh measúnú ar ghníomhaíochtaí frithocsaídeacha an HDE agus na seicní BNC ullmhaithe (BNC, BNC-G, BNC-G-HDE1, BNC-G-HDE1.5, BNC-G-HDE2, agus BNC-G-HDE3) trí mhodh scavening radacach saor in aisce DPPH (Fíor 6). Rinneadh monatóireacht ar ghníomhaíocht frithocsaídeach suas go dtí 2.5 h, bunaithe ar achar gearr de ghnáth le cur i bhfeidhm masc aghaidhe agus ar nósanna imeachta a thuairiscítear in áiteanna eile [44,58].

image

Ní chuireann an membrane BNC íon gníomhaíocht scavenging frithradacach suntasach i láthair, a aontaíonn le sonraí a tuairiscíodh i staidéir roimhe seo [51,59]. Fuarthas torthaí comhchosúla do na seicní BNC-G ós rud é nach comhdhúil frithocsaídeach é gliocról. Maidir le réitigh uiscí HDE, léiríonn siad gníomhaíocht frithocsaídeach atá ag brath ar dháileog, ar féidir iad a chur i leith a n-ábhar i bhfeanólacht, cosúil le torthaí a tuairiscíodh roimhe seo le haghaidh sliocht duille E.globulus uiscí [57]. Bhain an réiteach HDE3 (7.5 ug mL-)(75.1 ±5.8 faoin gcéad) an ghníomhaíocht scabhála uasta DPPH amach ag deireadh 2.5h. Léiríonn an toradh seo go bhfuil gníomhaíocht frithocsaídeach níos airde ag an HDE i gcomparáid le sliocht ethanolic de bhithmhais tráchtála E.globulus triomaithe, nach léiríonn ach gníomhaíocht scavenging DPPH de 65 faoin gcéad (ag 0.5 h goir) le haghaidh tiúchan eastóscáin. de 250 ug mL-I 【37】 Maidir leis na seicní BNC-G-HDE, léirigh na torthaí go léiríonn na seicní go léir gníomhaíocht frithocsaídeach le freagra dáileog-spleách a mhéadaíonn le himeacht ama.sochair salsa cistancheThángthas ar uasghníomhaíochtaí scavening DPPH ag deireadh 2.5 h, le 14.2 ±1.6 faoin gcéad , 28.1 ±6.3 faoin gcéad ,48.9 ±6.1 faoin gcéad, agus 53.3 ± 5.7 faoin gcéad do BNC-G-HDE1, BNC-G-HDE1.5, BNC-G-HDE2, agus seicní BNC-G-HDE3, faoi seach. Mar sin, léiríonn na torthaí go soiléir go gcuireann ionchorprú HDE isteach sa líonra BNC an BNC íon go rathúil le gníomhaíocht frithocsaídeach, cosúil leis an méid a baineadh amach i saothair roimhe seo le sleachta de S.striata Boiss [51] nó Epilobium Angustifolia L.[60 ].

KSL08

These results also demonstrate that the HDE is gradually released from the membranes, and after 2.5 h, the DPPH scavenging activities obtained for all membranes, except for BNC-G-HD3, are identical (p>0.05) leo siúd a baineadh amach don réiteach HDE comhfhreagrach. An difríocht (lch<0.05)between bnc-g-hde3="" and="" hde3="" samples="" may="" be="" related="" to="" the="" kinetics="" of="" the="" hde="" release="" from="" the="" membrane.="" these="" are="" promising="" results="" regarding="" the="" use="" of="" these="" membranes="" for="" the="" delivery="" of="" the="" active="" compounds="" of="" the="" hde.="" in="" particular,="" the="" bnc-g-hde2="" membrane="" seems="" preferable="" for="" further="" studies,="" because="" it="" shows="" similar="" results,="" in="" terms="" of="" antioxidant="" activity,="" to="" the="" membrane="" with="" the="" highest="" dose="" of="" hde,="" even="" though="" a="" lower="" dose="" of="" hde="" is="" used,="" which="" is="" especially="" relevant="" when="" future="" scale-up="" is="">

3.6.Eolalú ar Chobhsaíocht an Mhatháin BNC-G-HDE2 faoi Stóráil

Is eol go bhfuil tionchar ag fachtóirí comhshaoil ​​(m.sh., teocht, solas, agus ocsaigin) ar chobhsaíocht struchtúrach na gcomhdhúile feanólacha agus ar a ngníomhaíocht frithocsaídeach 61. Tá an teocht stórála agus an tsolais i measc na bhfachtóirí is mó tuairiscithe a bhaineann le laghdú na gníomhaíocht frithocsaídeach sleachta ina bhfuil comhdhúile feanólacha [62,63]. Mar sin, bunaithe ar threoirlínte idirnáisiúnta maidir le tástáil chobhsaíochta ar tháirgí cosmaideacha [46], rinneadh tástáil chobhsaíochta taiscéalaíoch chun meastóireacht a dhéanamh ar na hathruithe ar ghníomhaíocht frithocsaídeach an scannáin BNC-G-HDE2 faoi ghnáthchoinníollacha stórála, eadhon ag 22-25 céim agus 52 faoin gcéad RH (coinníoll I) agus ag coinníollacha luathaithe (viz. coinníollacha stórála áibhéalacha), eadhon ag 40 céim agus 75 faoin gcéad RH (coinníoll II) ar feadh 3 mhí.

Léirítear nuair a bhreathnaítear ar ghné mhacrascópach na seicní (Fíor 7) nach bhfuil aon athruithe suntasacha ar a n-aonchineálacht thar na 3 mhí stórála faoin dá choinníoll stórála.

Results from the antioxidant activity of the BNC-G (control) and BNC-G-HDE2 mem-branes over the 3 months of storage in each condition are depicted in Figure 8. As in the assay of the antioxidant activity of BNC-G-HDE membranes(Section 3.5), the values obtained for the antioxidant activity of BNC-G are not significant. Regarding the BNC-G-HDE2 membrane, when it is stored at 22-25°C and 52% RH (Figure8A), the antioxidant activity is kept unchanged over the entire assay(p>0.05), showing values of 37.0±6.9%in the beginning of the assay and 39.6± 2.4% after 3 months. Similar results were obtained after storage at accelerated conditions(Figure 8B) of 40°C and 75%RH, in which the variation in the antioxidant activity after 1 month (31.7±7.5%)and after 3 months (31.0±5.2%)is not significantly different(p>0.05)as sin ag tús na measúnachta. Mar sin, léiríonn na torthaí seo go bhfuil gníomhaíocht frithocsaídeach BNC-G-HDE2 cobhsaí ar feadh 3 mhí ar a laghad faoi na coinníollacha stórála seo, rud a chiallaíonn nach dtarlaíonn aon díghrádú dealraitheach ar na comhdhúile feanólacha ón HDE laistigh de na seicní. Thairis sin, leis na torthaí gealltanais seo faoi choinníollacha luathaithe, tá sé intuartha go mbeidh cobhsaíocht na seicní níos faide ná 3 mhí faoi ghnáthchoinníollacha stórála.


image

image

3.7. Measúnachtaí Bitheolaíochta In Vitro

3.7.1. Measúnacht cíteatocsaineachta

Tá sé ríthábhachtach meastóireacht a dhéanamh ar shábháilteacht na seicní atá bunaithe ar BNC chun iad a chur i bhfeidhm mar mhaiscí aghaidhe ós rud é go dtugann sé seo le tuiscint go bhfuil siad i dteagmháil dhíreach leis an gcraiceann. Mar sin, rinneadh measúnú ar cíteatocsaineacht BNC-G (le haghaidh rialaithe) agus na ceithre seicní BNC-G-HDE ag baint úsáide as an measúnacht MTT, le sleachta na seicní, i dtreo cealla keratinocytes daonna (HaCaT) agus luch fibroblasts (NIH / 3T3). . Roghnaíodh na línte cille seo as a bheith ionadaíoch don dá chineál struchtúracha cille tábhachtacha ón gcraiceann. Is iad keratinocytes príomhchealla an eipideirm (an ciseal craiceann uachtair), agus tá fibroblasts mar chuid den dermis (an dara ciseal craiceann) [64].

Tá na torthaí a fuarthas don scannán BNC-G (Fíor 9) ag teacht le neamh-chíteatocsaineacht BNC íon i dtreo cealla HaCaT [52,65] agus NIH/3T3 [65,66] agus BNC plaisteachithe le gliocról. ar chealla HaCaT [39]. Maidir le torthaí cíteatocsaineachta seicní BNC atá luchtaithe leis an HDE, tá sé faoi deara, go neamhspleách ar an dáileog HDE, nach bhfuil aon tionchar suntasach ag na seicní ar inmharthanacht cealla HaCaT nó NIH/3T3. Tá gach luach inmharthanachta cille a fhaightear le haghaidh seicní BNC-G-HDE os cionn 70 faoin gcéad agus mar sin meastar nach bhfuil siad cíteatocsaineach i dtreo na línte cille seo, de réir an chaighdeáin idirnáisiúnta ISO10993-5 le haghaidh meastóireachta bitheolaíoch ar fheistí leighis (Cuid 5). : Tástálacha le haghaidh cíteatocsaineacht in vitro). Mar sin, is dearbhú iad na torthaí seo go bhfuil ionchorprú na dáileoga seo den E.globulus HDE isteach sa BNC go hiomlán sábháilte d’fheidhmchláir dheirmeacha. Go deimhin, tá na sonraí seo ag teacht le torthaí a tuairiscíodh in áiteanna eile a thaispeánann neamh-chíteatocsaineacht eastóscán eatánólach ó bhithmhais E.globulus (1, 10, agus 100 ug mL-1) a tástáladh ar ghnáthfhibreablaisí deirmeacha daoine [37].

image

3.7.2. Gníomhaíocht Frith-Senescence

Tá baint ag an bpróiseas aosaithe craiceann ní hamháin le hathruithe ar chomhdhéanamh agus ar shláine struchtúrach an mhaitrís eischeallach deirmeach (ECM) [67] ach freisin le méadú na gcealla senescent sa chiseal deirmeach [68]. Aithnítear anois go bhfuil ról gníomhach ag carnadh fibroblasts deirmeach senescent sa phróiseas aosaithe craiceann, ag cur le meath ar fheidhmiúlacht fíocháin [69,70].

Sa chiall seo, rinneadh measúnú ar ghníomhaíocht frith-senescence an scannáin BNC-G-HDE2 i dtreo fibroblasts luiche (líne cille NIH / 3T3). Roghnaíodh membrane BNC-G-HDE2 don mheastóireacht seo mar, in éineacht le BNC-G-HDE3, léiríonn sé ceann de na gníomhaíochtaí frithocsaídeacha is airde, agus ós rud é go n-úsáidtear cainníocht níos ísle HDE sa BNC-G-HDE2, is é b'fhearr maidir le feidhm eacnamaíoch sa todhchaí.

Cothaíodh seandacht cheallacha leis an ngníomhaire géineatocsaineach etoposide, agus tomhaiseadh gníomhaíocht -gal, bithmharcóir a úsáidtear go forleathan le haghaidh cealla senescent [71]. De réir na sonraí a chuirtear i láthair i bhFíor 10, ní ghníomhaíonn seicní BNC-G ná BNC-G-HDE2 -gal seanaoise de chealla NIH/3T3. Os a choinne sin, tar éis cóireáil etoposide, tá méadú suntasach tagtha ar líon na gceall seanaoise -gal-dearfach (staining gorm) NIH/3T3 i gcomparáid le rialú (44.1 ± 2.7 faoin gcéad i gcoinne 8.9±1.0 faoin gcéad ) . Tá sé seo le feiceáil freisin i mhoirfeolaíocht faighte na gceall NIH/3T3, a thaispeánann an feinitíopa sainiúil seanaoise le cealla méadaithe agus leacaithe (Fíor 10A). Go suntasach, tar éis 24 h de chóireáil leis an sliocht BNC-G-HDE2, tá laghdú suntasach ar líon na gceall NIH/3T3 sinescent (32.2 ± 4.0 faoin gcéad) (Fíor 10B). Is cinnte go gcuirtear an éifeacht dearfach seo chun sochair do chomhpháirteanna an HDE, eadhon comhdhúile feanólacha a scaoiltear ón scannán. Go deimhin, tá sé léirithe cheana féin go bhfuil éifeachtaí tairbhiúla ag comhdhúile feanólacha maidir le seanaoise ceallacha a chosc tríd an senescence-associated -gal a shochtadh, go príomha mar gheall ar a ról aitheanta mar choscóirí damáiste ocsaídiúcháin [72,73]. Samplaí eile de réir na dtorthaí a fuarthas anseo is ea na torthaí ar éifeachtaí sliocht duille Sonchus oleraceus L. (ina bhfuil aigéad caitarach, aigéad clórogenic, agus aigéad siocaireiceach) ar sheansacht cille spreagtha H2O in WI{{45 }} cealla fibroblasts diploid scamhóg daonna [74], nó feanóil olóige (hiodrocsatyrosol agus oleuropein) ar fibroblasts deirm daonna agus scamhóg réamh-senescent [72] Mar sin féin, chomh fada agus is eol dúinn, is é seo an chéad uair a rinneadh an ghníomhaíocht seo. tuairiscithe le haghaidh seicní BNC saibhrithe le sleachta plandaí. Dá bhrí sin, is torthaí dóchasacha iad seo a thugann le tuiscint go bhfuil acmhainneacht shuntasach na seicní forbartha BNC-G-HDE le haghaidh feidhmeanna cúram craicinn frith-aosaithe.

image

4. Conclúidí

Arb é is aidhm dó ábhar atá go hiomlán bithbhunaithe a fhorbairt le hairíonna bithghníomhacha agus meicniúla leordhóthanacha d’fheidhmchláir fhéideartha cúram craicinn frith-aosaithe, baill BNC atá luchtaithe le gliocról agus dáileoga éagsúla (1-3 ug cm-2) d'eastóscadh uiscí E.globulus díorthaithe ó hidrea-dhriogadh (HDE) duilleoga ina bhfuil comhdhúile feanólacha (329 ± 9 mg GAE gI de eastóscán lyophilized) ullmhaithe tríd an modh tuile. Thaispeáin gach seicní BNC-G-HDE iompraíocht mheicniúil frithsheasmhach ach fós leaisteach, cosúil (i stáit thirim agus fhliucha) le hiompar masc aghaidhe BNC tráchtála. Bhí cumas na seicní BNC-G-HDE chun taise comhshaoil ​​a ghlacadh níos airde ná cumas BNC íon agus inchomparáide freisin le cumas an masc BNC tráchtála. Fuarthas amach go raibh seicní BNC-G-HDE cobhsaí go teirmeach suas go dtí thart ar 125 céim . Ina theannta sin, tugann corprú an HDE gníomhaíocht frithocsaídeach atá ag brath ar dháileog (measúnacht scavenging radacach DPPH) do BNC. Cruthaíodh cobhsaíocht ghníomhaíocht frithocsaídeach an scannáin le 2 ug cm-2de HDE tar éis é a stóráil thar 3 mhí ag an ngnáthnós ionchasach (22-25 céim /52 faoin gcéad RH) agus luathaithe (40C/75 faoin gcéad RH ) coinníollacha stórála. Léiríodh go raibh gach seicní BNC-G-HDE neamh-cíteatocsaineach i dtreo línte cille HaCaT agus NIH/3T3. Thairis sin, léiríodh go raibh an chóireáil le membrane BNC-G-HDE2 ina chúis le laghdú ar chéatadán na gcealla seanaoise (thart ar 32 faoin gcéad) i gcomparáid leis an méid a breathnaíodh i gcealla cóireáilte ach amháin le etoposide (thart ar 44 faoin gcéad ). Léiríonn na torthaí a thuairiscítear anseo go soiléir an poitéinseal atá ag na seicní BNC ullmhaithe HDE-luchtaithe mar mhaisc aghaidhe leatháin láidre le haghaidh cúram craicinn frith-aosaithe.


Baintear an t-alt seo as Ábhair 2022, 15, 1982. https://doi.org/10.3390/ma15051982 https://www.mdpi.com/journal/materials






















































B’fhéidir gur mhaith leat freisin