Straitéisí Bunaithe ar Aptamer Chun Imdhíonteiripe a Spreagadh i TNBC Cuid 1

Achoimre Shimplí:

Is fochineál ailse chíche ionsaitheach é ailse chíche trí-dhiúltach (TNBC) le torthaí laga agus roghanna teiripeacha teoranta. Is sainairíonna é imdhíon-ghineacht níos suntasaí i gcomparáid le fochineálacha eile ailse chíche, rud a thugann le tuiscint gur straitéis inmharthana é imdhíonteiripe. Is oligonucleotides gearra iad aptamers a aithníonn, cosúil le hantasubstaintí, a sprioc próitéin le sainiúlacht agus ard-chleamhnas. Mar sin féin, i gcomparáid le hantasubstaintí, baineann buntáistí éagsúla leo ó thaobh méide, táirgeachta, modhnaithe agus cobhsaíochta de, rud a fhágann gur iarrthóirí sármhaithe iad chun teiripí núíosacha frith-ailse spriocdhírithe a fhorbairt. Le déanaí, chun micrea-thimpeallacht meall imdhíon-imoibríoch agus frith-ailse a athbhunú, forbraíodh straitéisí éifeachtacha bunaithe ar aptamer. Anseo, déanaimid plé ar na cineálacha cur chuige is déanaí atá dírithe ar aptamers a úsáid chun an freagra imdhíonachta in aghaidh ailse in TNBC a fheabhsú nó a athchóiriú.

Is fochineál ailse chíche é ailse chíche trí-dhiúltach atá deacair a chóireáil agus a bhfuil seans maith ann go dtarlóidh atarlú agus metastasis agus a bhaineann go dlúth le díolúine.

Fuarthas amach i staidéir go bhfuil difríocht shuntasach idir ailse chíche trí-dhiúltach agus cineálacha eile ailse chíche ag an leibhéal imdhíoneolaíoch. Tá leibhéal ard insíothlú cille imdhíonachta agus freagairt athlastach láidir ag ailse chíche triple-diúltach, rud a d'fhéadfadh deacracht mhéadaithe cóireála agus rátaí atarlaithe méadaithe a bheith mar thoradh air. Ina theannta sin, d'fhéadfadh móilíní próitéine áirithe ar dhromchla ailse chíche trí-dhiúltach cur i láthair antaigin a spreagadh ag an gcóras imdhíonachta, rud a spreagann an freagra imdhíonachta a thuilleadh.

Dá bhrí sin, tá taighde ailse chíche triple-diúltach le imdhíonteiripe mar an príomh-chur chuige ar siúl faoi láthair. Is é ceann de na treoracha taighde monatóireacht imdhíonachta a úsáid chun monatóireacht a dhéanamh ar éifeachtúlacht imdhíonteiripe agus stádas imdhíonachta othar; is é an treo taighde eile ná cealla imdhíonachta sonracha, vacsaíní, agus drugaí inmunomodulatory a fhorbairt le haghaidh ailse chíche trí-dhiúltach chun ról an chórais imdhíonachta a chur chun cinn. As seo, tá a fhios againn go bhfuil díolúine an-tábhachtach. Is féidir le Cistanche díolúine a fheabhsú go suntasach. Is féidir leis na polaisiúicrídí i bhfeoil freagairt imdhíonachta an chórais imdhíonachta daonna a rialáil, cumas strus na gcealla imdhíonachta a fheabhsú, agus éifeacht bactericidal na gcealla imdhíonachta a fheabhsú.

Cliceáil forlíonadh cistanche deserticola

Coimriú:

Féadfaidh ról ríthábhachtach a bheith ag an gcóras imdhíonachta (IS) maidir le forbairt agus dul chun cinn siadaí a chosc, rud a fhágann, le blianta beaga anuas, forbairt imdhíonteiripe éifeachtach ailse. Mar sin féin, tá imghabháil imdhíonachta, cumas siadaí chun imdhíonacht óstaigh millteach a shárú, fós ar cheann de na príomhchonstaicí atá le sárú chun rath cóireála a uasmhéadú. Sa chomhthéacs seo, tá straitéisí geallta atá dírithe ar mhicrea-thimpeallacht imdhíonachta meall a athmhúnlú agus díolúine antitumor a chur chun cinn ag teacht chun cinn go tapa. Tá ailse chíche trí-dhiúltach (TNBC), fochineál ailse chíche ionsaitheach le torthaí laga, an-imdhíon-ghineach, rud a thugann le tuiscint gur straitéis inmharthana é imdhíonteiripe.

Mar fhianaise ar seo, cheana féin, tá dhá immunotherapies tháinig le déanaí ar an gcaighdeán cúraim d'othair a bhfuil siadaí in iúl PD-L1, a léiríonn, áfach, céatadán íseal na n-othar, a dhéanamh níos gníomhaí cur chuige imdhíonteiripeach is gá. Is oligonucleotides aonshnáithe gearra, ard-struchtúrtha iad aptamers a cheanglaíonn a gcuid spriocanna próitéine ag ard-chleamhnas agus sainiúlacht. Úsáidtear iad chun críocha teiripeacha ar an mbealach céanna le antasubstaintí monaclónacha; mar sin, tá straitéisí éagsúla bunaithe ar atamer á scrúdú go gníomhach chun freagairt IS i gcoinne cealla ailse a spreagadh. Tá sé mar aidhm ag an athbhreithniú seo plé a dhéanamh ar an bpoitéinseal a bhaineann leis na cineálacha cur chuige aptamer-bhunaithe a tuairiscíodh le déanaí chun tacú leis an IS chun troid i gcoinne TNBC.

Eochairfhocail:

chóras imdhíonachta; imdhíonteiripe; fealsamh ; TNBC; díriú ailse gníomhach.

1. Réamhrá

Is fochineál ailse chíche ionsaitheach (BC) é ailse chíche trí-dhiúltach (TNBC) arb ionann é agus thart ar 10-20 faoin gcéad de na RCanna go léir a diagnóisíodh. Go ginearálta bíonn tionchar aige ar mhná níos óige, is dóichí go dtarlóidh sé arís, agus baineann sé le ráta marthanais foriomlán níos boichte i gcomparáid le fochineálacha eile RC [1,2]. Tagraíonn an téarma TNBC do ghrúpa ilchineálach siadaí a bhfuil tréithe éagsúla histeolaíocha, géanómaíochta agus imdhíoneolaíocha acu agus freagairt ar theiripe, a bhfuil go coitianta acu easpa receptor estrogen, receptor progesterone, agus receptor fachtóir fáis eipideirm 2 (HER2); dá bhrí sin, níl othair TNBC incháilithe le haghaidh teiripe hormóin nó frith-HER2 [2,3].

Bunaithe ar phróifíliú slonn géine, tá Lehman et al. [4] rangaithe ar dtús TNBC i sé fhochineál móilíneach ar leith, is iad sin basal-mhaith 1 (BL1), basal-mhaith 2 (BL2), inmunomodulatory (IM), mesenchymal (M), gas-cosúil le mesenchymal (MSL), agus luminal androgen receptor (LAR). Ina dhiaidh sin, baineadh na fochineálacha IM agus MSL den aicmiú tosaigh toisc gur aithníodh nach raibh a ngnéithe tras-trascríobhacha díorthaithe ó chealla meall ach ó limficítí insíothlaithe siadaí (TILanna) agus cealla stromal a bhaineann le siadaí, faoi seach, i láthair go flúirseach sa TNBC. micrithimpeallacht siadaí (TME) [5].

Mhol Burstein et al aicmiú eile do TNBC. [6], a dheimhnigh ceithre fhochineál a thuairiscigh Lehman: LAR, M, agus dhá BL. Roinntear na fochineálacha basal a ndéanann Burstein cur síos orthu, bunaithe ar chomharthaíocht imdhíonachta, ina chosáin imdhíonachta-cosúil le basal, a thaispeánann íosrialáil cille B, ceall T, agus cosáin rialála imdhíonachta cille marú nádúrtha (NK) agus cosáin chitocine, agus cosáin basal-mhaith. imdhíonachta-ghníomhach, arb iad is sainairíonna upregulation géinte a rialaíonn B cille, T, agus feidhmeanna cille NK. Léirigh Burstein agus comhghleacaithe go bhfuil na prognóis is measa agus is fearr, faoi seach, ag siadaí imdhíonta agus imdhíonghníomhaithe. Leagann an dá aicmiú béim ar shíniú an chórais imdhíonachta (IS) mar fhachtóir prognóiseach tábhachtach i TNBC agus mar sprioc ionchasach i gcóireáil roinnt subtypes TNBC.

Mar gheall ar na roghanna teoranta de theiripí móilíneacha agus nádúr an-ilchineálach na siadaí seo tá TNBC ar an RC is dúshlánaí le cóireáil. Go dtí seo, tá an caighdeán cúraim do TNBC luath agus chun cinn araon fós ceimiteiripe, go ginearálta ag baint úsáide as réimeanna comhcheangailte taxane, anthracycline, cyclophosphamide, cisplatin, agus fluorouracil [7,8]. Ar an drochuair, tá éifeachtúlacht ceimiteiripe teoranta ag an ard-tocsaineacht i dtreo gnáthchealla [9]. Thairis sin, tar éis freagra tosaigh gairid ar chóireáil, tá claonadh ag TNBC teacht ar ais arís i bhfoirm níos ionsaithí agus chemoresistant, ag taispeáint ráta loghadh paiteolaíochta suntasach ard [10]. Dá bhrí sin, tá sé ag éirí níos gá sínithe móilíneacha sonracha a aithint ar féidir díriú orthu chun cóireálacha éifeachtacha nua a bhunú do TNBC. Le blianta de thaighde dian ar TNBC aithníodh na chéad teiripí móilíneacha.

Ba é an chéad bhithmharcóir arna bhailíochtú go cliniciúil do theiripe TNBC ná stádas sócháin BRCA. Iompraíonn suas le 19 faoin gcéad d'othair TNBC sócháin in ionchódú géinte do BRCA1 agus BRCA2, próitéiní a bhaineann le deisiú briseadh snáithe dúbailte DNA, rud a fhágann íogaireacht d'inhibitors poly-ADP-ribose polymerase (PARP) [2,11]. In 2018, d'fhormheas an Riarachán Bia agus Drugaí (FDA) dhá choscóirí PARP, Olaparib [12,13] agus Talazoparib [14], mar mhonaiteiripe chun cóireáil a dhéanamh ar othair le siadaí BRCA-shóite. Faoi láthair, tá éifeachtúlacht coscairí PARP á imscrúdú freisin i TNBC de chineál fiáin BRCA [15].

Tá TNBC níos imdhíon-ghineacha ná subtypes BC eile mar gheall ar a chlaonadh ard chun neoantaiginí a ghiniúint a fhéadann an IS oiriúnaitheach a aithint mar "nonself" agus láithreacht infiltrates cille imdhíonachta, atá freagrach as freagraí imdhíonachta antitumor a fhorbairt [17, 18]. Ina theannta sin, cuireann thart ar 20 faoin gcéad de TNBC bás cille frithchláraithe-ligand 1 (PD-L1) [19] in iúl, próitéin dromchla a cheanglaíonn gabhdóirí próitéin bás cille 1 (PD17) cláraithe ar TILanna, ag casadh as. a ngníomhaíocht. Ar an mbealach seo, spreagann an ais PD-1/PD-L1 TME imdhíonta atá freagrach as imghabháil imdhíonachta siadaí. Is réamhriachtanais bhunúsacha iad na gnéithe seo go léir chun leas a bhaint as imdhíonteiripe. Go deimhin, in 2019, d’fhormheas an FDA an chéad imdhíonteiripe le hantashubstaint mhonaclónach frith-PDL1 Atezolizumab (mAb) chun cóireáil a dhéanamh ar PD-L1-do-chosanta, chun cinn go háitiúil, agus TNBC meiteastatach i gcomhar le nab-paclitaxel [20,21 ].

Sa 2 bhliain ina dhiaidh sin, cheadaigh an FDA Pembrolizumab, mAb frith-PD-1, i gcomhar le ceimiteiripe caighdeánach: ar dtús, in 2020, d’othair a bhfuil TNBC neamh-inoibrithe nó méadastatach áitiúil athfhillteach acu agus níos déanaí, in 2021, le haghaidh TNBC luathchéime nua-dhiagnóisithe agus inoibrithe tríd an antashubstaint a chur le ceimiteiripe neoadjuvant agus aidiúvach [22]. Mar sin féin, níl na teiripí luaite ceadaithe ach amháin le haghaidh TNBC ag léiriú ardleibhéil PD-L1, rud a fhágann go bhfuil sé riachtanach straitéisí nua a aimsiú chun iarratais imdhíonteiripe do TNBC a leathnú.

Níos déanaí, d'fhormheas an FDA an chéad chomhchuingeach antashubstainte-drugaí (ADC) mar chóireáil dara líne d'othair a bhfuil TNBC dul chun cinn áitiúil nó meiteastatach neamh-indíreasaithe acu a fuair dhá theiripí sistéamach nó níos mó roimhe seo, ceann amháin acu ar a laghad le haghaidh galar meiteastach.

Sacituzumab govitecan is ainm don ADC seo, atá comhdhéanta d'antasubstaint dhaonnaithe antaigin dromchla cille trophoblast arna chúpláil trí nascóir leis an bpáil-ualach SN-38, meitibilít ghníomhach an inhibitor topoisomerase 1 irinotecan [23 ].

Is comhdhúile an-roghnacha iad aptamers Oligonucleotide atá ag teacht chun cinn mar mhalairt nó comhlánú ar mAbs le haghaidh díriú ailse gníomhach, agus tá cur i bhfeidhm aptamers mar ghníomhairí teiripeacha nuálaíocha in ailsí éagsúla daonna, lena n-áirítear TNBC, ag méadú go tapa [24]. San athbhreithniú seo, déanfaimid plé ar dtús ar ghnéithe aptamers i gcoinne bithmharcóirí a bhaineann le hailse mar theiripí nuálacha. Ansin, díreoimid ar na straitéisí atamer-bhunaithe a tháinig chun cinn le déanaí ar féidir leo imghabháil imdhíonachta a chosc agus freagraí imdhíonachta frith-ailse a spreagadh, ag plé a n-acmhainneacht TNBC a bhainistiú sa todhchaí.

2. Aptamers le haghaidh Teiripe Ailse Spriocdhírithe

Is oligonucleotides sintéiseach, gearr, aon-shnáithe DNA nó RNA iad aptamers a fillte isteach i struchtúir uathúla tríthoiseach (3D) a idirghníomhaíonn ag ard-chleamhnas agus sainiúlacht le spriocanna de chineálacha éagsúla. Thángthas ar Aptamers ar dtús i 1990 nuair a rinne dhá pháipéar [25,26] cur síos ar an teicneolaíocht in vitro SELEX (éabhlóid chórasach na ligands trí shaibhriú easpónantúil) do ghlúin aptamer agus thug siad isteach an téarma aptamer, a thagann ón bhfocal Laidine "Aptus" (a d'oirfeadh). ) agus an focal Gréigise ársa "meros" (cuid), rud a chiallaíonn "páirteanna feistiú" (Fíor 1).

Fíor 1. Léiriú scéimreach ar atamer atá ceangailteach dá sprioc agus príomhchéimeanna mhodh SELEX. (a) Glacann an t-aptamer struchtúr 3T chun ceangal a dhéanamh dá sprioc; (b) Tosaíonn an SELEX le leabharlanna randamacha de sheichimh ssDNA nó RNA agus cuimsíonn sé babhtaí athdhearbhaithe de cheangail leis an sprioc, deighilt na seichimh sprioccheangailte ó neamhcheangailte agus aimpliú na seicheamh ceangailte. Ar deireadh, déantar anailís ar an leabharlann saibhrithe trí chlónáil agus seicheamhú nó, sna cineálacha cur chuige is déanaí, sainaithnítear ligands ard-chleamhnais trí sheicheamhú den chéad ghlúin eile (NGS) agus bithfhaisnéisíocht. Cruthaithe le BioRender.com (ar fáil air an 2 Márta 2023).

Tosaíonn an roghnú in vitro le giniúint leabharlann chomhcheangailteach de oligonucleotides, gach ceann ina bhfuil seicheamh lárnach randamach, thart ar 20–100 núicléatídí ar fad, cliathánach ag dhá réigiún sheasta atá riachtanach chun primers a anáil le linn aimplithe agus trascríobh in vitro (chun aisteoirí RNA a roghnú ). Tá an leabharlann gortha le móilín sprice, agus déantar céim dheighilte chun oligonucleotides atá ceangailte leis an sprioc a scaradh ó sheichimh neamhshonracha neamhcheangailte. Is féidir le spriocanna SELEX peptídí, próitéiní, meitibilítí, carbaihiodráití, móilíní orgánacha beaga, RNA struchtúrtha eile, agus fiú cealla iomlána nó orgánaigh a áireamh, agus scéimeanna roghnúcháin éagsúla ar cuireadh síos orthu go dtí seo atá oiriúnaithe do nádúr na sprice [27–29]. . Nuair a bhíonn siad ar ceal ón sprioc, déantar na seichimh a aimpliú go díreach trí PCR i gcás DNA-SELEX nó a thras-scríofa ar ais ar dtús agus ansin a aimpliú i gcás RNA-SELEX. Úsáidtear na seichimh aimplithe chun leabharlann oligonucleotide nua a ghiniúint, a bheidh faoi réir babhta eile roghnaithe. Trí bhabhtaí iomadúla de gor, críochdheighilt agus aimpliú a dhéanamh arís agus arís eile, cruthaítear seichimh a bhfuil ard-chleamhnas agus sainiúlacht acu don sprioc mar thoradh ar an bpróiseas seo (Fíor 1).

Is féidir aptamers a mheas mar an leagan aigéid núicléigh d’antasubstaintí próitéine toisc go roinneann siad ard-chleamhnas agus sainiúlacht cheangailteach leo don sprioc (luachanna Kd, 10−8–10−12 M) agus, ar aon dul le hantasubstaintí, tá feidhmeanna éagsúla acu mar eilimintí aitheantais, lena n-áirítear teiripí, bithbhraiteoirí, agus diagnóisic [30].

Déanann Aptamers idirdhealú i measc baill an-chosúil den teaghlach próitéine céanna, isoforms próitéin, agus freisin próitéiní atá difriúil i aimínaigéad amháin [27]. Mar shampla, i gcodarsnacht le scagadh SELEX le coirníní agarose agus coirníní maighnéadacha in éineacht le próitéiní de chineál fiáin agus mutant, faoi seach, tá aptamers RNA ginte in ann ceangal a dhéanamh le p53R175, ceann de na spotaí te de shóchán p53, ag idirdhealú ar an próitéin mutant ó cineál fiáin p53 [31].

Féadfaidh aptamers feidhmiú mar theiripí frith-ailse de réir rialacha mionsonraithe éagsúla (Fíor 2).

Fíor 2. Teiripe frith-ailse bunaithe ar Aptamer. (a) Teiripe fhreastalaíoch: ceanglaíonn feisteoirí le spriocanna dromchla cille ailse, ag cur bac ar bhealaí protumoral. (b) Seachadadh spriocdhírithe drugaí: ceanglaíonn feisteas atá comhchuingeach le nanacháithníní atá luchtaithe ó dhrugaí nó atá nasctha le drugaí le spriocanna dromchla na gcealla agus déantar iad a inmheánú i gcealla ailse, agus mar thoradh air sin tá seachadadh roghnach drugaí intracellular. (c) Teiripe géin: feisteoirí a mhaisiú nanacháithníní RNA (siRNA)-luchtaithe beaga trasnaíochta nó comhchuingeach go díreach le siRNA, ceangailteach le spriocanna dromchla cille agus inmheánú isteach i gcealla ailse, a eascraíonn i tosta géine roghnach. (d) Imdhíonteiripe: spreagann aptamers cealla imdhíonachta i gcoinne cealla ailse (féach an téacs le haghaidh sonraí). Cruthaithe le BioRender. com (ar rochtain an 2 Márta 2023).

De réir mar a tharlaíonn sé d’antasubstaint, braitheann gníomh an aptamer mar theiripeach ailse ar a chumas ceangal a dhéanamh le sprioc próitéine a bhaineann le hailse agus cur isteach ar a fheidhmiú ceart, rud a chuireann bac ar fhorbairt agus dul chun cinn siadaí ar deireadh [27,32]. De rogha air sin, cosúil le mAbs atá nasctha le hualaí pála in ADC [33], is féidir aptamers i gcoinne bithmharcóirí ailse uathúla a chur i bhfeidhm mar uirlisí frith-ailse trí iad a shaothrú mar ghníomhairí spriocdhírithe chun móilíní teiripeacha a iompar go sonrach chuig láithreáin siadaí [28,34]. I dtaca leis seo, tá cumas fo-thacar de aptamers spriocdhírithe ar chill inmheánú go gníomhach i spriocchealla trí endocytosis receptor-mediated nó micripinicíotóis [35,36] tar éis réimse dian-taighde a spreagadh atá dírithe ar mhódúlachtaí cliste bunaithe ar atamer a fhorbairt do TNBC spriocdhírithe. cóireáil ag aptamers comhchuingeacha le ceimiteiripe [37], RNAs teiripeacha [38], coscairí beaga [39] nó nanachóras luchtaithe le drugaí [40,41], ar gá dóibh dul isteach sa chill chun a bhfeidhm frith-ailse a fheidhmiú.

Ina theannta sin, tá cur chuige le déanaí ag iarraidh freisin feidhmeanna éifeachtóra, atá tipiciúil don antashubstaint, de ghníomhachtú an chórais comhlántach a thabhairt do na haptamers [42]. Ina theannta sin, is féidir modhanna raidió-lipéadaithe a chuirtear i bhfeidhm ar antasubstaintí a úsáid go héasca chun aptamers a chomhchuingeach le radanúiclídí, agus tá acmhainneacht mhór ag na comhchuingeacha a bhíonn mar thoradh air sin in feidhmeanna nuálacha teiripeacha [43]. Fiú más féidir comparáid a dhéanamh idir aptamers agus antasubstaintí dá modh gníomhaíochta, níl aon amhras ach go bhfuil buntáistí éagsúla acu chun antasubstaintí traidisiúnta a athsholáthar nó a chomhlánú go rathúil chun díriú go gníomhach ar ailse (Tábla 1) [44,45].

Ar an gcéad dul síos, tá méideanna níos lú acu (5-15 kDa) agus struchtúir níos solúbtha i gcomparáid le antasubstaintí clasaiceacha a ligeann dóibh siadaí soladacha a bhriseadh níos éasca agus ceangal a dhéanamh le spriocanna beaga agus folaithe nach bhfuil inrochtana d'antasubstaintí ar shlí eile [46]. Is é an rud atá tábhachtach ná go gceadaíonn táirgeadh feisteas sainaitheanta trí shintéis cheimiceach éagsúlacht baisc-go-bhaisc a sheachaint agus sáraítear na céimeanna costasacha atá dian ar shaothar atá ag teastáil chun antasubstaintí a tháirgeadh.

For more information:1950477648nn@gmail.com