Athraíonn Sliocht Eatánólach de Shíolta Cucurbita Pepo L. Suaitheadh ​​Néar-inchríneacha i bhFrancaigh Ainsealach faoi Bhrú agus Léiriú Adrenal de Mharcóirí Athlasacha Agus HSP70

Teagmháil: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Ríomhphost:audrey.hu@wecistanche.com

Hailah M. Almohaimeed1, Shereen Hamed2, Hanan S. Seleem3,4, Ashwaq H. Batawi 5, Zuhair M. Mohammedsaleh6, Maha Jameal Balgoon7, Soad S. Ali 8,9, Soad Al Jaouni 9,10 agus Nasra Ayuob11*

Cúlra: Pumpkin(Cucurbita pepo L.) go raibhfrithocsaídeach,éifeachtaí frith-athlastacha, frith-tuirse, agus frithdhúlagráin. Is orgán ríthábhachtach a fhreagraíonn do strus í an fhaireog adrenal a chothaíonn homeostasis le linn strus.

Cuspóirí:Bhí sé mar aidhm ag an staidéar seo measúnú a dhéanamh ar éifeachtúlacht riar sliocht Cucurbitapepo L. (CP) maidir le faoiseamh a dhéanamh ar athruithe iompraíochta, bithcheimiceacha agus struchtúracha sa fhaireog adrenal de bharr nochtadh do strus ainsealach éadrom dothuartha (CUMS) agus iniúchadh a dhéanamh ar an meicníocht taobh thiar den tionchar seo.

Abhair agus modhanna:Roinneadh daichead francach albino fireann i 4 ghrúpa (n=10): rialú, CUMS, fluoxetine-treated, agus CP-cóireáilte. Athruithe iompraíochta, leibhéal corticosterone, cítocíní pro-athlastacha TNF- agus IL-6, agus ocsaídeach/frithocsaídeachRinneadh measúnú ar phróifíl sa serum ag deireadh an turgnaimh. Próiseáladh adreanalglands le haghaidh measúnú histeapaiteolaíoch agus imdhíon-histochemical. Rinneadh léiriú géine de caspase-3 agus Ki67 agus próitéin turraing teasa 70 (HSP70) a mheasúnú i faireoga adrenal ag baint úsáide as RT-PCR.

Torthaí:Laghdaigh an sliocht CP go suntasach an leibhéal corticosterone (p < {{0}}.001),="" am="" immobility="" (p="">< 0.001),="" agus="" athruithe="" athlastacha="" agus="" ocsaídeacha="" a="" bhaineann="" le="" dúlagar="" cums-spreagtha="" i="" gcomparáid="" leis="" an="" ngrúpa="" neamhchóireáilte.="" laghdaigh="" an="" sliocht="" cp="" athruithe="" histeapaiteolaíochta="" adrenal="" de="" bharr="" cums="" agus="" laghdaíodh="" go="" suntasach="">apoptóis(p < 0.001) agus uasrialaithe go suntasachfrithocsaídeachleibhéil sa serum.

Conclúid:Chuir Cucurbita pepo L. feabhas éifeachtach ar na hathruithe struchtúracha iompraíochta, bithcheimiceacha agus adrenal a spreagtar le strus ainsealach den chuid is mó trínafrithocsaídeachagus éifeachtaí frith-athlastacha.

Eochairfhocail: pumpkin, strus, dúlagar, caspase-3, ki67, Hsp70,apoptóis

Tá feidhm frithocsaídeach ag Cistanche, luibh Síneach.

RÉAMHRÁ

Tá níos mó ná 264 milliún duine de gach aois ag fulaingt ó dhúlagar ar fud an domhain (WHO, 2020). Is gnách go mbíonn feidhmíocht an duine depressed ar scoil, ag an obair, agus sa teaghlach. D'fhéadfadh féinmharú a bheith mar thoradh ar dúlagar; mar sin, meastar gurb é an dara príomhchúis báis i 15- go dtí 29-bliain d'aois (WHO, 2020). Is féidir le mamaí maireachtáil tar éis teagmhais struis trí fhreagairtí fiseolaíocha cuí ar na teagmhais seo a ghníomhachtú. Tá an fhaireog adrenal mar chuid den ais hypothalamic-pituitary-adrenocortical (HPA) agus ais thesympathy-adrenomedullary a chothaíonn homeostasis le linn strus (Ulrich-Lai et al., 2006). Tuairiscíodh go mbíonn léiriú tapa ar HSP70 sa cortex adrenal mar thoradh ar nochtadh do strus teirmeach (Huang et al., 2001). Roinneann na próitéiní seo gáinneáil incheallach, cur i láthair antaiginí,apoptóis, agus go leor gníomhartha eile (Khar et al., 2001). Tá sé curtha síos go bhféadfadh tionchar buan a bheith ag hormóin eisghineacha nó cur isteach ar hormóin ingineacha, le linn na dtréimhsí ríthábhachtacha forbartha, ar na cosáin fiseolaíocha agus iompraíochta arna rialú ag ciorcaid hypothalamicneuroendocrine (Gore agus Patisaul, 2010). fairsinge iomlán na fiseolaíochta comhtháite a áireamh; mar sin, tá sé níos mó ná suaitheadh ​​​​hormónach (Waye agus Trudeau, 2011).

Meastar go spreagtar athruithe i rialáil neuroendocrine, meitibileacht, agus aiste bia/micreabiota athlasadh agus réamh-mheas i leith dúlagar a fhorbairt (Huang et al., 2019). Dúradh go bhfuil caidreamh dhá threo ag an dúlagar—ceann de na neamhoird néarshíciatracha—agus athlasadh. Cé go gcuireann dúlagar frithghníomhartha athlastacha chun cinn, cuireann an t-athlasadh neamhoird néarshíciatracha chun cinn lena n-áirítear dúlagar (Bauer agus Teixeira, 2019).

Tá Fluoxetine, frithdhúlagrán clasaiceach, i measc na ndrugaí atá ar fáil ar an margadh chun dúlagar a chóireáil. Meastar anois gur réabóir neuroendocrine atá ag teacht chun cinn é. Is fo-iarmhairt é an éifeacht seo de fluoxetine, seachas na príomh-mhamaigh thargaide teiripeacha (León-Olea et al., 2014). Dá bhrí sin, tá gá le frithdhúlagráin níos sábháilte gan aon fo-iarmhairtí ar stádas theneuroendocrine.

Pumpkin(Cucurbita pepo L.) is speicis thábhachtacha eacnamaíocha iad a shaothraítear ar fud an domhain. Tá buntáistí cothaitheacha agus sláinte acu mar go bhfuil siad saibhir i bhfeanólacht, flavonoids, aimínaigéid, carbaihiodráití, agus vitimíní (Wang et al., 2002). Léirigh roinnt staidéar taighde go bhfuil bithghníomhaíochtaí fairsinge ag pumpkins, mar fhrith-diaibéitis, frith-ailse,frithocsaídeach, éifeachtaí frith-athlastacha, frith-tuirse, agus frithdhúlagráin (Wang et al., 2012; Zhanget al., 2012; Nawirska-Olszańska et al., 2013; Kim Nr et al., 2016). Leigheas traidisiúnta den chuid is mó Ayurvedic bhain córais agus Chinesemedicine úsáid as codanna éagsúla den phumpkin, lena n-áirítear feoil na dtorthaí agus na síolta (Perez Gutierrez, 2016). Éifeachtúlacht frithdhúlagráin Sweetme Sweet Pumpkin (SSP) agus Cucurbita moschata Rinneadh tástáil in vivoduch roimhe seo i staidéar in vivo ag baint úsáide as samhail tástála snámha éigeantais (FST) - múnla dúlagar ainmhithe spreagtha agus cuireadh i gcomparáid é le fluoxetine (Kim Nr et al., 2016). I gceann de na hathbhreithnithe a rinneadh le déanaí achoimríodh go ndearnadh cur síos ar bhianna frithdhúlagráin, cosúil le síolta pumpkin, go raibh scór bia frithdhúlagráin de 47 faoin gcéad acu, ag soláthar a éifeacht frithdhúlagráin (Lachance agus Ramsey, 2018). Le déanaí, d’fhormhuinigh Dotto agus Chacha staidéir thaighde bunaithe ar thrialacha níos ainmhithe agus cliniciúla a dhéanamh chun éifeacht leasaithe an dúlagar ar shíolta pumpkin a dhearbhú (Dotto agus Chacha, 2020).

Ba ábhar misnigh na tuarascálacha seo éifeachtúlacht napumpkinschun an tionchar a bhíonn ag strus ainsealach ar na faireoga adrenal a mhaolú. Dá bhrí sin, rinneadh an staidéar seo chun measúnú a dhéanamh ar éifeacht riaradh ó bhéal an tsleachta Cucurbita pepo L. (CP) ar mhaolú ar an strus éadrom ainsealach dothuartha (CUMS) - struchtúr iompraíochta, bithcheimiceach agus adrenal a tharlódh agus chun iniúchadh a dhéanamh ar an meicníocht taobh thiar den tionchar seo.

sliocht cistanche desert: Frith-ocsaídiúcháin

ABHAIR AGUS MODHANNA

Eastóscadh agus Dosage Pumpkin

Ceannaíodh Cucurbita pepo L. (eiseamal dearbhán: AQJ_95) ón margadh áitiúil in Jeddah, an Araib Shádach. Taisceadh eiseamail dearbháin sa luibhiam. D'aithin na húdair CP agus d'fhíoraigh luibheolaí ó Dhámh na hEolaíochta, Ollscoil KingAbdulaziz é.

Baineadh CP amach de réir na staidéar roimhe seo (Wang et al., 2012). Gearradh na torthaí amh leis an gcraiceann ag baint úsáide as aslicer agus triomaíodh iad ag baint úsáide as lyophilizer (FD5508; ilShinBioBase Co., Ltd., An Chóiré) agus ansin brúite trí úsáid a bhaint as meaisín meilt leictreach. Cuireadh an púdar trí 40-criathar mogaill chun púdar mín a fháil agus é a stóráil i gcoimeádán aerdhíonach. Meascaíodh an púdar triomaithe (50 g) le 450 ml d’eatánól 80 faoin gcéad agus fágadh é ar feadh 1 lá ag37 céim i gcrithadóir (JSSI-100T; JS Research Inc., Compact ShakingIncubator., An Chóiré) agus ansin scagadh é le cadás agus scagairepháipéar ar an dara lá. Rinneadh an próiseas eastósctha seo arís agus arís eile ag 37 céim chun sliocht eatánóil a fháil.

Comhábhair CP a shainaithint

Rinneadh anailís ar chomhdhéanamh ceimiceach PE ag baint úsáide as rian-gaschromatagrafaíocht GC-TSQ evo 8000 mais-speictriméadar (ThermoScientific, Austin, TX, Stáit Aontaithe Mheiriceá) le colún díreach ribeach TG–5MS (30 m × Tiús scannáin 0.25 mm × 0.25 µm). Socraíodh teocht an oigheann colúin ar dtús go 50 céim agus ansin méadaíodh í 5 céim / nóim go 250 céim agus coinníodh ar feadh 2 nóiméad é agus ansin méadaíodh go teocht deiridh 300 céim faoi 25 céim / nóim agus coinníodh é ar feadh 2 nóiméad. Coinníodh teocht an líne aistrithe injector agus MS ag 270 agus 260 céim, faoi seach; úsáideadh héiliam mar ghás iompróra ag ráta sreafa tairiseach 1 ml/nóiméad. Ba é an mhoill tuaslagóra ná 4 nóiméad, agus cuireadh samplaí caolaithe de 3 µl instealladh go huathoibríoch ag baint úsáide as Autosampler AS1300 in éineacht le GC sa mhodh scoilte in instealladh PTV. Bailíodh mais-speictrim FÉ ag 70 voltas eVionization thar an raon m/z 50–650 sa mhodh scanta iomlán. Socraíodh teocht an fhoinse ian ag 250 céim. Aithníodh na comhpháirteanna trí chomparáid a dhéanamh idir a mais-speictream agus iad siúd de bhunachar sonraí mais-speictrim WILEY 09 agus NIST 14 a úsáidtear chun comhdhéanamh ceimiceach comhpháirteanna anaithnid in aon sliocht a aithint agus staidéar a dhéanamh air (Wiley, 2006; Mikaia et al., 2014). Rinneadh an anailís de chineál neamhcháilíochtúil ag baint úsáide as bogearraí Thermo Scientific™ Xcalibur™ 2.2, agus tuairiscíodh gach luach i gcéatadán coibhneasta (Abd El-Kareem et al., 2016).

Dearadh Turgnamhach

D'fhaomh an Coiste Eitice um Thaighde Bithleighis ag Dámh an Leighis, Ollscoil an Rí Abdulaziz, Jeddah, KSA (uimhir thagartha {{150}} an staidéar seo. Sa staidéar seo, fuarthas daichead francach albín fireann ar mheá 150–200 g agus 2–3 mhí d’aois ó Ionad Taighde Leighis King Fahd (KFMRC). Sular thosaigh an turgnamh, fágadh na francaigh chun dul i dtaithí ar na coinníollacha saotharlainne ar feadh seachtaine amháin. Sannadh deich bhfrancach mar an grúpa rialaithe a fágadh gan nochtadh do CUMS. Bhí an tríocha francach eile faoi réir an nós imeachta CUMS ar feadh 4 seachtaine lena n-áirítear cineálacha éagsúla struis ag amanna éagsúla i rith an lae chun dul i ngleic le strus a chosc. Rinneadh cur síos iomlán ar nós imeachta CUMS in oibreacha roimhe seo (Ayuob et al., 2016; Ali et al., 2017) agus léiríodh é i dTábla 1. Roinneadh na francaigh a nochtar do CUMS i 3 ghrúpa (n 10). Fuair ​​an grúpa neamhchóireáilte (CUMS) an fheithicil 0.03 faoin gcéad carboxymethyl cellulose (CMC-Na) trí thomhas ar feadh 2 sheachtain. Fuair ​​an grúpa cóireáilte FLU FLU (Dar Al Dawa Pharmaceuticals Co., Ltd., Amman, Jordan), frithdhúlagán a úsáidtear bailíochtú cógaseolaíochta, tuaslagtha i dáileog CMC-Na 0.03 faoin gcéad de 20 mg/kg ag gavage gastric (Li et al. , 2014). Fuair ​​an grúpa cóireáilte CP an sliocht CP tuaslagtha in uisce driogtha ag dáileog de 100 mg/kg trí gavage ar feadh 2 sheachtain de réir Wang et al. (2012).

Measúnú ar Athruithe Iompraíochta

Rinneadh an FST tar éis 4 seachtaine chun éifeacht CUMS ar na francaigh a dhearbhú (Ali et al., 2017). Le linn na tástála seo, cuireadh gach francach i gcoimeádán sorcóireach gloineach (airde 20 cm, trastomhas 14 cm) le 15 cm uisce ag 25 ± 2 céim . Rinneadh an francach a fhístéipeáil ar feadh 6 nóiméad ag baint úsáide as bogearraí iompair (Noldus InformationTechnology, EthoVision XT®), agus rinne teicneoir dall a thomhas ar an am iomlán a chaitear ar soghluaiste le linn na 6 nóim do na grúpaí turgnamhacha. Socraíodh an t-am iomlán, i soicindí, a chaith na francaigh gan gluaiseacht géaga, ach amháin i gcás na mionghluaiseachta a bhí riachtanach chun an luch a choinneáil ar snámh “am immobility” le linn na 6 nóiméad.

Teicnící Bithcheimiceacha

Fiche ceithre huaire an chloig tar éis an tástáil iompraíochta a chríochnú, tógadh samplaí fola ó sinus fithiseach na bhfrancach tar éis iad a bheith anesthetized le 4 faoin gcéad isoflurane (SEDICO PharmaceuticalsCompany, Cairo, Egypt) i 100 faoin gcéad ocsaigine. Tar éis sin, bhí na francaigh euthanized ag dislocation ceirbheacs. Coinníodh samplaí fola ag 3,000 rpm ar feadh 15 nóiméad ag 4 céim chun an serumand a fháil ag −18 céim le haghaidh measúnú bithcheimiceach.

Rinneadh measúnú ar an leibhéal corticosterone (ALPCO Diagnostics, Orangeburg, NY, Stáit Aontaithe Mheiriceá) ag baint úsáide as feisteáin mheasúnachta einsím-nasctha-imdhíon-sorbacha de réir threoracha an mhonaróra. De réir threoracha an déantóra, rinneadh measúnú ar TNF- agus IL-6 (córas Quantakin R&D, USA Kit) trí úsáid a bhaint as measúnacht imdhíonta-nasctha le heinsím. Cinneadh dlús teoiriciúil gach sampla i ndúblach le léitheoir ELISA microplate socraithe go 450 nm.

Baineadh úsáid as an trealamh measúnachta substaintí imoibríocha aigéad thiobarbituric (TBARS) (Bithdhiagnóisic; an Éigipt) chun leibhéal malondialdehyde (MDA) a thomhas go speictrophotometric ag 535 nm (Gamal et al., 2018). Tomhaiseadh an leibhéal superoxide dismutase (SOD) trí úsáid a bhaint as an trealamh measúnaithe SOD (Bithdiagnostic; Egypt)(Packer, 2002). Rinneadh an measúnú ar an leibhéal glutathione peroxidase (GPX) trí úsáid a bhaint as an trealamh GPX (Randox Labs, Cromghlinn, An Ríocht Aontaithe). Chun gníomhaíocht catalase(CAT) a chainníochtú), gineadh cuar calabraithe don mheasúnacht agus do na samplaí uile, ag baint úsáide as trealamh measúnaithe (Bithdhiagnóisic; an Éigipt). Tá cur síos déanta ar an modh roimhe seo (Gamal et al., 2018).

sochair sliocht cistanche desert: frith-athlasadh

PCR Fíor-Ama Cainníochtúil

Baineadh úsáid as an imoibríTriFast™ (PeqLab, an Ghearmáin, Uimhir Chait: 30-2010) as eastóscadh RNA ó na samplaí fíocháin, mar a shonraítear i bprótacal an déantóra. Measadh tiúchan an RNA íonaithe trí úsáid a bhaint as speictreafótaiméadar NanoDrop 2000 (Thermo Scientific, Stáit Aontaithe Mheiriceá). Rinneadh an RNA eastósctha ó gach sampla a thras-scríobh trí úsáid a bhaint as trealamh sintéise cDNA SensiFAST™ do RT-qPCR (Bioline USA Inc., Stáit Aontaithe Mheiriceá, Cat Uimh.: BIO-65053), de réir threoir an déantóra. Stóráladh an sintéisiúcDNA ag -80 céim go dtí gur úsáideadh é le haghaidh qRT-PCR.

Rinneadh na frithghníomhartha qRT-PCR trí úsáid a bhaint as trealamh SensiFAST™ SYBR Lo-ROX (Bioline USA Inc., UnitedStates, Cat No.: BIO-94002) ar na Bithchórais Fheidhmeacha 7500fíor -time córas braite PCR (Teicneolaíocht beatha, Stáit Aontaithe Mheiriceá).Dear bogearraí Primer3 (v.0.4.0) priméirí géine-shonracha do fhrancaigh, a úsáideadh sa staidéar seo, agus rinneadh seiceáil ar a sainiúlacht ag baint úsáide as clár NCBI/Primer-BLAST. Ansin ceannaíodh na primers ó Willowfort™ (An Ríocht Aontaithe). Ba iad na primers GAPDH (5′-TGCACCACCAACTGCTTAGC-3′, 5′-GGCATGGACTGTGGTCATGAG-3′), caspase-3 (ar aghaidh 5- TGTATGCTTACTTACCCGCACCCG-3, droim ar ais 20}}GCGCAAAGTGACTGGATGAACC-3), HSP70 (5′-ACGAGGGTCTCAAGGGCAAG-3′, 5′-CTCTTTCTCAGCCAGCGTGTTAG-3′).

Ki67 (ar aghaidh 5-AGAAGAGCCCACAGCACAGAGAA-3, droim ar ais 5-AGAAGAGCCCACAGCACAGAGAA 3). Ullmhaíodh an PCRmixture mar seo a leanas: 10 µl meascán SensiFASTTM SYBRLo-ROX, 0.8 µl primer tosaigh, 0.8 µl primer droim ar ais, 2 µltemplate cDNA, agus 6.4 µl uisce saor ó núicléas. Aistríodh an meascán imoibrithe go timthriallach teirmeach a cláraíodh roimhe seo le coinneáil ag 95 céim ar feadh 2 nóiméad, agus ina dhiaidh sin 40 timthriall de 95 céim ar feadh 15 s, agus ansin 60 céim ar feadh 30 s. Reáchtáladh imoibriú rialaithe diúltach nach raibh teimpléad ar bith ann i ngach turgnamh.

Rinneadh anailís cuar leá chun sainiúlacht táirgí PCR a chruthú, agus fuarthas an luach Ct do gach imoibriú ó cheapacha aimpliúcháin. Ríomhadh an cainníochtú coibhneasta do gach géinléiriú sna samplaí fíocháin ag baint úsáide as an modh tairseach comparáideach (ΔΔCt) le GAPDH mar ghéine rialaithe inmheánaigh. Maidir leis an athrú iomlán fillte, rinneadh é a ríomh agus a líneáil leis an bhfoirmle uimhríochta 2−ΔΔCt.

Teicnící Histeolaíochta

Ag deireadh an turgnaimh agus tar éis do na francaigh ainéistéisiú a dhéanamh, osclaíodh an bolg agus díroinneadh an fhaireog dheis-adrenal. Chun bloic pairifín a fháil, rinneadh an fhaireog adrenal a shocrú i bhfoirm fhoirmiúil maolánach neodrach 10 faoin gcéad agus rinneadh próisis bhreise. Ullmhaíodh na codanna paraifín de4-μm ar thiús agus dathaíodh iad le hematocsailín agus eoisin (S&E). Ina theannta sin, rinneadh ranna pairifín eile a dhaite go himdhíon-cheimiceach ag baint úsáide as teicníc thestreptavidin-biotin-peroxidase. Goradh sleamhnáin thar oíche ag 4 céim , agus ansin goraíodh iad le frith-Ki67 monachlónacha (Dako Cytomation,Stáit Aontaithe Mheiriceá, ag caolú 1:1,000) ​​chun iomadú cealla a léiriú. Ina theannta sin, baineadh úsáid as antasubstaint fhrith-chaiseas polachlónúil (Biteicneolaíocht Santa Cruz, Stáit Aontaithe Mheiriceá, ag caolú 1:1,000) chun a bhrathapoptóis. Baineadh úsáid freisin as polachlonalantubstaint i gcoinne próitéin turraingthe teasa-70 (HSP70) (Dako, Carpinteria, CA, Stáit Aontaithe Mheiriceá, ag caolú 1:1,000). Baineadh úsáid as antasubstaintí tánaisteach comhchuingeach biotinylated ó chóras staining Dako. Níor úsáideadh na sleamhnáin a dhaite leis an antashubstaint thánaisteach ach mar rialuithe diúltacha.

Bhí na núicléis frithdhaite le hematocsailín. Measadh gur imoibriú dearfach é staining browncytoplasmic. Scrúdaíodh na hailt dhaite agus tógadh grianghraif díobh trí úsáid a bhaint as an Olympus Mhicreascóip BX{{{{0}} (Olympus) atá nasctha le ceamara digiteach agus ríomhaire. Rinne bogearraí anailíse íomhá Pro Plus anailís leathchainníochtúil ar imdhíonghníomhaíocht antashubstainte. Rinneadh measúnú ar limistéar céatadánach an imoibrithe imdhíon-dhearfach i 30 réimse ag formhéadú ×400. Rinneadh na cealla dearfacha a chomhaireamh in aghaidh 1.0 mm2 d'achar, mar a thuairiscigh Zhou et al. (2016). Scrúdaíodh ar a laghad cúig réimse ó gach sleamhnán, agus ríomhadh an meán do gach ainmhí.

Le haghaidh anailíse moirfiméadrach, scrúdaíodh ceithre chuid i ngach ainmhí (méadú ×100). Tomhaiseadh tiús chriosanna difriúla na faireoga adrenal i micriméadair. Fuarthas tiús cortex na n-adrenal tríd an achar idir an medulla agus an capsúl adrenal a thomhas i líne dhíreach, déantar tomhas amháin i ngach ceathrú den cortex adrenal.

Anailís staitistiúil

Rinneadh anailís ar na sonraí iompraíochta, bithcheimiceacha agus imdhíon-histochemical ag an bPacáiste Staidrimh do na hEolaíochtaí Sóisialta (SPSS) leagan 16. Bhí tionchar ag fachtóirí dhá neamhspleácha ar athróga an staidéir: nochtadh agus cóireáil struis. Mar sin, rinneadh anailís ag baint úsáide as ANOVA déthreo samhail measctha bunaithe ar Bonferroni post hoc. Breathnaíodh ar thábhacht staidrimh ag p <>

sochair cistanche fásaigh: frith-aosú

TORTHAÍ

Torthaí Iompraíochta

Bhí an t-am doghluaisteachta le linn FST i bhfad níos airde (p=0.03) sa ghrúpa CUMS ná an rialú, ach bhí sé i bhfad níos ísle (p=0.01, p=0.001) i ngrúpaí atá cóireáilte le FLU agus CP ná sa ghrúpa CUMS (Fíor 1A).

Torthaí Anailís Sliocht CP Ag baint úsáide asGC-MS

I measc na bpríomh-chomhdhúile a bhraitear i CP tá aigéad oiléach (thart ar 56 faoin gcéad), aigéad pailmít (thart ar 8.9 faoin gcéad), aigéad linóleic 3.5 faoin gcéad, aigéad andlinoleic 2.8 faoin gcéad sa bhreis ar go leor comhdhúile eile (Tábla 2; Fíor 2). I measc na gcomhdhúile CP ar tuairiscíodh go bhfuil éifeacht frith-athlastach acu, tá aigéad oiléach, aigéad palmitic, aigéad linolenic, betulin, agus aigéad linóleic, agus iad siúd a bhfuil aigéad linoleic acu.frithocsaídeachIs iad na héifeachtaí aigéad pailmít, 10-aigéad octadecenoic, agus eistear meitile.

Measúnú Bithcheimiceach

Leibhéal Corticosterone sa Séiream

Mhéadaigh an leibhéal corticosterone go suntasach (p < {{{{}}}}.001) francaigh neamhchóireáilte a nochtar do CUMS i gcomparáid leis sin i bhfrancaigh rialaithe, agus léirigh na cinn ar cuireadh cóireáil orthu le FLU agus CP laghdú suntasach (p < 0.001) i serum corticosterone leibhéal i gcomparáid leis sin i bhfrancaigh neamhchóireáilte a nochtar do CUMS (Fíor 1B).

Leibhéil TNF- agus IL-6 sa Séiream

Ag deireadh an turgnaimh, léirigh measúnú ar serum TNF- agus IL-6 go raibh siad ardaithe go suntasach (p < 0.001) sa ghrúpa CUMS, ach léirigh siad laghdú suntasach (p< 0.001)="" in="" flu-="" and="" cp-treated="" groups="" compared="" with="" those="" in="" the="" untreated="" rats="" exposed="" to="" cums="" (figures="" 1c,="">

Leibhéil MDA, SOD, GPX, agus CAT sa Serum

Tugadh faoi deara go raibh an leibhéal serum MDA i bhfad níos airde (p < {{0}}.001)="" sa="" ghrúpa="" cums="" ná="" sna="" francaigh="" rialaithe,="" cé="" go="" raibh="" sé="" i="" bhfad="" níos="" ísle="" i="" ngrúpaí="" cóireáilte="" cp="" (p="" 0.003)="" ná="" sin="" i="" bhfrancaigh="" neamhchóireáilte="" a="" nochtar="" do="" cums.="" níorbh="" fhéidir="" le="" riarachán="" flu="" laghdú="" suntasach="" a="" dhéanamh="" ar="" an="" leibhéal="" mda="" ionraoin="" a="" nochtar="" do="" cums="" (fíor="">

I gcodarsnacht leis sin, bhí leibhéil SOD, GPX, agus CAT i séiream an ghrúpa CUMS i bhfad níos ísle (p < {{0}}.001,="" p="">< 0.001,="" p="0" .002)="" ná="" iad="" siúd="" i="" serum="" an="" ghrúpa="" rialaithe,="" agus="" léirigh="" a="" leibhéil="" méadú="" suntasach="" (p="0.01," p="0.003," p="" 0.03)sa="" ghrúpa="" cóireáilte="" cp="" i="" gcomparáid="" leo="" siúd="" sa="" ghrúpa="" cums-nochta.="" níorbh="" fhéidir="" méadú="" suntasach="" a="" dhéanamh="" ar="" riarachán="" fliú="" sod,="" gpx,="" agus="" cat="" i="" bhfrancaigh="" a="" nochtar="" do="" cums="" (fíoracha="">

Léiriú Géine Ki67, Caspase-3, agusHSP70

Nocht RT-PCR slonn géine Ki67 neamhshuntasach ard (p=0.14) i bhfaireoga adrenal an ghrúpa CUMS i gcomparáid leis an ngrúpa rialaithe, agus léirigh faireoga adrenal an ghrúpa CUMS i gcomparáid leis an ngrúpa rialaithe, agus léirigh faireoga adrenal grúpaí cóireáilte le FLU agus CP ardléiriú suntasach (p {{6 }}.02, p 0.01) i gcomparáid leis an ngrúpa CUMS-nochta (Fíor 3E). Maidir le caspase-3, méadaíodh go suntasach a slonn géine (p < 0.001) i faireoga adrenal an Ghrúpa CUMS i gcomparáid leis an ngrúpa rialaithe, agus léirigh laghdú suntasach ar líon na ngrúpaí a ndearnadh cóireáil orthu le FLU- andCP (p=0.03, p=0.04) i gcomparáid leis an ngrúpa CUMS-nochta (Fíor 3F). Nuair a tháinig sé go dtí léiriú géine HSP70, thaifead sé leibhéil i bhfad níos airde (p < 0.001) i faireoga adrenal an ghrúpa CUMS ná sa ghrúpa rialaithe, agus an FLU agus Léirigh grúpaí cóireáilte CP laghdú neamhshuntasach (p=0.07,p=0.08) i gcomparáid leis an ngrúpa a bhí faoi lé CUMS (Fíor 3G).

Measúnú Histeapaiteolaíochta

Tá struchtúr slán ag faireoga adrenal na bhfrancach rialaithe le hailtireacht chaomhnaithe an cortex lena n-áirítear zona glomerulosa, zona fasciculata, agus zona reticularis chomh maith leis an medulla (Fíor 4). Léirigh faireoga adrenal na bhfrancaigh CUMS-nochta go leor cealla sa ZG, ZF, agus ZR le folúis soiléir agus núicléis meathlaithe agus uaireanta núicléis dhaite go domhain le ramhrú measartha sa capsule agus fíocháin nascachtrabeculae. Bhí cuma dorcha ar go leor cealla den ZR le líocha brownlipofuscin. Ar an láimh eile, léirigh faireoga adrenal na bhfrancach cóireáilte le CP níos lú cealla folúntas soiléir agus núicléis dhomhainstainithe sa ZG, agus níor léirigh ZF agus ZR mórán cealla dorcha.

Léirigh tomhais moirfiméadracha gur léirigh tiús theZG agus ZR méadú neamhshuntasach tar éis nochtadh do CUMS, agus gur tháinig méadú suntasach orthu san FLU- (p 0.01,p 0.02) agus grúpaí cóireáilte CP (p=0.02, p=0.001), faoi seach. Maidir le tiús an ZF, méadaíodh go suntasach é (p 0.02) sa ghrúpa CUMS-nochta, agus méadaíodh é a thuilleadh, ach go neamhshuntasach, i ngrúpaí cóireáilte FLU- agus CP i gcomparáid leis sin sa ghrúpa CUMS neamhchóireáilte.

D'fhonn a chinneadh an raibh hipearpláis cheallacha srianta do fho-réigiún sonrach den fhaireog adrenal, baineadh úsáid as lipéadú imdhíon-aisticeimiceach do Ki67 (marcóir na cille roinnte). Méadaíodh líon na gceall iomadaithe dearfach Ki67-(p < 0.001)="" sazf="" tar="" éis="" nochtadh="" do="" cums,="" agus="" tháinig="" méadú="" suntasach="" ar="" chóireáil="" le="" flu="" agus="" cp="" i="" gcomparáid="" leis="" an="" ngrúpa="" cums="" nár="" chóireáilíodh.="" cé="" gur="" tháinig="" méadú="" suntasach="" ar="" líon="" na="" gceall="" iomadaithe="" sa="" zg="" agus="" zr="" agus="" gur="" tháinig="" laghdú="" beag="" ar="" líon="" na="" gceall="" iomadú="" sa="" ghrúpa="" cums="" i="" gcomparáid="" leis="" an="" ngrúpa="" rialaithe,="" mhéadaigh="" cóireáil="" le="" flu="" agus="" cp="" go="" suntasach="" líon="" na="" gceall="" iomadaithe="" sa="" zg="" (p="0.001" ,="" p="0.003),ZR" (p="">< 0.001)="" agus="" medulla="" (p="0.004," p="0.003)" i="" gcomparáid="" leis="" an="" ngrúpa="" cums="" gan="" chóireáil="" (figiúirí="" 4,="">

Rinneadh smálú imdhíon-hiostacheimiceach ag baint úsáide as caspase-3 chun measúnú a dhéanamhapoptóis(Fíor 6). Tugadh faoi deara gur tháinig méadú suntasach ar achar faoin gcéad den slonn caspase-3(p < 0.001)="" i="" ngach="" crios="" den="" fhaireog="" tar="" éis="" nochtadh="" do="" cums="" ar="" feadh="" 4="" seachtaine="" i="" comparáid="" le="" ceann="" an="" ghrúpa="" rialaithe.="" léirigh="" an="" grúpa="" cóireáilte="" cp="" laghdú="" suntasach="" ar="" léiriú="" caspase="" sa="" zg="" (p="">< 0.001),="" zf="" (p="">< 0.001),="" zr="">< 0.001,="" p=""
="" 0.005),="" and="" medulla="" (p="0.004," p="0.001)," in="" comparison="" to="" that="" of="" the="" cums="" group="" (figures="">

Tháinig méadú suntasach ar an gcéatadán achair den slonn HSP70 (p < 0.001) i ngach crios den cortex agus i medulla faireog adrenal an ghrúpa CUMS i gcomparáid leis an ngrúpa rialaithe, ach níor laghdaíodh go suntasach é i gach crios gainimh agus medulla de ghrúpaí FLU agus CP-chóireáilte i gcomparáid leis an ngrúpa CUMS (Figiúirí 5).

Slisní triomaithe Cistanche tubulosa

PLÉ

Is léir go bhfuil an tsochaí nua-aimseartha lán de strus a d’fhéadfadh teacht chun cinn as fadhbanna laethúla, cúram sláinte, agus saincheisteanna a bhaineann le poist. D’fhéadfadh neamhoird a bhaineann le strus mar a thugtar orthu a bheith mar chúis leis na strusóirí seo (Clayton andMccance, 2014). Sa staidéar seo, baineadh úsáid as an sliocht eatánólach den fheoil agus den chraiceann de Cucurbita pepo L. chun imscrúdú a dhéanamh ar a acmhainneacht chun iompar dúlagair CUMS-spreagtha a mhaolú agus a thionchar ar an bhfaireog adrenal. Cruthaíodh é seo le méadú suntasach ar an leibhéal serum corticosterone agus fíoraithe ag am immobility fada le linn an FST. Bhí na torthaí seo comhsheasmhach leo siúd a tuairiscíodh roimhe seo (Tang et al., 2015).

Tuairiscíodh go raibh baint ag TNF- agus IL-6 le pataigineas an dúlagar (Taraz et al., 2015; Pedraz-Petrozziet al., 2020). Tuairiscíodh go bhfuil lucha atá easnamhach i ngabhdóirí IL-6 nó TNF- frithsheasmhach in aghaidh iompar dúlagair (Viana et al., 2010). Dá bhrí sin, rinneadh measúnú orthu sa staidéar seo, agus tugadh faoi deara go raibh TNF- agus IL{ araon. Méadaíodh {9}} go suntasach sna rumanna seo de francaigh a bhí faoi lé CUMS ar feadh 4 seachtaine, rud a thugann le fios go raibh dúlagar orthu. Thacaigh Numakawa et al.(2014) leis an gcinneadh seo i lucha le héadóchas iompraíochta agus le Taraz et al. (2015) in othair a bhfuil dúlagar orthu.

Sa staidéar seo, bhí baint ag riaradh sliocht pumpkin le feabhas a chur ar an iompar dúlagair, rud is léir ón laghdú suntasach ar am immobility an FST agus deimhnithe ag an laghdú suntasach incorticosterone agus cítocíní athlastacha TNF- agus IL-6 sa serum. Thacaigh Kim Nr et al leis na torthaí seo. (2016) a thuairiscigh gur laghdaigh SSP ar feadh 28 lá an leibhéal cítocíní athlastacha sna francaigh dúlagar. An ghníomhaíocht frith-athlastach depumpkinD'fhéadfaí é a chur i leith comhdhúile gníomhacha an phumpkin mar oiléic agus pailmítice agus estradiol.

Rinneadh cur síos ar íosrialáil aigéad oiléach, aigéad pailmít, agus aigéad linóleic sa dúlagar (Conklin et al., 2010; Martín et al., 2010). Tuairiscíodh go raibh baint ag neuroprotectionis aigéad oleic lena éifeacht frith-athlastach arna idirghabháil trí ghníomhú gáma receptor peroxisomeproliferator-activated (PPAR- ) (Song et al., 2019). Ina theannta sin, tuairiscíodh go gcuireann aigéad pailmeit bac ar fosfailipáis A(2) agus dá bhrí sin. mheas mar chomhdhúil ananti-athlastach (Aparna et al., 2012). Bhí Estradiol ar cheann de chomhdhúile an phumpkin a braitheadh ​​sa staidéar seo. Tuairiscíodh go spreagfadh Estradiol éifeacht frith-athlastach agus go laghdódh sé iompar dúlagair ina dhiaidh sin (Xu et al., 2015). léiriú fachtóir neurotrófaigh inchinn-díorthaithe (BDNF) agus fosfarylation ERK trí ghníomhachtú ER- san inchinn (Yang et al., 2010).

Sa staidéar seo, méadaíodh an leibhéal serum MDA, agus laghdaíodh leibhéil SOD, GPX, agus CAT sna CUMS-nochtaithe. Rinneadh athruithe cosúla a dhoiciméadú tar éis nochtadh do CUMS i staidéir roimhe seo, agus dúirt siad go raibh strus ocsaídiúcháin agus lagú HPA mar thoradh ar na hathruithe bithcheimiceacha seo (Nabavi et al., 2015). Dúirt Liu T. et al. (2015) freisin go bhféadfaí forbairt an dúlagar a chur i leith ábhar íseal frithocsaídeoirí sa chorp. Tá airíonna frithocsaídeacha anpumpkinTuairiscíodh sliocht torthaí go minic (Bahramsoltani et al., 2017). Ina theannta sin, tuairiscíodh go raibh feoil agus craiceann an Cucurbita pepo L. gníomhaíocht frithocsaídeach níos airde ná na codanna eile, mar shampla, síolta (Oyeleke et al., 2019). Mhéadaigh riarachán sliocht pumpkin, go leor staidéir roimhe seo, leibhéil SODand GPX go suntasach agus laghdaigh MDA sa serum lucha (Guo-Huaet al., 2000; Dang, 2004), agus doiciméadaíodh an éifeacht seo sa staidéar seo freisin. Dá bhrí sin, tá anfrithocsaídeachd'fhéadfadh gníomhaíocht pumpkins a bheith taobh thiar dá éifeacht frithdhúlagráin atá le feiceáil sa staidéar seo. Tá sé seo ag teacht le tuairimí Kim Nr et al. (2016). Tuairiscíodh go bhfuil táirgí nádúrtha le frith-athlastach,frithocsaídeach, agus tá éifeacht cosúil le frithdhúlagráin ag éifeachtaí frith-tuirse freisin (Jeong et al., 2015). Cruthaíodh na gníomhaíochtaí roimhe seo go léir ipumpkins.

Tá éifeacht frith-aging ag Cistanche

D’fhéadfaí folmhú cíteaplasma méadaithe de chealla cortical adrenal, a breathnaíodh sa ghrúpa CUMS sa staidéar seo, a chur i leith an éilimh mhéadaithe ar lipidí, atá mar bhunchloch shintéis forcortisol. Cigankova et al. (2005) faoi deara go raibh mar thoradh ar hipirdhinimic turgnamhach fada buan i gcomhtháthú braoiníní lipid cíteaplasmacha iolracha de chealla cortical. Tá colaistéaról sna lipdrópóidí seo, arb é an príomh-réamhtheachtaí i sintéis hormóin steroid. Mar sin féin, thuairiscigh Koldysheva agusLushnikova (2008) gur tháinig laghdú suntasach ar bhraoiníní lipid i gcealla na cortex adrenal, go háirithe ZF (Koldysheva agus Lushnikova, 2008) de bharr strus. Cuireadh síos ar an nochtadh do strus fisiceach, go dtarchuirtear spreagthaí pian chuig an hypothalamus, rud a fhágann go dtarchuirtear secretion CRH isteach sa chóras tairsí hypophyseal, a ardaíonn an secretion ACTH agus a spreagann a chuid gabhdóirí sa ZF agus ZR chun secretion cortisol a mhéadú (Patti et al., 2018). Tuairiscíodh roimhe seo an capsule tiubhaithe adrenal agus na trabeculae a breathnaíodh i bhfrancaigh atá faoi lé CUMS (El-Desouki et al., 2011; Altayeb agus Salem, 2017) mar thoradh ar shintéis mhéadaithe collagen ag fibroblasts ar nochtadh do strus díluailithe.

Léirigh go leor cealla i faireoga adrenal na bhfrancaigh atá faoi lé CUMS núicléis dhaite domhain, rud a thugann le fios go ndeachaigh siad faoi poptosis, rud a deimhníodh le staining imdhíonhistocheimiceach caspase. Thuairiscigh Altayeb agus Salem breathnóireacht den chineál céanna, (2017), agus iad ag déanamh staidéir ar éifeacht an díluailithe ar fhaireoga adrenal na bhfrancach. Dúirt Liu Q. et al. (2015) go ndéanann strus ocsaídiúcháin iomarcach, atá le feiceáil tar éis nochtadh do CUMS sa staidéar seo, na leibhéil slonn a mhodhnú "apoptóis-relatedgenes" agus spreagann sé apoptosis cille agus díghiniúint trí bhealaí comharthaíochta Bcl-2, Bax, agus caspase-3. Deimhníodh an mheicníocht seo sa staidéar seo ag RT-PCR a léirigh uasrialú suntasach ar ghéine caspase-3 Nuair a rinneadh athbhreithniú ar an litríocht, ní raibh aon éifeacht dhíreach ag Cucurbita pepo ar caspase-3-apoptosis idirghabhála i bhfíocháin dhifriúla.Dealraíonn sé gur cuireadh laghdú ar caspase-3-apoptoticcells dearfach a braitheadh ​​sna faireoga adrenal i leith anfrithocsaídeachéifeacht Cucurbita pepo doiciméadaithe sa staidéar seo.Tacaíonn go leor staidéar roimhe seo a rinneadh ar phlandaí agus luibheanna eile a bhfuil gníomhaíochtaí suntasacha frithocsaídeacha acu (Banagozar Mohammadi et al., 2019; Ghazizadeh et al., 2020).

Léirigh an staidéar seo gur mhéadaigh nochtadh do CUMS cealla Ki deimhneacha sa cortex adrenal rud a bhí le feiceáil go suntasach sa ZF, rud a léirigh líon méadaithe cealla iomadaithe, agus mar thoradh air sin, méadaíodh tiús na sraithe seo go suntasach. ar an láimh eile, tháinig laghdú suntasach ar líon na gcealla iomadaithe dearfacha Ki67-sa mhedulla mar fhreagra ar CUMS. 4}}núicléisí cille dearfacha amháin laistigh den ZF seachtrach tar éis nochtadh do strus athraitheach ainsealach, cé gur léirigh themeedulla hipertróf cheallacha agus ní hipearpláis. Thairis sin, thuairiscigh Laborie et al., (2003) méadú ginearálaithe ar fheidhm mheánach tar éis nochtadh do strus ainsealach, ag moladh go d'fhéadfadh strus ainsealach mar thoradh ar hypertrophy medullary.Sa staidéar seo, riarachán anpumpkinsliocht cille méadaithe go suntasach, rud is léir ón upregulation na géineKi67 agus imdhíon-léiriú i mbeagnach gach crios agus themeedulla den fhaireog adrenal i gcomparáid le CUMS. Mhínigh sé seo tiús méadaithe na gcriosanna faireoga a taifeadadh sa staidéar seo. Féadfaidh Ital cúiteamh a dhéanamh freisin as an éifeacht apoptotic a tharlódh de bharr nochtadh do CUMS. Tacaíonn Kim Hy et al. (2016) a thuairiscigh upregulation suntasach ar an abairt mRNA deKi67 agus iomadú splenocytes scoite amach ó spleen ofBALB / c lucha cóireáilte le SSP, sruthaithe, agus Cucurbita moschataDuch agus a phríomh-chomhpháirt, -carotene.

Sa staidéar seo, mhéadaigh nochtadh do CUMS go mór léiriú géine agus imdhíonléiriú HSP70 i ngach crios den fhaireog adrenal. I gcomhréir leis sin, tá Zheng et al. (2008) chomh maith gur mhó an léiriú HSP70 tar éis nochtadh do choinníollacha struis a mhodhnaíonn freagraí athlastacha trí chosc a chur ar ghníomhachtú an fhachtóra trascríobh athlastach, an fachtóir núicléach-kappa B(NF-kappaB). Ina theannta sin, féadfaidh HSP70 cur isteach go díreach ar apoptosis agus neacróis (Yenari et al., 2005). Níos déanaí, Liet al. (2019) thuairiscigh gur tháinig méadú ar léiriú HSP70 i bhfíochán faireog adrenal na muc tar éis nochtadh do strus teasa, a léiríonn ról HSP70 i gortú faireoga adrenal agus a chuireann béim ar a ábharthacht maidir le freagraí athlastacha. Meastar go bhfuil mear-ionduchtúchán HSP70 mar fhreagra ar strus riachtanach don phróiseas cosanta cille.

In ár staidéar, a chóireáil francaigh CUMS-nochta lepumpkinsBhí baint aige le laghdú neamhshuntasach i slonn HSP70 a bhain le apoptosis laghdaithe agus freagraí athlastacha. D’fhéadfadh sé seo léiriú a thabhairt ar an éifeacht thairbheach a bheadh ​​ag leibhéal ard HSP70 de bharr FLU agus CP araon toisc gur laghdaíodh caspase-3–idirghabhálaithe dá bharr.apoptóisandrelease cytokines athlastacha. Cé nach ndearnadh cur síos roimhe seo ar éifeacht pumpkins ar theaghlach próitéin turraing teasa, aigéad oleic, rud a léiríonn príomh-chomhábhairpumpkinsa úsáideadh sa staidéar seo, chun léiriú an HSP60 a íosrialáil sa líne chill-limficíte T daonna (Martins De Lima et al., 2004), a thacaíonn lenár dtorthaí staidéir. Tugtar achoimre i bhFíor 7 ar mheicníocht bheartaithe gníomhaíochta Cucurbita pepo asan mar shubstaint atá cosúil le frithdhúlagráin. I measc theorainneacha an staidéir seo bhí an neamhábaltacht chun imscrúduithe breise a dhéanamh ar mheicníocht dhomhain éifeacht frithdhúlagráin CP, agus dá bhrí sin, moltar staidéar breise chun é sin a dhéanamh. .

Mar fhocal scoir, cuireann an staidéar seo fianaise eolaíocht-bhunaithe ar fáil maidir le héifeachtúlacht sliocht Cucurbita pepo L. chun athruithe iompraíochta agus bithcheimiceacha de bharr CUMS a mhaolú chomh maith le tionchar histeapaiteolaíoch ar na faireoga adrenal. Ba léir na héifeachtaí seo trí íosrialáilapoptóisagusHSP70 léiriú agus an chuma a bheith idirghabhála tríd anfrithocsaídeachagus éifeacht frith-athlastach an Cucurbita pepoL. sliocht. Cé go ndearna an staidéar seo agus roinnt staidéar eile le déanaí doiciméadú ar éifeacht Cucurbita pepo cosúil le frithdhúlagráin agus go ndearna siad iniúchadh ar a mheicníocht, tá gá le staidéir bhreise lena n-áirítear staidéir chliniciúla chun an éifeacht seo ar dhaoine a dhearbhú.

Gráinníní Cistanche