Cosnaíonn Vacsaín Víreas Haolaithe Fliú Défhiúsach Beo in aghaidh Aonrachtaí Cliniciúla H1N2 agus H3N2 Sruthaithe i Muc Cuid 2

2.5. Measúnacht Imdhíon-Iomdhíonach-Cheangailte le heinsím (ELISA)

Chun antaiginí brataithe a dhéanamh, iomadaíodh SD435 agus SD467 i gcealla MDCK agus íonaíodh iad ag baint úsáide as ultracentrifugation grádán siúcrós. Tharla díghníomhú na víris trí 97 faoin gcéad -propiolactone a chur leis an víreas ag tiúchan 1:1000 (v/v) (Thermo Fisher Scientific, AAB2319703). Rocked an meascán seo ag 4 ◦C thar oíche, gortha ag 37 ◦C ar feadh dhá uair an chloig chun hidrealú -propiolactone a éascú, agus é a stóráil ansin ag −80 ◦C go dtí go n-úsáidfear é.

Tá antaiginí agus díolúine doscartha. Tagraíonn antaigin d'aon substaint ar féidir leis an gcóras imdhíonachta a aithint agus a chuireann faoi deara freagairt imdhíonachta, lena n-áirítear baictéir, víris, cealla meall, etc., agus tagraíonn díolúine do chumas an chomhlachta freagairt do na hantaiginí seo.

Is féidir an gaol idir antaiginí agus díolúine a léiriú le meafar simplí: Díreach mar a éilíonn a fheidhmiú tá oiliúint leordhóthanach agus forlíontaí cothaitheacha, braitheann díolúine a fheabhsú freisin ar theagmháil arís agus arís eile le antaiginí agus na cealla imdhíonachta comhfhreagracha agus móilíní imdhíonachta. tháirgeadh. Nuair a bhuaileann an córas imdhíonachta le hantaigin, ionsaíonn sé trí antasubstaintí sonracha, nó cealla imdhíonachta, a tháirgeadh mar aon le cealla cuimhne chun sinn a chosaint ó ath-ionfhabhtú.

Tá sé deimhnithe ag an eolaíocht gur féidir le dea-nósanna maireachtála agus itheacháin cabhrú le díolúine a fheabhsú. Mar shampla, is féidir le hionradh antaiginí mar bhaictéir agus víris a bheith glan, gan tobac a chaitheamh, aclaíocht mheasartha agus nósanna codlata a laghdú. Ag an am céanna, ag ithe roinnt bianna saibhir i frithocsaídeoirí, vitimíní, agus mianraí, mar shampla glasraí agus torthaí, grán iomlán, agus iasc, is féidir cabhrú freisin díolúine a fheabhsú.

I mbeagán focal, tá an gaol idir antigen agus díolúine an-dlúth. Ní féidir díolúine a fheabhsú go leanúnach ach amháin trí theagmháil arís agus arís eile le antaiginí agus nósanna maireachtála cuí, agus is féidir galair éagsúla a chosc agus a chóireáil. Mar sin, ba cheart dúinn dearcadh dearfach a choinneáil agus nósanna maireachtála maithe a fhorbairt chun sinn féin a chosaint ó ghalair. Is féidir a fheiceáil go gcaithfimid ár n-imdhíonacht a fheabhsú. Is féidir le Cistanche cabhrú linn ár n-díolúine a fheabhsú, toisc go bhfuil Cistanche saibhir i substaintí frithocsaídeacha éagsúla, mar shampla vitimín C, carotenoidí, etc. Is féidir leis na comhábhair seo fréamhacha saor in aisce a scavenge agus strus ocsaídiúcháin a laghdú, friotaíocht an chórais imdhíonachta a fheabhsú.

Cliceáil forlíonadh cistanche deserticola

Chun na leibhéil IgG swIAV-shonracha a tharlódh de bharr vacsaínithe agus dúshlán a thomhas, tógadh serum muc tar éis an chéad vacsaínithe (lá 20) agus an dara (lá 30), agus roimh necropsy (lá 36).

Cuireadh víris íonaithe -propiolactone-inactivated SD435 (1 µg/mL), agus SD467 (2 µg/mL), caolaithe i maolán brataithe carbónáit/décharbónáite, (pH 9.6) i bhfeidhm ar phlátaí toibreacha Immulon-2 96- ag 1{{ 12}}0 µL/well (Thermo Labsystems, Ottawa, ON, Ceanada, 3655) agus gor thar oíche ag 4 ◦C. Tar éis gor thar oíche, nite na plátaí brataithe ceithre huaire le TBST (0.1 M Tris, 0.17 M NaCl, agus 0.05 faoin gcéad Tween 20), lenar cuireadh caoluithe sraitheach ceithre huaire den serum nó BALF leis. an pláta i ndúblach, agus gor dhá uair an chloig ina dhiaidh sin ag teocht an tseomra. Cuireadh serum leis ag caolú tosaigh de 1:10, agus cuireadh BALF gan chaolú. Reáchtáladh samplaí de sera rialaithe dearfach a shainíodh roimhe seo agus na rialuithe diúltacha cuí, serum, agus BALF ó mhuca neamh-vacsaínithe i staidéar roimhe seo ar gach pláta [14].

Nite na plátaí ceithre huaire le TBST, agus ina dhiaidh sin gabhar frith-mhuc IgG (H móide L) antashubstaint íonaithe cleamhnas phosphatase-lipéadaithe (1:5000) (Sigma Aldrich, SAB3700435) nó luch frith-muc IgA (Serotec, MCA658) ( 1:300) caolaithe i TBST agus fágadh é chun gor ag teocht an tseomra ar feadh uair an chloig. Forbraíodh na IgA ELISAs trí antasubstaintí frith-luiche gabhar biotinylated IgG (H móide L) (CALTAG, Burlingame, CA, SAM, M30015) agus tuaslagán alcaileach phosphatase streptavidin (Jackson ImmunoResearch, West Grove, PA) a chur leis ar feadh uair an chloig. ag teocht an tseomra.

Tar éis goir, nite plátaí IgG agus IgA ceithre huaire le TBST, lena mbaineann foshraith fosfáit p-nitrophenyl (PNPP) [10 mg/mL p-nitrophenyl fosfáit di(tris) criostalach salainn (Sigma-Aldrich) , 1 faoin gcéad diethanolamine (Sigma-Aldrich), 0.5 mg / ml MgCl2, agus pH 9.8] (1 mg / mL) agus gor ag teocht an tseomra ar feadh dhá uair an chloig.

Cuireadh stop leis an imoibriú trí 0.3 M aigéad ethylenediaminetetraaicéiteach (EDTA) a chur leis, agus léigh na plátaí i speictreafótaiméadar ag 405 nm le tagairt de 490 nm. Sainmhíníodh titer an tsampla mar an caolú ab airde ag a raibh OD an tsampla sin níos airde ná an scoite sainithe (an meán OD de shampla diúltach aitheanta móide dhá oiread an diall caighdeánach).

2.6. Measúnacht ar Neodrú Víreas (VN).

Plátáladh cealla MDCK (3.5 × 104 ) i 96-phlátaí tobair. Díghníomhaíodh serum agus BALF ag teas ag 56 ◦C ar feadh 30 nóiméad. Cuireadh caoluithe dhá-huaire den serum agus BALF leis an pláta i gceathair dhúbailte, agus goradh 60 µL de shéiream caolaithe nó BALF le toirt comhionann SD435 nó SD456 ina raibh 100 TCID50 ag 37 ◦C ar feadh 1 uair an chloig. Cuireadh 100 µL den mheascán leis na cealla MDCK ansin, agus rinneadh an éifeacht cíteapatóigineach (CPE) a dhoiciméadú ag 48 uair agus 72 uair iar-ionfhabhtaithe (pi). Ba é an titer antasubstainte neodraithe an caolú ab airde de gach sampla serum a chosain na cealla go hiomlán ó CPE i 2 as 4 thobair ar a laghad.

2.7. Cinneadh Víreasach

Nuair a bailíodh iad, cuireadh na samplaí scamhóg ar oighear láithreach agus reoitear iad ag −80 ◦C go dtí go bpróiseáladh iad. Le haghaidh próiseála, rinneadh gach fíochán scamhóg a mheá agus cuireadh tiúchan 10 faoin gcéad (w/v) de MEM arna fhorlíonadh le 1 × antaibheathach-antimycotic (Thermo Fisher Scientific, 15240-062). Rinneadh aonchineálú ar fhíochán scamhóg sa TissueLyser II (Qiagen, Hilden, an Ghearmáin) ag 30 Hz ar feadh 5 nóiméad, agus ina dhiaidh sin lártheifneoiriú ag 5000 × g ar feadh 10 nóiméad ag 4 ◦C. Bailíodh agus stóráladh an forshnáthán aonchineálach ag −80 ◦C go dtí go ndéanfar anailís bhreise. Rinneadh na táithíní sróine a vortexed ar feadh 15 soicind agus a lártheifneoiriú ag 1600 × g ar feadh 25 nóiméad ag 4 ◦C. Bailíodh agus stóráltar na saighnitheoirí ag −80 ◦C go dtí go ndéanfar anailís bhreise orthu. Socraíodh na titers víreasacha le measúnacht TCID50 don scamhóg agus RT-PCR cainníochtúil do na táithíní sróine.

2.8. Eastóscadh RNA agus RT-PCR Cainníochtúil (qRT-PCR)

Chun leibhéil RNA víreasach de SD467 agus SD435 a chinneadh sna swabs nasal iar-dhúshlán, rinneadh qRT-PCR. Rinneadh cuar caighdeánach ag baint úsáide as RNA a bhaintear as SD435 agus SD467 de titer aitheanta. Go hachomair, baineadh úsáid as an RNeasy Plus Mini Kit (Qiagen, Toronto, ON, Ceanada, 74136) chun vRNA a bhaint as 200 µL de nigh sróine. Tiontaíodh RNA go cDNA ag baint úsáide as an primer fliú uilíoch Uni12 agus SuperScript III Transcriptase (Invitrogen, Burlington, ON, Ceanada) [19]. Rinneadh trí chóip de qPCR ar chóras PCR Fíor-Ama StepOnePlusTM (Bithchórais Fheidhmeach, CA, SAM) leis an Power SYBR Green PCR Master Mix (Bithchórais Fheidhmeach), 5 µL cDNA, agus 1 µL de 10µM tosaigh agus droim ar ais. Ritheadh ​​imoibrithe PCR ag teocht anáil 58 ◦C ar feadh 40 timthriall. Tá gach sraith de primers qPCR ar fáil ach iad a iarraidh.

2.9. Anailís staitistiúil

Rinneadh anailís staitistiúil ag baint úsáide as bogearraí GraphPad Prism 8. Baineadh úsáid as na tástálacha neamhpharaiméadracha Mann-Whitney agus Kruskal-Wallis. Cuirtear difríochtaí suntasacha in iúl le * (p < 0.05), ** (p < 0.01), *** (p < 0.001) , nó **** (p < 0.0001). ns=nach bhfuil suntasach.

3. Toradh

3.1. Thug Vacsaíniú leis an Vacsaín Défhiúsach Cosaint ar Aonrachtaí Cliniciúla Nua

Thomhaiseamar an fhreagairt fhisiciúil ar víris dúshlánacha chomh maith le macasamhlú víreasach sa chonair riospráide chun measúnú a dhéanamh ar an gcosaint a sholáthraíonn an vacsaín dhéfhiúsach i gcoinne na n-aonrachtaí cliniciúla nua seo. Taifeadadh an teocht go laethúil ar feadh cúig lá dúshlán iar-víreasach i ngach grúpa. Léirigh muca a ndearnadh vacsaíniú bréige orthu agus a ndearnadh dúshlán orthu le SD435 (H3N2) (MEM/SD435) nó SD467 (H1N2) (MEM/SD467) spíc teochta tipiciúil ar lá 1 dúshlán iar-víreasach, le teochtaí airmheánacha 40.6 ◦C agus 41.1 ◦C agus 41.1 ◦C agus 41.1 ◦C. C, faoi seach. Ní raibh an spíc seo le feiceáil sna grúpaí vacsaínithe ar tugadh dúshlán dóibh SD435 (Défhiúsach/SD435) nó SD467 (Défhiúsach/SD467), a raibh teochtaí airmheánacha 39.4 ◦C agus 39.6 ◦C, faoi seach acu. Ar laethanta 2-5 tar éis an dúshlán, bhí teocht timpeall 39 ◦C (Fíor 2A) ag grúpaí vacsaínithe agus neamhvacsaínithe araon.

Cúig lá tar éis an dúshláin rinneadh na muca go léir a necropsied, agus baineadh na scamhóga isteach agus rinneadh anailís orthu chun méid na loit a bhí i láthair a chainníochtú. Léirigh an grúpa Défhiúsach/SD435 loit íosta nó gan aon loit, le meánlíon de 0.65 faoin gcéad loit iomlána scamhóg. Bhí loit i bhfad níos airde ag an ngrúpa MEM/SD435 ná a chomhghleacaí vacsaínithe, le meánmhéid 5.1 faoin gcéad (p=0.0025) (Fíor 2B). Sa ghrúpa Défhiúsach/SD467, bhí méideanna ísle loit ag cúigear as seacht muc (<2%), one had minor lesions (3.75%), and one outlier had high lesions (31%), with a group median of 1.9%. Compared with the vaccinated group, the MEM/SD467 group had a higher degree of lesions with a median of 4.55% (p = 0.0417) (Figure 1C).

Sna scamhóga, bhí leibhéil ísle den víreas ag na grúpaí Bivalent/SD435 agus Bivalent/SD467 araon, le meán 8.6 PFU/mL/gr agus 3.{5}} PFU/mL/gr, faoi seach. Os a choinne sin, bhí méideanna níos airde víreas ag grúpaí MEM/SD435 agus MEM/SD467, le meán 656.1 agus 9118.2 PFU/mL/gr, faoi seach (p=0.0025 don dá cheann) (Fíor 3A, B). Chonacthas treochtaí cosúla sna táithíní sróine. Sa ghrúpa Bivalent/SD435, bhí na leibhéil sróine íseal ar laethanta 1, 3, agus 5 iar-dhúshlán (dpc), ach sa ghrúpa MEM/SD435 bhí titers beagán ardaithe agus méadaithe de réir mar a chuaigh laethanta ar aghaidh (ns) (Fíor 3C). Sa ghrúpa Défhiúsach/SD467, bhí na leibhéil sróine íseal freisin, le meánú faoi bhun 5 PFU/mL ar laethanta 1 agus 5, agus 10.0 PFU/mL ar lá 3 i ndiaidh an dúshláin. Bhí na teidil níos airde sa ghrúpa MEM/SD467 gach lá, ar an meán 4123.6 PFU/mL/gr ar 1dpc (p=0.0278), 77233.1 PFU/mL/gr (p=0.0009) ar 3dpc, agus 65.2 PFU/mL/gr ar 5dpc (ns) (Fíor 3D).

Tríd is tríd, tugann na torthaí seo le tuiscint gur thug an vacsaín dhéfhiúsach cosaint shuntasach in aghaidh tréithchineálacha dúshlánacha, ag laghdú loit scamhóg agus macasamhlú víreasach a bhaineann le hionfhabhtú leis an dá leithlis swIAV seo sna pasáistí scamhóg agus sróine.

3.2. Spreagann an Vacsaín Dhéfhiúsach Freagraí Imdhíonachta in aghaidh Thraenacha Dúshláin

Thomhaiseamar an fhreagairt antashubstainte sa séiream agus sa scamhóg a bhain go sonrach le tréithchineálacha dúshlánacha tar éis vacsaíniú príomh-treisithe leis an vacsaín dhéfhiúsach. Bailíodh séiream ó mhuca tar éis an chéad vacsaín (lá 2{0) agus tar éis an dara vacsaín (lá 30). Baineadh úsáid as víris dúshláin SD435 (H3N2) agus SD467 (H1N2) mar antaiginí gabhála chun freagairt antasubstainte IgG víreas-shonrach sa serum a thomhas. Le SD435, ní raibh aon difríocht shuntasach idir titers antasubstainte sa MEM agus na grúpaí défhiúsach vacsaínithe tar éis an chéad vacsaínithe (lá 20). Mar sin féin, i gcoinne SD467 titers antashubstaint i bhfad níos airde sa ghrúpa vacsaínithe ar an lá 20 (p=0.0321). Tar éis an dara vacsaín (lá 31), bhí líon na n-antasubstaintí i bhfad níos airde sa ghrúpa vacsaínithe i gcoinne SD435 agus SD467 ná mar a bhí sna grúpaí vacsaínithe bréige MEM (p <0.0001) (Fíor 4A, B). Go sonrach, i gcoinne antaigin ghabhála SD435, b'ionann na leibhéil serum IgG sa ghrúpa vacsaínithe bréige MEM agus 52 ar laethanta 20 agus 30, ach bhí siad 311 (lá 20) agus 4852 (lá 30) sa ghrúpa vacsaínithe défhiúsach (Fíor 3A). I gcoinne SD467, bhí 39 (lá 20) agus 38 (lá 30) sa ghrúpa vacsaínithe Séiream IgG sa ghrúpa MEM bréige, agus sa ghrúpa vacsaínithe défhiúsach, bhí siad 219 (lá 20) agus 3509 (lá 30) (Fíor 3B).

Chonacthas treochtaí comhchosúla nuair a rinneadh neodrú ar na titers antashubstainte a thomhas sa séiream i gcoinne an dá shraith dúshlán. Arís, ní raibh aon difríocht shuntasach idir na titers antasubstainte neodraithe sa MEM agus grúpaí défhiúsacha vacsaínithe i gcoinne SD435 tar éis dáileog amháin den vacsaín (lá 20) ​​(Fíor 5A, B). I gcoinne SD467, bhí leibhéil antashubstainte i bhfad níos airde ar an dara lá, tar éis vacsaíne amháin (p=0.0069). I gcoinne an dá víreas, bhí méadú ar líon na titers antashubstainte sna grúpaí vacsaíní défhiúsach tar éis an dara dáileog lá 30) (p < 0.0001). Tugadh dúshlán na dTitéar sa ghrúpa bréige-vacsaínithe MEM le SD435 ar an meán 1 (lá 20) agus 3 (lá 30), agus bhí meánmhéid 10 (da20) agus 77 (lá 30) (Fíor 5A) sa ghrúpa défhiúsach. Bhí 10 (lá 20) agus 54 (lá 20) agus 54 (lá 30) ar an meán sa ghrúpa vacsaínithe défhiúsach ag 10 (lá 20) agus 54 (lá 30) ar an meán (Fíor 5B) ar an meán de 0 (lá 20) agus 2 (lá 20) agus 2 (lá 30) (Fíor 5B) ar an meán de SD467.

Ar necropsy (lá 36), bailíodh BALF ó gach ceann de na muca ionas go bhféadfaí leibhéil antasubstainte a thomhas sna scamhóga. Baineadh úsáid as víris dúshláin SD435 agus SD467 mar antaiginí gabhála chun freagairt IgA agus IgG a bhaineann go sonrach le víreas a thomhas. I gcoinne SD435, b'ionann meánleibhéil IgA sna grúpaí vacsaínithe bréige MEM agus 17, ach bhí na leibhéil sa ghrúpa vacsaínithe défhiúsach i bhfad níos airde, ag 95 ar an meán (p=0.0014) (Fíor 6A). I gcás SD467, b'ionann leibhéil IgA agus 18 ar an meán sa ghrúpa vacsaíní bréige agus bhí siad i bhfad níos airde ag 158 sa ghrúpa vacsaíní défhiúsach (p=0.0185) (Fíor 6B). I dtéarmaí IgG, b'ionann an meánmhéid titers in aghaidh SD435 sa ghrúpa vacsaínithe bréige MEM ag 3, agus sa ghrúpa défhiúsach, bhí siad i bhfad níos airde ag meán de 138 (p < 0.0001) (Fíor 6C). Bhí meán-antasubstaintí IgG in aghaidh SD467 de 16 sna grúpaí vacsaínithe bréige MEM, ach sa ghrúpa vacsaíní défhiúsach, bhí siad i bhfad níos airde, ag meán de 259 (p < 0.0001) (Fíor 6D).

Maidir le neodrú antasubstaintí sa BALF, bhí na treochtaí cosúil leo siúd a chonacthas sna IgA agus IgG ELISAs. I gcoinne SD435, ní raibh sé inbhraite titers antashubstainte a neodrú sna grúpaí vacsaíní bréige MEM, agus bhí siad i bhfad níos airde ar an meán ag 13.2 sa ghrúpa vacsaíní défhiúsach (p < 0.0001) (Fíor 7A). Ar an gcaoi chéanna, bhí an meánleibhéal antasubstainte a bhaineann go sonrach le SD467 ag 0.7 sna grúpaí vacsaínithe bréige MEM agus bhí siad i bhfad níos airde sa ghrúpa vacsaíní défhiúsach le meán-títer de 10.9 (p=0.0002) (Fíor 7B). San iomlán, léiríonn na sonraí seo go n-eascraíonn dhá dháileog den vacsaín dhéfhiúsach freagairt ghreannmhar chórasach chumhachtach, chomh maith le freagairt imdhíonachta áitiúil sa scamhóg i gcoinne an dá aonróg chliniciúil neamh-homalógach seo.

4. Plé

Léirigh muid roimhe seo go raibh víris a bhí ag brath ar elastase SD191-R342V agus SD69.K345V go hiomlán maolaithe agus neamh-fhíorúil i muca agus gur spreag dhá vacsaíniú leis an LalV défhiúsach seo freagairt imdhíonachta láidir agus gur sholáthair siad cosaint in aghaidh ionfhabhtaithe le SD191 homalógach ( Amhrán H1N2) agus SD69 (H3N2) [14). Sa staidéar reatha seo, bhíomar ag iarraidh a thástáil an gcoinneodh an vacsaín dhéfhiúsach in vivo in aghaidh aonróg chliniciúil níos deireanaí a chuaigh faoi shíoraíocht antaigineach. Tá SD467, cosúil le SD191, ina bhall den ghrúpa antaigineach Ho a tháinig chun cinn i gCeanada, ach tá go leor sócháin faighte aige i bpríomhláithreáin antaigineacha (12,15]. Mar an gcéanna, seasann SD435 don bhraisle H3N2 IV-E). atá i láthair in iarthar Cheanada agus a bhfuil ionadú aimínaigéad iolrach aige i bpríomhláithreáin antaigineacha H3 uathu siúd atá i láthair in SD69 (17].

Laghdaigh an LalV défhiúsach go mór loit i muca vacsaínithe nuair a tugadh agóid ina leith le ceachtar SD435 (H3N2) nó SD467 (H1N2) agus chuir sé cosc ​​​​ar spíc teochta a chonacthas i ngrúpaí vacsaínithe MEM (bréagach) aon lae iar-dhúshlán. Ba é an toradh a bhí air seo freisin ná laghdú ar mhacasamhlú víreasach an dá tréithchineál sa scamhóg agus laghdú SD467 (H1N2) sna táithíní sróine. Is díol spéise é go raibh leibhéil sróine de SD435 (H3N2) íseal i ngrúpaí vacsaínithe agus neamh-vacsaínithe, in ainneoin na modhanna samplála céanna, rud a thugann le tuiscint go mb’fhéidir nach mbeadh an oiread trópaiceach ag an mbrú seo do na pasáistí sróine. Maidir leis an muc asluiteach sa Ghrúpa ag a raibh scór ard loit scamhóg de 31, níor léirigh tomhais teochta aon spíosc ar an dúshlán, agus bhí leibhéil víris sa scamhóg faoi bhun 10 PFU/g/mL. Bhí leibhéil antasubstainte sa séiream agus freagairt áitiúil na scamhóg mar a chéile freisin agus a bhí i ngach muc vacsaínithe eile. Fágann sé seo linn tuairimíocht a dhéanamh nach raibh na loit bainteach leis an bhfliú. Léirigh séirea-anailís go raibh freagairt imdhíonachta láidir i bhfeidhm ar an dá chineál tar éis dhá dháileog den vacsaín agus go raibh an rud céanna fíor maidir le hanailís áitiúil sa scamhóg. Tá gliocóphróitéiní dromchla faoi threoir antasubstaintí ríthábhachtach chun cosaint a dhéanamh i gcoinne ionfhabhtú IAV, agus mar sin tacaíonn an leibhéal ard antasubstaintí neodraithe chomh maith le lgG agus lgA a fhaightear i muca vacsaínithe leis an gcosaint a fheictear in vivo [20].

Is iad na vacsaíní víreas díghníomhaithe iomlána (WIV) na vacsaíní is coitianta atá ar fáil le haghaidh aidiúvach a fhoirmítear go raideolaíoch, meastar gur cur chuige sábháilte iad toisc nach bhfuil aon bhaol ann go ndéanfaí athshórtáil le tréithchineálacha a scaiptear. Mar sin féin, cuireann siad éifeachtúlacht theoranta ar fáil i gcoinne tréithchineálacha mímheaitseála agus léiríodh go n-eascraíonn siad neamhord feabhsaithe riospráide a bhaineann leis an vacsaín (VAERD) nuair a úsáidtear iad i gcoinne cineálacha mímheaitseála. Laghdaíonn a n-éifeachtúlacht freisin i láthair antasubstaintí díorthaithe ó mháthar (MDAanna) [4]. I measc na ndaoine atá ar fáil go tráchtála i Meiriceá Thuaidh tá FluSure XP®, atá ar fáil mar fhoirmiú tetravalent i SAM le braislí H1N1, H1N2, agus H3N2 IV-A agus IV-B [21]. Tá foirmliú níos sine de Flusure XP® ar fáil i gCeanada le dhá shraith de H1N1 agus brú H1N2 amháin, scoite amach idir 2000 agus 2005 [22]. Sa dá thír i Meiriceá Thuaidh, tá FluSure® Paindéimeach ar fáil, vacsaín monovalent comhdhéanta den strain H1N1pdm09, chomh maith le Pneumostar SIV Complete (Elanco, Greensboro, North Carolina, US Inc.), ina bhfuil H1N1, H1N2, agus H3N2, agus Pneumostar SIV, le tréithchineálacha fochineál H1N1 agus H3N2 (GOC, USDA) [23,24]. Is ionann na vacsaíní seo atá ar fáil ar bhonn tráchtála agus thart ar 50 faoin gcéad de vacsaíní fliú na muc i Meiriceá Thuaidh, agus is vacsaíní uathghineacha an 50 faoin gcéad eile de na vacsaíní [4].

Maidir le hardáin vacsaínithe malartacha, ceadaíodh vacsaín athchuingreach macasamhail de cháithníní alfa-víreas-díorthaithe i SAM [4]. Fostaíonn an t-ardán vacsaíne seo alfaivíreas le géanóm athraithe, áit a gcuirtear géine de rogha in ionad géinte struchtúracha víreasacha, rud a fhágann go bhfuil an macasamhlú alfaivíris lochtach. Tá an RNA seo féin-mhacasamhlú, agus mar sin tá an t-ardán vacsaínithe mar thoradh ar léiriú ard ar an géine spéise, agus le haghaidh fliú, rinneadh tástáil ar HA agus nucleoprotein (NP) mar antaiginí [25]. Tá sé léirithe ag staidéir go gcosnaíonn úsáid an ardáin seo i gcoinne dúshláin antaigineacha a mheaitseálann HA agus nach ionann iad, chomh maith le tréithchineálacha NP nach bhfuil comhoiriúnach, cé nach raibh an t-ardán in ann cosaint a dhéanamh i gcoinne láithreacht MDAanna.

D'fhaomh Roinn Talmhaíochta na SA (USDA) an chéad LAIV do fhliú na muc in 2017. Is vacsaín dhéfhiúsach H3N2 agus H1N1 é Ingelvac Provenza™, agus an HA agus NA ó dhá shraith scoite amach i SAM, arna shloinneadh ar chnámh droma TX98, caolaithe trí theascadh na próitéine neamhstruchtúrtha (NS1) [14,26]. Déanann LAIVanna aithris ar ionfhabhtú nádúrtha agus cuireann siad imdhíonacht mhúcóis mhéadaithe sna haerbhealaí uachtaracha nuair a sheachadtar go hinmheánach iad. Sa chás go mbíonn táirgeadh antasubstaintí IgG sistéamach mar thoradh ar vacsaíní díghníomhaithe den chuid is mó, is féidir le vacsaíní beo maolaithe IgA mucosal a spreagadh sa chonair riospráide, chomh maith le freagairt mhéadaithe trí mheán na gceall mar gheall ar nochtadh an chórais imdhíonachta do phróitéiní inmheánacha an fhliú, ina bhfuil níos mó T. epitopes cille [27]. Mar thoradh air seo tá cosaint níos fearr ar tréithchineálacha mímheaitseála.

Tá cosaint pháirteach léirithe acu i láthair MDAanna. Tá antasubstaintí IgG iomlána níos forleithne sa chonair riospráide íochtair, agus is iad antasubstaintí polaiméire IgA is mó i gconair riospráide uachtarach na muc, is minice mar dimers [28]. Déantar na hantasubstaintí seo a tháirgeadh go háitiúil agus iompraítear iad ar fud an chiseal cille epithelial áit a bhfanann siad sa mhúcóis, le cúnamh ó chomhpháirt secretory a chuireann i gcoinne díghrádú proteases [28,29]. Is iad antasubstaintí IgA an chéad líne chosanta den chóras imdhíonachta oiriúnaitheach i gcoinne pataiginí atá ag teacht isteach, ag obair chun gabháil víreasach le gabhdóirí aigéad sialic a bhacadh [30]. Tá antasubstaintí polaiméire IgA níos leithne tras-imoibríoch ná antasubstaintí monaiméireacha IgG, d'fhéadfadh a bheith mar gheall ar cheangal ilfhiúsach [31]. Tá sé léirithe ag staidéir freisin gur féidir leis na antasubstaintí seo cosc ​​​​a chur ar scaoileadh IAV nua-chruthaithe ó chealla ionfhabhtaithe i bhfad níos éifeachtaí ná IgG nó monaiméireach IgA, atá le fáil i serum muc, rud a thugann le tuiscint go bhfuil struchtúr polaiméire IgA buntáisteach chun an sliocht víreasach a thrasnascadh. go HA arna shloinneadh ar an dromchla cille ionfhabhtaithe [31-33]. Dá bhrí sin tá an freagra antashubstaint áitiúil IgA lárnach sa chosaint ar ionfhabhtú le IAV agus moltar é a bheith ina chomhghaolú cosanta i ndaoine [34].

Mar sin féin, is é an riosca a bhaineann le LAIV ná an fhéidearthacht go n-athshonrófar tréithchineálacha a scaiptear. Fuair ​​​​staidéar phylogenetic i SAM tréithchineálacha nua i gcúrsaíocht a d'athsórtáil leis na cineálacha vacsaíne atá san áireamh in Ingelvac Provenza™ [26]. Laghdaíonn an t-ardán LAIV atá ag brath ar elastase an baol seo, toisc go bhfuil an próitéin elastase an-ghann i gconair riospráide an mhuc, agus mar sin tá srian an-mhór ar mhacasamhlú víris vacsaíne, mar atá an fráma ama chun athshórtáil a dhéanamh. Áireofar i staidéir amach anseo meastóireacht ar riosca athshórtála na vacsaíne défhiúsacha seo, chomh maith le conas a sheasann an vacsaín seo i láthair MDAanna. Bheadh ​​​​sé suimiúil freisin freagra cille-idirghabhála na vacsaíne seo a thástáil, toisc go bhfuil sé seo ar cheann de na buntáistí móra a bhaineann le LAIV. Mar fhocal scoir, leathnaigh an LAIV défhiúsach atá ag brath ar elastase cosaint chuig aonróga cliniciúla nua a aimsíodh in iarthar Cheanada, agus líonfadh sé roinnt bearnaí i margadh vacsaíní fliú na muc.

Ranníocaíochtaí Údair:

Coincheapú, YZ; modheolaíocht, YZ, agus LA; anailís fhoirmiúil, LA; imscrúdú, LA agus UB-C.; acmhainní, SD; scríbhneoireacht - dréacht-ullmhú bunaidh, LA; scríbhneoireacht — athbhreithniú agus eagarthóireacht, YZ, UB-C., agus SD; maoirseacht, YZ; éadáil maoinithe, YZ Tá leagan foilsithe na lámhscríbhinne léite agus aontaithe ag na húdair go léir.

Maoiniú:

Maoiníodh an taighde seo ag an gCiste Forbartha Talmhaíochta (ADF), Aireacht Talmhaíochta Saskatchewan. Faigheann LA tacaíocht pháirteach ón Scoláireacht Vacsaínithe agus Imdhíon-teiripe (V&I) ó Scoil na Sláinte Poiblí, Ollscoil Saskatchewan. Faigheann VIDO maoiniú oibriúcháin ó Rialtas Saskatchewan trí Innovation Saskatchewan agus an Aireacht Talmhaíochta agus ó Fhondúireacht Cheanada um Nuálaíocht trí na Mórthionscnaimh Eolaíochta dá shaoráid CL3 (InterVac).

Ráiteas an Bhoird Athbhreithnithe Institiúideach:

Neamhbhainteach.

Ráiteas Infhaighteachta Sonraí:

Tuairiscítear sonraí agus anailísí an staidéir seo go léir san Airteagal seo.

Buíochas:

Ba mhaith linn buíochas a ghabháil le tréidlianna agus le teicneoirí ainmhithe VIDO as gach obair ainmhithe a dhéanamh dár dtrialacha ainmhithe. Foilsítear an saothar seo le cead ó stiúrthóir VIDO mar shraith lámhscríbhinní #1005.

Coinbhleachtaí Leasa:

Ní dhearbhaíonn na húdair aon choinbhleacht leasa.

Tagairtí

Webster, RG Víreas an fhliú: Tarchur idir speicis agus ábharthacht maidir le teacht chun cinn an chéad phaindéim dhaonna eile. Áirse. Víreas. Supl. 1997, 13, 105–113. [PubMed]

2. Li, Y. ; Robertson, I. Eipidéimeolaíocht fhliú na muc. Anim. Dis. 2021, 1, 21. [CrossRef] [PubMed]

3. Donovan, T. Ról an Fhliú ar Fhás Feidhmíochta Muc; Ollscoil Minnesota: Minneapolis, MN, SAM, 2005.

4. Gracia, JCM; Pearce, DS; Masaic, A. ; Balasch, M. Fliú Víreas i Muc: Eipidéimeolaíocht, Dúshláin agus Straitéisí Vacsaínithe. Tosaigh. Vet.-Sci. 2020, 7, 647. [CrossRef] [PubMed]

5. Ma, W. Víreas fliú na muc: Stádas reatha agus dúshlán. Víreas Res. 2020, 288, 198118. [CrossRef]

6. Suzuki, Y.; Ito, T. ; Suzuki, T.; Holland, RE; Seomraí, TM; Cíosó, M. ; Ishida, H. ; Kawaoka, Y. Speicis Aigéad Sialach mar Chinntitheach ar an Réimse Óstach Víreas Fliú A. J. Víreas. 2000, 74, 11825–11831. [CrossRef]

7. Grian, H. ; Xiao, Y.; Liu, J.; Wang, D.; Li, F.; Wang, C. ; Li, C. ; Zhu, J.; Amhrán, J. ; Grian, H. ; et al. Víreas fliú na muc H1N1 na muc Eoráiseach forleithne le géinte víreasacha paindéimeacha 2009 a éascaíonn ionfhabhtú daonna. Proc. Natl. Acad. Sci. Stáit Aontaithe Mheiriceá 2020, 117, 17204–17210. [CrossRef]

8. Henritzi, D.; Peitreach, PP; Lewis, NS; Graaf, A. ; Pessia, A. ; Starick, E. ; Breithaupt, A . ; Strebelow, G. ; Luttermann, C. ; Páircéir, LMK; et al. Aithníonn Faireachas ar Dhaonra Muc Intíre na hEorpa Taiscumar atá ag Teacht Chun Cinn de Víris A Féideartha Zónóiseacha Muc A. Miocrób Óstach Cill 2020, 28, 614–627.e6. [CrossRef]

9. Uinseann, AL; Ma, W.; Lager, KM; Janke, BH; Richt, JA Víris fliú na muc: Peirspictíocht Mheiriceá Thuaidh. Adv. Víreas Res. 2008, 72, 127–154.

10. Rajao, DS; Anderson, TK; Kitikoon, P. ; Stratton, J. ; Lewis, NS; Vincent, AL Éabhlóid antaigineach agus ghéiniteach ar víris fliú H1 na muc comhaimseartha sna Stáit Aontaithe. Víreolaíocht 2018, 518, 45–54. [CrossRef]

11. Mena, I. ; I Nelson, M.; Quezada-Monroy, F.; Dutta, J. ; Cortes-Fernández, R.; Lara-Puente, JH; Castro-Peralta, F.; Cunha, LF; Trovão, NS; Lozano-Dubernard, B.; et al. Bunús na paindéime fliú H1N1 2009 i muc i Meicsiceo. Elife 2016, 5, e16777. [CrossRef]

12. Nelson, MI; Culhane, MR; Trovão, NS; Patnayak, DP; Halpin, RA; Lín, X. ; Shiltí, MH; Das, SR; Detmer, SE Teacht chun cinn agus éabhlóid víreas fliú A (H1 ) i muc i gCeanada agus sna Stáit Aontaithe. J. Gen. Viol. 2017, 98, 2663–2675. [CrossRef] [PubMed]

13. Chauhan, RP; Gordon, ML Athbhreithniú Córasach ag Anailísiú Leitheadúlacht agus Scaipeadh Víreas an Fhliú i nDaonra na Muc ar fud an Domhain. Pataiginí 2020, 9, 355. [CrossRef]

14. Landreth, S.; Detmer, S.; Gerdts, V. ; Zhou, Y. Cosnaíonn vacsaín défhiúsach don víreas fliú mhaolaithe beo ar ionfhabhtú víreasach H1N2 agus H3N2 i muc. Tréidlia. Micribhith. 2020, 253, 108968. [CrossRef] [PubMed]

15. McCormick, K.; Jiang, Z.; Zhu, L.; Lawson, SR; Langenhorst, R.; Ransburgh, R. ; Brunick, C. ; Tracy, MC; Hurtig, Acmhainní Daonna; Mabee, LM; et al. Tógáil agus Imdhíon-ghineacht Meastóireacht ar Víris Athchuingreach Fliú A Ina bhfuil Géinte Chiméireacha Hemagglutinin a Díorthaigh ó Fhliú Éagsúla Géiniteach Víris A H1N1 Fochineál. PLoS ONE 2015, 10, e0127649. [CrossRef] [PubMed]

For more information:1950477648nn@gmail.com