Réamhscrúdú ar Éifeacht agus ar Mheicníocht Chur Chun Cinn Pholaisiúicrídí Ó Cistanche Deserticola Ar Iomadú Lymphocítí

Modhanna

Baineadh úsáid as measúnacht MTT chun iomadú limficítí splenic i lucha a bhrath. Baineadh úsáid as ciclophosphamide (Cy) chun samhlacha ainmhithe d'ainmhithe imdhíonachta a mhacasamhlú, agus tomhaiseadh innéacsanna spleen agus thymus gnáth-ainmhithe agus ainmhithe imdhíonachta. Rinneadh gníomhaíocht interleukin-2 (IL-2) a thomhas leis an measúnacht ar iomadú thymocyte. Torthaí: Chuir polaisiúicríd Cistanche deserticola go mór chun cinn iomadú limficítí gníomhachtaithe mitogen (ConA agus LPS) agus gnáthchealla neamhghníomhaithe, agus chuir sé chun cinn an secretion IL-2 i limficítí. Léirigh riarachán intraperitoneal gur mhéadaigh polaisiúicríd Cistanche deserticola go suntasach an t-innéacs spleen de lucha gnáth agus imdhíon-chomhbhrúite, agus bhí éifeacht fhrithsheasmhach suntasach aige freisin ar laghdú innéacs thymus de bharr Cy. Conclúid: Is féidir le polaisiúicríd Cistanche deserticola iomadú limficítí splenic i lucha a chur chun cinn go suntasach, rud a d'fhéadfadh a bheith bainteach lena chur chun cinn ar IL-2 secretion.

Ciste maireachtála an fhásaigh

[Eochairfhocail]Cistanche deserticola polaisiúicríd; Innéacs spleen; Innéacs thymus; iomadú lymphocyte; Idirleacáin-2

Tá aird fhorleathan tarraingthe ag polaisiúicrídí plandaí mar gheall ar a n-éifeachtaí inmunomodulatory forleathan agus tocsaineacht réasúnta íseal [1]. Is é Cistanche deserticola ma, ar a dtugtar "Desert Ginseng", an gas scagach, tirim, méithe de Cistanche deserticola, planda de chuid an Orobaceae, a bhfuil éifeachtaí cógaseolaíochta fairsinge aige. Is féidir leis an decoction uisce a mhéadú go suntasach an céatadán phagocytic agus innéacs phagocytic de macrophages. Tá sé léirithe ag staidéir bhreise gurb é a bhunús ábhartha ná polaisiúicríd iomlán Cistanche deserticola [3]. Tá Zeng Qunli et al. [4] fuarthas amach go bhfuil éifeacht iomadú suntasach ag comhpháirt amháin de polaisiúicríd Cistanche deserticola ar limficítí thymic luiche in vitro. Breathnaíodh éifeacht polaisiúicríd Cistanche deserticola ar iomadú limficítí in vivo agus in vitro.

Foirmle mhóilíneach Cistanche deserticola

1Ábhar agus Modhanna

1.1 Drugaí agus imoibrithe

Soláthraíonn an Roinn Plandaí agus Ceimiceach den Institiúid Leighis agus Plandála, Coláiste Leighis an polaisiúicríd ó Cistanche deserticola. Déantar é a bhaint as púdar sliocht Cistanche, agus is é 87% an t-ábhar polaisiúicríde.

Púdar sliocht Cistanche

Sula n-úsáidtear turgnaimh in vivo, tuaslagtha agus caolaigh le saline fiseolaíocha go dtí an tiúchan is gá, agus boil le haghaidh steiriliú. Roimh úsáid turgnaimh in vitro, rinneadh an meán cultúir RPMI-1640 a dhíscaoileadh agus a chaolú, agus rinneadh steiriliú ardbhrú. Is táirgí de chuid Sigma Corporation iad Lipopolysaccharide (LPS), concanavalin (ConA), dexamethasone (DEX), agus MTT. Is táirgí Gibco iad Cyclophosphamide, comhfhiontar Sino-Mheiriceánach de Shanxi Taisheng Pharmaceutical Co., Ltd., serum bó féatais, meán cultúir RPMI1640, agus trypsin. Is imoibrithe anailíseacha baile iad imoibrithe eile.

1.2 Ainmhithe

Soláthraítear lucha óga BALB c (leibhéal SPF) ag Viton Lihua Experimental Animal Technology Co., Ltd [SCXK (Beijing) 2002-2003]. Tógtar ainmhithe de ghrád SPF i seomra agus déantar iad a chothú agus a ól go saor.

1.3 Gaireas

Marcóir einsím Multikan Ascent, táirge de chuid Thermo Electron Company, SAM. Leici PHS-3B Méadar pH beachtais, Shanghai Precision Scientific Instrument Co., Ltd., gorlann dé-ocsaíd charbóin NAPCOo 5410, NAPCO, SAM. BCN-1360 Ultra Clean Workbench, Beijing Donglianhar Instrument Manufacturing Co., Ltd XDS-1B Mhicreascóip Inverted, Chongqing Optoelectronic Instrument Co., Ltd.

1.4 Modh

1.4.1 Éifeacht ar iomadú limficítí [5]:

Ullmhúchán gnáthamh limficítí spleen ó lucha BALB/c, ag baint úsáide as RPMI-1640 chun an tiúchan cille a choigeartú go 1 × 107 mL, ionaclaithe ar phláta saothraithe 96-tobar, le 100 ceall-uspions curtha le gach tobar μL-50. Rinneadh é a chomhshaothrú le tiúchain éagsúla de pholaisiúicríd Cistanche deserticola (ba é an tiúchan deiridh de pholaisiúicríd Cistanche deserticola le haghaidh iomadú limficítí neamhghníomhaithe ná 6.25, 12.5, 25, 50, agus 100 mg/L in ord; ba é an tiúchan deiridh de Cistanche deserticola polaisiúicríd de T. 9 3 limficítíde Deserticola polaisiúicríd don iomadú limficítí neamhghníomhaithe 7.8, 15.6, 31.2, agus 62.5 mg/L in ord; agus ba é an tiúchan deiridh de pholaisiúicríd Cistanche deserticola le haghaidh iomadú limficítí B gníomhachtaithe LPS ná 1.56, 3.13, 6.25, 12.5, agus 25 mg/L in ord rialaithe; Is é 200 μL toirt iomlán gach poll. Nuair a chuirtear mitogen ConA agus LPS (is é an rialú RPMI-1640 ina bhfuil tiúchain comhfhreagracha ConA nó LPS), is iad na tiúchain deiridh den dá cheann ná 2.5 mg/L agus 10 mg/L, faoi seach. Rinneadh trí pholl comhthreomhar le haghaidh cóireálacha éagsúla. Cuir an pláta cultúir i gorlann taise sáithithe 37 céim, 5% CO2 ar feadh 68 uair an chloig, cuir MTT leis, agus lean ar aghaidh ag cultúr ar feadh 4 uair an chloig. Déan an luach A540 nm a thomhas le marcóir einsím ag baint úsáide as an modh MTT chun iomadú a bhrath. Nuair a dhéantar comparáid idir gach grúpa, déan an luach A540nm a thiontú ina ráta iomadaithe limficítí de réir na foirmle seo a leanas:ráta iomadú limficítí=Sampla AA A rialtán × 100 %.

Éifeachtaí Cistanche-Feabhas a chur ar dhíolúine

1.4.2 Éifeacht ar mheáchan na n-orgán imdhíonachta i lucha gnáth [6,7]:

Roinneadh lucha óga BALB c (fireann, 4 seachtaine d'aois, le meáchan coirp 10-15 g) go randamach i ngrúpa rialaithe bán (saline) agus grúpaí dáileoga éagsúla (125 mg (kg · bw) agus 250 mg (kg · bw)), le 11 francaigh i ngach grúpa. Riaradh an druga intraperitoneally uair amháin sa lá ar feadh 7 lá as a chéile. Maraíodh na lucha tar éis dislocation ceirbheacs. Tógadh an spleen agus an thymus, baineadh saill agus fíochán fascia, agus triomaíodh an leacht dromchla le páipéar scagaire. Tar éis an mheá, an t-innéacs spleen=100 × Meáchan an spleen (mg) Meáchan coirp (mg); An hthymusindex=100 × Meáchan Thymus (mg) Meáchan Coirp (mg). Ríomh an t-innéacs spleen agus an t-innéacs thymus do gach 100 mg de mheáchan coirp, faoi seach.

1.4.3 Éifeacht ar mheáchan orgán imdhíonachta i lucha imdhíon-chomhbhrú [7,8]:

Roinneadh francaigh óga BALB c (fireann, 6 seachtaine d'aois, meáchan coirp 15-20 g) go randamach i 12 ghrúpa de réir mheáchan coirp. Ach amháin i gcás an ghrúpa rialaithe gnáth (instealladh intraperitoneal de thoirt coibhéiseach de saline fiseolaíocha), cuireadh na grúpaí eile le Cy 50 mg (kg · bw) intraperitoneally laethúil, agus riaradh an réiteach drugaí tástála intraperitoneally [125 agus 250Mg (kg · bw)], an grúpa rialaithe gnáth agus an grúpa múnla tugadh an méid céanna saline lá amháin, sacutive lá amháin sa lá. Breathnaíodh na hathruithe ar mheáchan ainmhí le linn an turgnaimh. 24 uair an chloig tar éis an riartha deiridh, rinneadh na hinnéacsanna spleen agus thymus a thomhas agus a ríomh ag baint úsáide as an modh céanna atá in 1.4.2.

1.4.4 Tionchar ar ghníomhaíocht IL-2:

① Ionduchtú IL-2 [9]: Cuir 50 le gach tobar i bpláta cille 96-tobar μ L Tiúchan éagsúla de pholaisiúicríd Cistanche deserticola (tiúchan deiridh in ord: 3.91, 7.82, 15.63, 31.25, 62.5, 125 mg /L a rialú go maith) cuir isteach sa chultúr meánach agus μL go maith. 50 μ L ConA (tiúchan deiridh 5 mg/L), cuir 1 eile in aghaidh an tobair × 106 cealla spleen. Gor i gorlann taise sháithithe 37 céim, 5% CO2 ar feadh 24 uair, lártheifneoir ar feadh 20 nóiméad ag 2500 r nóim, agus tóg an forshnáthán cille agus stóráil ag - 20 céim le haghaidh fuireachais. ② IL-2 braite gníomhaíochta [9,10]: Tá an modh bunúsach bunaithe ar an litríocht [9], agus déantar coigeartuithe cuí de réir na litríochta [10]. Ullmhúchán traidisiúnta ar fhionraí thymocytes luiche BALB c, 96 pláta saothraithe cille tobair, 1 ionaclú in aghaidh an tobair × 106 thymocytes, agus 50 cill in aghaidh an tobair μ L ConA (tiúchan deiridh 2.5 mg/L) á gcur leis, agus ansin cuir an sásán ullmhaithe IL-2 50 μ L (cuir 50 uair an chloig le chéile leis an gcultúr L bán, cuir 50 uair an chloig leis an gcultúr bán rialaithe, 50 μ). MTT, leanúint ar aghaidh ag gor ar feadh 4 uair an chloig, lártheifneoir ar feadh 10 go 15 nóiméad ag 1000 r min, caith amach an sásán, agus cuir DMSO 100 in aghaidh an tobair μ L, croith le micrea-oscillator ar feadh 8 nóiméad, agus tomhas an luach A540 nm le marcóir einsím.

1.5 Anailís Staitistiúil

Cuireadh na sonraí in iúl mar mheán agus diall caighdeánach (x ± s). Baineadh úsáid as bogearraí Microsoft Excel chun na sonraí a chomhordú, agus rinneadh tástáil t. p<0.05 and P<0.01 were significant differences, both of which were statistically significant.

2. Torthaí

2.1 Éifeacht ar iomadú limficítí

Mar atá le feiceáil i dTábla 1, má chuirtear polaisiúicríd Cistanche deserticola le meán cultúir na limficítí spleen luiche saothraithe in vitro ag tiúchan os cionn 25 mg/L is féidir iomadú limficítí a spreagadh go suntasach, rud a léiríonn go bhfuil éifeacht miotóiseach ag polaisiúicríd Cistanche deserticola féin. Ag an am céanna,is féidir a fheiceáil ó Thábla 2 agus Tábla 3 go bhfuil éifeacht chothaithe shuntasach ag CDPS ar iomadú limficítí T de bharr ConA nó limficítí B de bharr LPS.

Táb.1 Tionchar polaisiúicríd Cistanche deserticola ar iomadú limficítí neamhghníomhaithe (x ±s, n =3)

Níl: i gcomparáid leis an ngrúpa rialaithe, ＊P<0.05.

Táb.2 Tionchar polaisiúicríd Cistanche deserticola ar iomadú limficítí T a tharlódh de bharr ConA (x ±s, n =3)

 

Nóta: i gcomparáid leis an ngrúpa ConA, ＊P<0.05, ＊＊P <0.01.

Táb.3 Tionchar polaisiúicríd Cistanche deserticola ar iomadú limficítí B a tharlódh ó LPS (x ±s, n =3)

Nóta: i gcomparáid leis an ngrúpa LPS, ＊P<0.05, ＊＊P <0.01.

2.2 Éifeacht ar mheáchan na n-orgán imdhíonachta i lucha gnáth

Mar is léir ó Tábla 4,Is féidir le polaisiúicríd Cistanche deserticola méadú suntasach a dhéanamh ar innéacs spleen na bhfrancach óga normalBALB/cc ach ní chuireann sé isteach ar an bhfaireog thymus.

2.3 Éifeacht ar mheáchan orgán imdhíonachta i lucha imdhíonachta

Ó Tábla 5,is féidir a fheiceáil go bhfuil na hinnéacsanna orgán spleen agus thymus de lucha sa ghrúpa imdhíonta Cy níos ísle ná iad siúd sa ghrúpa rialaithe, agus is féidir le polaisiúicríd Cistanche deserticola (125, 250 mg/kg) feabhas suntasach a chur ar na hinnéacsanna spleen agus thymus.

2.4 Éifeacht ar ghníomhaíocht IL-2

Mar is léir ó Tábla 6,nuair a shroicheann an dáileog de Cistanche deserticola polaisiúicríd 7.82 mg/L, féadfaidh sé méadú suntasach ar an scaoileadh IL-2 ó chealla spleen luiche.

Cluaisín.4 Éifeacht polaisiúicríd Cistanche deserticola ar mheáchan na n-orgán imdhíonachta i lucha gnáth (x ±s, n =11)

Nóta: i gcomparáid leis an ngrúpa rialaithe, ＊＊P<0.01.

Cluaisín.5 Tionchar polaisiúicríd Cistanche deserticola ar mheáchan na n-orgán imdhíonachta i lucha imdhíonbhrúite ( x ±s, n =12)

Nóta: i gcomparáid leis an ngrúpa rialaithe, ## P < 0.01; i gcomparáid leis an ngrúpa samhail, ＊＊P<0.01.

Cluaisín.6 Tionchar polaisiúicríd Cistanche deserticola ar tháirgeadh IL-2 ag limficítí splenacha i lucha( x ±s, n =3)

Nóta: i gcomparáid leis an ngrúpa rialaithe, ＊＊P<0.01.

3. Plé

Is turgnamh in vitro é iomadú limficítí splenic-spreagtha ConA agus LPS i lucha chun feidhm na limficítí T agus B a bhrath agus is táscaire tábhachtach é ar chumas imdhíonachta ar leith. Tá sé léirithe ag staidéir, nuair a bhíonn an tiúchan deiridh de pholaisiúicríd Cistanche deserticola os cionn 25 mg / L, is féidir leis iomadú limficítí a chur chun cinn go suntasach, rud a léiríonn go bhfuil éifeacht áirithe miotóiseach aige. I láthair mitogen (ConA nó LPS), is féidir dáileog níos lú de Cistanche deserticola polaisiúicríde feabhas a chur ar an gcomhlacht, a thaispeáint gníomhaíocht iomadú suntasach. Tá a fhios againn go gcothaíonn ConA agus LPS go príomha iomadú limficítí T nó limficítí B, faoi seach. Staidéar a thaispeáintsochair sláinte púdar cistanche: Is féidir le polaisiúicríd Cistanche deserticola iomadú limficítí T agus iomadú limficítí B a chur chun cinn, ach tá a éifeacht iomadaithe ar limficítí B i bhfad níos láidre ná mar atá ar limficítí T.

Sochair sláinte púdar Cistanche-Improve díolúine

Cliceáil anseo chun táirgí Cistanche Feabhsú Díolúine a fheiceáil

【Iarr tuilleadh】 Ríomhphost: xue122522@foxmail.com / WhatsApp 0086 18599088692 / WeWeChat18599088692

Is iad an thymus agus an spleen na príomh-orgánaigh imdhíonachta in ainmhithe. Is iad na cealla imdhíonachta sa spleen den chuid is mó limficítí B aibí, agus is é an thymus den chuid is mó limficítí T neamhaibí. Is féidir le hinnéacsanna thymus agus spleen forbairt orgáin imdhíonachta agus stádas feidhmiúil cealla imdhíonachta a léiriú. Is féidir le hinstealladh intraperitoneal de Cistanche deserticola polaisiúicríd méadú suntasach ar innéacs spleen na lucha gnáth agus imdhíonta agus tá éifeacht fhrithbheartaíochta suntasach ar atrophy thymic tharlódh de Cy i lucha.

Níl aon éifeacht shuntasach ag polaisiúicríd Cistanche deserticola ar an innéacs thymic i ngnáth-ainmhithe, atá ag teacht le torthaí turgnaimh in vitro ina gcuireann polaisiúicríd Cistanche deserticola iomadú limficítí B seachas limficítí T chun cinn.

Cforlíonadh istanche in aice liom-Feabhsaighdíolúine

Is cítocín é IL-2 a tháirgtear trí limficítí T ón gcéim G1 den timthriall cille go dtí an chéim S. Is fachtóir fáis cille T mór é a fheidhmíonn mar fhachtóir fáis autocrine. Ina theannta sin, is féidir le IL-2 iomadú cille B agus sintéis antasubstainte a chur chun cinn [11,12]. Spreagann polaisiúicríd Cistanche deserticola scaoileadh IL-2 ó limficítí, rud a bhaineann go soiléir le polaisiúicríd Cistanche deserticola a chuireann iomadú limficítí splenic chun cinn.

Léiríonn taighde leighis go bhfuil Cistanche polaisiúicrídí, Echinacosides, agus Acteoside, is féidir a ghníomhachtú limficítí agus feabhas a chur ar an gcomhlacht; tá éifeacht shuntasach ag comhpháirteanna feidhmiúla Glycosides Phenylethanoid cistanche ar aisghabháil cille tar éis damáiste gamma-gha 60 Co, agus is féidir leo feidhm imdhíonachta a fheabhsú i gcoinne damáiste radaíochta freisin. Is féidir le forlíontaí Cistanche deserticola a ghlacadh go laethúil éifeacht díolúine a fheabhsú.