Teibí

Cistanche deserticolais luibh íocshláinte a bhfuil clú agus cáil air a fhaightear ón bhfásach ó dhúchas Iarthuaisceart na Síne, ar a dtugtar “ginseng an fhásaigh” go minic. Mar ábhar luibheolaíoch homalógach leighis bia, tá acmhainneacht forbartha iontach aige i dtionscail feidhmiúla bia agus forlíontaí aiste bia. Tá fíocháin úra bainte i mbaol donnú einsímeach arna spreagadh ag einsímí ocsaídáis ingenacha. Glactar le gnáthchleachtais táirgthe triomú scátha faoin aer nó díhiodráitíodh aer te díreach gan céimeanna caighdeánacha réamhchóireála. Mar thoradh ar na hoibríochtaí traidisiúnta seo go coitianta go gcailltear go leor gliocóisídí feinileatánóil (PhGanna), arb iad na croíshubstaintí marcála bithghníomhacha iad, agus díghrádaíonn siad cáilíocht tráchtála na slisní triomaithe deiridh. Tá sé ríthábhachtach teaglaim phraiticiúla réamhchóireála-díhiodráitithe a bhunú chun comhdhúile gníomhacha a chaomhnú agus chun feidhmíocht stórála táirgí críochnaithe a chobhsú.

Rinneadh staidéar ar dhá chonair réamhchóireála san obair seo: brú hidreastatach ultra-ard neamhtheirmeach (UHP) agus gnáthbhrú teirmeach. Comhcheanglaíodh gach réamhchóireáil le dhá theicneolaíocht díhiodráitithe príomhshrutha, triomú aer-te comhiompartha agus lyophilization bhfolús. Cuireadh trialacha aonfhachtóir i bhfeidhm chun raonta paraiméadair indéanta a laghdú, agus ina dhiaidh sin samhaltú dromchla freagartha Box-Behnken chun ceithre shreabhadh oibre táirgeachta comhtháite a bharrfheabhsú. Gliogóisídí iomlána feinileatánóil, arna ríomh trí cheithre mharcóir ionadaíocha a achoimriú lena n-áirítear echinacoside, verbascoside, cistanoside A agus isoverbascoside, mar phríomhtháscaire meastóireachta. Pacáladh slisní luibhe triomaithe a táirgeadh faoi pharaiméadair bharrfheabhsaithe faoi cheithre chóireáil folúis-bhunaithe: folússhéalaithe simplí, folús le sáicíní ocsaigin-scavenger, folús le triseoirí glóthacha shilice, agus folúsphacáistiú ilchodach ina raibh scavenger ocsaigine agus triomadóir araon. Rinneadh monatóireacht leanúnach ar tháscairí cáilíochta iolracha lena n-áirítear leibhéal taise, siúcra iomlán, próitéin intuaslagtha, PhGanna iarmharacha agus comhaireamh miocróbach aeróbach iomlán faoi stóráil ag teocht an tseomra. Baineadh úsáid as tástáil luathaithe seilfré fad saoil (ASLT) faoi theochtaí ardaithe chun seilfré an fhíorshaoil ​​a mheas faoi choinníollacha comhthimpeallacha.

Thug torthaí le fios gur fheabhsaigh réamhchóireáil UHP agus galúcháin caomhnú PhGanna i gcomparáid le rialuithe díhiodráitithe díreacha neamh-réamhchóireáilte. Tháinig an toradh próiseála optamach ó UHP in éineacht le triomú te-aer: brú 296 ​​MPa, an t-am a choinneáil 16 min agus an teocht a thriomú 81 céim , a thugann cion PhG de 5.12 mg/g·FW, timpeall 1.8 huaire níos airde ná an sampla tagartha te-aer-triomaithe neamhchóireáilte. Maidir le triomú aer-te gaile, ba iad na paraiméadair idéalach ná an teocht gaile 94 céim , an fad gaile 21 nóiméad agus an teocht a thriomú 79 céim . I gcás UHP in éineacht le reoite-thriomú, ba iad na socruithe barrmhaithe ná brú 295 MPa, am coinneála 16 nóim agus −43 céim teocht réamhreo. Maidir le lyophilization gaile, ba é an riocht is fearr galú 94 céim ar feadh 21 nóiméad agus −43 céim teocht réamh-reo. Le linn na dturgnaimh stórála, chomhroinn gach grúpa pacáistithe treochtaí comhsheasmhacha maidir le hathrú cáilíochta: tháinig méadú de réir a chéile ar an líon taise agus miocróbach, agus tháinig laghdú ar shiúcra iomlán, próitéin intuaslagtha agus marcóirí bithghníomhacha PhG. I measc na bhfoirmeacha pacáistithe ar fad a tástáladh, choinnigh an fholúsphacáistiú ilchodach a bhí feistithe le saicíní ionsúite ocsaigine agus taise-ionsú araon an cháilíocht táirgí cuimsitheach is fearr. Réamh-mheastar ríomh cobhsaíochta luathaithe seilfré 256 lá do ghnáthshamplaí folús-séalaithe ag teocht chomhthimpeallach 20 céim. I gcomparáid leis sin, baineadh amach seilfré measta suas le 663 lá i bhfolúsphacáistiú ilchodach défheidhmeach.

Tá buntáistí suntasacha ag réamhchóireáil neamhtheirmeach ardbhrú ultra-ard chun gliocóisídí feinileatánól-íogair a chosaint le linnCistanche deserticoladíhiodráitiú. Má chuirtear scavengers ocsaigine agus triomadóirí ocsaigine i bpacáistíocht i bhfolús-séalaithe go comhuaineach is féidir leis an meathlú cáilíochta iltoiseach a mhoilliú go héifeachtach agus síneadh a chur le seilfré inúsáidte slisní triomaithe. Soláthraíonn an staidéar seo tagairtí praiticiúla táirgthe do chóireáil iar-fhómhair agus do chaomhnú tráchtála fadtéarmach an amhábhair luachmhara homalógach bia-leighis seo.

Eochairfhocail: Cistanche deserticola; gliocóisídí feinileatánól; brú hidreastatach ultra-ard; pretreatment gaile; díhiodráitiú aer te; lyophilization bhfolús; cobhsaíocht stórála luibhe triomaithe; meastóireacht luathaithe ar an seilfré; hoimeolaíocht bia-leighis

 

1. Réamhrá

1.1 Próifíl Luibheolaíoch agus Cúlra Tionsclaíoch naCistanche deserticola

Cistanche deserticolaBaineann YC Ma leis an teaghlach Orobanchaceae, agus is luibh holoparasitic éigeantach é gan clóraifill. parasitizes sé an córas fréimhe deAmmodendron halocsalon, tor atá frithsheasmhach ó thriomach agus atá scaipthe go forleathan i réigiúin fhásacha thuaisceart na Síne. Tá a ghais scaly méithe in úsáid mar ábhar tonach luibhe le breis agus dhá mhíle bliain i gcórais feidhmchláir thraidisiúnta. D'aicmigh doiciméid luibhe ársa é mar ábhar tonach ardghrád, a bhfuil cáil air mar gheall ar éifeachtaí tonifying duán-yang, athlánú bunúsach-fola agus faoiseamh comharthaí constipation.

Mar gheall ar bhailiú stairiúil iomarcach fiáin, fiáinCistanche deserticolabhí rioscaí ídiú os comhair acmhainní agus fuarthas idirghabhálacha oifigiúla caomhnaithe. Sa lá atá inniu ann, tá saothrú saorga ar mhórscála bainte amach trí ionaclúCistanchear curtha go saorgaAmmodendron halocsalonfoscadh-foraoisí, go príomha i limistéir fhásaigh Laistigh Mhongóil. Go luath in 2020, chuir údaráis rialála na Síne san áireamhCistanche deserticolaisteach sa chatalóg píolótach homaleolaíochta bia-leighis, ag oscailt ionchais tráchtála níos leithne do bhia feidhmiúil, forlíonadh cothaitheach agus margaí amhábhar cosmaideacha.

1.2 Bithghníomhaíocht na gComhábhar Feidhme Móra

Is iad gliocóisídí feinileatánól na substaintí bithghníomhacha sínithe agCistanche deserticola. D'fhíoraigh líon mór turgnaimh cille in vitro agus staidéir ar shamhlacha ainmhithe in-vivo a acmhainneacht chógaseolaíoch éagsúil. Léiríonn na comhdhúile seo cumas frithocsaídeach suntasach: Is féidir le codáin PhGs gníomhaíocht einsím frithocsaídeach a ardú mar SOD agus damáiste sárocsaídiúcháin lipid a laghdú i serum ainmhithe agus fíocháin ae. Léirigh samhlacha díobhála cille ocsaídiúcháin-strus gur féidir le haonraitheoirí PhG mortlaíocht néarcheall a ísliú, rud a thacaíonn lena acmhainn mar amhábhar frithocsaídeach nádúrtha.

Pharmacological animal trials also validate its traditional tonic value. Is féidir le sleachta uisce luibhe feabhas a chur ar pharaiméadair cháilíochta sperm iolracha in ábhair ainmhithe fireann, lena n-áirítear tiúchan sperm, motility agus ráta anchuma. Léirigh turgnaimh goir lymphocyte goCistanched’fhéadfadh sleachta giniúint antashubstainte a chur chun cinn agus slonn gabhdóra dromchla na gceall imdhíonachta a rialáil, ag léiriú éifeachtaí imdhíon-mhodúla. I dtaighde ar rialáil gastrointestinal, léirigh comhpháirteanna oligosaccharide a bhaintear as an luibh seo feidhmíocht laxative soiléir, a luathaigh peristalsis intestinal agus a ghiorrú latency defecation i múnlaí ainmhithe constipation. Codáin pholaisiúicríde óCistanche deserticolarannchuidíonn sé freisin le freagraí fiseolaíocha frithocsaídeacha agus imdhíon-mhodúla.

1.3 Stádas Reatha na Teicneolaíochta Díhiodráitithe d'Amhábhair Luibhe

ÚrfhóiteCistanche deserticolago bhfuil go leor cothaithigh ann, ach fanann gníomhaíocht mheitibileach iar-fhómhair láidir tar éis piocadh. Gan próiseáil thráthúil, bíonn donnú einsímeach ag baint le gais úra, bogann uigeachta agus milleadh miocróbach, rud a chruthaíonn deacrachtaí maidir le lóistíocht thras-réigiúnach agus stóráil fhadtéarmach. Is é díhiodráitiú an príomh-mhodh caomhnaithe do ghrád tráchtálaCistancheamhábhar. Glacann an táirgeadh traidisiúnta go príomha grianthriomú nó scáth-aerthriomú. Mar sin féin, coimeádfaidh einsímí oxidase ingenous lena n-áirítear polyphenol oxidase (PPO) agus peroxidase (POD) substaintí bithghníomhacha táireach sula dtiteann taise fíocháin go leibhéil shábháilte. Is é is cúis leis seo ná caillteanas mór ar shainghnéithe PhGanna agus ar cháilíocht an táirge chríochnaithe éagobhsaí.

I measc na dteicnící coitianta díhiodráitithe tionsclaíochta d’ábhair luibheolaíocha tá triomú comhiompartha te-aer, díhiodráitiú micreathonn, triomú i bhfad-infridhearg agus folús-reo-reo. Tá infheistíocht trealaimh íseal, tréchur baisc mhóra agus oibríocht shimplí oiriúnach do mhonarú ollscála i gceist le triomú aer-te convective. Is é an míbhuntáiste mór atá aige ná damáiste teirmeach i dtreo móilíní bithghníomhacha teas-labile faoi choinníollacha ardteochta. Baineann lyophilization folúis taise trí sublimation oighir faoi choinníollacha reoite ísealbhrú. Is féidir leis an teicneolaíocht seo uigeacht fíocháin bhunaidh, dath agus fíteiceimiceáin atá íogair ó thaobh teirmeach de a choinneáil níos fearr, agus ídiú fuinnimh agus costais táirgthe níos airde ag baint leis. Déanann scéimeanna comhthriomaithe hibrideacha iarracht na buntáistí a bhaineann le modhanna éagsúla triomúcháin a chomhtháthú chun cáilíocht an táirge chríochnaithe agus an geilleagar déantúsaíochta a chothromú.

1.4 Straitéisí Réamhchóireála roimh Dhíhiodráitiú Luibheolaíoch

Is féidir le céimeanna réamhchóireála roimh dhíhiodráitiú ilchuspóirí a bhaint amach: díghníomhú einsím ocsaídiúcháin, laghdú páirteach ar ualach miocróbach agus mionathrú ar mhicreastruchtúr fíocháin phlandaí. Feabhsaíonn pretreatment réasúnta éifeachtúlacht díhiodráitithe agus íoslaghdaíonn sé díghrádú comhdhúile bithghníomhacha ingenous luachmhar. Baineann galú teirmeach nó blanching le réitigh réamhchóireála teirmeach traidisiúnta. Dínádúraíonn cóireáil teasa próitéiní PPO agus POD oxidase chun frithghníomhartha donnú a shochtadh, ag an am céanna ag feabhsú tréscaoilteacht balla cille agus ag giorrú na dtimthriallta díhiodráitithe ina dhiaidh sin. Mar sin féin, d’fhéadfadh próiseáil theirmeach ró-fhairsing nó teocht ró-ard láisteadh fíteiceimiceach intuaslagtha in uisce agus dianscaoileadh teirmeach substaintí gníomhacha sprice a spreagadh.

Idirghabháil fhisiciúil neamhtheirmeach a bhfuil gealladh fúthu do mhonarú bia-luibhe is ea próiseáil faoi bhrú hidreastatach ultra-ard (UHP). Cuireann brú ard hidreastatach isteach ar bhannaí neamhchomhfhiúsacha taobh istigh de mhacramóilíní bitheolaíocha amhail próitéiní, agus fanann naisc chomhfhiúsacha ceimiceacha meitibilítí tánaisteacha beaga-mhóilín slán den chuid is mó. Is féidir le UHP miocrorgánaigh agus einsímí ocsaídiúcháin a dhíghníomhachtú gan ionchur teirmeach dian, agus tréscaoilteacht cealla-scile a mhodhnú chun scaoileadh meitibilíte ó chealla plandaí a éascú. Le blianta beaga anuas tá suim mhéadaitheach sa taighde i bpróiseáil torthaí, glasraí agus ábhar luibhe sa teicneolaíocht neamhtheirmeach seo.

1.5 Dúshláin a Bhaineann le Stóráil le haghaidh Sliseanna Luibhe Díhiodráitithe

Fiú tar éis dóthain díhiodráitithe a dhéanamh, rachaidh táirgí luibheolaíocha triomaithe faoi mheath mall ar cháilíocht le linn stórála fadtéarmach. I measc na bpríomhfhachtóirí a mbíonn tionchar acu tá cion taise iarmharach, luach gníomhaíochta uisce, páirtbhrú ocsaigine comhthimpeallach, teocht stórála, nochtadh solais agus feidhmíocht bhacainn na n-ábhar pacáistithe. Luathaíonn taise iarmharach donnú neamh-einsímeach agus cuireann sé uisce ar fáil le haghaidh iomadú miocróbach. Luathaíonn ocsaigin díghrádú ocsaídiúcháin substaintí bithghníomhacha feanólacha arna léiriú ag gliocóisídí feinileatánóil. Glacann réitigh pacáistithe cuí scannáin ilchodacha ard-bhacainn, saicéid triscrios chun ionsú taise agus paicéid scavenger ocsaigine chun meath cáilíochta a mhoilliú. Faoi láthair, an chuid is mó atá ar fáil go tráchtálach triomaitheCistanche deserticolaúsáideann slices pacáistiú pouch nó canister simplí, a bhfuil easpa sonraí turgnamhacha córasacha ann chun tacú le fíorfheidhmíocht seilfré.

1.6 Cuspóirí Taighde agus Scóip Turgnamhach

Príomhshrutha atá ann cheana féinCistancheIs minic a sheachnaíonn sreafaí oibre táirgthe réamhchóireáil chaighdeánaithe roimh dhíhiodráitiú, rud a fhágann go gcailltear go suntasach na bithghníomhaithe sainiúla feinileatánóil-glycoside. Déanann an staidéar seo idirghabháil UHP neamhtheirmeach a chur i gcomparáid le réamhchóireáil teirmeach gaile clasaiceach. Comhcheanglaítear gach rogha réamhchóireála le triomú aer te agus triomú reoite faoi seach. Cuirtear scagadh fachtóir aonair agus samhaltú dromchla freagartha Bosca-Behnken i bhfeidhm chun ceithre phíblíne déantúsaíochta chomhtháite éagsúla a bharrfheabhsú, agus leagtar tosaíocht maidir le coinneáil PhGanna a uasmhéadú. Ag baint úsáide as slisní a ullmhaíodh faoi thacair pharaiméadair bharrfheabhsaithe, déanann an páipéar seo tuilleadh imscrúduithe ar an gcaoi a mbíonn tionchar ag folúsphacáistiú arna fhorlíonadh le triseoirí agus saicíní scavenger ocsaigine ar athruithe cáilíochta iltoiseacha le linn stórála. Baintear úsáid as tástáil luathaithe ar aosú chun feidhmíocht seilfré an domhain fíor a thuar faoi ghnáthchoinníollacha teochta an tseomra. Tá sé mar aidhm ag an tionscadal seo bunsraitheanna turgnamhacha agus paraiméadair phraiticiúla déantúsaíochta a sheachadadh le haghaidh láimhseáil iar-fhómhair agus caomhnú fadtéarmach de ghrád míochaine bia.Cistanche deserticola.

Tá raon feidhme an turgnaimh lárnach liostaithe mar seo thíos:

Comhcheangail pharaiméadair a bharrfheabhsú do cheithre phíblíne phróiseála: UHP móide triomú aer te; galúchán móide triomú aer te; UHP móide lyophilization; steaming móide lyophilization. Feidhmíonn ábhar glycosíde feanileatánól iomlán mar tháscaire príomhfhreagartha.

Monatóireacht a dhéanamh ar athruithe dinimiciúla taise, siúcra iomlán, próitéin intuaslagtha, tiúchan PhGs agus comhaireamh miocróbach aeróbach iomlán do slisní luibhe triomaithe faoi cheithre chumraíocht ar leith i bhfolúsphacáistiú le linn trialacha stórála.

Déan turgnaimh luathaithe seilfré aosaithe agus ríomh seilfré réamh-mheasta na teochta comhthimpeallaí do gach réiteach pacáistithe.

2. Ábhair agus Nósanna Imeachta Turgnamhach

2.1 Foinsiú Amh-Ábhair, Imoibrithe Ceimiceacha agus Gaireas Saotharlainne

ÚrCistanche deserticolabaineadh gais amh le linn shéasúr an fhómhair laistigh de Shraith Alxa, Lár Mhongóil, an tSín. Áiríodh le substaintí caighdeánacha tagartha éiceachóisíd, verbascoside, cistanoside A agus isoverbascoside, gach ceann acu a bhfuil íonacht dheimhnithe acu ar mó é ná 98 % nó ar cóimhéid leis. Úsáideadh aicéataitrile agus meatánól de ghrád crómatagrafaíochta le haghaidh tomhas cainníochtúil HPLC. Ghlac oibreáin cheimiceacha eile caighdeán íonachta de ghrád anailíseach.

Mórthrealamh saotharlainne: comh-aireachta triomú aer-te atá rialaithe go teirmeastatach, folcadán eastóscadh ultrasonaic, lártheifneoir cuisnithe ardluais, ionstraim crómatagrafaíocht leacht ardfheidhmíochta, reoiteoir i bhfolús, córas imshruthaithe uisce teirmeastatach, aonad próiseála hidreastatach-bhrú ultra-ard, speictreafótaiméadar UV-Vis, folústóir-teocht-phacáistíocht ardbhrú agus folústóir-teocht-fholústóir-teocht-phacáistíochta tionsclaíochta agus tairiseach-taiseitheoir gaile tionsclaíochta.

2.2 Sreabhadh Oibre Tosaigh um Ullmhúchán Amh-Ábhair

ÚrCistancherinsíodh na gais chun salachar dromchla agus neamhíonachtaí a bhaint, baineadh fíochán sceach seachtrach amach de láimh. Gearradh gais próiseáilte go haonfhoirmeach i slisní 5 mm-tiubh, a chumasc go hiomlán agus a sannadh go randamach d'fhoghrúpaí turgnamhacha. Sainmhíníodh ceithre mhórchóhórt próiseála: réamhchóireáil UHP agus díhiodráitiú aer te ina dhiaidh; réamhchóireáil theirmeach gaileadh agus díhiodráitiú aer te ina dhiaidh sin; pretreatment UHP agus lyophilization bhfolús ina dhiaidh sin; gal pretreatment teirmeach agus lyophilization bhfolús ina dhiaidh sin. Ullmhaíodh cúig shampla mhacasamhail bitheolaíochta do gach riocht turgnamhach.

2.3 Prótacal Braite Cainníochtúil le haghaidh Glicóisídí Iomlána Feanileatánól

Cuireadh cainníochtú bunaithe ar HPLC i bhfeidhm chun comhdhúile marcála PhGs a thomhas. TriomaitheCistanchecriathar an púdar slise trí scáileán 60-mogalra; rinneadh go beacht 1.0 g sampla púdar a mheá agus a mheascadh le tuaslagóir uiscí meatánóil 50 %. Mhair eastóscadh tuaslagóir le cúnamh ultrasonaic 1.5 h, rinneadh an timthriall eastósctha seo arís agus arís eile trí huaire ar leith. Socraíodh riocht lártheifneoraithe go 8000 g fórsa rothlach faoi thimpeallacht 4 chéim ar feadh 15 nóiméad. Chuaigh an leacht saitheach a bailíodh trí scannán scagaire 0.22 μm de chéim orgánach roimh instealladh HPLC.

Cumraíocht crua-earraí HPLC: Colún anailíseach LaChrom X C18 (250 mm × 4.6 mm, méid na gcáithníní 5 μm). Comhdhéanamh céime soghluaiste: aicéataitrile mar chéim A agus tuaslagán uiscí formach-aigéad 0.5 % mar chéim B, arna oibriú faoin modh ríomhchláraithe grádán-leasaithe. Socraíodh tonnfhad braite UV ag 320 nm; colún-teocht a chothabháil 30 céim ; bhí toirt insteallta samplach 8 μL; ráta sreafa sreabhán 0.6 mL/nóim. Ríomhadh luach glycosíde feanileatánól iomlán trí thiúchan tomhaiste ceithre mhóilín marcála aonair a achoimriú, a tuairiscíodh in aonad mg/g·FW. Críochnaíodh measúnachtaí bailíochtaithe modha lena n-áirítear calabrú líneachta, measúnú beachtas ionstraime, atrialltacht ullmhúcháin samplaí, cobhsaíocht ghearrthéarmach réitigh tástála agus tástáil aisghabhála spíce maitrís chun iontaofacht anailíseach a ráthú.

2.4 Trialacha Scagtha Paraiméadair Aonfhachtóra

I gcás gach comhbhealaigh próiseála, rinneadh tástáil aonfhachtóir chun fuinneoga paraiméadar réasúnta a theorannú roimh bharrfheabhsú an dromchla freagartha.

Cohórt te-aerthriomaithe UHP +: imscrúdaíodh grádán brú-mhéid (100 MPa-500 MPa), fad coinneála brú (5-25 nóim), teocht triomú an aeir te (60-100 céim ), ag glacadh tiúchan iomlán PhG mar fhreagra meastóireachta.

Cohórt galúcháin + aerthriomaithe: chumhdaítear in athróga tástála an teocht galúcháin (60-100 céim ), fad an ghabháltais gal (10-50 nóim), teocht an aer-thriomaithe (60-100 céim ).

Cohórt reoite-thriomú UHP +: áiríodh le grádáin athraitheacha brú oibre (100-500 MPa), am brú-choinneála (5-25 nóim), teocht réamh-reo ag dul ó 0 céim síos go −80 céim .

Cohórt gal + reoite-thriomú: teocht gaile láimhsithe, ré galúcháin agus teocht réamhreo laistigh de na raonta grádáin comhfhreagracha.

2.5 Bosca-Behnken Freagairt-Dromchla Dearadh Turgnamhach

Bunaithe ar thorthaí ó thástálacha scagthástála aonfhachtóir, cuireadh leagan amach turgnamhach trí-fhachtóir-trí leibhéal Box-Behnken i bhfeidhm ar gach ceann de na ceithre shreabhadh oibre próiseála. Ainmníodh an t-ábhar iomlán feinileatánól-glycoside mar fhreagra-athróg Y. Ardán bogearraí Design-Saineolaí a tógadh samhlacha matamaiticiúla aischéimnithí cearnacha ilainmneacha. Gineadh paraiméadair déantúsaíochta optúla teoiriciúla trí ríomh na samhla; rinneadh mionchoigeartú ar luachanna na bparaiméadar chun srianta oibríochtúla trealaimh phraiticiúla a shásamh, agus rinneadh turgnaimh fíoraithe fisiceacha ina dhiaidh sin.

2.6 Anailís Próifílithe Meitibilíte UPLC-Q-TOF-MS/MS

Rinneadh sleachta samplacha a fuarthas ó cheithre ghrúpa próiseála optamaithe a scagadh trí scagaire orgánach 0.22 μm agus cuireadh isteach iad le haghaidh tomhais próifílithe meitibilíte UPLC-Q-TOF-MS/MS. Roghnaíodh modh braite ian dearfach ESI; cumhdaíodh raon feidhme an ollscanaithe 50-2000 Da; fuinneamh imbhuailte coigeartaithe laistigh de 30-40 V. Rinneadh crostagairt ar chomharthaí mais-speictriméadrachta blúirí i gcoinne litríochta fíteiceimiceach foilsithe chun meitibilítí de chineál feinileatánól-glycoside a shainaithint go sealadach laistigh deCistanchesleachta fíocháin.

2.7 Socrú Meastóireachta Stórála-Feidhmíochta Slice Triomaithe

TriomaitheCistancheroinneadh slisní a monaraíodh faoi cheithre shonrúchán próiseála optamaithe ag 10 g in aghaidh an aonaid aonair agus séalaithe taobh istigh de phúitsí bacainní folúis ilchisealacha PA/PE. Bunaíodh ceithre chohórt cóireála pacáistithe ar leith:

DP: séalaithe bhfolús íon, gan aon saicíní feidhmiúla breise curtha leis;

DOP: séalaithe i bhfolús le saic scavenger ocsaigine-bhunaithe púdar iarainn san áireamh;

DHP: saothraítear rónta i bhfolús le saic trisiccant ionsúcháin taise shilice curtha leis;

DOHP: folúsphacáistiú ilchodach ina bhfuil saicéid dísleáin ocsaigine-ghlóthach agus trí shilice araon.

Goradh baisceanna samplacha faoi choinníollacha timpeallachta teocht an tseomra. Rinneadh oibríochtaí samplála gach eatramh 14 lá le haghaidh tomhais anailíse il-innéacs. I measc na dtáscairí measúnaithe bhí cion taise (arna chinneadh tar éis prótacal triomú díreach GB 5009.3-2016), siúcra iomlán arna chainníochtú trí mheasúnacht speictrophotiméadracht feanól-sulfair-aigéad, próitéin intuaslagtha arna thomhas le modh dathmhéadrach thar cionn-gorm Coomassie, feinileatánól-glycoside trí shreabhadh oibre bunaithe ar chigireacht HPLC202, trí chomhaireamh coilíneachta aeróbach222 iomlán. sonraíocht. Tharraing tagarmharc glactha miocróbaigh tagairt ó chritéar an tionscail díhiodráitithe-glasraí díhiodráitithe NY 5184-2002, a éilíonn comhaireamh iomlán coilíneachta aeróbach lg(CFU/g) Níos lú ná nó cothrom le 5.

2.8 Measúnú Luathaithe ar Aosú Seilfsaoil (ASLT) agus Ríomh na Seilfré

Goradh eiseamail ionadaíocha a tháinig ó ghrúpa folúis DP simplí agus grúpa ilchodach-phacáistithe DOHP taobh istigh de chaibinéid teirmeastatacha a coinníodh ag 50 céim agus 60 céim chun trialacha luathaithe meathlaithe saorga a dhéanamh. Sainmhíníodh eatraimh ama samplála de réir luach eimpíreach Q10. D’fheidhmigh tairseach chomhairimh choilíneachta mhiocróbaigh agus tiúchan iarmharach PhGanna i gcomhpháirt mar tháscairí críochphointí criticiúla le haghaidh breithiúnas seilfré. Glacadh le foirmle chomhéifeacht Q10 agus foirmlí caighdeánacha ríomha seilfré ASLT chun feidhmíocht seilfré réamh-mheasta a eachtarshuíomh faoi spriocchoinníoll stórála comhthimpeallach 20 céim .

2.9 Staitisticí agus Modheolaíocht Próiseála Sonraí

Láimhseáil bogearraí Excel 2019 agus SPSS Statistics 26 sórtáil bunsonraí agus meastóireacht ar thábhacht staidrimh. Baineadh úsáid as Origin 2022 le haghaidh breacadh figiúr eolaíoch. Dearaidh-Saineolaí 13 tógáil samhail freagartha-dromchla éirithe agus ríomh barrfheabhsú paraiméadar. Thacaigh anailís aontreo ANOVA le meastóireacht chomparáideach ilghrúpa; Léiríodh luach P níos lú ná 0.05 mar dhifríocht shuntasach staitistiúil. Cuireadh na torthaí turgnamhacha tomhaiste go léir i láthair i bhformáid meánluacha ± diall caighdeánach.

 

3. Torthaí agus Plé

3.1 Torthaí Bailíochtaithe do PhGanna Sreabhadh Oibre Cainníochtaithe HPLC

Sheachaid ceithre sprioc-chomhdhúil marcóra feinileatánóil-glycósíd feisteas líneach fabhrach, le comhéifeacht cinntiúcháin R² os cionn nó cothrom le 0.9995. Fuarthas luachanna RSD buaiclimistéir faoi bhun 2.3 %. Gintear figiúirí RSD bunaithe ar inneachar níos ísle ná 3 % sa tástáil atriallachta ullmhaithe samplach Cruthaíodh i dtrialacha cobhsaíochta gearrthéarmacha gur fhan réitigh tástála samplacha cobhsaí ar feadh 24 h ar a laghad faoi thimpeallacht teocht an tseomra. Thit rátaí aisghabhála maitrís-spike do cheithre shubstaint mharcála idir 95.9 %-97.8 %, le RSD comhfhreagrach< 2 %. Collectively these validation outputs confirm that the established HPLC quantitative workflow supplies precise, stable and accurate measurement capacity for phenylethanol‑glycoside marker compounds from processed Cistanche deserticolasamplaí.

3.2 Breathnú ó Thurgnaimh Scagtha Fachtóra Aonair

Laistigh den chohórt UHP móide aer-thriomú te, bhí éagsúlacht aonmhódach le sonrú ar ábhar feinileatánólatán-glycoside: dhreap an tiúchan meitibilíte ar dtús agus tháinig laghdú air ina dhiaidh sin de réir mar a mhéadaigh brú, d’ardaigh am coinneála brú agus teocht an triomú go seicheamhach. Nuair a coinníodh paraiméadair chúnta tairiseach, tháinig uastáirgeacht PhG chun cinn gar do bhrú oibre 300 MPa, fad sealúchais 15 nóiméad agus an teocht triomúcháin socraithe go 80 céim . Cuireann brú meánach ultra-ard-hidrostatach-leibhéal isteach ar ailtireacht planda-chill, feabhsaíonn sé tréscaoilteacht cille-scileáin agus éascaíonn sé scaoileadh meitibilíte PhGanna intracellular. Bíonn iarmhairtí díobhálacha ag tréimhsí brú ró-ard nó tréimhsí coinneála brú ró-fhada: tarlaíonn sceitheadh ​​mór eisíontais incheallacha ilghnéitheacha, chomh maith leis sin téann cuid de mhóilíní PhGs i dteagmháil le ocsaigin iarmharach laistigh de chealla briste agus fulaingíonn siad díghrádú ocsaídiúcháin, rud a fhágann laghdú ar thiúchan inbhraite PhGs. Spreagann teocht ró-ard a thriomú craiceann dromchla na slisní luibhe, cuireann sí bac ar bhealaí idirleata uisce inmheánacha agus leathnaíonn sé ré éifeachtach an díhiodráitithe, ag luasghéarú tuilleadh miondealú teirmeach ar mhóilíní PhG atá íogair ó thaobh teirmeach de.

Maidir le píblíne thurgnamhach díhiodráitithe gaile-te-aer, léirigh ábhar PhGs claonadh ardú-ansin-titim mar an gcéanna ag freagairt d'athruithe ar ré gaile, ar theocht gaile agus ar theocht a thriomú. Díríodh na leibhéil oibríochta aonfhachtóire is fearr is féidir ar theocht gaile 90 céim , ar an ngabháltas gaile 20 nóiméad agus ar an teocht triomúcháin 80 céim . Dínádúraíonn cóireáil chuí gaileadh teirmeach einsímí ocsaídiúcháin PPO agus POD ingenous, ag baint amach an éifeacht chosanta “neamhghníomhachtaithe-einsím chun glúcósíd a chaomhnú” agus cuireann sé cosc ​​ar mhiondealú hidrealaíoch einsímeach ar chomhábhair feinileatánól-glycoside. Déanann nochtadh teirmeach ró-dhian ó theocht ró-ard nó fad galúcháin rófhada dochar mór do thógáil na gcillbhallaí, rud a fhágann go gcailltear láisteadh substaintí gníomhacha intuaslagtha in uisce taobh le dianscaoileadh teirmeach na gcomhdhúile marcála sprice.

Maidir le réamhchóireáil in éineacht le grúpaí reoite-thriomaithe, tháirg coigeartuithe ar mhéid brú UHP, fad coinneála brú agus teocht réamh-reo cuair aonmhódacha freagartha PhGs. Bhí an chuma ar aschur buaic PhGs timpeall 300 MPa brú, 15 nóiméad coinneála agus suíomh réamhreo −40 céim. Cuireann teocht réamh-reo tionchar suntasach ar mhoirfeolaíocht chriostail oighir agus ar mhicreastruchtúr deiridh slisní luibheacha lyophilized. Gineann teocht réamh-reo measartha-íseal ailtireacht fíocháin scaoilte agus scagach, rud a théann chun tairbhe as eastóscadh PhGanna trí mheán tuaslagóirí ina dhiaidh sin. Ní féidir le doimhneacht réamh-reo leordhóthanach cosc ​​iomlán a bhaint amach ar ocsaíd-einsím; Cruthaíonn teocht réamh-reo an-íseal uigeacht fíocháin tite agus dhlúth a íslíonn táirgeacht PhGanna in-eastósctha. Thaispeáin an cohórt gaile-lyophilization patrún freagartha ardú-agus-titim analógach; Ba iad na paraiméadair aonfhachtóra ab fhearr ná teocht an ghaile 90 céim , fad na gaile 20 nóiméad agus an teocht réamh-reo −40 céim .

3.3 Aschuir Barrfheabhsaithe Freagartha-Dromchla do Cheithre Shreabhadh Oibre Próiseála

Bhain samhlacha aischéimniúcháin chearnach a tógadh do cheithre phíblíne phróiseála amach luach samhail-P thar a bheith suntasach (P< 0.0001), meanwhile lack‑of‑fit terms displayed non‑significant difference (P >0. 05). Sháraigh luachanna R² comhéifeacht cinntitheacha 0.98 do gach samhail, rud a léirigh oiriúnacht na samhla cúlchéimnithe i gcoinne tacar sonraí turgnamhacha agus acmhainn thuarthach iontaofa maidir le tiúchan PhGanna laistigh den spás paraiméadar imscrúdaithe.

Coigeartaíodh na paraiméadair optamach atá tuartha sa tsamhail go mín chun teorainneacha oibríochta trealaimh sa saol mór a shásamh, tugtar achoimre ar pharaiméadair déantúsaíochta praiticiúla fíoraithe mar seo a leanas:

UHP in éineacht le díhiodráitiú te-aer: brú oibriúcháin 296 MPa, brú-choinneáil 16 nóiméad, teocht an aer-thriomaithe 81 céim . PhGanna a thomhaistear go praiticiúil = 5.12 mg/g·FW, diall tuartha ach 1.98 %. Seachadadh an sreabhadh oibre seo an éifeacht caomhnaithe PhGanna ab airde as ceithre phíblíne, ábhar marcála 1.8-huaire níos airde ná samplaí tagartha a bhí ag dul faoi aer-thriomú díreach gan aon réamhphróiseáil.

Galú in éineacht le díhiodráitiú te-aer: teocht galúcháin 94 céim , fad galúcháin 21 nóiméad, teocht a thriomú 79 céim . PhGanna tomhaiste = 3.52 mg/g·FW, diall tuartha 3.43 %. Shroich leibhéal PhGanna 1.1-huaire i gcomparáid le sampla tagartha um theas-thriomú neamhchóireáilte.

UHP in éineacht le lyophilization bhfolús: brú 295 MPa, sealbhaíocht-am 16 min, réamh-reo-teocht −43 céim . PhGanna tomhaiste = 4.08 mg/g·FW, diall tuartha 1.33 %. Mhéadaigh tiúchan PhG 1.7-huaire i gcomparáid le rialú díreach ar an reo-thriomú.

Galú in éineacht le lyophilization bhfolús: steaming-teocht 94 céim , fad gaile 21 nóiméad, réamh-reo-teocht −43 céim . PhGanna tomhaiste = 2.87 mg/g·FW, diall tuartha 3.53 %. Bhí leibhéal PhGanna 0.9-huaire níos airde ná an t-ábhar tagartha um reo-thriomú díreach.

Léiríonn traschomparáid idir ceithre phíblíne optamaithe go n-éiríonn le réamhchóireáil neamhtheirmeach ardbhrú feidhmíocht caomhnaithe PhGanna níos fearr i gcomparáid le gnáth-idirghabháil galúcháin teirmeach, beag beann ar phéireáil le díhiodráitiú te-aer nó lyophilization. Tá an bhreathnóireacht seo ag teacht le láidreacht intreach na teicneolaíochta UHP maidir le fíteiceimiceáin bheaga-mhóilín atá soghonta ó thaobh teasa a chosaint. D’éirigh le próifíliú meitibilít UPLC-Q-TOF-MS/MS idirdhealú a dhéanamh idir naoi meitibilít a bhaineann le feinileatánól-glycoside laistigh deCistanchesleachta. Chláraigh roinnt meitibilítí ionadaíocha amhail cistanoside C agus aigéad géineasóideach déine freagartha mais-speictriméadrachta níos airde do chohóirt réamhchóireáilte UHP i gcomparáid le comhghleacaithe réamhchóireáilte gaile. Tugann an feiniméan seo le tuiscint go bhfeidhmíonn cóireáil UHP éifeachtaí modhnúcháin difreáilte d’fho-aicmí éagsúla meitibilítí feinileatánólatán-glicóisíde, agus tá imscrúdú leantach níos doimhne tuillte ag an mbunmheicníocht rialála mhóilíneach.

3.4 Éabhlóid Cáilíochta Stórála le haghaidh Sliseanna Triomaithe faoi Chumraíochtaí Éagsúla Pacáistíochta

Le linn na fuinneoige iomlán breathnadóireachta 70-lá ar theocht an tseomra, d'fhan an claonadh il-innéacs éagsúlachta cáilíochta comhsheasmhach ar fud na gceithre chohórt pacáistithe uile: coimeádadh ábhar taise agus comhaireamh coilíneachta aeróbach iomlán ag ardú de réir a chéile; léirigh tiúchan iomlán siúcra, leibhéal intuaslagtha-próitéine agus ábhar iarmharach feinileatánól-glycosídí treochtaí íslitheacha leanúnacha.

Léiríonn torthaí tomhais ábhar taise gur léirigh cohóirt atá feistithe le saicíní trisigh (DHP agus DOHP) treoluas ionsúcháin taise i bhfad níos moille i gcomparáid le grúpaí gan suimiú trisiccant (DP, DOP). Déanann sé éifeachtacht triomadóir glóthach shilice a bhailíochtú chun glacadh taise i dtriomaithe a shochtadhCistancheslisní. Coinníonn slisní te aer-triomaithe substaintí níos airde a bhaineann le siúcra a thugann airí hygroscópacha níos láidre; mar sin sháraigh an ráta méadaithe taise do chohóirt te-aer-triomaithe na grúpaí samplacha lyophilized.

Maidir le léamha próitéine iomlána siúcra agus intuaslagtha: is léir gur chuir cohóirt a raibh trealamh scavenger ocsaigine orthu (DOP, DOHP) moill ar luas íslitheach na dtáscairí siúcra agus próitéin intuaslagtha. Sochtann micrea-thimpeallacht íseal-ocsaigin miondealú ocsaídiúcháin ar shubstaintí de chineál próitéine agus laghdaítear tomhaltas an tsubstráit siúcra a eascraíonn as gníomhaíocht mhiocróbach iarmharach. Sholáthair an cohórt DOHP ilchodach a chomhtháthaíonn triseoir agus scavenger ocsaigine an fheidhmíocht chosanta optamach do chomhábhair chothaitheacha.

Baineann gliocóisídí feanileatánóil le bithghníomhaithe den aicme feanólacha atá an-so-ghabhálach i leith meath ocsaídiúcháin. Le linn na dtimthriallta stórála, choinnigh grúpa ilchodach DOHP i bhfolúsphacáistiú tiúchan PhGanna iarmharacha a bhí níos airde ó thaobh staitistice de i gcomparáid le cohórt DP simplí-folúis. Moillíonn ocsaigin íseal mar aon le micrea-aeráide íseal-taise laistigh de phúitsí pacáistithe ilchodacha bealaí díghrádaithe ocsaídiúcháin do chomhdhúile marcála PhG.

Maidir le comhaireamh coilíneachta miocróbach aeróbach iomlán: choinnigh gach grúpa turgnamhach an comhaireamh coilíneachta faoi bhun lg(CFU/g) Níos lú ná nó cothrom le 5, ag comhlíonadh na sonraíochta maidir le sábháilteacht bia ar feadh na tréimhse breathnóireachta 70 lá. Léirigh an grúpa ilchodach DOHP an ráta iolraithe miocróbach is moille, mar thoradh ar chomh-éifeachtaí coiscthe fáis a tháinig ó mhicrea-thimpeallacht íseal-taise agus stórála ocsaigine íseal.

3.5 Torthaí Réamh-mheastacháin Seilfsaoil Luathaithe um Aosú

Glacadh le comhaireamh coilíneachta miocróbach a thrasnaíonn an tairseach rialála mar chríochphointe teip seilfré. Arna ríomh ó thacar sonraí luathaithe aosaithe ASLT: ba é 256 lá seilfré réamh-mheasta na teochta comhthimpeallaí (20 céim ) le haghaidh samplaí simplí DP folús-séalaithe. D'éirigh le folúsphacáistiú ilchodach DOHP le dé-scavenger ocsaigine móide saicíní triomaigh an seilfré réamh-mheasta a shroich 663 lá, feabhsú fad saoil thart ar 1.5 uair i gcomparáid leis an ngnáthshéalú i bhfolús. Cruthaíonn aschuir thurgnamhach gur rogha theicniúil phraiticiúil éifeachtach ó thaobh costais de chun seilfré tráchtála na n-earraí triomaithe a shíneadh a chuirtear le sáicíní ocsaigine-séalaithe agus triomaigh le chéile faoi choinníollacha folúséalaithe.Cistanche deserticolaslisní.

4. Conclúidí & Dearcadh Taighde

Tá réamhchóireáil neamhtheirmeach ardbhrú agus réamhchóireáil gal teirmeach in ann an fheidhmíocht coinneála a ardú go suntasach do chroí-mharcóirí feinileatánólatán-glicóisíde bithghníomhacha deCistanche deserticola, i gcomparáid le samplaí tagartha a fhaigheann díhiodráitiú díreach gan aon réamhchóireáil. As ceithre shreabhadh oibre déantúsaíochta comhcheangailte, bhain réamhchóireáil UHP agus díhiodráitiú te-aer amach an toradh is fearr maidir le caomhnú PhGs. A pharaiméadair optamaithe praiticiúla: brú 296 ​​MPa, fad brú-choinneála 16 nóiméad, teocht an aerthriomaithe 81 céim ; cion PhGs tomhaiste 5.12 mg/g·FW, a shroich luach 1.8 huaire níos airde ná samplaí rialaithe díreacha te-thriomaithe. Bhí cáilíocht fheistiú shásúil agus cumas tuartha ag samhlacha aischéimniúcháin a tógadh do cheithre phíblíne phróiseála. Léiríonn teicneolaíocht neamhtheirmeach ard-bhrú ultra-ard iarrthóir tuar dóchais inti réamhchóireáil le haghaidh triomú tráchtála ardchaighdeáin-Cistanchedéantúsaíocht.

Laistigh de triomaithe-Cistancheis féidir le cleachtas stórála slisne, pacáistiú folús-séalaithe in éineacht le scabhálaí ocsaigine défheidhme móide saicíní triomaigh srian a chur go héifeachtach le gnóthachan taise, moill a chur ar ídiú na mbithghníomhaithe lán-siúcra, intuaslagtha próitéine agus feinileatánól-glycoside, agus srian a chur ar atáirgeadh coilíneachta miocróbach. Réamh-mheastar le tástáil aosaithe luathaithe go bhféadfaidh an scéim phacáistithe ilchodach seo seilfré teochta comhthimpeallaí a bhrú suas le 663 lá. Soláthraíonn an t-imscrúdú seo paraiméadair phróiseas praiticiúla a thacaíonn le láimhseáil iar-fhómhair agus caomhnú tráchtála fadtéarmach le haghaidh bia-leighis-homalógach.Cistanche deserticolaearraí críochnaithe.

Teorainneacha an staidéir agus an t-ionchas don todhchaí: Dhírigh an taighde reatha go mór ar éagsúlacht chainníochtúil ar mheitibilítí marcála dea-thréithrithe PhG. D’fhéadfadh imscrúdú leantach iniúchadh breise a dhéanamh ar an gcaoi a n-athraíonn oibríochtaí réamhchóireála éagsúla cumas foriomlán frithocsaídeach an chríochnaitheCistanchetáirgí, agus tochailt níos doimhne isteach i meicníochtaí ar scála móilíneach trína athraíonn brú ultra-ard conairí claochlaithe agus díghrádaithe d'fhochineálacha feinileatánól-glicóisíde. Ó thaobh an fheidhmchláir thionsclaíoch de, teastaíonn meastóireacht chuimsitheach eacnamaíoch-costais le haghaidh cásanna olltáirgeachta chun trealamh UHP a imscaradh ar mhórscála.

Tagairtí

[1] Dul chun cinn i bpróiseáil agus imscrúdú fíteiceimiceach le haghaidhCistanche deserticolaábhair luibh feidhme.Journal of Luibhe Acmhainní Taighde Fheidhmeach.

[2] Meastóireacht feidhmíochta frithocsaídeach le haghaidh eastóscáin feinileatánól-glycosídí a dhíorthaítear ó luibheanna íocshláinte tréigthe.Tuarascálacha Ceimic Bhia agus Bithphróiseáil.

[3] Feidhm teicneolaíochta hidreastatach ardbhrú neamhtheirmeach le haghaidh amhábhair bia-luibhe atá díorthaithe ó phlandaí.Léirmheasanna Nuálaíocha Próiseála Bia.

[4] Tionchar réamhchóireála ar éifeachtúlacht díhiodráitithe agus coinneáil substaintí bithghníomhacha de phlandaí íocshláinte de chineál riosóim.Feasachán Teicneolaíochta Iar-Fhómhair.

[5] Modheolaíocht luathaithe seilfré do thuar táirgí luibheolaíocha díhiodráitithe.Cumarsáid Taighde Cobhsaíochta Bia.

[6] Ábhair chúnta pacáistithe i bhfolús (scavenger ocsaigine, triomadóir) ar chaomhnú tráchtearraí luibhe triomaithe.Iris Nuálaíochta Pacáistithe.

[7] Comparáid lyophilization versus convective te-aer-thriomú do slisní luibhe teas-íogair-saibhir-saibhir.Dul Chun Cinn na Teicneolaíochta Triomú.

[8] Rialú cáilíochta agus cainníochtú HPLC-comhdhúil marcála le haghaidh acmhainní luibhe tréigthe bia-leighis-homalógach.Tuarascálacha Anailíse Táirge Nádúrtha.