Comparáid idir Éagsúlacht Ábhar Ocht gComhpháirt Cheimiceach i dTáirgí Amha agus Próiseáilte Fíona De Dhá Chineál Cistanche Deserticola Bunaithe Ar UPLC Ⅱ

2. Modhanna agus Torthaí

2.1 Coinníollacha Crómatagrafacha

Rinneadh anailís UPLC ag baint úsáide as aUiscí ACQUITY UPLC™ BEH C18 colún (100 mm × 2.1 mm, méid na gcáithníní 1.7 μm). Is éard a bhí sa chéim shoghluaistemeatánól (A)agusTuaslagán uiscí aigéad formach 0.1% (B)leis an elution grádán seo a leanas:

0–4 nóim: 10% → 26% A

4–18 nóim: 26% → 40% A

18–20 nóim: 40% → 50% A

Ráta sreafa:0.3 mL / nóim
Toirt insteallta:3 μL
Teocht an cholúin:35°C
Tonnfhad braite:330 nm

2.2 Réitigh a Ullmhú

2.2.1 Réiteach Tagartha Measctha

Meáigh na comhdhúile caighdeánacha seo a leanas go cruinn:cistanoside F, echinacoside, cistanoside A, verbcosside, tubuloside A, isoverbascoside, 2'-aicéitilverbascoside, agustubuloside B. Tuaslaig i meatánól 50% chun meascán tagartha a ullmhú a bhfuil na tiúchain seo a leanas aige (µg·mL⁻¹):

Cistanoside F: 32.7

Echinacoside: 102.4

Cistanoside A: 50.2

Leithead focal: 80.6

Tubuloside A: 25.6

Isoverbascoside: 86.3

2'-Acetylverbascoside: 77.3

Tubuloside B: 60.8

2.2.2 Réiteach Samplach

slices Raw CistancheUllmhaíodh iad ag softening an luibh, slicing, agus a thriomú.
Cistanche gaile fíonaUllmhaíodh é trí slisní amh a maos i bhfíon ríse 30%, gal an meascán ar feadh 12 uair an chloig, fuarú, agus triomú arís.

Thart ar0.2 gde phúdar triomaithe (a ritheadh ​​trí criathar 65-mogalra) a mheá isteach i bhfleascán ómra toirtmhéadrach 50 ml, a bhaintear le 25 ml de meatánól 50%, sonicated ar feadh 40 nóiméad (250 W, 35 kHz), agus a thabhairt ar ais de réir meáchain. Scagadh an réiteach trí amembrane 0.22 μm, agus baineadh úsáid as an scagáit le haghaidh anailíse.

Nóta: H. Desert Cistanche; G. Tubulosa Cistanche; RH. slices amh Cistanche deserticola; RG. slices amh Cistanche tubulosa; WH. Cistanche deserticola stewed le fíon; WG. Cistanche tubulosa stewed le fíon; Tá figiúirí 4 go 7 mar an gcéanna.
Fíor 1 Pictiúir d’ábhair íocshláinte Cistanche deserticola agus Cistanche tubulosa, slisní amh, agus stewed le fíon

fíon cistanche cáiliúil a dhíoltar sa tSín

Ceannaigh Anois

Seirbhís Tacaíochta Wecistanche-The Déan Teagmháil Linn Chun Sampla nó Sonraí Mórdhíola a fháil
Ríomhphost:wallence.suen@wecistanche.com
Whatsapp/Teil:+86 15292862950

2.3 Anailís Chainníochtúil ar 8 gComhdhúil Mhóra i gCistanche Amh agus Próiseáilte Fíona

2.3.1 Oiriúnacht an Chórais

Faoi na coinníollacha crómatagrafaíochta a thuairiscítear, uimhir pláta teoiriciúil le haghaidhechinacoside exceeded 6000 with good resolution (>1.5). Léirítear i bhFíor 2 crómatagram den chaighdeán measctha, Cistanche an fhásaigh amh, agus samplaí próiseáilte fíona.

Aitheantas Buaic:

Cistanoside F

Echinacoside

Cistanoside A

Briathar briathar

Tubuloside A

Isoverbascoside

2'-Acetylverbascoside

Tubuloside B

cistanche deserticola

cistean tubulosa

2.3.2 Líneacht agus Teorainneacha Braite

Bunaíodh cuair chaighdeánacha calabraithe trí úsáid a bhaint as caolaitheoirí sraitheacha den mheascán tagartha ag tiúchan 0.1 go 5.0 mL. Gineadh cuair chalabrúcháin trí bhreacadh a dhéanamhtiúchan (X)i gcoinnebuaiclimistéar (Y). Socraíodh teorainneacha braite (LOD, S/N=3) agus teorainneacha cainníochtaithe (LOQ, S/N=10) agus deimhníodh líneacht mhaith thar na raonta a tástáladh.

2.3.3 Cruinneas

Léirigh sé instealladh mhacasamhlú den réiteach tagartha meascthadiallais chaighdeánacha choibhneasta (RSDanna)de bhuaic-réimsí ó0.48% go 2.14%, rud a léiríonn cruinneas ionstraim den scoth.

2.3.4 Cobhsaíocht

Réitigh samplaí depúdar amh Cistanche (Uimh. Baisc. 160901)Rinneadh anailís orthu ag 0, 2, 4, 8, 12, agus 24 uair an chloig. Chuimsigh na RSDanna de bhuaiclimistéir do na 8 gcomhdhúil go léir ó0.71% go 1.93%, ag deimhniúcobhsaíocht réitigh laistigh de 24 uair an chloig.

Tábla 1. Eolas Samplach ar Ábhair Cistanche

2.3.5 Atrialltacht

Léirigh sé mhacasamhail a ullmhaíodh go neamhspleách den bhaisc chéanna Cistanche in-atrialltacht mhaith. Bhí an meán-ábhar (mg·g⁻¹) agus RSDs mar seo a leanas:

2.3.6 Tástáil Aisghabhála

Rinneadh tástáil ar aisghabháil trí spikingsé mhacasamhail de phúdar Cistanche (0.1 g)le tiúchain aitheanta de na 8 gcomhdhúil thagartha. Bhí raon idir aisghabhálacha meánacha ó95.56% go 102.71%, le RSDs idir1.44% agus 2.97%, ag léiriúiontaofacht eastósctha agus cainníochtaithe den scoth.

Nóta: A. Tagairt mheasctha; B. Raw Cistanche deserticola; C. Stewed Cistanche deserticola i bhfíon; 1. Cistanchesside F; 2. Echinacoside; 3. Cistanchesside A; 4. Briathar cois; 5. Tubuloside A; 6. Isoverbascoside; 7. 2΄-aicéitilverbascoside; 8. Tubuloside B.

2.3.7 Cainníochtú Comhdhúile Gníomhacha i gCistean Amha vs. Fíon-Phróiseáilte

Rinneadh tástáil dhúblach ar gach sampla. Rinneadh na 8 gcomhdhúile sprice a chainníochtú i10 mbaisceanna de Cistanche deserticola(amh agus fíon-phróiseáilte) agus10 mbaisceanna de Cistanche tubulosa. Tá achoimre ar na torthaí i dTábla 3, ag tabhairt léargais ar:

Difríochtaí sainspeicis sa chomhdhéanamh

Athruithe ar ábhar fíteiceimiceach tar éis próiseáil fíona

Méarlorgaireacht anailíseach le haghaidh rialú cáilíochta Cistanche

Tábla 2. Cuair Calabrúcháin, Comhéifeachtaí Comhghaolaithe (r), Raonta Líneach, LOD agus LOQ le haghaidh Ocht Comhdhúil

2.4 Anailís Chomparáideach ar Chomhdhéanamh Ceimiceach idir Speicis Cistéise

Chun imscrúdú a dhéanamh ar andifríochtaí fíteiceimiceachaidirCistanche deserticolaagusCistanche tubulosa, an tiúchan de ocht eochairgliocóisídí feinileatánóideachó10 mbaisceanna de shamplaí amh agus fíonphróiseáilteRinneadh léirshamhlú de gach speiceas ag baint úsáide asceapacha bosca (Fíor 3). Léirigh anailís staitistiúil go bhfuil, seachas2'-aicéitilverbascosideagustubuloside B, léirigh an chuid is mó comhdhúile eiledifríochtaí suntasacha (P < 0.05)idir an dá speiceas i bhfoirmeacha amh agus próiseáilte araon.

Go sonrach:

ICistanche amh, ábhar nacistanoside F, echinacoside, isoverbascoside, tubuloside A, agus verbascosidebhíi bhfad níos ísleisteachC. deserticolai gcomparáid leC. tubulosa(P < 0.05).

Tá ansamplaí fíon-phróiseáilteléargas ar threochtaí cosúla.

Go háirithe,cistanoside Afuarthas agleibhéil níos airde iC. deserticolaagus bhído-bhraiteisteachC. tubulosa, ag moladh go bhféadfadh sé fónamh mar acumaisc marcóir féidearthale haghaidh idirdhealú speiceas.

Anailís Cheimiceach PLS-DA ar Speicis Cistanche

A Anailís ar Pháirt-Cearnóga Is Lú (PLS-DA)Baineadh úsáid as sonraí tiúchana na n-ocht gcomhdhúil. An toradhceapacha scór (Fíor 4A)léirigh go raibh samplaí amh agus próiseáilte ón dá speiceasgan cnuasaigh i ngrúpaí atá deighilte go soiléir.

Mar sin féin,tástálacha randamacha iomalartaithe (Fíor 4B)le fios go raibh an tsamhailgan a bheith rófheistithe, mar fhíorluachanna deR²Y agus Q²níos airde ná iad siúd de na samhlacha iomalartaithe. An réasúntaluachanna íseal Q²le fiosintuarthacht theoranta, is dócha mar gheall aréagsúlacht inghrúpaagusraonta cumaisc forluiteachaidir foirmeacha amh agus próiseáilte.

Samhaltú breise PLS-DA agus Anailís VIP

Tógadh samhlacha PLS-DA ar leith chun samplaí amh agus fíonphróiseáilte den dá speiceas a iniúchadhdifríochtaí ceimiceacha speiceas-shonracha. Breathnaíodh iad seo a leanas:

Ceapacha scóir (Fíoracha 5A agus 5C)léirighcnuasach ar leithidirC. deserticolaagusC. tubulosai bhfoirm amh agus próiseáilte araon.

Bailíochtú múnla (Fíoracha 5B agus 5D)dea-chumhacht thuarthach deimhnithe gan rófheisteas.

Tábhacht Athraitheach i gceapacha Teilgean (VIP) (Fíoracha 6A agus 6B)príomh-chomhdhúile aitheanta a chuireann le hidirdhealú speiceas:

Le haghaidhsamplaí amh: Cistanoside A, cistanoside F, echinacoside, agusverbcossideba fhaisnéiseach iad.

Le haghaidhsamplaí fíon-phróiseáilte: Cistanoside Aagustubuloside Bbhí rólanna ceannasacha.

2.5 Tionchar Próiseála Fíona ar Fhíteiceimic na gCistíneach

Mar gheall ar éagsúlacht shuntasach san ábhar cumaisc thar bhaisceanna,comparáidí péireáiltea rinneadh idir samplaí amh agus fíon-phróiseáilte de nabhaisc chéanna. Na torthaí, visualized ag baint úsáide asceapacha veidhlín (Fíor 7), nocht an méid seo a leanas:

IC. deserticola, leibhéil de2'-aicéitilverbascoside, cistanoside A, cistanoside F, echinacoside, tubuloside A, agus verbascoside laghdú suntasachiar-phróiseáil (P < 0.05), agustubuloside B méadaithe.

IC. tubulosa, leibhéil de2'-aicéitilverbascoside, echinacoside, agus verbascosidefreisinlaghdaigh, céisoverbascoside agus tubuloside B méadaithego suntasach (P < 0.05).

Tugann na torthaí le fios go bhféadfadh próiseáil fíona a bheith mar thoradh airhidrealú, isiméiriú, nóclaochlú ceimiceachde chomhábhair ghníomhacha.

3. Plé

De réir anEagrán 2020 den Pharmacopoeia Síneach, Cistanche deserticolaNí mór go bhfuil níos lú ná0.3%den ábhar comhcheangailte deechinacoside agus verbascoside, céCistanche tubulosaNí mór go bhfuil níos lú ná1.5%den dá chomhdhúil seo. Sa staidéar seo, chomhlíon gach sampla amh agus próiseáilte - ach amháin baisc amháin (180710) na caighdeáin seo.

In ainneoinéagsúlacht bhaisc-go-bhaisclaistigh de gach speiceas (difríocht roinnt comhdhúile suas le 10-huaire, mar shampla tubuloside A agus isoverbascoside), breathnaíodh difríochtaí suntasacha staitistiúla in ábhar cumaisc idir an dá speiceas. Deimhníonn sé seo go bhfuilIs fachtóir mór é tionscnamh speiceastionchar a imirt ar chomhdhéanamh fíteiceimiceach.

Ina theannta sin,cistanoside Abhíbraitheadh ​​​​amháin iC. deserticolaagus as láthair iC. tubulosa, á dhéanamh amarcóir luachmhar maidir le fíordheimhniú speiceas, go háirithe i suíomhanna cógas-gnóiseacha nó rialaithe cáilíochta.

🔬 Éifeacht Próiseála Fíona ar Chomhdhéanamh Ceimiceach

Tar éis próiseáil fíona, léirigh an dá speiceas treocht comhsheasmhach:

Leibhéil laghdaithede:
Cistanoside F, echinacoside, cistanoside A, verbascoside, tubuloside A, agus 2'-aicéitilverbascoside

Leibhéil mhéadaithede:
Tubuloside B agus isoverbascoside

D’fhéadfadh na treochtaí seo a bheith mar thoradh arhidrealú ceimiceach, díghrádú, nóathshocrú struchtúrachle linn an phróisis gaile. Suimiúil go leor, anbhí éagsúlacht i méid agus treo na n-athruithe trasna baisceanna, is dócha mar gheall ar dhifríochtaí i:

Comhchruinnithe cumaisc tosaigh

Mhoirfeolaíocht luibh (méid, tiús)

Íogaireacht do choinníollacha próiseála

Léiríonn sé seo an tábhacht a bhaineann leparaiméadair próiseála a chaighdeánúagus stiúradhmeasúnuithe cáilíochta a bhaineann go sonrach le baisceannale linn ullmhúcháin luibhe.