Nochtann Cógaseolaíocht Líonra agus Bailíochtú Turgnamhach Ról Meicniúil Glicóisídí Feinileatánóideach Cistánach maidir le Cóireáil NAFLD Trí Chosán TNF/PI3K/Akt

3. Torthaí

3.1 Cógaseolaíocht Líonra

3.1.1 Comhdhúile Gníomhacha agus Spriocanna Féideartha

Bunaithe ar thaighde a rinne foireann an tionscadail roimh ré agus ar fhaisnéis ó bhunachair shonraí agus litríocht, roghnaíodh deich gcomhdhúil ionadaíocha le gníomhaíocht cógaseolaíochta [10–11]:verbascoside, isoverbascoside, echinacoside, 2′-aicéitil-verbascoside, cistanoside A, cistanoside B, salidroside, isocrenatoside II, glycosíd cistanche A, agus glycosíd cistanche F.

Sliocht Cistéise Ard-Ábhar Verbascoside(acteoside) le haghaidh Cóireála Lipide Fola

Liosta sonraíochtaí sliocht Cistanche

Déan teagmháil linn cheannach anois

Ag baint úsáide asSwissTargetPrediction, fuarthas 44 sprioc;NetInfertuartha na 20 sprioc is airde, ag cruthú 45 sprioc;Sárphrionsafuarthas 118 sprioc. Tar éis dúbailt a chumasc agus a bhaint,195 sprioc uathúlaaithníodh.

ÓnGSE89632tacar sonraí, lena n-áirítear 39 sampla NAFLD agus 24 gnáthshampla,589 géinte a chuirtear in iúl go difreálachscreadadh. Sonraí a chomhcheangal óCártaí GineagusDisGeNET, 2,315 géinte galair a bhaineann le NAFLDfuarthas tar éis dídhúbailt (Fíoracha 1A–1B). Trí spriocanna a bhaineann le cumaisc a thrasnú le spriocanna galair,77 sprioc forluiteachaAithníodh mar spriocanna teiripeacha féideartha de gliocóisídí feinileatánóideach Cistanche i gcoinne NAFLD (Fíor 1C).

Iompórtáladh na spriocanna seo isteach saSTRING database with an interaction threshold >0. 400. Baineadh nóid leithlisithe, agus léiríodh an líonra tríCítea-dhreach, mar thoradh ar aLíonra PPI le 75 nóid agus 408 imill(Fíor 1D). Ag baint úsáide as an bhfeidhm "Analyze Network" in Cytoscape, aithníodh na 10 sprioc is airde bunaithe ar luach céime mar phríomhspriocanna:TNF, NFKB1, TLR4, HSP90AA1, ESR1, HIF1A, STAT1, APP, PRKACA, SMAD3.

3.1.2 TÉIGH, KEGG, agus Déan Anailísí Saibhrithe

Nocht anailís saibhrithe GO 93 téarma le haghaidh, 38 docomhpháirt cheallacha (CC), agus 989 le haghaidhpróiseas bitheolaíoch (BP). Rinneadh na 10 n-iontráil ba mhó i ngach catagóir a léirshamhlú (Fíor 2). Léirigh na torthaí go bhféadfadh gliocóisídí feinileatánóideach Cistanche éifeachtaí frith-NAFLD a chur i bhfeidhm trí bhealaí a bhaineann leathlasadh, cytokines, meitibileacht, agus freagairt imdhíonachta.

Aithníodh saibhriú DO833 galaira bhaineann leis na spriocanna, leis na 25 barr amharcléirithe (Fíor 4), lena n-áirítearmeitibileach, imdhíonachta, cardashoithíoch, a bhaineann le murtall, agus galair hepatic, go léir a bhaineann go dlúth le NAFLD.

3.1.3 Líonra “Comhdhúil–Sprioc–Conair”.

Bunaithe ar thorthaí saibhrithe KEGG, alíonra “comhdhéanta–sprioc-chonair”.Tógadh ag baint úsáide asCítea-dhreach 3.9.1. Seasann cearnóga glasa do chomhdhúile gníomhacha, seasann ciorcail ghorma ar spriocanna, agus seasann nóid oráiste V-chruthach do chosáin (Fíor 5). Léiríonn sé seo go n-imríonn gliocóisídí feinileatánóideach Cistanche éifeachtaí frith-NAFLD trídcomhdhúile iolracha, spriocanna, agus cosáin, leechinacoside agus verbascosidea bheith ar na comhdhúile marcála is flúirseach agus liostaithe in eagrán 2020 denPharmacopoeia na Síne.

3.1.4 Duáil Mhóilíneach

Na cúig phríomhsprioc is airde sa líonra PPI (TNF, NFKB1, TLR4, HSP90AA1, ESR1) docáladh leis na comhdhúile gníomhacha, agus ríomhadh a n-íosfhuinnimh cheangailteach (Fíor 6). Bhí gach scóir Á níos lú ná–6 kcal/mol, rud a léiríonn cleamhnas ceangailteach láidir.Léirigh TNF an cleamhnas is láidre. Léiríodh roinnt torthaí duga ag baint úsáide asPyMOL(Fíor 7).

3.2 Turgnaimh Cille

3.2.1 Éifeachtaí FFA ar Charnadh Lipid i gCealla HepG2

Mar a léirítear iFíor 8, tháinig méadú ar an líon braoiníní lipid dearga a tháinig le chéile i mbroiníní lipid móra, rud a léirigh gur éirigh leis an luchtú lipid.

3.2.2 Éifeachtaí Glicóisídí Feinileatánóideacha FFA agus Cistanche ar Inmharthanacht na gCeall

Mar a léirítear iFíor 9A, comhchruinnithe FFA de1 mmol/L agus thíosní raibh aon tionchar suntasach aige ar inmharthanacht cille (P > 0.05); mar sin,1 mmol/Lroghnaíodh le haghaidh samhaltú. Mar a léirítear iFíor 9B, Cistanche gliocóisídí phenylthanoid suas go dtí200 μg/mLní raibh tionchar suntasach aige ar inmharthanacht (P> 0.05), ach400 μg/mLbac suntasach ar inmharthanacht (P < 0.01). Dá bhrí sin,25, 50, agus 100 μg/mLRoghnaíodh dáileoga íseal, meánacha agus ard le haghaidh cóireála.

3.2.3 Éifeachtaí ar Charnadh Lipid

Mar a léirítear iFíor 10, léirigh an grúpa múnla carnadh droplet lipid dearg suntasach i gcomparáid leis an ngrúpa rialaithe (P < 0.01), ag deimhniú samhaltú rathúil. Cóireáil le50 agus 100 μg/mLLaghdaigh gliocóisídí feinileatánóideach Cistanche go mór foirmiú braoiníní lipid (P < 0.01). IFíor 11, ardaíodh leibhéil TG agus TC sa ghrúpa múnla (P < 0.01), agus léirigh na grúpaí cóireála go léir leibhéil laghdaithe go suntasach i gcomparáid leis an ngrúpa múnla (P < 0.01).

3.2.4 Éifeachtaí ar Dhamáiste Míteachondrial

carnann dath JC-1 i mitochondria sláintiúil agus astaíonn fluaraiseacht dearg; i mitochondria damáiste, fanann sé i bhfoirm mhonaiméireach agus astaíonn fluaraiseacht glas. Mar a léirítear iFíor 12, bhí an fhluaraiseacht dearg chun tosaigh sa ghrúpa rialaithe, agus bhí fluaraiseacht glas feiceálach sa mhúnlaghrúpa. Léirigh grúpaí cóireála an fhluaraiseacht glas laghdaithe agus an fhluaraiseacht dhearg mhéadaithe, rud a léiríonn acmhainneacht feabhsaithe membrane mitochondrial.

3.2.5 Éifeachtaí ar Leibhéil ROS Incheallach

Mar a léirítear iFíor 13, léirigh an grúpa múnla déine fluaraiseachta méadaithe go suntasach (P < 0.01), rud a léiríonn ROS ardaithe. Laghdaigh cóireáil le gliocóisídí feinileatánóideach Cistanche go suntasach leibhéil ROS ag gach tiúchan (P < 0.01).

3.2.6 Éifeachtaí ar Apoptosis

núicléis stains Hoechst 33342, le núicléis apoptotic ag taispeáint deilbhíocht ghorm gheal, chomhdhlúite nó ilroinnte. Mar a fheictear iFíor 14, is beag an fhluaraiseacht gheal a bhí ag an ngrúpa rialaithe, ach léirigh an tsamhailghrúpa go leor núicléis apoptotic gorm geal. Léirigh na grúpaí cóireála déine fluaraiseachta laghdaithe, rud a léiríonn laghdú ar apoptosis.

3.2.7 Éifeachtaí ar Chonair Chomharthaíochta TNF/PI3K/Akt agus Slonn Bax

Mar a léirítear iFíor 15, i gcomparáid leis an ngrúpa rialaithe, léirigh an grúpa múnla léiriú ardaithe go suntasachTNF-α, PI3K p85, Akt, agus Baxpróitéiní (P < 0.05, P < 0.01). Ar chóireáil:

Léirigh gach grúpa glycosíde feinilethanoid Cistanche laghdaitheTNF-αslonn (P < 0.01),

Tá an50 μg/mLléirigh an grúpa laghdaithePI3K p85slonn (P < 0.01),

Tá an100 μg/mLléirigh an grúpa laghdaitheAkt agus Baxslonn (P < 0.05).

4. Plé

Is galar ae casta é NAFLD a bhaineann le neamhoird meitibileach, lena mbaineannéagothroime meitibileachta lipid, friotaíocht inslin, agus strus ocsaídiúcháin[12]. Le blianta beaga anuas,leigheas Sínis traidisiúnta (TCM)Tá gealltanas suntasach léirithe ag caitheamh le NAFLD.

Léirigh taighde nua-aimseartha é singliocóisídí feinileatánóideach ó Cistancheis féidir leis meitibileacht lipid agus glúcóis a rialáil san ae agus strus ocsaídiúcháin, athlasadh agus fiobróis a chosc [13-15]. Úsáideann an t-aeβ-ocsaídiúcháina metabolize aigéid sailleacha agusCYP7A1chun colaistéaról a thiontú ina aigéid bhile le haghaidh hoiméastáis lipid [16-18]. I dtimpeallachtaí ard-saill, bíonn carnadh lipid agus NAFLD mar thoradh ar éagothroime meitibileach [19].

Dheimhnigh an staidéar seo goCealla HepG2 atá spreagtha ag FFAléirigh braoiníní lipid méadaithe agus leibhéil ardaithe TC agus TG. Laghdaigh cóireáil le gliocóisídí feinileatánóideach Cistanche go mór foirmiú braoiníní lipid agus leibhéil TC/TG, rud a chuir feabhas ar steatóis hepatic.

Mar thoradh ar mhífheidhm mitochondrial tá β-ocsaídiúcháin laghdaithe, táirgeadh iomarcach ROS, agus sárocsaídiú lipid [20]. Déanann ROS damáiste breise do mitochondria, steatosis in olcas [21]. Léiríonn ár dtorthaí go bhfuil gliocóisídí feinileatánóideach CistancheROS a laghdú, feabhasacmhainneacht membrane mitochondrial, agus a mhaolústrus ocsaídiúcháin, rud a mhaolú carnadh saille.

Thug cógaseolaíocht líonra le fios go mbaineann na héifeachtaí frith-NAFLD le hiliomadbealaí meitibileach agus apoptosis a bhaineann le. Léirigh dugáil mhóilíneach naisc cheangailteacha láidre idir comhdhúile gníomhacha agus spriocanna, go háiritheTNF, ag moladh a ról lárnach.

Tá ancosán TNFríthábhachtach i gcomharthaí cille. Ceanglaíonn TNF-α leTNFR1, cosáin receptor bás a ghníomhachtú agus apoptosis a aslú [22]. Gníomhaíonn sé freisin anConair PI3K/Akttrí chomharthaíocht paracrine [23–24]. Tá comharthaíocht neamhghnácha PI3K / Akt nasctha le carnadh lipid, athlasadh, agus fiobróis i NAFLD [25]. Léiríonn ár sonraí go bhfuil Cistanche gliocóisídí feanilethanoidbac apoptosisagus laghdú ar léiriú naTNF-α, PI3K, Akt, agusBax, comhsheasmhach le tuar líonra, ag deimhniú an tábhacht a bhaineann leis anTNF/PI3K/Conair Akt.

Conclúid

Rialaíonn gliocóisídí feinileatánóideach Cistanche NAFLD trídpróisis iolracha agus bealaí, lena n-áirítear:

carnadh lipid a laghdú,

Cosc ar strus ocsaídiúcháin,

damáiste mitochondrial a mhaolú,

Shochtadh apoptosis.

Féadfaidh na héifeachtaí seo a bheith nasctha go dlúth leis anTNF/PI3K/Conair comharthaíochta Akt. Soláthraíonn an staidéar seo ní hamháin tacaíocht eolaíoch d'fheidhmiú gliocóisídí feinileatánóideach Cistanche i gcóireáil NAFLD ach freisin tagairt d'fhorbairt agus do thaighde cliniciúil ar dhrugaí teiripeacha nua.